Alejandro Martínez M. 1

Transcripción

Alejandro Martínez M.
1
2
3
4
5
6
7
FLAVONOIDES
8
Definición
•Varias clases de sustancias naturales
•Contienen dos anillos aromáticos unidos mediante una cadena
de tres átomos de carbono (compuestos C6C3C6)
•Ampliamente distribuídas en los vegetales
•Biosintetizadas a partir del ácido shikímico y de la
acetilcoenzima A vía malonilCoA (biosíntesis mixta)
9
Clasificación
O
O
O
O
O
Chalconas
Flavonas
O
Flavanonas
O
O
OH
OH
O
Catequinas
O
Flavonoles
O
OH
Flavanonoles
O
O
O
OH
O
Antocianinas
Auronas
O
Rotenoides
10
Nomenclatura
11
Nomenclatura común
O M e
O H
H O
O
O H
O H
H O
O
O
O H
Apigenina
O
O H
Crisoeriol
O H
H O
O
H O
O
O H
O H
O H
O
O
Galangina
Fisetina
O H
O H
H O
O
O H
H O
O
O H
O H
O H
O
O H
Kaemferol
O
Quercetina
O H
O H
M eO
O
O M e
H O
O
O H
O H
O
O H
O H
Ramnetina
O
Acacetina
12
Nomenclatura IUPAC
O M e
O H
H O
O
O H
O H
H O
O
O
O H
4',5-7-trihidroxiflavona
O
4',5,7-trihidroxi-3-metoxiflavona
O H
O H
H O
O
H O
O
O H
O H
O H
O
O
3,5,7-trihidroxiflavona
3,3',4',7-tetrahidroxiflavona
O H
O H
H O
O
O H
H O
O
O H
O H
O H
O
O H
O
3,3',4,5,7-pentahidroxiflavona
3,4',5,7-tetrahidroxiflavona
O H
O H
M eO
O
O M e
H O
O
O H
O H
O H
O
O H
3,3',4',5-tetrahidroxi-7-metoxiflavona
O
3,5,7-trihidroxi-4'-metoxiflavona
13
Distribución y Estado Natural
•Plantas verdes (especialmente angiospermas), pocos
se han detectado en hongos y algas.
•Especialmente en las partes aéreas
O
•En forma libre (agliconas
flavonoides), como
glicósidos (O y C-glicósidos), como sulfatos y
algunas veces como dímeros y otras como polímeros.
O
•Las antocianinas como sales principalmente en
flores, frutos y tejidos con coloraciones que van del
rojo hasta el violeta y el azul
14
Propiedades Físicas
Agliconas: Sólidos solubles en solventes de mediana o
baja polaridad, cristalizan y funden sin descomposición.
Las más conjugadas tienen coloraciones del amarillo al
rojo y hasta el azul.
Glicósidos: Sólidos solubles en solventes muy polares,
amorfos y funden con descomposición. Los que presentan
más conjugación de enlaces dobles son más coloreados.
15
Acido shikímico
MalonilCoA
O
O H
O
C H
3
O
H 2O
R
O
O H
H O
H
O
O
R=H, Acido cinámico
R=OH, Acido p-cumárico
H 2O
R
O
O H
O
Biogénesis
O
R
H O
O H
Otros flavonoides
O H
O
Chalcona
16
Biosíntesis de isoflavonoides
OH
HO
O
2
Isoflavonasintasa
Glycine max
OH
O
(2S)-Naringenina
HO
O
3
OH
O
OH
Genisteína
17
Metodología general para la extracción
de flavonoides
•
•
•
•
Muestra seca y molida
Desengrase con n-hexano u e.p.
Extracción con EtOH puro o del 70%
Particiones sucesivas con Et2O (flav. apolares), AcOEt
(flav. medianamente polares) y n-BuOH (flav. polares:
Glicósidos)
18
Condiciones para el análisis y separación
por CCF y HPLC de flavonoides
• CCF (agliconas) mezclas n-hexano/acetato de etilo y
cloroformo/acetato de etilo
•Wagner-Bladt-Zgainski: cloroformo/acetato de etilo 60:40
• CCF (glicósidos) Wagner y col.: acetato de etilo/ácido
fórmico/ácido acético/agua 100:11:11:27.
• HPLC (glicósidos): Columnas RP-18, detector UV 254
nm, ácido acético al 2% acuoso/acetonitrilo en diferentes
proporciones. .
• HPLC (agliconas): Columnas RP-18, detector UV 254
nm, acetonitrilo/agua con ácido acético al 1%,.
•El ácido acético previene la formación de picos asimétricos
en el cromatograma
19
Metodología para la extracción y
separación de antocianinas
• Tejidos frescos (p.ej. pétalos)
• Ext. MeOH:AcOH:Agua
• Cromatografía de papel
tBuOH:AcOH:Agua
• CCF (celulosa, HCH:HCOOH:Agua)
• HPLC (RP-18, Agua:MeCN:AcOH:H3PO4, 440 nm)
20
Ensayos de Reconocimiento
1. Ensayo de Shinoda
Nota: La prueba la dán positiva sustancias
con el anillo benzopirona. P.ej. las chalconas
no la dán positiva, pero las flavonas y
flavanonas sí.
21
Ensayos de Reconocimiento
2. Ensayo con Zn y HCl:
Flavononoles: Color Rojo-Violeta
3. Ensayo de Pacheco:
Flavononoles: Color Rojo
característico
Negativo para flavonas,
chalconas, auronas, flavonoles y
flavanonas
22
Reconocimiento de
antocianinas
O H
O H
HO
O
O Gl i
pH=3
O Gl i
Base
Acido
HO
O H
O
O
O Gl i
pH=8.5
O Gl i
O
Base
Acido
HO
O H
O
O Gl i
O Gl i
pH=11
23
Espectroscopía UltravioletaVisible
O
R
Banda II
Benzoílo
250-280 nm
O
Banda I
Cinamoílo
300-390 nm
R=H, Flavonas
R=OH, Flavonoles
R=OAlquil
24
Espectroscopía UV-VIS: Reactivos de
Desplazamiento
•NaOMe: Hidroxilos 3 y/o 4’
•NaOAc: Hidroxilo 7
•AlCl3 y HCl: orto-dihidroxilos y/o
hidroxilos 3 y/o 5
•H3BO3/NaOAc: orto-dihidroxilos
25
Espectroscopía UV-VIS: Espectro en
NaOMe
• Flav. 3-hidroxilados, la banda I se desplaza + 45-65 nm y
decrece su intensidad
•Flav. 4’-hidroxilados, la banda I se desplaza + 45-65 nm y su
intensidad no decrece.
•Flav. 3,4’-dihidroxilados, hay descomposición del espectro en
pocos minutos
3'
8
7
1
1'
O
2
OH
4'
2'
5'
6'
3
6
4
5
OH
O
26
Espectroscopía UV-VIS: Espectro en NaOAc
• NaOAc: Base débil, ioniza hidroxilos más ácidos 3, 4’ y
7.
• Si hay desplazamiento de + 5-20 nm en la banda II, hay
hidroxilo en 7
• Si hay un desplazamiento menor, pero batocrómico,
puede haber hidroxilo en 7, y grupos oxigenados en C-6 y
3'
C-8
4'
2'
8
H O
1
1'
O
2
7
5'
6'
3
6
4
5
R
O
27
Espectroscopía UV-VIS: Espectro en H3BO3 y álc.
• Se forma quelato con dos hidroxilos en disposición
relativa orto entre sí.
•Si hay desplazamiento de + 12-36 nm, en la banda I, es
orto-diOH en B (ó en ambos anillos).
•Si el desplazamiento es menor , es orto-diOH en A.
O
HO
HO
O
B
O
O
B
O
OH
OH
R
O
28
Espectroscopía UV-VIS: Espectro en AlCl3 y HCl
• El AlCl3 forma quelatos con hidroxilos peri (p.ej. en C5) y en C-3, que son resistentes a la hidrólisis ácida
•También forma quelatos con hidroxilos en posición
relativa orto entre sí, pero estos se hidrolizan en
presencia de un ácido mineral.
O
Cl
O
Al
O
R
O
O
Al
Cl
Cl
29
Ejercicio de ejemplo 1
• C16H12O6
• UV (MeOH): 267, 367 nm
•UV (NaOMe): 280, 411 nm (I disminuye int.)
•UV (AlCl3): 271, 423 nm
•UV (AlCl3+HCl): 270, 422 nm
•UV (NaOAc): 274, 384 nm
•UV (H3BO3+base): 268, 367 nm
30
OCH 3
HO
O
OH
OH
O
Kaempferol-4'-metiléter
31
Ejercicio de ejemplo 2
• C15H10O7, Quercetina
• UV (MeOH): 255, 370 nm
•UV (NaOMe): 247h, 321 nm (aum. int. I y desc.)
•UV (AlCl3): 272, 458 nm
•UV (AlCl3+HCl): 265, 428 nm
•UV (NaOAc): 274, 390 nm (desc.)
•UV (H3BO3+base): 261, 388 nm
32
OH
OH
HO
O
OH
OH
O
Quercetina
33
RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR PROTONICA
•ppm
TIPOS DE PROTONES
•0.0
Tetrametilsilano
•0.0-0.5 Trimetilsililo
•1.0-1.2 Metilo de la ramnosa (doblete ancho)
•1.7
Metilos del grupo isopentenilo
•1.9-2.0 Metilos de acetatos alifáticos (de azúcares)
•2.2-2.4 Metilos de acetatos aromáticos
•2.7-3.1 H-3 de flavanonas (multiplete)
•3.0-4.8 Protones de azúcares
•3.5
Metileno del grupo isopentenilo
•3.7-4.1 Metoxilos aromáticos
•4.1-4.6 Protones 2 y 3 de isoflavanonas
•4.2-6.0 Protón 1 de azúcares
•5.4
Protón 2 de flavanonoles y flavanonas (doble
•5.9-6.0 Metiléndioxi
•6.0-6.8 Protones 3, 6 y 8 de flavonas
•6.8-8.0 Protones aromáticos del anillo B
•7.5-8.0 Protón 2 de isoflavonas
•8.9
Protón 4 de antocianinas
•12.0-14.0 Protón del hidroxilo 5 (Hidroxilo peri)
doblete)
34
RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR DE
CARBONO-13
•ppm
•18
•30
•42-46
•56-61
•60-80
•70-75
•80
•85
•100-115
•115-128
•130-140
•145
•150-165
•175-178
•182
•190-196
•197-200
TIPOS DE CARBONOS
C-6 de ramnosa
C-4 de flavan-3-oles
C-3 de flavanonas
Metoxilos
C-OH de carbohidratos
C-3 de flavanonoles
C-2 de flavanonas
C-2 de flavanonoles
C-3 de flavonas, C-1 de
carbohidratos, C-10 de flavonas 5-hidroxiladas
Aromáticos con H
Aromáticos sulfatados
C-3 de flavonoles, C-5 de flavonas 5-hidroxiladas,
C-3 y C-4 de antocianinas
C aromáticos hidroxilados y metoxilados, C-1a de
flavonas, C-2 de antocianinas, C-2 de flavonas, C4' oxigenado, C-9 de flavonas
Carbonilo C-4 sin OH en C-5 en flavonas, C-4 de
flavonoles
Carbonilo C-4 con OH en C-5 de flavonas
Carbonilo C-4 de flavanonas
Carbonilo C-4 de flavanonoles
35
ESPECTROMETRIA DE MASAS IE DE
AGLICONAS
R4'
R7
R4'
O
RDA
R7
O
C
R3
R5
C
O
R5
M+.
+
O
A1+.
C
R3
B1+.
R4'
O
C
B2+
•Flavonas: M+., [M-H]+, [M-CO]+., A1+, [A1+H]+, B1+., B2+
•Flavonoles: Además [M-CHO]+, [M-H2O]+.
•3-Metoxiflavonas: Además [M-CO-Me]+
•Flav. 6 y/o 8 metoxilados: [M-Me]+ (intenso)
•Flav. sust. isopentenilo: [M-55]+ y/o [M-56]+.
36
ESPECTROMETRIA DE MASAS FAB
DE SULFATOS
O
OH
OM e
M eO
S O 3H
O
O
OM e
O
S O 3H
3,3’-Disulfato de gossipetina-7,8-dimetiléter
m/z
Asignación
505
[M-H]+
425
[M-HSO3]+
345
[M-2HSO3]+
Chulia, A. et al., J. NAT. PROD. 58, 560 (1995)
37
ESPECTROMETRIA DE MASAS FAB DE
GLICOSIDOS
OH
OMe
HO
O
C H 2O H
O
OH
H
OH
O
H
O
m/z 345
H
H
H
O
C H 2O H
O
OH
H
OH
m/z 513
H
H
H
H
OH
M +. = 675
Yong, L. et al., PHYTOCHEMISTRY 42, 1203 (1996)
38
DIFRACTOMETRIA DE RAYOS X
H O
H
O
O
O
H
O
O H
O M e
O M e
12ß-Hidroxidalpanol (Rotenoide)
Li, L. et al., J. NAT. PROD. 56, 690 (1993)
39
HIDROLISIS ACIDA
•O-Glicósidos: Hidrolizan con HCl dil., reflujo suave, 1 hora
•O-Glucuronidos: Hidrolizan con HCl 2N, reflujo a 100°C, 2
horas
•C-Glicósidos: Sufren reordenamiento de Wessley-Moser:
OH
Glu
HO
O
HO
H+
OH
OH
O
Glu
O
OH
Vitexina
O
Isovitexina
40
HIDROLISIS ALCALINA Y METABOLISMO
• En condiciones alcalinas fuertes:
OH
HO
OH
O
HO
OH
NaOH 2M
OH O
100°C, 60 min
N2
+
R
OH
(R=CH
2OH o COOH)
41
•En el intestino grueso, la quercetina:
OH
•
OH
OH
OH
HO
HO
OH
O
OH
+
OH
OH
O
OH
OH
pH alcalino
O
O
-CO 2
OH
OMe
OH
O
OH
O
OH
HO
OH
OH
42
ACTIVIDAD BIOLOGICA
•Antiinflamatoria
•Antioxidante
• Anticancerígena
• Antibacterial
• Antiviral
•Inhibidores de enzimas (hidrolasas, ciclooxigenasas,
fosfatasa alcalina, cAMP fosfodiesterasas, ATP-asas,
liasas, hidroxilasas, transferasas, oxidoreductasas y
kinasas)
• Otras
43
Actividad biológica de varios flavonoides
•Rutina: para el tratamiento de la fragilidad capilar, la hipertensión y en geriatría
•Las flores de saúco (Sambucus niger), tratamiento de resfriados, influenza y reumatismo, varios
glicósidos flavonoides.
•Isoflavonas: actividad estrogénica (producen esterilidad en las ovejas que consumen trébol)
• La silibina y la silimarina: flavolignanos del cardosanto (Silybum marianum) en Alemania
hepatoprotector
•Dímeros flavonoides (biflavonoides): diinsininol, acción antiinflamatoria
•La quercetina y la rutina tienen efectos anticancerígenos potenciales. Consumidores de vinos
rojos y vinotinto presentan baja mortalidad por enfermedad coronaria: catequina, epicatequina y
quercetina
•Procianidinas, uvas, uso potencial en isquemias cardíacas
•Flavonoides inhiben la agregación plaquetaria
•Vasodilatadores (naringenina, eriodictyol y luteolina)
•Antiarrítmicos
•Chalconas antimicóticas, antibacterianas, citotóxicas y antimitóticas
•3-ramnosilquercetina: antidiarréica
•Isoflavanquinonas,potente actividad antiinflamatoria y antialérgica
•Flavonoles con actividad antiespasmolítica
•Isoflavonas y flavanonas antimicóticas
•Isoflavanos antimicrobianos
•Flavanos con actividad leishmanicida
•Glicósidos del kaemferol, la quercetina y la miricetina inhiben la infección por el virus VIH-1
•Quercetina, flavona, catequina y crisina parecen desempeñar un papel importante contra la
acción de la morfina
•Antocianinas, colorantes de alimentos
•Ciertos flavonoides en cosméticos
44
FUNCION BIOLOGICA
• Filtros solares que protegen los tejidos vegetales de radiaciones dañinas, y se
ha sugerido que participan en el proceso de la fotosíntesis
• Favorecen la reproducción atrayendo a insectos polinizadores
• Las diferentes actividades biológicas (antimicrobiana, antimicótica, etc.) y las
evidencias experimentales de que algunos aumentan la resistencia de ciertas
plantas contra diferentes plagas y enfermedades vegetales , sugieren que estas
sustancias también son un mecanismo químico de defensa vegetal (fitoalexinas)
• La capacidad inhibidora de ciertas hormonas vegetales presentada por
algunos flavonoides sugiere que actúan como reguladores del crecimiento
vegetal
45
PROBLEMA 1
Del extracto metanólico de la planta entera Polanisia dodecandra, se aisló por métodos cromatográficos una
sustancia con actividad antimitótica potente y con las siguientes características:
Prismas amarillos P.F. 176-7°C
UV (MeOH): 257, 278, 345 nm
UV (MeOH+NaOMe): 280, 396 nm
EMIE: 404.1110 (74%), 389 (100), 371 (8), 359 (10), 331 (12), 303 (8), 275 (9), 211 (14), 202 (8), 183 (13), 164 (10),
151 (17), 123 (5).
RMN-1H (CDCl3, 300 MHz): 3.88 (s, 3H), 3.95 (s, 3H), 3.96 (s, 3H), 4.00 (s, 3H), 4.11 (s, 3H), 7.00 (d, 1H, J=7.0 Hz),
7.77 (d, 1H, J=2.2 Hz), 7.78 (dd, 1H, J=2.2 y 7.0 Hz), 12.40 (s, 1H).
RMN-13C (CDCl3, 75 MHz): δ 56.1, 60.1, 61.2, 61.7, 62.1, 107.5, 110.5, 114.6, 121.6, 123.7, 132.9, 136.2, 138.9, 144.9,
145.6, 149.0, 149.1, 152.9, 155.8, 179.4 ppm.
Determine la estructura más probable para esta sustancia. Describa su biogénesis a partir del precursor más
inmediato, y compare su posible actividad antioxidante frente a la quercetina.
46
OMe
OMe
M eO
OH
7.77d
O
7.00d
7.78dd
M eO
OMe
OH
O
12.40s
47
PROBLEMA 2
De la fracción soluble en n-butanol del extracto metanólico de las partes aéreas de Lysionotus
pauciflorus (Gesneriaceae) se aisló la nevadensina una sustancia que ha sido reportada como
poseedora de actividad antiinflamatoria e hipotensora. Sus características son las siguientes:
P.F. 198-199°C
UV(metanol): 283, 330 nm
UV (AlCl3): 210, 352 nm
UV (AlCl3/HCl): 308, 351 nm
UV (NaOAc): 283, 273 nm
UV (H3BO3/NaOAc): 283, 321 nm
EMIE: m/z 344, 329, 277, 197, 169, 133
RMN-1H (CDCl3, 360 MHz): 3.90 (s, 3H), 4.02 (s, 3H), 4.04 (s, 3H), 6.59 (s, 1H), 7.03 (2H, d,
J=8.9 Hz), 7.89 (2H, d, J=8.9 Hz), 11.82 (s, 1H).
RMN-13C (CDCl3, 90 MHz): δ 55.6, 60.2, 61.2, 103.0, 103.1, 114.7, 123.0, 128.0, 128.2, 131.6,
145.4, 148.4, 150.9, 162.4, 163.1, 182.3 ppm.
Determine la estructura más probable y el nombre IUPAC de esta sustancia.
48
7.89d
7.03d
OH
MeO
O
OMe
7.89d
7.03d
6.59s
MeO
OH
O
11.82s
49
REA antioxidante (Lien, 1999)
• Enlace C=C entre C-2 y C-3
• Carbonilo C-4
• Hidroxilos en C-3 y C-5
50
REA cáncer de seno (Zhang, 2005)
•
•
•
•
•
Enlace C=C entre C-2 y C-3
Anillo B ligado al C-2
Hidroxilo en C-5
No hidroxilo en C-3
Sust. Apolares en C-4’, C-6, C-7 y C-8
51
REA Antialérgica (Matsuda, 2002)
• Enlace C=C entre C-2 y C-3
• 3- y 7-O-glicósidos son menos activos
• A mayor número de hidroxilos en 3’, 4’, 5, 6, 7; hay mayor
actividad
• Los 3’,4’,5’-trihidroxilados son menos activos que los 4’monohidroxilados, y los 3’,4’-dihidroxilados
• Las flavonas son más activas que los flavonoles
• Los flavonoles 3-O-metilados son menos activos.
• Flavonas y flavonoles con metoxilos en 4´y 7, no siguen
las reglas 3, 4 y 5.
52
REA inhib. Xantina-oxidasa
• Antocianinas
• Hidroxilos en C-5 y/o C-7
• Anillo B sin sustituyentes
53
Algunas Drogas que
contienen Flavonoides
Arnica
Flores, Arnica montana (Asteraceae)
contienen quercetrina-3-O-glucósido,
luteolina-7-O-glucósido y kaemferol-3-Oglucósido entre otros. En Colombia
antiinflamatorio de uso externo
Caléndula
Las flores de Caléndula officinalis
(Asteraceae) contienen glicósidos de
iso- ramnetina y quercetina. En
nuestro país es una droga de venta
libre usada como antiinflamatoria y
regeneradora del epitelio
54
Espino
La droga la constituyen las hojas,
flores y frutos de Crataegus sp.
(Rosaceae). Contiene glicósidos de
quercetina y apigenina.
Tusílago
Las flores de Tussilago farfara
(Asteraceae) contienen glicósidos
de quercetina
Manzanilla chiquita
Flores de Matricaria chamomilla
(Asteraceae) contienen
quercimeritrina, glicósidos de
apigenina, luteolina y patuletina.
Colombia: carminativa y digestiva
55
Endrino
Las flores de Prunus spinosa
(Rosaceae) contienen glicósidos de
quercetina y kaemferol.
Saúco
Flores de Sambucus niger
(Caprifoliaceae) contienen
glicósidos de quercetina, rutina,
hiperósido, etc. Colombia:
expectorante.
Tilo
Flores de Tilia sp. (Tiliaceae)
contienen glicósidos de quercetina,
kaemferol y miricetina. En
Colombia corresponde a Tilia
sylvestris y sus hojas se utilizan
como sedante menor.
56
Nogal
Hojas de Juglans regia (Juglandaceae)
contienen hiperósido y otros glicósidos
flavonoides. En Colombia es de venta
libre la Juglans cinerea (nogal blanco),
cuyas hojas se usan como antidiarréico
Cola de caballo
Partes áereas de Equisetum arvense
(Equisetaceae) contienen glicósidos
de luteolina, isoquercitrina y
equisetrina (7).
Ruda
Ruta graveolens (Rutaceae)
contiene rutina
57
Pensamiento
Corresponde a Viola tricolor
(Violaceae). Contiene glicósidos de
quercetina. Es una planta medicinal
aceptada en Colombia. Sus hojas y
flores se usan como antitusivo.
Cardo de María
Frutos de Sylibum marianum
(Asteraceae) contienen flavolignanos,
silibina, silicristina, silidianina,
silimarina, etc. La silimarina es
hepatoprotector y se utiliza en el
tratamiento de trastornos digestivos
funcionales.
Gingko
Hojas de Gingko biloba
(Gingkoaceae). El extracto de actúa
a nivel circulatorio. Inhibe la
agregación plaquetaria y se utiliza
contra la insuficiencia de flujo
sanguíneo en el cerebro.
58
59
Otras drogas con flavonoides
•
Flores de Acacia Flores de Robinia psudoacacia (Fabaceae) contienen robinina.
•
Flores de Manzanilla Romana: Las flores de Anthemis nobilis (Asteraceae) contienen
apigenina-7-O-glucósido y luteolina-7-O-glucósido.
•
Flores de Cactus: Las flores de Cereus grandiflorus (Cactaceae) contienen glicósidos
de iso-ramnetina y rutina. Para el análisis HPLC de la rutina se puede consultar el
artículo de Dimov y col. (3)
•
Reina de los prados: Las flores de Filipendula ulmaria (Rosaceae) contienen
espiracósido, hiperósido y avicularina.
•
Pié de gato: Las flores de Helichrysum arenarium (Asteraceae) contienen glicósidos de
naringenina, kaemferol, apigenina y luteolina.
•
Abedul: Las hojas de Betula sp. (Betulaceae) contienen glicósidos de quercetina y
miricetina.
•
Bodas de Plata: Corresponde a la Potentilla anserina (Rosaceae) que contiene
glicósidos de quercetina y miricetina
•
Herniaria: Herniaria sp. (Caryophyllaceae) contiene rutina y narcisina.
•
Infusión madre: Leonorus cardiaca (Lamiaceae) contiene rutina.
60
Algunas fuentes de antocianinas
Mora
Fresa
Arándano
Grosella
61
Problema 5
Del extracto de la corteza de Colebrookea oppositifolia (Labiatae), usada en China para el tratamiento de
fracturas, heridas y artritis reumatoide, se aislaron dos compuestos con las siguientes características:
Compuesto A:
Polvo amarillo, [α]D25 = -27° (DMSO, c 0.48).
IR (KBr): 3270, 1650, 1600, 1580, 1485, 1441, 1350, 1290, 1196, 1112, 1065, 1045, 840, 800, 765, 680 cm-1.
EM-FAB: m/z 447 [M+H].
EMIE: m/z 284 (100), 266 (41), 238 (44), 181 (15), 153 (35), 139 (32), 102 (48).
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.89 (s, 1H), 8.10 (2H, dd, J=7.6 y 1.6 Hz), 7.60 (3H, m), 6.98 (1H, s), 7.03
(1H, s), 5.05 (1H, d, J=7.6 Hz), 3.90 (s, 3H).
RMN-13C (100 MHz, DMSO-d6): δ 56.56, 60.91, 69.95, 74.13, 76.54, 77.21, 91.77, 102.05, 104.93, 105.16, 126.35
(dos carbonos), 128.31, 129.05 (dos carbonos), 130.62, 132.01, 151.60, 152.75, 158.99, 163.39, 182.31 ppm.
Compuesto B:
Polvo amarillo, [α]D25 = -48° (DMSO, c 0.36).
IR (KBr): 3430-3240, 1650, 1610, 1560, 1500, 1442, 1350, 1280, 1240, 1162, 1075, 1040, 850, 830, 751, 740 cm-1.
EM-FAB: m/z 432 [M].
EMIE: m/z 432, 280, 270, 242, 152, 124, 118.
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.88 (s, 1H), 7.87 (1H, d, J=8.1 Hz), 7.53 (1H, dd, J=8.4 y 7.4 Hz), 7.33 (1H,
d, J=8.4 Hz), 7.20 (1H, dd, J=7.5 y 7.8 Hz), 7.00 (1H, s), 6.45 (1H, s), 6.20 (1H, s), 5.10 (1H, d, J=8 Hz).
RMN-13C (100 MHz, DMSO-d6): δ 60.63, 69.62, 73.28, 76.73, 77.12, 93.69, 98.76, 100.26, 103.77, 110.19, 115.53,
120.32, 121.91, 129.00, 132.73, 155.35, 157.64, 160.76, 161.36, 164.30, 181.79 ppm.
62
Compuesto 1 (Phytochem. 53, 87 2000)
•
(1) Yellow amorphous powder from MeOH, mp 180±190° dec, [α]20 78°
(DMSO, c 0.001). UV MeOH nm (log e): 254 (3.3), 286 (1.0), 373 (3.5);
+ AlCl3: 268,298, 386; + AlCl3/HCl: 270, 300, 376; + NaOMe: 271, 328,
414; + NaOMe/H3BO3: 252, 282, 370. IR máx cm-1 1205, 1166, 1129,
1050, 1030, 980. 1 H- and 13 C-NMR spectral data shown in Table 1.
Negative LSIMS, m/z (rel. int.): 623 [M-H]- (30), 315 [M-309]
(100). Compound 1 (40 mg) was heated in 2 M HCl (5 ml) until reflux
began, this being continued for 2 h. Aglycone was extracted with EtOAc
and evaporated to dryness in vacuo. Thc residue was dissolved in MeOH
and the solution on concentration yielded a yellow compound which on
further crystallization gave tamarixetin (18 mg). Melting point and UV, IR,
1 H- and 13 C-NMR spectral data and mass spectral analysis were in
accordance with those reported in the literature (Struck & Kirk, 1970;
Barrcro ct al., 1998). Aqueous layer was adjusted to pH 6 by addition of
NaHCO3. After lyophilization, sugars were dissolved in pyridine and
analyzed by silica gel-TLC in the above-described systcm. After
spraying, rhamnose gave a green spot at Rf 0.75, and glucose gave a
blue spot at Rf 0.70.
63
RMN-1H, DMSO-d6
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
0.68 d J 6.2 Hz 3H
5.06 bs
5.80 d J 7.2 Hz
3.83 s 3H
6.22 d J 1.8 Hz
6.48 d J 1.8 Hz
6.86 d J 8.4 Hz
7.54 dd J 1.8, 8.4 Hz
7.98 d J 1.8 Hz
12.52 s
64

Alejandro Martínez M. 1

Transcripción

Documentos relacionados

Alejandro López Moreina

Samuel Alejandro Joya Curso