GUIA DE EJERCICIOS ENZIMAS 1. Una enzima cataliza una

GUIA DE EJERCICIOS ENZIMAS 1. Una enzima cataliza una

FACULTAD DE FARMACIA
CARRERA DE QUIMICA Y FARMACIA
BIOQUIMICA
GUIA DE EJERCICIOS
ENZIMAS
1.
Una enzima cataliza una reacción con una velocidad máxima de 5 µmoles por
minuto, siendo su Km para el sustrato de 0,5 mM. Si la ponemos en presencia de
una concentración 500 mM de sustrato, ¿Qué cantidad de sustrato se logrará
transformar en 10 min?
Sol.: 50 µmoles
2.
La formación de producto en una reacción catalizada es de 0.12 µmol a los 3
minutos de 0.2 µmol a los 5 minutos y de 0.25 µmol a los 7 minutos.
a) Se podría determinar la rapidez inicial de esta reacción?
b) Si su respuesta fue si, el valor es?
3.
Calcular qué velocidad se obtendrá en una reacción enzimática si la velocidad
máxima es igual a 100 y la concentración de sustrato es igual: a) 10 Km y b) Km/3.
Sol.: a) v= 90,9; b) v= 25
4.
La actividad de una enzima medida con 3 ng de proteína en el medio de ensayo es
de 12 µmol de Producto por minuto. Si ahora se ensaya la actividad con 1 ng de
proteína y con las mismas condiciones, el producto formado en 30 segundos debería
ser?
5.
Una enzima cataliza una reacción a una velocidad de 35 µmoles/min cuando la
concentración de sustrato es 0,01 M. La Km para el sustrato es 2 x 10-5 M. ¿Cuál
será la velocidad inicial a las concentraciones de sustrato: a) 3,5 x 10-3 M; b) 4 x
10-4 M; c) 2 x 10-4 M; d) 2 x 10-6 M y e) 1,2 x 10-6 M?.
Sol.: a) 34,8 µmoles/min; b) 33,3 µmoles/min; c) 31,8 µmoles/min;
d) 3,18 µmoles/min; e) 1,98 µmoles/min.
6.
Se sabe que la fosfatasa alcalina posee una actividad máxima volumétrica de 2 a 14
µmol min dL. en el suero de pacientes normales. El peso molecular de esta enzima
es de 150 000 y se trata de un tetrámero con cuatro sitios activos por molécula. La
-1
constante catalítica de la enzima pura es de 4069 s ¿cuál es rango normal de
concentración molar de esta enzima en la suero sanguíneo?
7.
Calcular qué concentración de sustrato, expresada en función de la Km, nos dará
una velocidad de reacción enzimática igual al 60% de la velocidad máxima.
Sol.: [S]= 1,5 Km.
8.
Se midió la actividad de una enzima en presencia de una cantidad muy elevada de
-1
sustrato y se encontró una actividad de 100 µmol min en presencia de 0.1, 0.5 y 1
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-1
mM de sustrato su actividad fue de 3, 50 y 85 µmol min ¿Sigue esta enzima un
comportamiento tipo Michaelis-Menten? Explique:
9.
A partir de los siguientes datos obtenidos para una reacción catalizada
enzimáticamente, calcular gráficamente la Km y la Vmax de dicha enzima
Sustrato (mM)
Velocidad (µmoles/min)
0,5
1,00
1,0
1,67
1,5
2,40
2,0
2,50
2,5
2,78
3,0
3,00
Sol.: Km= 2 mM; Vmax= 5 µmoles/min
10.
En base a los siguientes datos, calcular los valores de Km y Vmax, según la
representación de doble inversos.
[S] (M)
2.1 · 10-5
2,5 x 10-5
3,3 x 10-5
5,0 x 10-5
1,0 x 10-4
1,5 x 10-4
2,0 x 10-4
3,0 x 10-4
5,9 x 10-4
1,4 x 10-3
Actividad U/mg proteína)
0.67
0.75
0.91
1.16
1.56
1.79
1.92
2.10
2.27
2.50
a) Calcular qué velocidad se obtendrá en una reacción enzimática si la velocidad
máxima es igual a 100 y la concentración de sustrato es a) 10 Km b) Km/3.
b) Una enzima cuya Km es 2,4 · 10-4 M se ensaya con una concentración de sustrato de
2·10-7 M. Si la velocidad media para esta reacción con una concentración de sustrato
de 5·10-2 M fue 0.128 mmoles/min, calcular la velocidad inicial en el caso anterior.
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11.
Calcular la concentración de un inhibidor competitivo, cuya Ki= 10-7 M, necesaria
para inhibir en un 80% la velocidad de una reacción enzimática, sabiendo que la Km
de la enzima es 1,6 10-4 M y que la concentración de sustrato es de 40 µM
Sol.: 5 x 10-7 M
12.
Al representar por el método de Lineweaver y Burk los resultados obtenidos en tres
experimentos, al emplear una misma cantidad de enzima y sustrato, en las
condiciones que se explican en la tabla adjunta, se encontraron los puntos de corte
con los ejes indicados en la tabla:
a) Calcular Vmax y Km en ausencia y presencia de A. ¿Qué efecto produce este
compuesto sobre la actividad enzimática?
b) Calcular Vmax y Km en ausencia y presencia de B. ¿Qué efecto produce este
compuesto sobre la actividad enzimática?
c) En ausencia de A o B y con una concentración inicial de sustrato de 0,2 M,
calcular la cantidad de sustrato que se habrá consumido al cabo de 5 minutos de
reacción.
d) Calcular la Ki del compuesto A.
e) Calcular la concentración de B en el tercer experimento, sabiendo que su Ki = 5
mM