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XVIII Congreso Nacional de Ingeniería Bioquímica XVIII National Congress of Biochemical Engineering VII Congreso Internacional de Ingeniería Bioquímica VII International Congress of Biochemical Engineering X Jornadas Científicas de Biomedicina y Biotecnología Molecular X Biomedicine and Molecular Biotechnology Meeting Clave: TAL342ARG20120131 CORRELACIÓN DEL ANÁLISIS SENSORIAL DESCRIPTIVO DE LOS EXTRACTOS DE VAINILLA DE VAINA VERDE Y LA PRESENCIA DE SUS PRINCIPALES COMPONENTES AROMÁTICOS 1 Argel, Flores Primo, 2Violeta T., Pardío Sedas; 1Lizbeth, Mota Magaña; 1Oscar T., Galván Valencia; 1Luis M., Ruiz Gómez; 1 Sergio A., Ramírez García. DIRECCIÓN DE LOS AUTORES 1 Licenciatura en Nutrición. Universidad de la Sierra Sur, Guillermo Rojas Mijangos s/n C.P. 70800, Miahuatlán de Porfirio Díaz, Oaxaca, México. 2 Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Universidad Veracruzana, M.A. de Quevedo s/n, C.P. 91710, Veracruz, Veracruz, México. CORREO ELECTRÓNICO [email protected] XVIII Congreso Nacional de Ingeniería Bioquímica XVIII National Congress of Biochemical Engineering VII Congreso Internacional de Ingeniería Bioquímica VII International Congress of Biochemical Engineering X Jornadas Científicas de Biomedicina y Biotecnología Molecular X Biomedicine and Molecular Biotechnology Meeting INTRODUCCIÓN La vainilla es uno de los productos saborizantes más empleados en la industria alimentaria y varios autores han reportado la presencia de más de 250 componentes aromáticos en la vainilla; identificando que la mayor parte del aroma y sabor de la misma esta impartido por la vainillina, la cual es tomada como control de calidad en la evaluación de los extractos de vainilla (Havkin-Frenkel et al., 2005). Así mismo, se han establecido las características aromáticas de vainas de vainilla beneficiadas de diferentes regiones del mundo y se ha reportado que una de las propiedades sensoriales más atractivas de la vainilla es su delicado y bien balanceado bouquet el cual depende fuertemente de la especie, país de origen, prácticas agrícolas y las condiciones climáticas. Lo anterior es debido a las diferencias en la planta de vainilla, la formación bioquímica de los precursores del sabor y el proceso de beneficiado poscosecha que difiere en cada región (Ranadive, 1992). Por otro lado, se ha demostrado que la extracción de la vainillina se ve limitada por las estructuras celulósicas, disminuyendo la concentración final de ésta en el extracto. En este sentido, varios autores han propuesto la utilización de preparados enzimáticos exógenos con la intención de exponer a un pre-tratamiento enzimático a las vainas de vainilla y mejorar la extracción de los componentes aromáticos. De igual manera, se han desarrollado patentes en las que se plantean mejorar la calidad del extracto. Sin embargo, hasta el momento solo se ha evaluado la concentración de vainillina obtenida mediante esta nueva metodología, y se ha dejado de lado la evaluación sensorial. Por lo que, el presente estudio tuvo como finalidad establecer el perfil de aroma y sabor aportado por el extracto de vainas verdes, así como mostrar su correlación con la presencia de sus principales componentes aromáticos (Bruniere, 1998; Ruiz-Terán et al., 2001) . OBJETIVO GENERAL Realizar un perfil de sabor y aroma de extractos de vainilla de vaina verde obtenidos por métodos enzimáticos y determinar la correlación con sus principales componentes aromáticos. OBJETIVOS ESPECÍFICOS Determinar la concentración de los principales componentes aromáticos de la vainilla. Establecer el perfil de aroma y sabor de los extractos de vainilla de vaina verde mediante un panel de jueces entrenados. Evaluar la correlación entre el perfil de sabor y aroma de los extractos y la presencia de los principales componentes aromáticos. MATERIALES Y MÉTODOS En la realización de este trabajo de investigación se utilizaron vainas verdes con una coloración verde amarillenta en el ápice, a las cuales se les sometió a un marchitamiento en frio y un posterior tratamiento enzimático con actividades celulolíticas y -glucosídicas, logrando 28 al 30 de Marzo del 2012 - Ixtapa-Zihuatanejo Guerrero, México. e-mail: [email protected] www.cmibq.org.mx XVIII Congreso Nacional de Ingeniería Bioquímica XVIII National Congress of Biochemical Engineering VII Congreso Internacional de Ingeniería Bioquímica VII International Congress of Biochemical Engineering X Jornadas Científicas de Biomedicina y Biotecnología Molecular X Biomedicine and Molecular Biotechnology Meeting obtener una concentración 2.8 veces mayor de vainillina (La información se encuentra actualmente en la generación de una patente), en comparación a lo propuesto por la Food and Drugs Administration (FDA) que menciona que un extracto de vainilla single fold debe contener 0.2 % de vainilla. Se utilizaron dos preparados enzimáticos Crystalzyme PML-MX y Cellulase 17600L, por lo que los extractos obtenidos a partir de ellos se denominaron Cry40 y Cel40 respectivamente. Para llevar a cabo la evaluación sensorial se seleccionó un panel de entre 30 candidatos mediante un cuestionario utilizando criterios en base a sus hábitos alimenticios, condiciones de salud y disponibilidad. Posteriormente se les realizaron pruebas de determinación de sabores básicos y aromas comunes. Los jueces seleccionados fueron entonces entrenados en la descripción de las características sensoriales (olor y sabor) del extracto de vainilla (análisis cualitativo) y su medición (análisis cuantitativo) utilizando un extracto comercial (Virginia Dare), uno tradicional elaborado partir de vainas beneficiadas y los extractos Cry40 y Cel40. Para el análisis del perfil de aroma se utilizaron los extractos de vainilla en forma directa, mientras que para evaluar el sabor se elaboraron helados, adecuándoles la misma concentración de vainillina en los cuatro extractos. La concentración de componentes aromáticos en los extractos y el resultado del análisis descriptivo de olor de los extractos y sabor de los helados, se evaluaron por medio de un análisis de PLS (Partial Least Square) para relacionar la presencia de los componentes aromáticos y la percepción de atributos de sabor en los helados de vainilla. RESULTADOS Y DISCUSIONES Después de la extracción alcohólica se realizó la cuantificación de vainillina y glucovainillina, p-hidroxibenzaldehído, ácido vainíllico y el alcohol vainíllico presentes en los extractos de vainilla a partir de vaina verde mediante la modificación a una técnica de HPLC propuesta por Waliszewski et al., (2007) y los resultados son mostrados en la Figura 1. Figura 1: Composición de los extractos de vainilla. Concentración de los principales componentes aromáticos presentes en los extractos Tradicional, Virginia Dare, Cry40 y Cel40. Aunque la vainillina es el principal componente de sabor y aroma de la vainilla, el bouquet completo esta dado por cerca de 250 componentes aromáticos, dentro de los que destacan el ácido vainíllico, p-hidroxibenzaldehído, ácido p-hidroxibenzoico y alcohol vainíllico 28 al 30 de Marzo del 2012 - Ixtapa-Zihuatanejo Guerrero, México. e-mail: [email protected] www.cmibq.org.mx XVIII Congreso Nacional de Ingeniería Bioquímica XVIII National Congress of Biochemical Engineering VII Congreso Internacional de Ingeniería Bioquímica VII International Congress of Biochemical Engineering X Jornadas Científicas de Biomedicina y Biotecnología Molecular X Biomedicine and Molecular Biotechnology Meeting (Havkin-Frenkel, 2005; Perez-Silva et al. 2006), por lo tanto, es posible que la presencia o ausencia de alguno de estos componentes podría alterar la percepción final del sabor de los extractos de vainilla. Estos extractos de vainilla fueron analizados sensorialmente por un panel de jueces entrenados y los descriptores reportados en consenso con el fueron caramelo, vainilla, jerez, alcohol, verde, chocolate y medicinal para el aroma en donde se empleó el extracto de vainilla directamente sin diluir, mientras que los descriptores reportados para el sabor fueron vainilla, leche caramelo, crema, jerez, chocolate y alcohol mediante la elaboración de un helado de vainilla. Los valores dados a cada atributo de cada uno de los extractos evaluados, se obtuvieron de una escala de dos puntos con las definiciones "débil y fuerte" a cada extremo de la escala. La Figura 2 muestra los resultados de las pruebas descriptivas de aroma para cada extracto analizado, en donde se observa que los extractos de vainilla de vaina verde presentan una similitud, sin embargo para el extracto Cel40 se reportó una mayor intensidad en olor a caramelo que en el extracto Cry40. El extracto tradicional presentó las menores intensidades en los descriptores caramelo, vainilla, jerez y chocolate, manteniendo el olor a alcohol en intensidades similares a los extractos de vaina verde Cry40 y Cel40, lo que era de esperarse porque las concentraciones de etanol eran similares. El extracto comercial presentó una mayor intensidad en los descriptores de alcohol y jerez, comparado con los otros extractos, sin embargo la percepción a chocolate estuvo casi ausente. Figura 2. Perfil de aroma de los extractos de vainilla. Análisis descriptivo de aroma de los extractos de vainilla de vaina verde, extracto comercial y extracto tradicional, V. Dare, Cry40 y Cel40. Los resultados de la evaluación de los descriptores del sabor (Figura 3) mostraron que la percepción de vainilla fue similar para los helados con extractos de vaina verde y con los helados de vaina beneficiada, solamente se presentaron diferencias estadísticamente significativas entre los helados elaborados con el extracto comercial Virginia Dare y el helado con extracto Cry40, tanto en el descriptor vainilla como en los descriptores leche, caramelo, crema, jerez y chocolate. A diferencia de los resultados del perfil de olor, cuando se analizó el perfil de sabor se observan diferencias entre los extractos Cry40 y Cel40, en los descriptores de jerez y caramelo, lo que indica que en el perfil de sabor global, los helados pudieran ser 28 al 30 de Marzo del 2012 - Ixtapa-Zihuatanejo Guerrero, México. e-mail: [email protected] www.cmibq.org.mx XVIII Congreso Nacional de Ingeniería Bioquímica XVIII National Congress of Biochemical Engineering VII Congreso Internacional de Ingeniería Bioquímica VII International Congress of Biochemical Engineering X Jornadas Científicas de Biomedicina y Biotecnología Molecular X Biomedicine and Molecular Biotechnology Meeting percibidos como diferentes, aunque provengan de una metodología similar. adjudicar especialmente al ácido vainíllico, debido a que la glucovainillina no está indicado como un componente aromático, sino un precursor de la vainillina, es decir, que el impacto en el olor y sabor se notaría después de su hidrólisis y no en su forma glucosilada. Los componentes alcohol vainíllico, p-hidroxibenzaldehído, y vainillina se relacionaron a los descriptores de vainilla, caramelo y chocolate lo cual confirmaría la importancia de estos componentes en la impartición del bouquet completo de la vainilla. Figura 3. Perfil de sabor de los extractos de vainilla. Análisis descriptivo de sabor en los helados de vainilla elaborados con los extractos de vainilla de vaina verde, extracto comercial y extracto tradicional, V. Dare, Cry40 y Cel40. Para correlacionar los datos de análisis descriptivo y la composición de los extractos de vainilla se utilizó una regresión PLS (Partial Least Squareregression). En primer lugar, se relacionó la respuesta del análisis descriptivo de aroma con los componentes vainillina, glucovainillina, p-hidroxibenzaldehido, ácido vainíllico y alcohol vainíllico (Figura 4), observando que los descriptores verde y medicinal no presentaron ninguna relación con los componentes evaluados. Sin embargo, los componentes ácido vainíllico y glucovainillina presentaron una alta relación con los descriptores de olor alcohol y jerez. Esta relación se le podría Figura 4. Correlación de los componentes principales y los descriptores de aroma de los extractos de vainilla. Correlación obtenida mediante el método estadístico Partial Least Square Regression (PLS) Se analizaron los resultados de los descriptores de sabor, y se demostró que los componentes p-hidroxibenzaldehido, alcohol vainíllico y vainillina está ligado a la percepción a vainilla y chocolate en 28 al 30 de Marzo del 2012 - Ixtapa-Zihuatanejo Guerrero, México. e-mail: [email protected] www.cmibq.org.mx XVIII Congreso Nacional de Ingeniería Bioquímica XVIII National Congress of Biochemical Engineering VII Congreso Internacional de Ingeniería Bioquímica VII International Congress of Biochemical Engineering X Jornadas Científicas de Biomedicina y Biotecnología Molecular X Biomedicine and Molecular Biotechnology Meeting los helados, lo que implica su importancia en el impacto global de los extractos de vainilla y los productos elaborados a partir de ellos (Figura 5). Figura 5. Correlación de los componentes principales y los descriptores de sabor de los extractos de vainilla. Correlación obtenida mediante el método estadístico Partial Least Square Regression (PLS) CONCLUSIONES Los componentes aromáticos más directamente relacionados con los atributos de sabor y olor a vainilla, además de la vainillina, fueron el p-hidroxibenzaldehido y alcohol vainíllico, demostrando su importancia en el impacto del sabor y aroma de la vainilla. Los resultados solo nos brinda información del impacto de algunos componentes sobre el sabor y aroma de la vainilla, por lo que, para poder saber si estos helados pueden ser aceptados o no, es necesario realizar pruebas para determinar su nivel de agrado. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. Brunerie, P.M., (1998). Process for the production of natural vanilla extract by enzymatic processing of green vanilla pods, and extract thereby obtained. United States Patent 5,705,205. 2. Havkin-Frenkel D., French J.C., Pak F., Frenkel C. (2005). Inside vanilla: Vanilla planifolia´s botany, curing options and future market prospects. Perfumer and Flavorist 30:36-55. 3. Pérez-Silva, A.; Odoux, E.; Brat, P.; Ribeyre, F.; Rodríguez-Jimenes, G.; Robles-Olvera, V.; García-Alvarado, M.A. y Günata, Z. (2006). GC-MS and GC-olfatometry análisis of aroma compounds in a representative organic aroma extract from cured vanilla (Vanilla planifolia G. jackson) beans. Food Chemistry 99:728-735. 4. Ranadive A. (1992). Vanillin and related flavor compound in vanilla in vanilla extracts made from beans of various global origins. Journal of Agricultural and Food Chemistry 40:1922-1924. 5. Ruiz-Terán, F.; Pérez-Amador, I.; López-Munguía, A. (2001). Enzymatic extraction and transformation of glucovainillin to vainillin from vanilla green pods. Journal of Agricultural and Food Chemistry 49:5207-5209. 6. Waliszewski, K.N.; Pardío, V.T.; Ovando, S.L. 2007. A simple and rapid HPLC technique for vanillin determination in alcohol extract. Food Chemistry 101:1059-1062. 28 al 30 de Marzo del 2012 - Ixtapa-Zihuatanejo Guerrero, México. e-mail: [email protected] www.cmibq.org.mx