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LA RIOJA – 27 Y 28 DE ABRIL DE 2005 CONTRIBUCIÓN DE LAS LEVADURAS A LAS PROPIEDADES SENSORIALES DEL VINO MANTENIMIENTO DE LA TIPICIDAD Y BIODIVERSIDAD EN EL MARCO DE LA GLOBALIZACIÓN RESUMEN DE LAS CONFERENCIAS DEL XVII ENCUENTRO CIENTÍFICO DE LALLEMAND CONTRIBUCIÓN DELAS LASLEVADURAS LEVADURAS A LAS PROPIEDADES SENSORIALES VINO CONTRIBUCIÓN DE A LAS PROPIEDADES SENSORIALES DEL DEL VINO PRÓLOGO E l papel de las levaduras en la elaboración del vino va mucho más allá de la fermentación alcohólica. El impacto de la levadura en la calidad sensorial de los vinos quedó claro durante las XVIIas Entretiens Scientifiques de Lallemand que tuvieron lugar en La Rioja, España, el 27 y 28 de Abril de 2005. El encuentro técnico reunió a investigadores, expertos y enólogos procedentes de ocho países para discutir los avances en las ciencias de elaboración y prácticas enológicas relacionadas con la utilización de levaduras seleccionadas naturales en la producción de vinos. Cerca de 200 asistentes aprendieron de las presentaciones y discusiones acerca de la contribución sensorial de las levaduras, obteniendo un mejor conocimiento de su papel en el mantenimiento de la tipicidad y biodiversidad del vino en el contexto de la globalización. Varios temas, tales como la contribución sensorial de las levaduras, legislación acerca de su utilización y de sus derivados, investigaciones acerca de microorganismos genéticamente modificados y su poten- cial, y la diseminación ecológica de las levaduras, fueron tratados en las diferentes conferencias. Los asistentes fueron invitados a una mesa redonda con 10 enólogos y winemakers de Europa y del Nuevo Mundo que compartieron sus perspectivas en los aspectos prácticos de la utilización de levaduras seleccionadas naturales. Principalmente, la discusión se centró en dos aspectos: mantenimiento del carácter natural y de la tipicidad de los vinos, y la oferta al consumidor de vinos de calidad impecable. Estos encuentros técnicos no sólo ayudan a los asistentes a continuar informados, las presentaciones científicas, las experiencias de los enólogos y expertos, y los comentarios que los participantes expresaron durante las XVIIas Entretiens Scientifiques de Lallemand ayudarán directamente a la investigación, producción y comunicación de Lallemand para responder de manera más adecuada a las distintas y específicas necesidades de los usuarios de levaduras seleccionadas de la naturaleza. –2– Lactic Acid Bacteria andDEL Selected CONTRIBUCIÓN DE LAS LEVADURAS AIndigenous LAS PROPIEDADES SENSORIALES VINO Lactic Acid Bacteria CONTENIDOS UTILIZACIÓN DE LEVADURAS SELECCIONADAS Y BIODIVERSIDAD .................................................13 Basado en el artículo de Eva Valero, Dorit Schuller, Brigitte Cambon, Margarida Casal y Sylvie Dequin LA POTENCIALIDAD DE LAS LEVADURAS SACCHAROMYCES CEREVISIAE PARA LA MEJORA DEL COLOR DE LOS VINOS TINTOS ...............................5 Basado en el artículo de Eveline J. Bartowsky, Simon J. Dillon, Paul A. Henschke, Andrew J. Markides, Ann Dumont, Anne Ortiz-Julien, Isak S. Pretorius y Markus Herderich EL USO DE LEVADURAS EN BORGOÑA Y EN OTRAS REGIONES: FERMENTACIÓN Y CRIANZA SOBRE LÍAS .............................................................15 Basado en un artículo de Michel Feuillat SELECCIÓN DE LEVADURAS SACCHAROMYCES BAYANUS AUSTRALIANAS PARA INCREMENTAR LA DIVERSIDAD DE LOS VINOS TINTOS Y BLANCOS ...7 Basado en el artículo de Jeffrey M. Eglinton, I. Leigh Francis y Paul A. Henschke EL IMPACTO DE LAS LEVADURAS SELECCIONADAS NATURALES EN EL ESTILO DE VINO Y SU COMERCIALIZACIÓN DEBATE DE LA MESA REDONDA ............................17 Moderador: Joe Wadsack TÉCNICAS PARA EL DESARROLLO DE LEVADURAS VÍNICAS: POSIBILIDADES Y LIMITACIONES .............9 Basado en el artículo de Florian F. Bauer –3– Lactic Acid Bacteria andDEL Selected CONTRIBUCIÓN DE LAS LEVADURAS AIndigenous LAS PROPIEDADES SENSORIALES VINO Lactic Acid Bacteria LA POTENCIALIDAD DE LAS LEVADURAS SACCHAROMYCES CEREVISIAE PARA LA MEJORA DEL COLOR DE LOS VINOS TINTOS Basado en el artículo de Eveline J. BARTOWSKY1, Simon J. DILLON2, Paul A. HENSCHKE1, Andrew J. MARKIDES3, Ann DUMONT4, Anne ORTIZ-JULIEN5, Isak S. PRETORIUS1 y Markus HERDERICH1 1 The Australian Wine Research Institute, P.O. Box 197, Glen Osmond, South Australia 5064 2 The Australian Wine Research Institute, The Yalumba Wine Company, P.O. Box 10, Angaston, South Australia 5353 3 Lallemand Australia Pty Ltd, P.O. Box 209, Plympton, South Australia 5038 4 Lallemand Inc, 1620 rue Préfontaine, Montréal, Québec H1W 2N8, Canada 5 Lallemand SA, Parc d’Activité de Font, Grasse, 19 rue des Briquetiers, BP 59, 31702 Blagnac CEDEX, France Publicado en The Australian & New Zealand Grapegrower and Winemaker, noviembre 2004. E l color del vino, la primera sensación que recibe el catador, tiene una gran influencia en la apreciación global del mismo. Para optimizar el color de los vinos tintos, la calidad de las uvas es fundamental. Pero existen numerosas técnicas vitícolas y enológicas que pueden determinar también el color final del vino. Intensidad colorante 12 10 8 6 4 2 0 Levadura 1 Levadura 2 Levadura 3 Levadura 4 Levadura 5 Levadura 6 Levadura 7 Levadura 8 Levadura 9 Levadura 10 Levadura 11 Levadura 12 Levadura 13 Levadura 14 Levadura 15 Levadura 16 Levadura 17 Durante la maceración de las uvas, una fracción de la composición fenólica, localizada en los hollejos, viene extraída con el mosto. Estos componentes fenólicos son los responsables del color rojo. A continuación varios metabolitos derivados de las levaduras, en particular acetaldehído y ácido pirúvico, interaccionan con los antocianos y los taninos para formar compuestos coloreados, tales como piranoantocianos y polímeros pigmentados (Romero y Baker, 1999). Estas moléculas más estables son menos sensibles que los antocianos al pH y al SO2 libre del vino. Un reciente trabajo del Australian Wine Research Institute (AWRI) ha mostrado el efecto de levaduras Saccharomyces bayanus sobre el color de un vino tinto (Eglinton et al. 2003; Eglinton et al. 2004). Por lo que respecta a Saccharomyces cerevisiae, el equipo de microbiología del vino del AWRI y Lallemand han colaborado en un estudio sobre la influencia de 17 levaduras comerciales en el color de un vino Shiraz. Los ensayos fueron realizados mediante microfermentaciones de 1 kg de uvas. Los vinos producidos presentan unas características colorantes similares a las de los vinos elaborados a escala piloto (750 kg). Cuatro semanas después del final de la fermentación alcohólica, se determinó la intensidad colorante de los vinos elaborados con las 17 levaduras (Ver Fig. 1). Los resultados presentaron variaciones de hasta el (unidades de absorbancia) FIGURA 1. Intensidad colorante cuatro semanas después de la fermentación alcohólica de vinos elaborados a partir de uva Shiraz (Clare Valley, 2000) y de 17 levaduras1 de Saccharomyces cerevisiae mediante microvinificaciones (1Kg de uva) Levaduras seleccionadas 38% y permitieron clasificar las levaduras en tres grupos estadísticamente diferentes en función de la intensidad colorante de los vinos. Las diferencias de color, apreciables a simple vista, concuerdan con las observaciones de la industria. Los vinos con las mayores intensidades colorantes presentaban también las tonalidades más bajas. Contenían más compuestos fenólicos, tales como malvidina -3-glucósido (principal antociano de las uvas) y polímeros pigmentados. Posteriormente se seleccionaron seis levaduras de entre las 17 iniciales, que representaban los tres tipos de intensidad colorante. Fueron inoculados en mostos Shiraz de tres regiones vitícolas: Adelaide Hills, Clare Valley y Langhorne Creek (Ver Fig. 2 en la página siguiente). El efecto de las levaduras es notable, mostrando la misma tendencia observada anteriormente: las levaduras que produjeron –5– CONTRIBUCIÓN DE LAS LEVADURAS A LAS PROPIEDADES SENSORIALES DEL VINO Bibliografía Intensidad colorante (unidades de absorbancia) FIGURA 2. Intensidad colorante cuatro semanas después de la fermentación alcohólica de vinos elaborados a partir de uva Shiraz procedentes de tres regiones vitivinícolas diferentes y utilizando seis levaduras1 de Saccharomyces cerevisiae. 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 1 ra a5 a9 ur du 6 14 a ur 7 v ad d ra e a1 v a u L e v a1 ur d L d a ur Le v a d v e Levaduras L va Le Le seleccionadas Eglinton, J., P. Henschke, P. Høj, y I. Pretorius. 2003. Winemaking properties and potential of Saccharomyces bayanus wine yeast—harnessing the untapped potential of yeast biodiversity. Australian and New Zealand Wine Industry Journal. 18(6):16-19. Eglinton, J., M. Griesser, P. A. Henschke, M. J. Kwiatkowski, M. Parker, y M. Herderich. 2004. Yeast-mediated formation of pigmented polymers in red wine. Waterhouse A. L., J. A. Kennedy (eds.) Red wine color: Revealing the mysteries. ACS Symposium Series 886: Oxford University Press. 7-21. Langhorne Creek Adelaide Hills Clare Valley Origen vitícola Romero, C., y J. Bakker. 1999. Interactions between grape anthocyanins and pyruvic acid, with effect of pH and acid concentration on anthocyanins composition and color in model systems. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 47:3130-3139. vinos con intensidad colorante baja, media o alta reprodujeron el fenómeno en los mostos procedentes de las diferentes regiones. Sin embargo, el efecto del terroir no está encubierto por el tipo de levadura utilizado. La investigación actualmente en marcha sugiere que la intensidad colorante relativa de los vinos jóvenes se mantiene durante un máximo de ocho meses. En la práctica, ésto depende de las condiciones de producción del vino, ya que la crianza en barrica o la microoxigenación influyen sobre el efecto de la levadura. Estos resultados necesitan ser confirmados mediante ensayos a gran escala, considerando más variedades. Estos resultados sugieren ya que la elección de la levadura puede ser relativamente importante cuando al enólogo le interesa optimizar el color del vino. En el futuro, una mejor comprensión de las complejas interacciones entre las levaduras y los compuestos fenólicos podría conducir a un uso más eficaz de las levaduras comerciales existentes y podría llevar también a la obtención de nuevas levaduras interesantes. Este es el objetivo de las actuales investigaciones del AWRI. 1 Levadura 1 = LALVIN 71B ® Levadura 2 = ENOFERM AMH ® Levadura 3 = ENOFERM T73 ® Levadura 4 = LALVIN 522 DAVIS ® Levadura 5 = ENOFERM BDX ® Levadura 6 = LALVIN RHÔNE 2323 ® Levadura 7 = VITILEVURE CSM ® Levadura 8 = LALVIN BOURGOROUGE RC212 ® Levadura 9 = LALVIN ICV D254 ® Levadura 10 = LALVIN L 2226 ® Levadura 11 = LALVIN ICV D47 ® Levadura 12 = LALVIN RHÔNE 2056 ® Levadura 13 = VITILEVURE SIRAH ® Levadura 14 = LALVIN EC1118 ® Levadura 15 = LEVULINE BRG ® Levadura 16 = ENOFERM M2 ® Levadura 17 = LALVIN BM45 ® –6– CONTRIBUCIÓN DE LAS LEVADURAS A LAS PROPIEDADES SENSORIALES DEL VINO SELECCIÓN DE LEVADURAS SACCHAROMYCES BAYANUS AUSTRALIANAS PARA INCREMENTAR LA DIVERSIDAD DE LOS VINOS TINTOS Y BLANCOS Basado en el artículo de Jeffrey M. EGLINTON, I. Leigh FRANCIS y Paul A. HENSCHKE The Australian Wine Research Institute P.O. Box 197 Glen Osmond (Adelaide), SA 5064 Australie Saccharomyces bayanus se está convirtiendo en una alternativa a S. cerevisiae En el mercado mundial, en donde la distancia entre la superproducción de vino y el consumo que disminuye es cada vez más grande, la competición es feroz y las innovaciones con el fin de mejorar y distinguir los vinos son numerosas. Teniendo en cuenta ésto, entre las numerosas técnicas posibles, la elección de la levadura para la fermentación representa un instrumento interesante, aunque en gran parte todavía subexplotado. Durante una investigación sobre levaduras criotolerantes, el Australian Wine Research Institute (AWRI) consiguió aislar 12 levaduras indígenas de S. bayanus genéticamente diferentes que mostraban fuertes capacidades fermentativas en ensayos realizados a 10°C y 1°C. Durante estos ensayos, algunos vinos presentaron unos perfiles sensoriales y unas características aromáticas tan interesantes que se convirtieron en los principales criterios para la selección de S. bayanus. Estas levaduras se han convertido por tanto en una alternativa a S. cerevisiae. Las interacciones entre la levadura y los componentes del mosto de uva son muy complejas, y producen una elevada cantidad de moleculas, algunas de las cuales con un importante impacto sensorial. Simplemente cambiando el tipo de levadura utilizada, el enólogo puede diversificar el perfil aromático de sus vinos. Buenas capacidades fermentativas La especie de levadura Saccharomyces cerevisiae, la cual se adaptan bien a las variaciones ambientales (en particular cuando el nivel de alcohol aumenta durante la fermentación), es la levadura de vinificación preeminente. En paralelo a la investigación llevada a cabo para desarrollar las capacidades de esta levadura, se evaluó la capacidad de numerosas levaduras existentes para variar los perfiles aromáticos y gustativos. Saccharomyces bayanus muestra una potencialidad considerable como levadura vínica alternativa. No se debe confundir con Saccharomyces cerevisiae var. bayanus, ya que genéticamente son tan diferentes como el hombre y el ratón. De hecho, esta distinción no siempre viene realizada por los productores de levaduras. No existen muchas levaduras Saccharomyces bayanus comercialmente disponibles, exceptuando un híbrido natural de S. bayanus y S. cerevisiae (LALVIN S6U ® de Lallemand) que es muy apreciado por aquellos que ya lo han usado. Dos de estas levaduras han sido particularmente bien caracterizadas: AWRI 1176 y AWRI 1375. Aunque su velocidad media de fermentación es menor respecto a las levaduras clásicas de S. cerevisiae, estas levaduras consumen todo el azúcar presente en el zumo de uva, a diferencia de otras levaduras no-S. cerevisiae. En los raros casos en los que se produce una reducción de la velocidad hacia el final de la fermentación, una inoculación secuencial con S. cerevisiae o con S. bayanus, o una aireación mediante remontado es suficiente para asegurar la degradación prácticamente completa de los azúcares sin perjudicar el perfil aromático del vino. (Ver Fig. 1 en la página siguiente) Las levaduras AWRI 1176 y AWRI 1375 fueron evaluadas utilizando mostos Shiraz en laboratorio y mostos Chardonnay en barricas. Mostraron su capacidad para dominar rápida–7– CONTRIBUCIÓN DE LAS LEVADURAS A LAS PROPIEDADES SENSORIALES DEL VINO to a aquellos elaborados con levaduras convencionales de S. cerevisiae. Las levaduras AWRI 1176 y AWRI 1375 producen más glicerol (sin afectar a la viscosidad del vino) y ácido succínico, y menos ácido acético y, a veces, menos etanol (Tabla 1). La capacidad para producir un vino con menos alcohol podría ser un rasgo interesante de estas levaduras. FIGURA 1. Perfil aromático de vinos Chardonnay utilizando técnicas diferentes para completar la fermentación Azúcar (g/L) 250 200 150 + AWRI 838 + aireación 100 50 0 Estas dos levaduras generan perfiles aromáticos diferentes respecto a S. cerevisiae, en función de la concentración del aroma fermentativo frutal o floral que producen. Algunos son característicos, por ejemplo corteza de naranja cocinada, albaricoque, miel, así como levadura y nuez. Los vinos Chardonnay fermentados por S. bayanus se presentan generalmente con una mayor complejidad. En boca los vinos fermentados con AWRI 1176 y AWRI 1375 presentan una mayor sensación de redondez y volumen. Con respecto al análisis visual, los vinos tintos jóvenes fermentados con S. bayanus también fueron diferentes de los inoculados con S. cerevisiae, a causa de su color más rojo con una tonalidad menos púrpura, por lo cual parecían haber experimentado un mayor envejecimiento. + AWRI 1375 0 10 20 30 40 50 60 Tiempo (días) ésteres 3 floral levadura/caramelo 2 piña sulfuroso 1 melón sudor 0 cítrico acetaldehído albaricoque coci acético acetato de etil + aireación + AWRI 1375 + AWRI 838 Fermentación con la pareja Saccharomyces bayanus y S. cerevisiae mente la microflora indígena hasta el final de la fermentación, momento en el cual a menudo seguían siendo las únicas levaduras presentes (Eglinton y Henschke, 2002). Por esta capacidad se distinguieron de la mayoría de las especies no-S. cerevisiae. A pesar de sus interesantes características, las levaduras AWRI 1176 y AWRI 1375 deben ser consideradas la primera generación, ya que otras, incluso mejores, S. bayanus están por llegar. Proporcionan una visión rápida del nuevo material genético que podrían ofrecer. Este trabajo, que ha permitido que diversas levaduras hayan sido seleccionadas, ha permitido también una mejor comprensión de los mecanismos bioquímicos implicados en la transformación de los nutrientes y de los precursores del aroma. Los requisitos nutricionales de estos dos levaduras todavía no han sido determinados completamente. Sin embargo su comportamiento por lo que respecta al oxígeno y al nitrógeno durante las fermentaciones ralentizadas o paradas indica que tienen unos requisitos parecidos a los de S. cerevisiae. Es necesario asegurar que el mosto contenga al menos de 200 a 300 mg/L de nitrógeno asimilable por las levaduras e incluir una breve fase de aireación durante la fermentación. Para obtener el máximo potencial de S. bayanus durante la vinificación, es interesante utilizarlo junto con S. cerevisiae, mediante inoculación simultánea o secuencial. Una bodega ha alcanzado ya buenos resultados realizando una fermentación con S. bayanus y utilizando S. cerevisiae al final de la fermentación. No importa como vienen utilizadas, las levaduras de S. bayanus representan una herramienta adicional para los enólogos que desean elaborar unos vinos que se distingan. Las levaduras de S. bayanus pueden ser utilizadas para producir vinos con una composición química diferente con respecTABLA 1. Composición de vinos Chardonnay elaborados a pequeña escala utilizando levaduras S. cerevisiae o S. bayanus (Eglinton et al. 2000) Propiedades S. cerevisiae S. bayanus S. bayanus AWRI 838 AWRI 1176 AWRI 1375 Azúcar residual (g/L) 0,6 0,1 0,1 Alcohol (% v/v) 13,1 13,1 13,3 pH 3,40 3,39 3,38 Acidez valorable (g/L) 6,8 6,5 6,5 Ácido acético (g/L) 0,43 0,10 <0,05 Glicerol (g/L) 5,1 8,6 7,9 Ácido málico (g/L) 2,25 1,85 2,04 Ácido succínico (g/L) 0,50 1,00 1,07 Bibliografía Eglinton, J., y P. Henschke, P. 2002. Winemaking properties of Saccharomyces bayanus – fermentation dominance. Aust. NZ Grapegrower Winemaker. (466):47-51. Eglinton, J. M., S. J. McWilliam, M. W. Fogarty, I. L. Francis, M. J. Kwiatkowski, P. B. Høj, y P. A. Henschke. 2000. The effect of Saccharomyces bayanus mediated fermentation on the chemical composition and aroma profile of Chardonnay wine. Aust. J. Grape Wine Res. 6:190-196. –8– Lactic Acid Bacteria andDEL Selected CONTRIBUCIÓN DE LAS LEVADURAS AIndigenous LAS PROPIEDADES SENSORIALES VINO Lactic Acid Bacteria TÉCNICAS PARA EL DESARROLLO DE LEVADURAS VÍNICAS: POSIBILIDADES Y LIMITACIONES Basado en el artículo de Florian F. BAUER Institute for Wine Biotechnology University of Stellenbosch South Africa obtención de vinos que coinciden con las expectativas de un segmento específico del mercado (Barre et al. 1993; Pretorius 2002). T estimonios arqueológicos sugieren que Saccharomyces cerevisiae fue el primer microorganismo domesticado. Los enólogos en esos tiempos no eran conscientes de ello, pero estuvieron implicados en la adaptación evolutiva que ha conducido a la levadura vínica actual. Selección de levaduras a partir de fermentaciones espontáneas Un mosto en fermentación es un ambiente “extremo” al que relativamente pocas especies se han adaptado con éxito. Este ambiente está caracterizado por un desequilibrio entre los elevados niveles de azúcar y las concentraciones relativamente bajas de nutrientes esenciales tales como nitrógeno, ácidos grasos y esteroles. El pH es bajo y el ambiente se vuelve rápidamente anaerobio durante la fermentación. Las levaduras que son capaces de fermentar completamente el mosto se encuentran presentes ya durante el prensado de las uvas. Tienen su origen en los granos de uva y en los equipos de la bodega. La mayor parte son S. cerevisiae, capaces de desarrollarse más rápidamente que las otras especies y de dominarlas. La mayoría de las levaduras actualmente comerciales fueron aisladas a partir de fermentaciones espontáneas. Estas levaduras “naturales” no ofrecen hoy en día bastante variedad como para satisfacer todos los requisitos de los enólogos. Ninguna levadura ofrece una combinación óptima de todos los criterios de selección. Desde la perspectiva de la vinificación, las mejores levaduras seleccionadas para el terroir tienen que ser todavía optimizadas. En los últimos años, además de su capacidad para fermentar los mostos hasta agotar los azúcares, las levaduras son seleccionadas en función de otras propiedades y de su contribución a la calidad del vino y a su valor nutricional (Ver Tabla 1 en la página 11). En efecto, las levaduras pueden conferir perfiles aromáticos específicos u optimizar el nivel de los compuestos que pueden tener un impacto positivo o negativo sobre la salud humana. Los productores de levaduras están desarrollando cada vez más levaduras regionales que expresarán el terroir a través de aromas específicos. Aunque el concepto de terroir es controvertido desde un punto de vista científico, hay que señalar que el uso generalizado de este tipo de levadura no conduce a una estandarización de los vinos. Producción de híbridos Para los productores de levaduras, el término “híbrido” se refiere a las levaduras que han sido creadas a partir de especies cruzadas mediante un programa de hibridación, implicando por lo menos a dos levaduras parentales (hibridación interespecífica). Todas las técnicas de hibridación implican el azar. El resultado es aleatorio y las levaduras obtenidas deben ser a continuación estudiadas para verificar su potencial enológico y seleccionar aquellas que presenten las propiedades deseadas. En general hoy en día se acepta que el uso de levaduras seleccionadas puede contribuir de forma significativa a la –9– CONTRIBUCIÓN DE LAS LEVADURAS A LAS PROPIEDADES SENSORIALES DEL VINO Mutantes variabilidad genética de las especies Saccharomyces, el aislamiento de levaduras existentes seguirá siendo importante para el desarrollo de levaduras con nuevos rasgos. Aunque las técnicas de hibridación han obtenido algunos éxitos durante las últimas décadas y han aportado mucho, tienen limitaciones. Estas técnicas, así como la mutagénesis, no permiten la introducción de rasgos fundamentalmente diferentes dentro de una levadura determinada. Sin embargo, la ingeniería genética puede, y parece ser indispensable para el mejoramiento de los rasgos. Pero la elección de una técnica para el desarrollo de levaduras no depende solamente de su potencial tecnológico y científico. Actualmente el mercado del vino no está todavía preparado para aceptar el uso de los OGM. De hecho, sólo las levaduras genéticamente modificadas tienen que ser sometidas a un largo proceso de evaluación antes de ser introducidas en el mercado y, a pesar de que los riesgos inherentes a las tecnologías aleatorias podría ser mayores, las levaduras obtenidas no son objeto de los mismos controles. Se están llevando a cabo estudios más exhaustivos para evaluar los riesgos relacionados con la ingeniería genética (Bauer et al. 2004). Los resultados deberían proporcionar una base científica para este debate. En un programa de desarrollo de levaduras, los mutantes se obtienen mediante aplicación de luz UV o de un agente mutágeno químico a las levaduras que el investigador desea mejorar. Esto provoca una gran cantidad de errores en la réplica del DNA – mutaciones. La técnica de mutación es simple, pero tiene el mismo problema que la hibridación: debe ser seguida sistemáticamente por una fase de selección, así cualquier levadura mutada interesante pueden ser aislada del grueso de levaduras afectadas negativamente por la mutación. OGM La ingeniería genética representa otra vía para el mejoramiento de las levaduras. La producción de organismos genéticamente modificados (OGM) consiste en la manipulación de fragmentos de DNA in vitro y a continuación su reimplantación en el genóma de las especies de interés. En las últimas tres décadas, S. cerevisiae ha servido como modelo a los científicos para poder entender mejor el funcionamiento de la célula. La gran abundancia de conocimientos que se han acumulado puede servir ahora para el desarrollo de nuevas levaduras vínicas. A diferencia de las técnicas de hibridación y mutágenas, la ingeniería genética requiere el conocimiento previo de los genes, sus posiciones y su regulación. Por otra parte, sólo la ingeniería genética permite la introducción de nuevas características dentro de la levadura, que pueden no existir en absoluto en S. cerevisiae o en especies estrechamente relacionadas. Bibliografía Barre, P., et al. 1993. Genetic improvement of wine yeast. In Wine Microbiology and Biotechnology, Fleet, G. H. (ed.). Harwood Academic Publishers. 421-447. Bauer, F. F., S. Dequin, I. S. Pretorius, H. Shoeman, G. Wolfaardt, M. B. Schroeder, y M. K. Grossmann. 2004. The assessment of the environmental impact of genetically modified wine yeast strains. Bulletin de l’OIV. 77:515528. Métodos futuros Para satisfacer las futuras demandas de los consumidores, sin duda será necesario disponer de métodos capaces de transmitir radicalmente características nuevas y diferentes por lo que respecta el tratamiento del vino (enzimas), su conservación (alternativas al SO2), los aspectos relativos a la salud, y el aroma y perfil sensorial del vino. Pretorius, I. S. 2002. The genetic analysis and improvement of wine yeasts. In Fungal Biotechnology, Arora, D. (ed.). Marcel Decker. La capacidad de las diferentes técnicas para desarrollar nuevas levaduras o de conferir características nuevas depende de la complejidad del DNA sobre el que se trabaja. La ingeniería genética ofrece las mayores posibilidades porque, teóricamente, viene aplicada a todos los materiales genéticos. Pero en el caso de las levaduras, muchos de los rasgos que interesa modificar o mejorar a menudo dependen de cientos de genes. A nivel molecular, por tanto, resulta difícil entenderlos y utilizar la ingeniería genética para modificarlos. De esta manera, enfoques aleatorios como la hibridación son más adecuados. Dada la enorme – 10 – Técnicas para el desarrollo de levaduras vínicas: posibilidades y limitaciones TABLA 1. Mejoramiento de levaduras vínicas Propiedades Métodos que pueden ser aplicados (método preferido si pertinente) Comentarios Funcionamiento de la fermentación Capacidad de recuperación general Todos (hibridación) y resistencia al estrés Rasgos poligénicos. Puede ser aplicada una fuerte presión de selección, y programas de mejoramiento genético de no-GM ofrecen un buen potencial para sucesivos mejoramientos. Eficiencia en la utilización del azúcar Todos (Mutagénesis) Rasgos poligénicos. Puede ser aplicada una fuerte presión de selección, y programas de mejoramiento genético de no-GM ofrecen un buen potencial para sucesivos mejoramientos. Eficiencia en la utilización del nitrógeno Todos (Hibridación, Ingeniería genética) Rasgos poligénicos. Puede ser aplicada una fuerte presión de selección, y programas de mejoramiento genético de no-GM ofrecen un buen potencial para sucesivos mejoramientos. Sin embargo, aunque el uso de una fuente de nitrógeno específica podría ser mejorada (prolina), GM puede proporcionar una alternativa más segura y veloz ya que se requiere sólo un número limitado de genes Conducción de la fermentación maloláctica Ingeniería genética Única alternativa. Primera levadura GM con aprobación del FDA en los Estados Unidos Mejoramiento de la eficiencia del proceso Producción de mosto, clarificación y extracción de color y de compuestos aromáticos Ingeniería genética Sedimentación celular y floculación Ingeniería genética controladas Expresión de enzimas específicos (proteasas, glucanasas, pectinasas, etc.). S.Cerevisiae produce sólo un número limitado de estas enzimas, proporcionando una influencia limitada en los métodos de hibridación o mutagénesis. El método más eficiente es claramente a través de GM. Han sido generadas un número significativo de levaduras GM y se ha demostrado su eficiencia en la producción de vinos a pequeña escala. Expresión controlada de los genes de la floculación. Control biológico de los microorganismos contaminantes del vino Levaduras vínicas que producen enzimas antimicrobianas o péptidos Ingeniería genética Ningún otro método, como genes que codifican tales proteínas/ péptidos no se encuentran presentes en S. cerevisiae. Mayor producción de antioxidantes Ingeniería genética o de otros nutraceuticales Ningún otro método, como rutas metabólicas no se encuentran presentes en S. cerevisiae. Reducida formación de etil carbamato Mutagénesis La supresión de genes individuales puede ser alcanzada a través de enfoques no-GM Disminución de la producción de etanol Todos los métodos tradicionales/Ingeniería genética Varias estrategias han sido mejoradas con resultados diferentes. Hasta ahora no ha sido generada ninguna levadura no-GM con una producción de etanol significativamente reducida Mayor liberación de los terpenoides de las uvas Todos los métodos tradicionales/Ingeniería genética GM será la metodología con mejores resultados, pero algunos buenos resultados pueden ser alcanzados a través de métodos tradicionales. Producción optimizada de compuestos del aroma, del gusto y del perfil sensorial Todos los métodos tradicionales/Ingeniería genética (Ingeniería metabólica) Un elevado número de metabolitos, incluidos los compuestos aromáticos volátiles (ésteres y alcoholes superiores) y compuestos del perfil sensorial (equilibrio ácido,etc). Para alcanzar un resultado específico, GM es claramente la alternativa más prometedora. Sin embargo todas las levaduras producen un perfil aromático específico, y los métodos tradicionales permitirán la generación de una amplia gama de capacidades para la producción de aromas. Mejora de la salud del vino Cualidades sensoriales del vino – 11 – Lactic Acid Bacteria andDEL Selected CONTRIBUCIÓN DE LAS LEVADURAS AIndigenous LAS PROPIEDADES SENSORIALES VINO Lactic Acid Bacteria UTILIZACIÓN DE LEVADURAS SELECCIONADAS Y BIODIVERSIDAD Basado en el artículo de Eva VALERO1, Dorit SCHULLER2, Brigitte CAMBON1, Margarida CASAL2 y Sylvie DEQUIN1 1 Institut National de la Recherche Agronomique UMR Sciences pour l’Œnologie 2, Place Viala, 34060 Montpellier, France 2 Centro de Biologia Universidade do Minho, Campus de Gualtar, 4710-057 Braga, Portugal [email protected] Durante las últimas dos décadas, el uso de levaduras secas activas de Saccharomyces cerevisiae se ha generalizado de forma importante. Cada año, las levaduras comerciales de levadura vienen liberadas en grandes cantidades en el ambiente que rodea las bodegas, junto con residuos sólidos y líquidos procedentes de la vinificación. Pero su comportamiento en el ecosistema y su impacto potencial sobre la microflora natural siguen siendo totalmente desconocidos. Con el fin de evaluar la capacidad de las levaduras seleccionadas para propagarse y sobrevivir en el viñedo, para naturalizarse y convertirse en parte de la flora natural de los mostos, se llevó a cabo un estudio a gran escala. El objetivo era adquirir datos bien fundamentados sobre el impacto de estas levaduras sobre su biodiversidad y sobre fermentaciones futuras, en particular en el caso de bodegas que utilizan fermentaciones espontáneas. El estudio fue llevado a cabo entre 2001 y 2003, en seis viñedos del sur de Francia y del norte de Portugal. Estas bodegas utilizaron fundamentalmente la misma levadura seleccionada durante al menos cinco años consecutivos (LALVIN ICV K1M ® y ZYMAFLORE VL1 respectivamente). Las muestras de uva fueron tomadas en los alrededores de cada bodega (a unas distancias que oscilaron entro los 20 y los 1000 metros), antes y después de la vendimia. El zumo de uva extraído fue fermentado en pequeños volúmenes (de 200 a 500 mL) con agitación mecánica y mantenidos a 20°C. La flora fue analizada una vez transcuridos dos tercios de la fermentación. (Tabla 1). En total, de las 198 muestras recogidas durante las tres campañas, el 64% produjo fermentaciones espontáneas (12% con al menos una levadura seleccionada); se aislaron 3.780 colonias, incluyendo 2.355 pertenecientes a la especie Saccharomyces. Entre éstas, 296 fueron levaduras seleccionadas (7,8% de las levaduras aisladas), recuperadas principalmente después de la vendimia. Ésto indica la inmediata difusión. (Ver Fig. 1 en la página siguiente). La gran mayoría de las levaduras seleccionadas recogidas (94%) se encontraban muy cerca de la bodega (de 20 a 100 m). El análisis de las variaciones de población, de un año para TABLA 1 : Levaduras comerciales recuperadas en cada viñedo durante los tres años. Viñedos A B C D E F Total Fermentaciones espontáneas 19 24 29 16 23 15 126 Fermentaciones espontáneas con 0 2 1 11 9 2 25 570 720 870 480 690 450 3 780 Levaduras comerciales 0 15* 1 206 54+18* 2 296 % Levaduras comerciales / número de aislados 0 2 0,1 43 10 0,5 7.8 ⱖ 1 levadura comercial Aislados * Levaduras provenientes de la misma región. – 13 – CONTRIBUCIÓN DE LAS LEVADURAS A LAS PROPIEDADES SENSORIALES DEL VINO FIGURA 1. Distribución global (tres años) de levaduras comerciales en función de la distancia hasta la bodega antes de la vendimia (a) y después de la vendimia (b) (a) Antes de la vendimia 180 ZYMAFLORE VL1 ZYMAFLORE F10 ZYMAFLORE F15 ENOFERM BDX ® LALVIN ICV D254 ® 160 140 120 Número de levaduras (en el gráfico) Número de levaduras (en el gráfico) 180 100 80 60 40 20 0 (b) Después de la vendimia LALVIN ICV K1 M ® ZYMAFLORE VL1 ZYMAFLORE VL3 ZYMAFLORE F10 ZYMAFLORE F15 LALVIN BOURGOBLANC CY3079 ® ENOFERM BDX ® LALVIN ICV D254 ® LALVIN QA23 ® 160 140 120 100 80 60 40 20 0 10 - 50 100 200 400 600 800 Distancia (m) hasta la bodega 1000 10 - 50 100 200 400 600 800 Distancia (m) hasta la bodega 1000 vaduras seleccionadas no parecen que se establezcan en el viñedo. otro, indica que las levaduras seleccionadas no se implantan en el viñedo de forma estable, pero están sometidas a fluctuaciones naturales, apareciendo y desapareciendo periódicamente como las levaduras indígenas. Los resultados muestran que la propagación de las levaduras seleccionadas se encuentra limitada dentro de una distancia pequeña y en periodos de tiempo limitados. La dispersión ocurre en los lugares donde se descargan los orujos y está ayudada por las salidas de agua. Estos resultados pueden contribuir también a determinar el riesgo medioambiental relacionado con el uso de levaduras genéticamente modificadas durante la vinificación. Bibliografía Beltran, G., M. J. Torija, M. Novo, N. Ferrer, M. Poblet, J. M. Guillamón, N. Rozes, y A. Mas. 2002. Analysis of yeast populations during alcoholic fermentation: A six year follow-up study. Syst. Appl. Microbiol. 25:287-293. Aunque tienden a competir con las levaduras indígenas dentro de la misma bodega (Beltran et al. 2002), las le- – 14 – CONTRIBUCIÓN DE LAS LEVADURAS A LAS PROPIEDADES SENSORIALES DEL VINO EL USO DE LEVADURAS EN BORGOÑA Y EN OTRAS REGIONES: FERMENTACIÓN Y CRIANZA SOBRE LÍAS Basado en un artículo de Michel FEUILLAT Université de Bourgogne B.P. 27877, 21078 Dijon CEDEX France En Borgoña la adición de levaduras al vino es una antigua práctica que realmente tomó pie en diversas regiones vinícolas francesas a mitad de los años setenta con las levaduras secas activas. Las pocas levaduras distribuidas en esa época, de la especie Saccharomyces cerevisiae, habían sido seleccionadas por sus capacidades fermentativas y por su tolerancia al etanol y a los pH bajos. Una maceración prefermentativa a baja temperatura (de 8° a 10°C durante 3-5 días) refuerza los aromas varietales del Pinot noir en Borgoña (Feuillat 1997). Esto podría ser el resultado de un mecanismo enzimático o del crecimiento de levaduras resistentes al frío. Sabemos que en una flora indígena mantenida a baja temperatura durante pocos días, las levaduras criotolerantes de Saccharomyces bayanus uvarum llegan a ser dominantes (Massoutier et al. 1998). Los mostos Pinot noir fueron inoculados con estas levaduras y se controló la implantación. Las fermentaciones se llevaron a cabo a 10° y 25°C produciendo más glicerol que las fermentaciones de control que utilizaron S. cerevisiae, y menos etanol a 25°C. Entre los compuestos volátiles, la mayor diferencia se observó con el alcohol isoamílico y con el 2-fenil etanol, respectivamente dos y cuatro veces más concentrados en vinos fermentados con S. uvarum. El compuesto 2-fenil etanol tiene un olor agradable semejante a la rosa, cuando se encuentra presente en bajas concentraciones. Pero con las cantidades producidas por S. uvarum, podría afectar de forma negativa al aroma del vino al cubrir los aromas a frutos rojos típicos del Pinot noir. Impacto de las levaduras sobre el perfil aromático A principios de los años 90, y motivado por el miedo a la estandarización de los vinos, las principales regiones vinícolas francesas organizaron sus propios programas de selección de levaduras, recuperando el concepto de “levures de cru” con levaduras que se habían adaptado bien, en particular a la hora de mostrar los aromas varietales de variedades de uva local. La Université de Bourgogne y el Bureau Interprofessionnel des Vins de Bourgogne condujeron un programa de selección que duró desde 1987 hasta 1993. Las muestras de levadura fueron recogidas a partir de mostos al inicio de la fermentación, y a partir del material en contacto con el vino, en las mejores bodegas de la zona estudiada. Entre las miles de muestras tomadas a lo largo de un periodo de 2-3 años, sólo un pequeño número fue conservado. A continuación se emplearon varios años para verificar si estas levaduras se diferenciaban de las que ya habían sido aisladas y para evaluar su impacto sobre el perfil sensorial del vino, sobre todo en las bodegas en las que el proceso de vinificación (crianza sobre lías) determina en gran parte el resultado final. Influencia de las proteínas glicosiladas de las levaduras sobre los polifenoles La pared celular de la levadura libera glucanos y proteínas glicosiladas durante la fermentación alcohólica, a través de la gemación de las células vivas, y a continuación, después de la fermentación, a través de la autolisis de las células muertas. – 15 – CONTRIBUCIÓN DE LAS LEVADURAS A LAS PROPIEDADES SENSORIALES DEL VINO Estas proteínas glicosiladas desempeñan varias funciones durante la vinificación: activando la fermentación maloláctica, mejorando la estabilidad del vino, interaccionando con los compuestos del aroma, mejorando la calidad de los vinos espumosos, y así sucesivamente. Más recientemente, se ha estudiado también su interacción con los compuestos fenólicos (Saucier et al. 2000). Su influencia sobre las propiedades de los taninos depende de la levadura utilizada, y parece ser más importante durante la fermentación que durante la autolisis. Las proteínas glicosiladas cubren los taninos, los cuales ya no pueden precipitar. Este fenómeno conduce a una mejora de la estabilidad del color y a una disminución de la astringencia. En Borgoña, la crianza de los vinos sobre lías es una práctica cada vez más frecuente, a veces con la adición de glucanasas, para hacer los vinos más sutiles. La cantidad de péptidos liberados al final de la fermentación aumenta de forma considerable cuando no hay más células viables y cuando la temperatura se mantiene a 35°C para acelerar la autolisis. Al final, el vino contiene de 10 a 15 veces más péptidos que el mosto correspondiente. Esto varía mucho de una levadura a otra. Los péptidos liberados durante la fermentación, al inicio de la autolisis o después de varias semanas no presentan la misma composición aminoacídica, y por tanto las características sensoriales son diferentes. Por esta razón en particular, la duración de la crianza del vino sobre las lías influye en su perfil sensorial. El nivel de péptidos de un vino a menudo se encuentra por debajo de su umbral de percepción. La futura selección de nuevas levaduras debería permitir obtener preparaciones elaboradas con derivados de las levaduras enriquecidos con estos compuestos. Algunos autolisados que ya han sido probados han dado lugar a vinos no espumosos con una mayor sensación de redondez y de volumen en boca y a vinos espumosos con una espuma más fina y persistente. Liberación de péptidos durante la autolisis Existen dos mecanismos principales responsables de la autolisis de las levaduras muertas: • La degradación de la pared celular por las beta-glucanasas, que libera glucanos y proteínas glicosiladas Hoy en día, más de 200 levaduras enológicas han sido aisladas y seleccionadas, prestando en los últimos años particular atención a las moléculas liberadas por las levaduras. La liberación en el vino de proteínas glicosiladas presenta una gran variabilidad, dependiendo de la levadura, pero se trata de compuestos que desarrollan numerosas e interesantes funciones enológicas. Los péptidos y los nucleótidos, que son agentes del perfil sensorial, están siendo también objeto de estudio. • La degradación de las proteínas intracelulares por las proteasas, que libera aminoácidos y péptidos. FIGURA 1. Evolución de la liberación de péptidos en un mosto de Chardonnay MOSTO SINTÉTICO Final de la FA Bibliografía 2 40 0 0 Feuillat, M. 1997. Vinification du Pinot noir en Bourgogne par macération préfermentaire à froid. Revue des Œnologues. 85:18-21. 98 h 472 h 80 200 h 120 4 0 6 Massoutier, C., H. Alexandre, M. Feuillat, y C. Charpentier. 1998. Isolation and characterisation of cryotolerant Saccharomyces strains. Vitis. 37(1): 51-59. Tiempo (horas) MOSTO CHARDONNAY Final de la FA 40 0 0 Saucier, C., Y. Glories, y D. Roux. 2000. Interaction tanins-colloïdes: nouvelles avancées concernant la notion de « bons » et « mauvais » tannins. Revue des Œnologues. 94:9-10. 532 h 2 280 h 80 112 h 4 40 h 120 0 6 Tiempo (horas) Péptidos Viabilidad (%) – 16 – Lactic Acid Bacteria andDEL Selected CONTRIBUCIÓN DE LAS LEVADURAS AIndigenous LAS PROPIEDADES SENSORIALES VINO Lactic Acid Bacteria EL IMPACTO DE LAS LEVADURAS NATURALES SELECCIONADAS EN EL ESTILO DE VINO Y SU COMERCIALIZACIÓN DEBATE DE LA MESA REDONDA Moderador: Joe WADSACK Escritor de vinos y Locutor, Reino Unido Participantes: Peter Bell, Fox Run Vineyards, Finger Lakes, Nueva York, Estados Unidos Eduardo Casadamón, Bodega Peñaflor, Argentina Christophe Coupez, CEIOE, Burdeos, Francia Carmine Deiure, Cantina Tollo, Italia Pieter Ferreira, Graham Beck Wines, Sudáfrica Daniel Granès, ICV Montpellier, Francia Jesús Madrazo, Contino, La Rioja, España Jon McPherson, South Coast Winery, Temecula, California, Estados Unidos Hermann Mengler, Franken Wines, Alemania Kevin Miller, Penfolds Wines, Australia Durante las XVIIes Entretiens Scientifiques Lallemand, 10 enólogos fueron invitados a un debate de la mesa redonda sobre temas relacionados con el uso de levaduras seleccionadas. Estos profesionales del sector, con formaciones y experiencias muy variadas en organizaciones de dimensiones diferentes, presentaron sus puntos de vista y discutieron bajo la dirección de Joe Wadsack, escritor británico y locutor especializado en vinos. uvas, de la variedad, del estilo de vino deseado y en base a sus propias experiencias durante vendimias anteriores. Peter Bell, un enólogo de Fox Run Vineyards en el área Finger Lakes del Estado de Nueva York en los EEUU, inocula los mostos para preservar la pureza de los perfiles sensoriales y de la fruta. Jon McPherson (South Coast Winery, California) y Pieter Ferreira (Graham Beck Wines, Sudáfrica) utilizan levaduras para obtener un estilo de vino específico, y porque quieren asegurar que sus vinos mantengan una cierta constancia cuando los sacan al mercado. A Kevin Miller (Penfolds Wines, Australia) le interesa jugar con varias levaduras de vinificación, pero también considera importantes algunos de los impactos que produce la fermentación espontánea, en particular sobre la textura y la viscosidad del vino. Lo que todos los participantes tienen en común es el deseo de producir vinos de calidad que sean competitivos en el actual difícil mercado mundial. Desde esta perspectiva, ¿las levaduras seleccionadas pueden ser una de las claves del éxito? ¿O amenazan con generar un mercado del vino uniforme en el que los vinos Chardonnay de California tendrán el mismo gusto que los vinos Chardonnay de Borgoña? A continuación presentamos un resumen de este debate. Daniel Granès, director científico del ICV Montpellier en Francia, realizó una interesante comparación. El enólogo puede elegir entre varias variedades diferentes que, en función de la madurez, clima, etc., producirán perfiles de vinos particulares. Lo mismo puede ser sostenido para la elección de una o más levaduras. En Francia, la mezcla de tanques diferentes representa una fase típica para la obtención de vinos de buena calidad. Con el uso de le- ¿Las levaduras influyen en el estilo de vino? Los invitados a la mesa redonda afirman que todos ellos utilizan levaduras seleccionadas, no sólo para iniciar la fermentación alcohólica sino para influenciar el perfil del vino. Eligen las levaduras en función de la calidad de sus – 17 – CONTRIBUCIÓN DE LAS LEVADURAS A LAS PROPIEDADES SENSORIALES DEL VINO tienen un impacto sobre la textura, la estabilidad del color y los aromas del vino. vaduras seleccionadas, se puede sacar provecho de sus diferentes contribuciones a los vinos a través de mezclas que permitan ajustar mejor el perfil final. De hecho, el terroir no siempre satisface nuestras aspiraciones, y a veces el uso de la levadura correcta puede mejorar el resultado dijo Dominique Delteil, asesor. El uso de levaduras seleccionadas de calidad elevada es una manera de respetar la calidad de las uvas, dijo Christophe Coupez (agente de la Cámara de agricultura de Gironda (Gironde), director del CEIOE, centro de asesoramiento enológico en Pauillac, Francia). En contra de lo que algunos enólogos piensan todavía, las levaduras seleccionadas no impiden que el terroir se exprese por sí mismo, sino que se lo permiten al evitar, por ejemplo, la producción de ciertos compuestos indeseables producidos por Brettanomyces. ¿La levadura correcta puede añadir valor? Hermann Mengler (Franken Wines, Alemania) utiliza una levadura versátil para elaborar sus vinos de menor precio. En el caso de los vinos aptos para una crianza de pocos años, prefiere utilizar selecciones regionales. Pero en el caso de sus vinos de mayor calidad, cuando la uva es magnífica, a menudo les deja fermentar de forma espontánea. Para los vinos de Penfolds, Kevin Miller usará de 10 a 12 levaduras diferentes. Con los vinos premium, no está dispuesto a arriesgarse a variaciones de la calidad, prefiere ser precavido y utilizar levaduras seleccionadas. Bajo el sol de Sudáfrica y Australia, donde los mostos presentan elevados niveles de azúcar, la inoculación asegura fermentaciones completas. Eduardo Casadamón, responsable de la vinificación en la bodega Peñaflor en Argentina, explicó que él utiliza levaduras seleccionadas para desarrollar aromas y complejidad en vinos elaborados con variedades neutras. ¿Puede la levadura seleccionada realzar el terroir? Según Jesús Madrazo (Contino, La Rioja, España), para conservar una mayor tipicidad, es interesante utilizar una levadura regional, en particular cuando el clima proporciona una vendimia inusual, como durante la ola de calor de 2003. Daniel Granès refirió que en Languedoc los productores de vinos de mesa utilizan levaduras seleccionadas sin dar mucha importancia a si son las más adecuadas. Pero para los vinos premium, pueden ser necesarios varios años de pruebas y errores para encontrar la mejor levadura para un determinado estilo de vino. Pero la tipicidad presenta muchos aspectos, comentó Sam Harrop, antes en Marks & Spencer y ahora asesor. Éstos van desde los aromas a corral generados por Brettanomyces, a los mercaptanos que ayudan a definir las notas de terroir del Chablis. En este caso, las levaduras seleccionadas son necesarias para la expresión del terroir. Jon McPherson considera que los enólogos a partir de ahora estarán interesados en una levadura que ayude a reducir los compuestos sulfurados, las aminas biógenas y la ocratoxina A en los vinos. El potencial para expresar el terroir está en las uvas, insistió Christophe Coupez. Las levaduras disponibles en el mercado pueden proteger e incluso realzar la expresión de los aromas de la uva y, especialmente, prevenir cualquier defecto aromático. ¿Las levaduras seleccionadas son tan poéticas como los fermentos espontáneos? Christophe Coupez admite que no entiende el entusiasmo que muestran algunas personas por las fermentaciones espontáneas, ni su reticencia al uso de levaduras seleccionadas. Cree que el no utilizar levaduras seleccionadas significa arriesgarse a olores desagradables, esfuerzos inútiles y pérdida de dinero. El uso de levaduras seleccionadas ha tenido una gran difusión en la región bordolese, incluso en los grandes châteaux, donde todavía insisten en hablar de las fermentaciones espontáneas. No se ha planteado todavía el problema de los visitantes de las bodegas alarmados, confirmó Jesús Madrazo, que confunden las levaduras y las bacterias con los productos químicos. En función de su capacidad para transformar los precursores, las levaduras liberan diferentes aromas dentro del vino, explicó Paul Henschke, investigador del Australian Wine Research Institute. Por otra parte, un ensayo realizado en el AWRI mostró que las levaduras tienen también un impacto diferente sobre el color del vino. Preservan las características colorantes específicas de las regiones, pero las capacidades de cada levadura son diferentes. Existe una fuerte tendencia hacia una selección regional de las levaduras que se adapten mejor a las características específicas de los mostos dentro de la región. Para Paul Henschke, utilizar la fermentación espontánea es como ir a las carreras sin saber que caballos están corriendo: lo que ocurre con tu apuestá lo decide sólo la La levadura es también una fuente de polisacáridos y de manoproteínas, añadió Daniel Granès. Estos compuestos – 18 – El impacto de las levaduras naturales seleccionadas en el estilo de vino y su comercialización suerte. Claude Espeillac, director del Grupo Bebidas fermentadas de Lallemand, recordó a los participantes que las levaduras seleccionadas son las mejores levaduras espontáneas de cuvées especiales. Además, Daniel Granès dejó claro que no es positivo pensar en términos de una levadura única, sino más bien en términos de una mezcla de levaduras, de depósitos diferentes. Es importante entender que las condiciones sanitarias, el tiempo transcurrido entre la cosecha y el proceso, la gestión del SO2 y la velocidad de inoculación influyen todos ellos sobre los microorganismos responsables de la fermentación. Paul Henschke preguntó, “si se pudiese encontrar una extraordinaria aplicación para las levaduras GM, como por ejemplo una levadura con un incremento de resveratrol que aumentase de cinco años la esperanza de vida, serían más fácil de aceptar?” ¿Tenemos una opinión equivocada de las levaduras seleccionadas? Algunos enólogos parecen pedir disculpas por usar las levaduras comerciales, precisó Florian Bauer. El vino es un producto elaborado y las levaduras son fundamentales para la transformación de las uvas en vino. Pero muchos consumidores ésto no lo entienden, incluso en los países de habla inglesa que normalmente tienen una mente más abierta en relación a estos temas. Piensan que las levaduras representan procesos industriales y vinos estandarizados. Los productores del Viejo Mundo no dicen qué tipo de levadura utilizan. En Alemania, por ejemplo, dijo Hermann Mengler, el público está interesado sólo en las sensaciones y los criterios técnicos no ayudarán nunca a vender. ¿Existen demandas de levaduras genéticamente modificadas? Según Daniel Granès, las levaduras actualmente disponibles son satisfactorias y ofrecen una variedad suficiente, por lo que las levaduras genéticamente modificadas no parece que sean necesarias. Aún más, éstas asustan a los consumidores, especialmente en Europa. Sería muy difícil introducir OGM en el vino, ya que el vino goza de una imagen basada en la naturaleza y en la pureza, incluso en el Reino Unido, dijo Gerd Steep, de Marks & Spencer. “Los amantes del vino buscan sobre todo una calidad constante,” concluyó Cornelius (Cees) van Casteren, autor, periodista y editor en asuntos del vino. Valoran conocer que existen estas pequeñas bodegas que producen unos vinos únicos, pero compran las grandes marcas en las que confían. En regiones donde los mostos tienen altos niveles de azúcar, ¿creen los expertos que podría ser factible obtener levaduras seleccionadas naturales con una baja producción de alcohol durante la transformación de los azúcares? ¿O las levaduras genéticamente modificadas representan la única posibilidad? Paul Henschke piensa que existen otras alternativas, tales como el uso de levaduras no-Saccharomyces en las inoculaciones secuenciales. Pero en muchos casos, los niveles de reducción del etanol no son suficientes. La investigación sobre levaduras genéticamente modificadas en su conjunto no ha sido satisfactoria – las levaduras GM producían menos etanol pero se producía también un incremento de otros subproductos, tales como acidez volátil. Los enólogos comparten sus secretos Todos los enólogos de la mesa redonda declaran que usan regularmente varias levaduras diferentes de levadura para cada color del vino. Adaptan su elección a la vendimia, a la variedad y al mercado. Esta práctica es la tendencia general en Languedoc, donde las bodegas utilizan de tres a cinco levaduras por color, en función del segmento de mercado al que se dirigen, comentó Daniel Granès. Christophe Coupez confirmó que se trata de una buena técnica para obtener un estilo de vino definido. En la Cantina Tollo en Italia, Carmine Deiure normalmente tienen de dos a cuatro levaduras diferentes por vino, ya que la elección varía en función de la vendimia y del mercado. Cuando se manejan levaduras múltiples, Pieter Ferreira, de Graham Beck Wines en Sudáfrica, está muy atento. Durante la vendimia, tienes que estar seguro de que inoculas la levadura correcta en el depósito correcto. Actualmente existe una levadura genéticamente modificada disponible en los EEUU, pero ya ha sido prohibida en el condado de Sonoma. Gordon Specht, responsable del mercado de EEUU en Lallemand, refirió que los enólogos muestran interés, pero si utilizaran levaduras GM no armarían mucho alboroto sobre el tema. Volviendo a la cuestión de la reducción de los niveles de alcohol, Sylvie Dequin (INRA, Montpellier, Francia) cree que es hora de explorar nuevos caminos, en particular nuevas levaduras mediante adaptación, imitando la naturaleza o modificando el metabolismo de las levaduras. Arte, tradición y ciencia Por su parte, Daniel Granès piensa que la solución está también en cómo se producen las uvas, enfoque que es claramente más fácil que el desarrollo de levaduras GM. En las regiones que se encuentran más unidas a las tradiciones, los enólogos que utilizan levaduras seleccionadas – 19 – CONTRIBUCIÓN DE LAS LEVADURAS A LAS PROPIEDADES SENSORIALES DEL VINO un proceso químico industrial. Por el contrario, todas las levaduras seleccionadas fueron en un principio fermentos espontáneos dominantes de muy buena calidad. Su uso simplemente asegura la calidad constante que los enólogos – y los consumidores – desean. prefieren guardar el secreto para mantener la “magia” de la vinificación. El verdadero desafío es combinar el arte, la tradición y la ciencia con armonía. En Lallemand, sentimos que es responsabilidad nuestra el comunicar a los consumidores, periodistas y enólogos que las levaduras seleccionadas no son un producto sintético que resulta de Cover Design: Bruno Loste – Layout and Printing: MODULI INC. © LALLEMAND S.A.S. – 2006. LALLEMAND S.A.S. – B.P. 59, 31702 Blagnac Cedex-France – Tél. : +33 (0)5 62 74 55 55 – Fax : +33 (0)5 62 74 55 00 www.lallemandwine.com – 20 –