17 1050 Damonte-Garcia - Departamento de Quimica Biologica

17 1050 Damonte-Garcia - Departamento de Quimica Biologica

FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES
UNIVERSIDAD DE BUENOS AIRES
Estrategias antivirales para tratamiento y
prevención de infecciones virales humanas
Elsa B. Damonte – Cybele C. García
Laboratorio de Virología
Departamento de Química Biológica / IQUIBICEN
Virus Junín
Virus dengue
Genoma RNA cs
Genoma RNA cs
Cuatro serotipos
Virus herpes simplex
Genoma DNA cd
Dos serotipos
ESTRATEGIAS ANTIVIRALES CONTRA VIRUS HUMANOS
PRINCIPALES LÍNEAS DE ESTUDIO
● ENTRADA DEL VIRUS A LA CÉLULA
● BIOSÍNTESIS DE RNA
● FACTORES CELULARES DE RESTRICCIÓN VIRAL
ESTRATEGIAS ANTIVIRALES CONTRA VIRUS DENGUE Y HERPES
● ENTRADA DEL VIRUS A LA CÉLULA
Agentes miméticos del receptor heparan sulfato (HS)
• Polisacáridos sulfatados (PS) de algas marinas
∗ HERPES SIMPLEX 1 y 2: POTENTE Y SELECTIVA INHIBICIÓN
AISLAMIENTO DE VARIANTES RESISTENTES DE MENOR VIRULENCIA
SUSCEPTIBLES: DENV2 y DENV3
∗ DENGUE: RESPUESTA VARIABLE A PS
RESISTENTE: DENV1
ENDOCYTOSIS PATHWAYS FOR DENGUE ENTRY
DENV2 -Vero
DENV3 -Vero
DENV1 -Vero
Macropinocytosis
References
Clathrin-mediated endocytosis
DENV
Non-classical pathway
Rab5
Receptor
Clathrin
Early endosomes
Dynamin
Actin
Rab22
Rab7
Rab11
Recycling endosomes
Late endosomes
DENV2 NGC Vero
DENV1 HW Vero
DENV2 16681 Vero
ESTRATEGIAS ANTIVIRALES CONTRA VIRUS DENGUE Y JUNÍN
● BIOSÍNTESIS DE RNA
Agentes inhibidores de enzimas celulares que
intervienen en la biosíntesis de RNA
• Inosina monofosfato dehidrogenasa (IMPDH)
Inhibidores de síntesis de purinas
• Dihidroorotato dehidrogenasa (DHODH)
Inhibidores de síntesis de pirimidinas
ESTRATEGIAS ANTIVIRALES CONTRA VIRUS DENGUE Y JUNÍN
● FACTORES CELULARES DE RESTRICCIÓN
Proteínas celulares con actividad antiviral intrínseca y
relacionadas con la respuesta a interferón
• Proteína de la leucemia promielocítica (PML)
• Viperina (Virus inhibitory protein, endoplasmic
reticulum -associated, interferon -inducible)
• Teterina (bone marrow stromal antigen 2, BST2)
TÉCNICAS DE USO FRECUENTE
• Cultivos celulares
• Cultivo y detección de virus por ACP
• Titulación de virus por formación de placas (UFP)
• Purificación de virus
• Ensayos de actividad antiviral y virucida
• Modelos murinos de infección herpética vaginal e intraperitoneal
• Ensayos de citotoxicidad
• Inmunofluorescencia indirecta de proteínas virales y celulares
• Detección de proteínas virales por Western blot
• Cuantificación de RNA viral por real time RT- PCR
• Transfecciones para sobreexpresión de proteínas celulares mutantes
• Silenciamiento de genes virales y celulares con siRNA
• Secuenciación de genes virales
El grupo de investigación
Colaboraciones externas
Responsables
M.C. Matulewicz, C. Stortz,
N. B. D’Accorso, M. Maier
Elsa B. Damonte
Cybele C. García
Depto. Química Orgánica, FCEN- UBA
M. Monte
Integrantes
Depto. Química Biológica/IQUIBICEN, FCEN-UBA
María J. Carlucci
Carlos A. Pujol
Claudia S. Sepúlveda
M. D. Noseda
Dept. Bioquímica, Universidad de Paraná, Brasil
B. Ray
Federico Giovannoni
Luana É. Piccini
José Peña
Est. Laura Morelli
Dept. Chemistry, Universidad de Burdwan, India
F. Quintana
Harvard Medical School, EEUU
Colaboraciones: Viviana Castilla,
Sandra Cordo
I. Bosch
Massachussetts Institute of Technology, EEUU
Apoyo financiero
CONICET
ANPCyT
UBA