Mecanismos epigenéticos involucrados en la regulación de la

Mecanismos epigenéticos involucrados en la regulación de la

XXX Congreso Nacional de la Sociedad Española de Trombosis y Hemostasia
por efecto del tratamiento con fluvastatina se encontraban asociados
a enfermedad cardiovascular y trombosis (inflamación, metabolismo
lipídico, enfermedad vascular y hematológica, e interacción y señalización célula-célula, estrés oxidativo y actividad mitocondrial). El
análisis de expresión mediante RT-PCR de diversos genes seleccionados entre los descritos (GPX1, SOD2, NFKBIA, WNT5A, C1QTNF7, NRP1 y TGFB1) en monocitos de una cohorte independiente
de pacientes LES permitió validar los resultados obtenidos. Adicionalmente, en estudios de microscopía electrónica pudimos demostrar
que la fluvastatina inducía biogénesis mitocondrial en los monocitos
de los pacientes con LES, con la consiguiente mejora de la respiración
y del metabolismo celular.
Estos resultados subrayan la eficacia del tratamiento con fluvastatina en los pacientes LES, particularmente en aquellos con un riesgo
incrementado de aterotrombosis.
rativos; así, en respuesta a estímulos específicos pueden promover la
fagocitosis de lipoproteínas citotóxicas, la eliminación de cuerpos apoptóticos, la secreción de citocinas antiinflamatorias o la síntesis de proteínas reparadoras de la matriz que estabilizan las placas ateroscleróticas
vulnerables. Pero también pueden promover efectos deletéreos: además
de modular el metabolismo lipídico, los monocitos secretan citocinas
inflamatorias, quimiocinas y especies reactivas de oxígeno que dirigen
la patogenia. También producen TF y proteasas que contribuyen a la
trombosis y la ruptura de la placa aterosclerótica15. Por tanto, la modulación farmacológica de la actividad monocito/macrofágica representa una
estrategia terapéutica potencial para la prevención de la aterotrombosis.
Numerosos estudios llevados a cabo en los últimos años sugieren
que las estatinas, potentes inhibidores de la enzima 3-hidroxi-3-metil
glutaril coenzima A reductasa (HMG-CoA), e inicialmente asociadas a
la reducción del metabolismo del colesterol, poseen efectos beneficiosos sobre numerosas enfermedades cardiovasculares y autoinmunes.
Estos efectos serían debidos a sus pleiotrópicas funciones sobre la
disfunción endotelial, sus propiedades antiinflamatorias, sus efectos
inmunomoduladores, etc.16.
Con esta premisa, en nuestro equipo de investigación nos planteamos evaluar, en monocitos de pacientes con SAF, los efectos del
tratamiento con fluvastatina sobre la expresión y regulación de las
proteínas implicadas en el estado proinflamatorio/procoagulante característico de este síndrome17. Dicho estudio se realizó en una cohorte
de 42 pacientes con SAF e historia previa trombosis, que recibieron
fluvastatina (20 mg/día) durante un mes. Se obtuvieron muestras de
sangre periférica antes del tratamiento y después de uno y tres meses.
Tras un mes de tratamiento con fluvastatina, los monocitos de pacientes con SAF mostraron una inhibición significativa en la expresión
TF, PAR1, PAR2, VEGF y Flt1. A nivel molecular, esta inhibición
se asoció con la reducción de la proteólisis de IkBalfa y la inhibición
de la actividad de NFkB. Los niveles medios de la forma fosforilada
de p38-MAPK mostraron una reducción paralela. El análisis proteómico demostró cambios significativos en los patrones de expresión
de proteínas implicadas en el desarrollo de trombosis: la fluvastatina
inhibió la expresión de Annexin II y de RhoA e indujo la expresión de
la proteína disulfuro isomerasa.
En su conjunto, nuestros datos sugerían que las estatinas pueden
regular, in vivo, la expresión de proteínas procoagulantes y proinflamatorias en monocitos de pacientes con SAF. El análisis proteómico
contribuyó a la elucidación de los mecanismos subyacentes a dichos
efectos reguladores. La fluvastatina podría por tanto constituir una terapia alternativa con resultados prometedores en el tratamiento del SAF.
En un estudio posterior18 nos planteamos como nuevo objetivo
evaluar la efectividad de la fluvastatina como fármaco antiinflamatorio/antioxidante en pacientes lúpicos, en los que se ha demostrado
igualmente una alteración del estado redox intracelular en monocitos
asociada al efecto de los autoanticuerpos del LES e implicado en el
desarrollo de eventos cardiovasculares. Seleccionamos 27 pacientes,
a los que se administró fluvastatina a una dosis de 20 mg/día durante
un mes. Se obtuvieron muestras de sangre antes del tratamiento y al
final del mismo y se realizó un array de expresión a partir de ARN
extraído de monocitos purificados.
El estudio de microarray mostró que alrededor de 800 genes
sufrieron un cambio significativo en su perfil de expresión en monocitos de pacientes LES en respuesta al tratamiento con fluvastatina.
Aproximadamente un 38% de los genes alterados en su expresión
Mecanismos epigenéticos involucrados en la
regulación de la aterotrombosis en el síndrome
antifosfolípido primario y el lupus eritematoso
sistémico. Papel de los miRNA
La complejidad de la aterotrombosis en los pacientes SAF/LES probablemente requiera de un sistema integrado de análisis de factores
de riesgo cardiovascular y biomarcadores para identificar y tratar a
los pacientes con alto riesgo. En este sentido diversos estudios a nivel
molecular han mostrado que existe una familia de RNA, denominada
microRNA (miRNA) con una función esencial en un número creciente
de procesos biológicos, a través de la regulación de la expresión proteica. Los miRNA son RNA cortos, de 21-25 nucleótidos, no codificantes, e implicados en la regulación génica, aunque el papel preciso de
muchos de ellos es aún desconocido. Se han identificado más de 1.500
miRNA en la especie humana, habiéndose demostrado su participación
clave en numerosos procesos fisiológicos y patológicos (cardiogénesis,
diferenciación hematopoyética, inmunidad innata y adquirida, oncogénesis, etc.)19. Estudios recientes, desarrollados en colaboración con
el grupo de investigación dirigido por el Dr. Constantino Martínez, de
la Universidad de Murcia, han demostrado que diversos miembros del
cluster miR 17-92 (miR-20a y miR-19b), inicialmente identificados
como reguladores de la angiogénesis tumoral, regulan la expresión
de TF en monocitos de pacientes con SAF y LES, de modo que se
ha observado una reducción en los mismos significativamente correlacionada con la sobreactivación del TF20. La reducción en la expresión de estos miRNA podría pues contribuir al estado protrombótico
característico de pacientes SAF y LES. Se trata del primer trabajo
que muestra que los miRNA pueden ser importantes moduladores del
sistema hemostático y estar implicados en procesos fisiopatológicos
en enfermedades autoinmunes sistémicas. Por tanto, la identificación y
caracterización de los miRNA implicados en el control de la expresión
de proteínas proinflamatorias y protrombóticas asociadas a la aterotrombosis en patologías autoinmunes podría contribuir a la identificación de biomarcadores para delinear el fenotipo de dicha patología, así
como la valoración de respuesta a nuevas modalidades terapéuticas.
Consideraciones finales
En suma, la aterotrombosis en SAF y LES constituye una patología de
carácter sistémico en cuyo desarrollo interviene una compleja red de
42