Prefazioni

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Prefazioni

Prefazioni
La celebrazione del XVII Congresso Italo Latinoamericano di Etnomedicina non
poteva non vedere coinvolta l’Azienda Regionale Foreste Demaniali della Regione
Siciliana che tra i propri compiti istituzionali svolge attività di tutela e valorizzazione
delle piante officinali e di uso popolare.
La riproposizione di utilizzazioni e modi di vita che vedono come protagoniste le
piante, rappresenta un momento importante per far conoscere, nelle opportune
sedi, le potenzialità spesso nascoste del mondo vegetale.
In merito alla palma nana, per esempio, è stata istituita un’apposita Scuola
dell’intreccio, presso la R.N.O. dello Zingaro, mentre le piantagioni delle piante
officinali attuate in diverse sedi rappresentano campi sperimentali atte a saggiarne
l’attecchimento e la produttività.
La partecipazione al Congresso di Etnomedicina, pertanto si configura come
momento di arricchimento culturale per la nostra Amministrazione ed il
coinvolgimento con le Università ed il SILAE- Società Italo-Latinoamericana di
Etnomedicina – rappresenta un ulteriore momento di sinergia tra Pubbliche
Istituzioni che hanno interessi comuni.
La cultura dell’uomo e dei popoli in ogni angolo della Terra si è formata ed evoluta
attraverso le conoscenze del mondo vegetale, per cui gli studi e le ricerche di
etnobotanica, etnomedicina e di etnofarmacologia, per esempio, potranno
avvicinare culture diverse verso obiettivi comuni e le tematiche trattate in questo
Congresso hanno trovato adeguato spazio tra le pagine della Collana Sicilia
Foreste, fiduciosi che questo ambizioso progetto possa concretizzarsi.
Dott. Agostino GATTO
Redazione di Sicilia Foreste
Il XVII Congresso Italo Latinoamericano Di Etnomedicina “Bernardino d’Ucria” è un
importante evento a carattere internazionale istituito dalla Società ItaloLatinoamericana di Etnomedicina (SILAE). Questa Società è stata costituita allo
scopo di promuovere le ricerche scientifiche nei settori che possono essere
raggruppati sotto il nome di Etnomedicina e di coordinare le collaborazioni che da
anni si sono sviluppate fra le Università italiane e quelle dell'America latina.
Ritengo sia estremamente importante valorizzare le potenzialità delle piante
medicinali e alimentari, ancora poco conosciute, proprie del Continente latinoamericano e di trovare un momento di scambio scientifico-culturale tra ricercatori
italiani o europei e quelli latino-americani, con interessi comuni di ricerca nelle aree
della medicina tradizionale. Questa iniziativa della SILAE si accorda con l'attività
dell’Organizzazione Mondiale della Sanità che è impegnata a valorizzare su basi
scientifiche l'uso delle piante medicinali, tenendo conto che l'85% della popolazione
mondiale ricorre all'uso della medicina tradizionale che, tra l'altro, assume una
grande importanza nei paesi economicamente meno ricchi, come molti dei paesi
latino-americani.
Questo evento, sponsorizzato dalla SILAE e dall'Istituto Italo Latino Americano
(IILA) di Roma, è organizzato in collaborazione con l’Università degli Studi di
Palermo, con il Dipartimento di Chimica Organica “E. Paternò” e con il Dipartimento
di Scienze Botaniche dell’Università degli Studi di Palermo, con il Dipartimento di
Scienze Farmaceutiche dell’Università degli Studi di Salerno. Esso fa seguito a
quelli tenuti, regolarmente a partire dal 1992 alternandosi annualmente in Italia e in
un Paese dell'America Latina.
Anche quest’anno il carattere multidisciplinare del Congresso si rispecchia nelle sei
sessioni tematiche:
•
Alimentazione e salute
•
Antropologia
•
Biotecnologia
•
Chimica delle Sostanze Naturali
•
Etnobotanica e Etnomedicina
•
Etnofarmacologia e Farmacognosia
Al Congresso sono state invitate personalità scientifiche di rilievo internazionale nei
vari settori e per ogni sessione verranno presentati i nuovi risultati ottenuti nell'ultimo
periodo dai ricercatori italiani e latino-americani.
Prof. Maurizio BRUNO
Presidente del Comitato Organizzatore
Omaggio a Bernardino da Ucria, precursore della botanica
medica a Palermo
Nella seconda metà del Settecento, la botanica in Sicilia viveva della fama e
dell’opera di due grandi figure che tra Seicento e Settecento avevano studiato
compiutamente la flora della Sicilia facendola conoscere fuori dai confini della
regione. Si tratta di Paolo Boccone (1633-1704) e di Francesco Cupani (16371714), quest’ultimo originario di Mirto. A Palermo, in quegli anni – alla scuola dei
fratelli Clemente e Celestino Gazzarra presso il convento di S. Antonino – si
formava Bernardino da Ucria (1739-1796) dei
Frati Minori Riformati, al secolo Michelangelo
Aurifici, nativo del piccolo centro dell’allora Val
Demone. Nominato dimostratore delle piante
del primo Orto botanico della Regia Accademia
degli Studi, allestito pochi anni prima sul
bastione di Porta Carini, per il suo legame con il
vicerè Francesco D’Aquino principe di
Caramanico fu il personaggio più incisivo per la
realizzazione del nuovo Orto botanico,
partecipando attivamente al suo impianto a
partire dal 1789. Di questo assumerà di fatto la
direzione, durante l’assenza dalla Sicilia del titolare Giuseppe Tineo, inviato a
“perfezionarsi” nelle più prestigiose sedi italiane. Nello stesso anno porta a termine il
disegno di descrivere le piante del nuovo Orto pubblicandole nel suo Hortus Regius
Panhormitanus, la prima opera di botanica medica che vede la luce in Sicilia.
Questa, ordinata secondo il sistema di classificazione di Linneo, introduce nell’Isola
anche la nomenclatura binomia. Per le circa duemila piante trattate vengono
riportati i nomi siciliani, nonché le proprietà farmacologiche e i possibili impieghi
terapeutici.
Il frate di Ucria indaga la flora della Sicilia, effettua viaggi sull’Etna e sulle Madonie e
percorre buona parte del territorio facendo raccolte e osservazioni originali. Nel
1793 dà alle stampe un supplemento di 32 nuove specie, non pubblicate da Linneo.
Fra queste figurano alcune piante endemiche che ancora oggi conservano il nome
originariamente dato dal botanico ucriese. Ma la vera grande opera di Padre
Bernardino è l’inedito trattato sui “semplici” in cui lo studioso riassume tutta la sua
esperienza sui rimedi naturali. Si tratta di un corposo manoscritto disposto in tre
tomi, redatto in latino, non sempre di facile interpretazione. Questo, per lungo tempo
fu conservato presso lo stesso convento di S. Antonino e, successivamente, nella
Biblioteca Nazionale del capoluogo siciliano, oggi Biblioteca Centrale della Regione.
A distanza di oltre due secoli, quest’opera attende di essere adeguatamente
divulgata. La sua trascrizione, traduzione e interpretazione richiedono competenze
diversificate e risorse adeguate. Questo lavoro è stato già avviato. La seconda parte
dedicata al Regno vegetale, datata 1775, è stata già definita (1); in fase avanzata è
la trascrizione della parte dedicata al Regno animale; appena iniziato è invece la
trascrizione di una terza dedicata al Regno minerale.
Questo XVII Congresso di Etnomedicina, dedicato proprio a Bernardino da Ucria, ci
offre un forte stimolo per far luce sul lavoro dell’umile frate. Con tale auspicio,
esprimo la mia gratitudine alla Società Italo-Latinoamericana per avere preferito
Palermo come sede congressuale, consentendoci così di ricordare la figura del più
celebre “dimostratore delle piante” che abbia avuto il nostro Orto botanico.
Prof. Francesco Maria RAIMONDO
Direttore dell’Orto Botanico dell’Università
Referenze
1.
Raimondo FM, Mazzola P, Mineo C. 2000. De Regno Vegetabile, pars secunda. Opus patris
Bernardini ab Ucria. Opera inedita del 1775. Riassunti 95°Congresso SBI (Messina): 170.
Index
Indice
Índice general
Autorità del Congresso e della SILAE
Programma
Etnofarmacologia e farmacognosia
Plenary
Orali
Alimentazione e salute
Plenary
Orali
Antropologia
Plenary
Orali
Etnobotanica ed etnomedicina
Plenary
Orali
Chimica dei prodotti naturali
Plenary
Orali
Biotecnoogia
Plenary
Orali
Conclusione
Plenary
Poster
Indice degli autori
6
7
15
19
33
34
41
44
49
51
63
67
81
84
87
91
297
Autorità del Congresso e della SILAE
Presidente SILAE
Wagner Vilegas
Vice Presidente SILAE
Massimo Curini
Comitato Organizzatore
Presidente
Maurizio Bruno
Componenti
Francesco Maria Raimondo
Luca Rastrelli
Sergio Rosselli
Vivienne Spadaro
Antonella Maggio
Comitato Scientifico
Massayoshi Yoshida
Wagner Vilegas
Juan Garbarino
Plutarco Naranjo
Francesco De Simone
BRASILE
BRASILE
CILE
ECUADOR
ITALIA
Paola Vita Finzi
Massimo Curini
F. Cabieses Molina
J. Mendez Blanco
ITALIA
ITALIA
PERU'
VENEZUELA
Comitato Internazionale
Teresita Di Bernardi
Aníbal Amat
Luis Morales Escobar
Susana Leitão
Wagner Vilegas
Marisa Piovano
Jose Luis Martinez
Rubén Torrenegra
Mariano Chica Barrios
Silvia Quesada
Omany Cuesta Rubio
Gabbino Garrido
Susana Abdo
Ximena Chiriboga
Armando Cáceres
Amarillis Saravia
Inés Ruiz
ARGENTINA
ARGENTINA
BOLIVIA
BRASILE
BRASILE
CILE
CILE
COLOMBIA
COSTARICA
COSTARICA
CUBA
CUBA
ECUADOR
ECUADOR
GUATEMALA
GUATEMALA
HONDURAS
Francesco De Simone
Paola Vita Finzi
Massimo Curini
López Bárcena Joaquín
Mejía Sibaja Guadalupe
Torres Molina Jorge
Mirìe Medina
Ernesto Medina
Enrique Murillo
Mahabir Gupta
Isabelle Basualdo
Fernando Quevedo
Ricardo Guerrero
L. Germosén-Robineau
Patrick Moyna
Jeannette Méndez
Maria Gualtieri
ITALIA
ITALIA
ITALIA
MESSICO
MESSICO
MESSICO
NICARAGUA
NICARAGUA
PANAMA
PANAMA
PARAGUAY
PERÚ
PORTORICO
S. DOMINGO
URUGUAY
VENEZUELA
VENEZUELA
6
PROGRAMMA XVII CONGRESSO ITALO LATINOAMERICANO
DI ETNOMEDICINA “BERNARDINO D’UCRIA”
Palermo 16-20 Settembre 2008
MARTEDÌ 16 Settembre 2008
ore 18:30
ore 18:45
ore 20:15
ore 21:00
Apertura dei lavori
Saluto del Presidente del Comitato Organizzatore e delle Autorità
Lezione inaugurale
Prof. Giuseppe Silvestri - Magnifico Rettore dell’Università di Palermo
Esposizione dei poster nei viali dell’Orto Botanico di Palermo
Cocktail di Benvenuto presso l’Orto Botanico di Palermo
MERCOLEDÌ 17 Settembre 2008
ETNOPHARMACOLOGY E PHARMACOGNOSY
ETNOFARMACOLOGIA E FARMACOGNOSIA
ETNOFARMACOLOGÌA Y FARMACOGNOSIA
Chairman: prof. F. De Simone
PL 01
ore 9:00
Prof. Hermann Stuppner - University of Innsbruck - AUSTRIA
Drug discovery from plants - Ethnopharmacological approaches and virtual screening
techniques
Chairman: prof. B. Badilla
O 01
ore 9:45
Ma. Teresa Alvarez Ramírez, Rafael Salgado Garciglia, Luis José Flores Alvarez.
Efecto de la infusión del pericarpio de Citrus sinensis y el fruto total de Piper nigrum
L. en la curación de la viruela aviar en Gallus gallus.
O 02
ore 10:00
Ciangherotti Carlos, Pimentel Adriana, Usubillaga Alfredo, Cegarra Jesus, Orsini
Giovannina, Salazar-Bookaman Margarita.
Efecto del extracto acuoso de la raíz y partes aéreas de Ruellia tuberosa L. sobre el
daño inducido por alta concentración de glucosa en células vero
O 03
ore 10:15
María Araque, Fanny González, Francy Hernández, Luís Rojas
Composición química y actividad antibacteriana del aceite esencial de Montanoa
quadrangularis Sch.
O 04
ore 10:30
Bernardo Chataing, Alfredo Usubillaga, Alexis Valentin
Actividad citotóxica de α-Solamargina sobre las células del melanoma A375 humano
in vitro y el melanoma B16/F1 en ratones C57/BL6
O 05
ore 10:45
Zurita-Valencia Wendy, Alejandra Hernández García, Bello-González Miguel A.,
Molina-Torres Jorge, Álvarez Ramírez Ma. Teresa, Martínez-Pacheco Mauro, GarcíaChávez Abraham y Salgado-Garciglia Rafael
Antifungal activity of the ethanolic extract of Satureja macrostema (nurite) on
Sporotrix schenckii
6
ore 11:00
ore 11:15
O 06
Dulce Maria Gonzales Mosquera, Liliana Vicet Muro, Hoa Nguyen Thi Thanh,
Armando Cuéllar Cuellar, Yannarys Hernández Ortega
Evaluación de la actividad antiinflamatoria de un crudo obtenido a partir del extracto
acuoso de Capraria biflora, L.
Coffee Break
Chairman: prof. W. Vilegas
PL2
ore 11:45
Suzana Guimarães Leitão - Universidade Federal do Rio de Janeiro - BRAZIL
Brazilian plants with antimycobacterial activity
Chairman: prof. F. Echeverri
O 07
ore 12:30
Adriana Pimentel, Iriana Zambrano, Jais Nieves, Felipe Sojo, Héctor Rojas, Alirica I.
Suarez, Reinaldo Compagnone, Francisco Arvelo y Gustavo Benaim
Effect of agelasina B on the intracellular calcium mobilization in breast cancer cells
(MCF-7)
O 08
ore 12:45
Tapia-Rodríguez Aurelio, Cortés-Rodríguez Marco A., Hernández-García Alejandra,
Macías-Rodríguez Lourdes I., Álvarez-Ramírez Ma. Teresa, Martínez-Pacheco
Mauro, García-Chávez Abraham y Salgado-Garciglia Rafael
In vitro antifungal activity of ethanolic extract of Artemisia ludoviciana ssp. mexicana
on Botrytis cinerea
O 09
ore 13:00
Jaramillo Ximena, Ojeda Santiago, Guerrero Trotsky
Inhibición de -glucosidasa y -amilasa a partir de los extractos totales de Justicia
colorata, Artocarpus altilis y Adiantum poiretii
O 10
ore 13:15
Ma. Teresa Alvarez Ramírez, Rafael Salgado Garciglia y Luis José Flores Alvarez
Efecto antibacteriano de la infusión de raíces de Perezia tyrsoidea en la tifoidea aviar
experimental en Gallus gallus comercial
O 11
ore 13:30
Díaz, L.E., Medina A.L., Marti-Mestres, G., Vian L.
Actividad citotóxica, fototóxica y antioxidante de extractos acuosos de plantas de los
Andes venezolanos
PAUSA PRANZO
ore 13:45
FOOD AND HEALTH
ALIMENTAZIONE E SALUTE
ALIMENTACIÒN Y SALUD
Chairman: prof. C. Pizza
PL 03
ore 15:00
Giovanni Dugo – Università di Messina - ITALIA
Metodi cromatografici multidimensionali in chimica degli alimenti
6
Chairman: prof. A. Souza-Brito
O 12
ore 15:45
Méndez-Corao G, Carpio E, Pérez E, Fermin G
Actividad antioxidante y contenido de polifenoles en la fruta de granada (Punica
granatum L), guayaba (Psidium guajava L.) y mora (Rubus sp)
O 13
ore 16:00
Noemí Waksman, Jonathan Pérez-Messeger, Aurora Garza-Juárez, Ricardo SalazarAranda, María de la Luz Salazar-Cavazos
Diferentes metodos analíticos para el control de calidad de productos herbolarios
O 14
ore 16:15
Pardo R.B., Matioli L., Osaka D.M., Nagai L., Simoni A.G., Thomaz A.G., Rocha E.P.,
Meneguim G.A.O., Guimarães P.H.L.C., Murari C.S., Omura M.H., Paris A., Escouto
L.F.
Habits of consumption of UHT milk after chemical frauds in Brasil: a matter of
education
O 15
ore 16:30
Ciampi E., Alonzo G., Sinacori A.
The determination of polyphenols content in white mulberry leaves
O 16
ore 16:45
Teresita Di Bernardi, Ivan Romero, S.M. Carpano y, E. D. Spegazzini
Analítica micrográfica de las semillas de Chenopodium quinoa Willd. “quinoa”
Chenopodiaceae
Coffee Break
ore 17:00
ANTHROPOLOGY
ANTROPOLOGIA
ANTROPOLOGIA
Chairman: prof. Aurelio Rigoli
PL 04
ore 17:30
Marta Alicia Crivos - CONICET – UNLP - ARGENTINA
Estudio etnográfico de las relaciones hombre-entorno vegetal en el contexto de las
estrategias de búsqueda de la salud en dos regiones de Argentina
O 17
ore 18:15
Costa, R. C., Nunez, C. V
Identificación de las plantas medicinales utilizadas en el asentamiento Tarumã-Mirim
(Amazonas Brasil)
O 18
ore 18:30
Adriana Gómez Aiza, Sergio Sánchez Vázquez, Laura Gómez Aiza
Galenic dialogue? Biomedicine and tradicional medicine in Mexican indigenous
contexts
O 19
ore 18:45
Nunez, C. V., Costa, R. C.
Plantas medicinales usadas por los indios Arara, Volta Grande do Xingu, Pará, Brasil
GIOVEDI’ 18 Settembre 2008
ETHNOBOTANY E ETHNOMEDICINE
ETNOBOTANICA E ETNOMEDICINE
ETNOBOTANICA Y ETNOMEDICINA
6
Chairman: prof. V. Castro Araya
PL 05
ore 9:00
Ana Ladio y Soledad Molares - Universidad Nacional del Comahue- ARGENTINA
Etnobotánica de las plantas medicinales de la Patagonia Argentina usadas contra
dolencias gastrointestinales
ore 9:45
ore 10:00
ore 10:15
ore 10:30
ore 10:45
O 20
José Miguel Andrade, Chabaco Armijos, Omar Malagón, Vladimir Morocho, Hernán
Lucero, Paola Vita Finzi, Giovanni Vidari, José Cartuch
Estudio etnobotánico de las plantas medicinales empleadas por Yurak hampi
yachakkuna (hierbateros), Rikuy hampi yachakkuna (visionarios), Kakuy hampi
yachak (sobador) y Wachak hampi yachak (partera) de la etnia Saraguro - Ecuador
O 21
Fabio Cabezas, Andrés Yanza, Santiago Martínez, Carles Codina, Jaume Bastida y
Francesc Viladomat
Fuentes naturales de Galantamina en cuatro especies Colombianas de
Amaryllidaceae, metabolito utilizado en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer.
O 22
Menghini L, Epifano F., Leporini L, Luzzi R, Tammaro F, Curini M
Protocol for cultivation and chemotypes differentiation of wild gentian populations on
Gran Sasso and Monti della Laga Park
O 23
Deborah Quintanilha Falcao, Edilaine Rijo Costa, Ricardo Machado Kuster, Francoise
Nielloud, Laurence Vian and Fabio de Sousa Menezes
Calceolaria chelidonioides Humb. Bonpl. & Kunth.: new galenic formulations against
Herpes Simplex Types I and II
Coffee Break
Chairman: prof. M. Curini
PL6
ore 11:15
Maurizio Grandi - La Torre - ITALIA
Le piante e l’apoptosi
O 24
ore 12:00
Roberto Campos Navarro
Aproximación descriptiva y analítica al empacho en Bolivia
O 25
ore 12:15
J. A. González-Lavaut, S. Prieto-González, K. González-García, M. García-Torres, R.
Monteagudo, O. Gordo-Álvarez, N. García-González, O. Fidalgo, A. Álvarez-Reyes
Evidencia científica del uso etnomedico antiviral de especies vegetales de Cuba
O 26
ore 12:30
Fernando Tammaro
Il Narciso (Narcissus poeticus L., Amaryllidaceae), dal mito dei poeti classici alle
recenti applicazioni dei suoi principi attivi in cosmesi ed in medicina.
PAUSA PRANZO
ore 12:45
ore 15:00
ore 15:30
Trasferimento in pullmann dei signori partecipanti all’Orto Botanico
SESSIONE POSTER ORTO BOTANICO
6
ore 17:30
Visita guidata all’orto botanico
ore 19:00
Spettacolo di musica tradizionale offerto dal Centro Internazionale di Etnostoria
ore 21:00
Cena all’Orto Botanico
VENERDI’ 19 Settembre 2008
CHEMISTRY OF NATURAL PRODUCTS
CHIMICA DELLE SOSTANZE NATURALI
QUIMICA DE PRODUCTOS NATURALES
Chairman: prof. A. Nuñez
PL7
ore 9:00
Prof. Giovanni Vidari – Università di Pavia - ITALIA
Violet-perfuming chemistry: new synthetic ionone odorants with increased odour
potency
Chairman: prof. G. Romussi
O 27
ore 9:45
Alfredo Usubillaga, Rosa Aparicio, Yndra Cordero, Agni Saavedra.
Hemisynthesis of ent-15-oxo-kaur-16-en-19-oic acid from entkaur-16-en-19-oic acid
O 28
ore 10:00
Nicoletta Faraone, Sergio Rosselli, Antonella Maggio, Maurizio Bruno, Vivienne
Spadaro
Natural products and derivatives from Ferulago campestris [Apiaceae]
O 29
ore 10:15
María Gualtieri, Maria Luisa Di Bernardo, Maria Ysabel García, Nurby Ríos, Ciro
Villalobos, Yilen Fung, Néstor Uscátegui, Frank Sosa, Maria del Carmen Araque,
Silvio Barreto
Composición química y actividad antibacteriana del Schinus molle
O 30
ore 10:30
Maria Carla Marcotullio, Claudio Santi, Gildas Norbert Oball-Mond Mwankie, Massimo
Curini.
Phytochemical study of Commiphora erythraea
O 31
ore 10:45
Sosa-Moreno, Adakarleny y Rosquete-Porcar, Carmelo
Un biflavonoide aislado de los tallos de Bauhinia cumanensis H.B.K.
Coffee Break
ore 11:00
Chairman: prof. N. De Tommasi
PL8
ore 11:30
Prof. Oscar Manuel Cóbar Pinto - University of San Carlos – GUATEMALA
Marine natural products in Guatemala
Chairman: prof. J. Mendez
6
ore 12:15
ore 12:30
ore 12:45
ore 13:00
ore 13:15
ore 13:30
ore 13:45
O 32
Cinzia Lotti; Anna Lisa Piccinelli; Osmany Cuesta Rubio; Francesco De Simone; Luca
Rastrelli
Chemical investigation of red brazilian propolis
O 33
Noriega M, Rojas L y Usubillaga A.
Estudio de los componentes volátiles de las hojas de Ambrosia cumanensis H.B.K.
que crece en el Estado Mérida. Venezuela.
O 34
Benavides A., Napolitano A., Bassarello C., Carbone V., Fuertes C., Piacente S.,
Pizza C.
Studio chimico-analitico di una specie vegetale della selva amazzonica: il Croton
baillonianus (Euphorbiaceae)
O 35
L. Torras, I. Berkov, J. Bastida, C. Codina, F. Viladomat
Identification of Amaryllidaceae alkaloids in Pancratium canariense by GC-MS
O 36
Severina Pacifico, Antonella Maggio, Maurizio Bruno
Nuovi metaboliti aromatici ad attività antiossidante da Carex distachya
O 37
Alfredo Usubillaga, Rosa Aparicio, Yndra Cordero, Agni Saavedra.
Synthesis of glucosyl esters of kaurenic acid, 15-oxo-kaur-16-en-19-oic acid, and 15αacetoxi-kaur-16-en-19-oic acid.
PAUSA PRANZO
BIOTECHNOLOGY
BIOTECNOLOGIA
BIOTECNOLOGÌA
Chairman: prof. P. Vita Finzi
PL9
ore 15:00
Prof. Ernesto Reverchon - Università di Salerno - ITALIA
Supercritical Fluid Extraction: Application to herbal Medicine
O 38
ore 15:45
Martínez-Sotres M.C. y López-Albarrán P.
Evaluación de la actividad antifúngica de Dalgerbia granadillo Pittier para el diseño
asistido por química computacional de preservantes para madera
Coffee Break
ore 16:00
Chairman: prof. R. Noto
PL10
ore 16:30
Prof. Bruno Botta - Sapienza Università di Roma ITALIA
Chemistry and biotechnology: novel routes to etoposide-type anticancer drugs
Consegna del Premio Etnopharma al miglior contributo orale di un giovane
ore 17:15
ricercatore
PL11
ore 17:45
Prof. Dr. Alberto J. Núñez-Sellés - Centro de Química Farmacéutica – CUBA
Phytomedicine: to be or not to be?
ore 19:00
Riunione Soci SILAE
6
ore 21:00
Cena Sociale presso lo Splendid Hotel La Torre
SABATO 20 Settembre 2008
VISITA AL PARCO DELLE MADONIE
6
Etnopharmacology and Pharmacognosy
Etnofarmacologia e Farmacognosia
Etnofarmacología y Farmacognosia
6
6
XVII Congresso Italo-Latinoamericano di Etnomedicina “Bernardino d’Ucria”
PL 1
Drug discovery from plants – Ethnopharmacological approaches
and virtual screening techniques
Hermann Stuppner
Institute of Pharmacy/Pharmacognosy, Center for Molecular Biosciences, University of Innsbruck, Innrain
52c, A-6020 Innsbruck, Austria.
The potency of plants to treat and cure human diseases is well known and has been
for living memory. Even today, in the 21st century approximately 70% of the world’s
population relies on plants as their primary source for health care [1]. Plants are
used as herbal remedies, but also as source for purified compounds, and as starting
materials for chemical modifications. According to a recent survey by Newmann et
al. [2] approximately 60% of small–molecule new chemical entities introduced
worldwide during 1981-2006 can be traced to or were inspired by natural products.
During 2000–2006 a total of 26 plant-based drugs were launched and at present
about 90 plant-derived compounds are in clinical trials [3]. The global market for
plant-derived drugs was estimated at $19 billion in 2006 and is expected to grow to
nearly $26 billion by 2011 [4].
Since only 10–15% of plant diversity has been explored for their pharmaceutical
purpose so far and many plants were investigated decades ago, when techniques
were relatively crude, the plant kingdom seems to be still a promising source for
bioactive molecules.
However, it remains an exciting challenge to target and efficiently select lead
(active) compounds from the multitude and biodiversity of natural products. Drug
discovery from plants faces many problems including legal and logistical difficulties
concerning procurement of plant materials. Phytochemical analysis of the natural
material, isolation and identification of the constituents is a very time consuming
procedure. Biological screening of extracts and isolated metabolites is feasible and
often performed, but very often not at all a focused procedure, thus unpractical and
too expensive. Hence the NPs’ diversity has to be accessed in a more rational way
and straightforward strategies have to be introduced into the drug discovery process
from plants [5].
For the efficient discovery of plant constituents with interesting pharmacological
properties we combine classical pharmacognostic methods (bioassay-guided
fractionation, ethnopharmacological approach) and modern in silico tools. The latter
include the prediction of bioactive constituents (i.e. virtual hits) by means of
pharmacophore-base virtual screening (VS) and docking. Access is provided for
three in-house generated 3D multiconformational databases, which are basic
requirements for the VS process: The NP-database consists of more than 110.000
15
NPs, the DIOS database contains more than 9.000 NPs originating from the
ethnopharmacological source ‘de material medica’ by Pedanius Dioscorides (1st
cent. AD) and the TCM database comprises approximately 10.000 constituents of
plants used in traditional Chinese medicine.
Some basic principles, requirements and limitations of virtual screening strategies
are demonstrated. Their applicability in the drug discovery process will be illustrated
with some examples of ongoing projects.
Acknowledgements: Parts of this work are supported by the Austrian Science Fund P18379
References
1.
World Health Organization (2003) WHO Guidelines on Good Agricultural and Collections Practices
(GACP) for Medicinal Plants. World Health Organization, Geneva.
2.
Newman, D. et al. (2007), J Nat Prod. 70 461-477 2007
3.
Saklani A. et al (2008), Drug Discovery Today, 13, 161-171
4.
McWilliams, A. (2003) B-121N Plant-Derived Drugs: Products, Technology, Applications BBC,
Research (http://www.bbcresearch.com)
5.
Rollinger, J. et al. , Planta Med 2006, 72, 671-678
16
PL 2
Brazilian plants with antimycobacterial activity
Suzana Guimarães Leitão
Faculdade de Farmácia, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Centro de Ciências da Saúde, Bl. A, 2o
andar, Ilha do Fundão, Rio de Janeiro, RJ, Brazil, [email protected] .
Tuberculosis (TB) is a systemic disease caused by Mycobacterium tuberculosis, the
alcohol-acid resistant bacillus, discovered by Robert Koch more than 120 years ago.
Despite the discovery of very effective drugs against it more then 40 years ago, it
still remains a serious health problem in many regions of the world, specially in
developing nations (Lall: Meyer, 1999). Currently, almost one third of the world
population is infected with M. tuberculosis, and each year 2-3 million people die
from it (Newton et al., 2002). It is estimated that between the years 2000 and 2020
nearly one billion people will be newly infected, 20 million will develop TB and 35
million will die from the disease (WHO, 2000). It is estimated that in Latin America
approximately 600.000 new cases of tuberculosis occur per year. Brazil, with c.a.
129.000 new cases per year, ranks the 13º position within other 22 countries with
high-burden of TB incidence. In the past 5 years several reports and review articles
appeared in the literature about medicinal plants and natural products with antimycobacterium activity (Okunade et al., 2004; Copp, 2003; Newton et al., 2002;
Cantrell et al., 2001). Over 350 natural products, mainly from plant species have
been assessed for their antimycobacterial activities (Newton et al., 2002). A number
have demonstrated significant in vitro antimycobacterial activity and active plantderived compounds belonging to various chemical classes have been isolated
(Newton et al., 2002).
In this way, we initiated a search for anti-mycobacterium activity of some plant
extracts against Mycobacterium tuberculosis (ATCC-27294 H37Rv), by the Alamar
Blue test (Franzblau et al., 1998). Two approaches have been used: simple
screening of plant extracts available at our laboratory, and the
ethnopharmacological approach. Until now, a total of 88 ethanolic crude extracts
and fractions (hexane, dichloromethane, ethyl acetate and n-butanol) from Brazilian
plants were assayed at a fixed concentration of 100 μg/ml. Out of the assayed
extracts, some presented antimycobacterial activity at this concentration (Leitão et
al., 2006). All extracts were simultaneously assayed by the Alamar Blue Test at the
two microbiology laboratories (Fiocruz, Rio de Janeiro and FURG, Rio Grande do
Sul), in order to assure an interlaboratorial control. The isolation and identification of
biologically active methoxy-flavones, triquinane type sesquiterpenes, triterpenoids
and steroids from the genera Lippia, Lantana and Anemia will be discussed. Also,
there will be discussed results obtained from an ethnopharmacological survey
17
among the “Quilombolas” group from Oriximiná, Pará State, as well as among
medicinal plant dealers in the cities of Petropolis and Nova Friburgo, at Rio de
Janeiro State.
Financial support: CNPq, FAPERJ.
References
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Cantrell CL, Franzblau SG, Fischer NH 2001. Antimycobacterial plant terpenoids. Planta Medica
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Franzblau SG, Witzig RS, McLaughlin JC, Torres P, Madico G, Hernandez A, Degnan MT, Cook
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Leitão, GG, Martino, V, Sülsen, V, Barbosa, YAG, Pinheiro, DPG, Silva, PEA, Teixeira, DF, Neves
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Antimycobacterial Activity by The Alamar Blue Test. Revista Brasileira de Farmacognosia. , v.16,
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Newton SM, Lau C, Gurcha SS, Besra GS, Wright CW 2002. The evaluation of forty-three plant
species from in vitro antimycobacterial activities; isolation of active constituents from Psoralea
corylifolia and Sanguinaria Canadensis. J. Ethnopharmacology 79: 57-67.
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10. WHO, Global Health Atlas, http://www.who.int/globalatlas, accessed on July 27th, 2005.
18
O 01
Efecto de la infusión del pericarpio de Citrus sinensis y el fruto
total de Piper nigrum L. en la curación de la viruela aviar en
Gallus gallus
Ma. Teresa Alvarez Ramírez1, Rafael Salgado Garciglia2, Luis José Flores Alvarez 1
1Lab.
Parasitología y Nutrición. Fac. Biología, Edif. B4. 2Lab. Biotecnología vegetal. IIQB. Edif. B3.
Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo, Ciudad Universitaria, C.P. 58060, Morelia,
Michoacán, MÉXICO.
La viruela aviar, es una enfermedad inflamatoria aguda, causada por un poxvirus
que afecta piel y endotelios de aves, anualmente produce una alta mortalidad en
aves domésticas de traspatio, principalmente aquellas que portan el gen cuello
desnudo (Na). Por otro lado, se ha observado que los flavonoides presentes en
Citrus sinesi (1), y los terpenoides además de otros metabolitos secundarios
presentes en el fruto de Piper nigrum pueden contribuir en la curación de la viruela
aviar (2,3). El objetivo de este trabajo fue valorar los efectos de las infusiones de
pericarpio de C. sinensis y fruto total de P. nigrum en la viruela aviar. El diseño fue
al azar, con 6 grupos con 10 repeticiones cada uno, grupos: 1Nana y 2nana
problema, 3Nana y 4nana control, 5Nana y 6nana blancos. Con un nivel de
signficancia del P<0.05. Los resultados en ANDEVA y Tukey mostraron diferencia
estadísticas de P<0.01 entre grupo problema respecto al grupos controles en
relación en el número de lesiones, biometría hemática, respuesta inmune celular,
índice de morbilidad y mortalidad. Se concluye que la combinación de metabolitos
secundarios de ambas plantas contribuyeron en la recuperación de las aves, a
diferencia de las que no recibieron el tratamiento, grupo que presentó una
mortalidad (70%), morbilidad considerable y sus paramétros hemáticos y respuesta
inmune célular afectados.
References
1.
González-Gallego J, Sánchez-Campos S, Tuñón MJ. 2007. Anti-inflammatory properties of dietary
flavonoids. Nutr Hosp.22:287-293
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dissimilar effects on melanocyte proliferation in-vitro. J Pharm Pharmacol.59:529-536.
3.
Pathak N, Khandelwal S. 2007.Cytoprotective and immunomodulating properties of piperine on
murine splenocytes: an in vitro study. Eur J Pharmacol.3:160-170.
19
O 02
Efecto del extracto acuoso de la raíz y partes aéreas de Ruellia
tuberosa L. sobre el daño inducido por alta concentración de
glucosa en células vero
Ciangherotti Carlos1, Pimentel Adriana1, Usubillaga Alfredo2, Cegarra Jesus3, Orsini
Giovannina4, Salazar-Bookaman Margarita1
Unidad de Cultivo Celular, Facultad de Farmacia, Universidad Central de Venezuela, Caracas, Venezuela.
Instituto de investigaciones, Facultad de Farmacia, Universidad de Los Andes, Mérida, Venezuela. 3 Herbario
(MER), Facultad de Ciencias Forestales y Ambientales, Universidad de Los Andes, Mérida, Venezuela. 4 Herbario
Ovalles Facultad de Farmacia, Universidad Central de Venezuela, Caracas, Venezuela.
1
2
La Ruellia tuberosa L. es conocida en Venezuela como yuquilla y es utilizada para el
tratamiento de la diabetes. Nosotros demostramos que el extracto acuoso de la raíz de
la R. tuberosa L. posee actividad antidiabética en modelos animales.1 Asimismo, los
extractos acuosos (raíz y partes aéreas) han mostrado actividad antioxidante in vitro.2 En
la diabetes uno de los tejidos más afectados por la glucotóxicidad es el riñón, el aumento
del estrés oxidativo, de la secreción de citoquinas y de la síntesis de proteínas de matriz
extracelular inducen hipertrofia y la muerte celular.3-6 Con el propósito de evaluar el
posible papel protector renal de los extractos acuosos de la raíz (RTr) y partes aéreas
(RTa) de R. tuberosa L. en la diabetes, se realizó un ensayo de glucotoxicidad in vitro en
células vero.7 Brevemente, las células se incubararon (5% CO2 a 37ºC), bajo un
ambiente de 5 mM de glucosa por 24 h. El medio es removido y reemplazado por medio
completo con el siguiente esquema de tratamientos: pozos controles, 8 mM de glucosa;
pozos alta glucosa, 50 mM de glucosa; pozos RTr (concentraciones crecientes), pozos
alta glucosa + RTr, pozos RTa (concentraciones crecientes) y pozos alta glucosa + Rta.
bajo estas condiciones las células son cultivadas (5% CO2 a 37ºC) durante 72 horas.
Para evaluar la supervivencia celular se realizó el método de Mosmann, en donde se
añade MTT a cada pozo de la placa y se incuba por 3 h. Se elimina el sobrenadante y la
monocapa se disuelve con DMSO y luego se lee en un lector de ELISA a 570 nm. Las
células Vero cultivadas con 50 mM de glucosa disminuyeron significativamente su
viabilidad comparadas con el control de 8 mM de glucosa. Este efecto citotóxico fue
inhibido por ambos extractos de R. tuberosa L. Lo que sugiere que el tratamiento con
estos extractos pueden ser útil en la prevención del daño renal en la diabetes, por lo que
estudios in vivo son necesarios para respaldar esta hipótesis.
Referencias
1.
Ciangherotti C, et al. 2006. XV Cong. Italo-Latinoam. di Etnomed. “Ivano Morelli”. Perugia, Italia.
2.
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Mason RM, Wahab NA. 2003. Am Soc Nephrol. 14(5):1358-73.
Kannan K, Jain S. 1994. Horm metab res. 26:322-325.
21
O 03
Composición química y actividad antibacteriana del aceite
esencial de Montanoa quadrangularis Sch.
María Araque, Fanny González, Francy Hernández, Luís Rojas
Departamento de Microbiología y Parasitología, Laboratorio de Bacteriología Clínica, Facultad de
Farmacia y Bioanálisis (ULA) Mérida-Venezuela
La constante búsqueda de sustancias con actividad antibacteriana en fuentes no
tradicionales como las plantas superiores es importante, porque existe la posibilidad
de encontrar principios activos con buena actividad antimicrobiana1. Es por ello, que
en este estudio se determinó la composición química y la actividad antibacteriana
del aceite esencial de la hoja y la flor de M. quadrangularis. El material vegetal se
recolectó en la carretera vía al Morro, Mérida - Venezuela. Los aceites se
obtuvieron mediante hidrodestilación y la caracterización química se realizó
mediante cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masa, empleando
las columnas HP-5 y C-WAX. Siendo la primera más eficiente para la detección de
los componentes químicos de los aceites. El componente predominante en ambas
columnas y aceites fue el limoneno. La actividad antibacteriana de los aceites se
realizó por el método de difusión del disco y del agar perforado2, siendo esta última
la más eficiente para valorar esta característica. El aceite esencial de la flor
demostró mayor espectro de actividad sobre las bacterias gramnegativas
ensayadas, mientras que el aceite puro de la hoja mostró actividad sobre las cepas
gramnegativas o grampositivas ensayadas. Los hallazgos demuestran que en los
aceites esenciales de la flor y la hoja provenientes de Montanoa quadrangularis,
existen principios activos que tienen actividad antibacteriana, y pudieran constituir
una fuente natural de agentes antimicrobianos.
Referencias
1.
Evans W. Farmacognosia. Méx. Edit. Interamericana, 1991. p. 454-60.
2.
Kalemba D, Kunicka A. Antibacterial and antifungal properties of essential oils. Current Medicinal
Chemistry 2003; 10 (10): 813-29.
22
O 04
Actividad citotóxica de α-Solamargina sobre las células del
melanoma A375 humano in vitro y el melanoma B16/F1 en
ratones C57/BL6
Bernardo Chataing1,3, Alfredo Usubillaga2, Alexis Valentin3
Departamento de Biología, Facultad de Ciencias, Universidad de Los Andes, La Hechicera, Mérida
5101, Venezuela; 2 Instituto de Investigacion. Facultad de Farmacia, Universidad de Los Andes, Mérida
5101,Venezuela; 3 Laboratoire de Parasitologie et Mycologie Médicale 15 Ave Ch. Flahault 34060,
Montpellier, France.
1
α-Solamargina [(25R)-3β-{O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-{O-α-L-rhamnopyranosyl
(1→4)-β-D-glucopyranosyloxy}-22αN-spirosol-5], un glicósido de solasodina,
aislado de frutos frescos de Solanum americanum Miller, fué estudiado por su
citotoxicidad sobre las células del melanoma A375 humano in vitro y en sus
efectos sobre el melanoma B16/F1 en ratones C57/BL6. In vitro, la concentración
inhibitoria 50 (IC50) de α-solamargina sobre las células de melanoma humano fue
de 9.8 ± 0.1 ; 9.3 ± 0.1 y 8.6 ± 0.1 μM a 24, 48 y 72 h, respectivamente. Estos
valores fueron comparados con los obtenidos para los glicoalcaloides α-chaconina,
α-solanina, α-solasonina , α-tomatina y actinomicina D (control positivo). Se
observó que los efectos in vitro son sinergísticos con el de otros glicoalcaloides,
tales como α-chaconina, α-solasonina y α-solanina. In vivo, los experimentos
indicaron que α-solamargina inhibió el crecimiento del melanoma B16/F1 en
ratones a una concentración menor que su concentración tóxica [dosis efectiva50
(ED50) de 6.0 mg/kg peso corporal (BW), dosis letal 50 (LD50) de 49.5 ± 0.1 mg/kg
BW e índice terapeútico de 8.25 ± 0.08]. Los efectos parecen depender del periodo
de administración de la droga. Se discute el posible mecanismo de acción de solamargina sobre estos tumores.
Acnowledgements: Este proyecto ha sido financiado parcialmente por CDCHT-ULA proyecto C-844-97,
MundoPerfumería, proyecto LOCTI 7973048 y proyecto MISION CIENCIA: Investigación y desarrollo
tecnológico para mejorar el tratamiento oncológico y su aplicación en la red de servicios del
SPNS,subproyecto IDENTIFICACION Y CARACTERIZACION DE DROGAS ANTICANCEROSASVenezuela.
23
O 05
Antifungal activity of the ethanolic extract of Satureja
macrostema (nurite) on Sporotrix schenckii
Zurita-Valencia Wendy1, Alejandra Hernández García1, Bello-González Miguel A1.,
Molina-Torres Jorge2, Álvarez Ramírez Ma. Teresa1, Martínez-Pacheco Mauro1,
García-Chávez Abraham1 y Salgado-Garciglia Rafael1
Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo, Instituto de Investigaciones Químico-Biológicas,
Edif. B1, Ciudad Universitaria, C.P. 58060, Morelia, Michoacán, MÉXICO. [email protected].
2CINVESTAV Campus Guanajuato, Unidad de Biotecnología e Ingeniería Genética, Lab. De Fitoquímica,
Km. 9.6 Libramiento Norte Carretera Irapuato-León, Apdo. Postal 629, C.P. 36500 Irapuato, Guanajuato,
MÉXICO.
1
Satureja macrostema (Benth.) Briq. (Lamiaceae) is a Mexican medicinal plant,
which grows well in forest areas of Central Mexico[1]. It is locally used in treating
abdominal pains, coughs and is also used to the treatment of several infections
which include skin diseases [2]. To evaluate the antifungal activity of S.
macrostema, the ethanolic extract of aerial part (leaves and stems) was probed on
S. schenckii and this activity was compared with the action of itraconazole (10
µg/mL), a known synthetic antimycotic (Sporanox®). S. macrostema plants were
collected at locations within Michoacan State and they were identified and
authenticated at the Herbarium of the Biology Faculty, University of San Nicolás de
Hidalgo.The S. macrostema extract and of a fraction (FII) purified by thin layer
chromatography exhibited strong inhibitory activity against mycelial form of S.
Schenckii (100%), assaying by the agar-solid diffusion and disc diffusion methods,
using Sabouraud dextrose agar (SDA) medium (28°C). After the GC-MS analyses,
pulegone (21.35%) and thymol (54.4%) were identified as major constituents in the
crude extract. They were the biologically active compounds responsible for the
antifungal effect of FII.
References
1.
Rzedowski, G.C and Rzedowski J. 2001. Flora fanerogámica del Valle de México, 2nd. Edition,
Inst. de ecología and CONABIO, Xalapa, Ver. México. p. 644.
2.
Bello-González, M.A, 2006. Catálogo de plantas medicinales de la comunidad Indígena Nuevo San
Juan Parangaricutiro, Michoacán. México. Libro Técnico No. 4. Campo Experimental Uruapan.
CIRPAC. INIFAP. Michoacán, México. 138 p.
24
O 06
Evaluación de la actividad antiinflamatoria de un crudo obtenido
a partir del extracto acuoso de Capraria biflora L.
Dulce Ma González Mosquera, Liliana Vicet Muro1, Hoa Nguyen Thi Thanh1,
Armando Cuéllar Cuellar2, Yannarys Hernández Ortega1
1
Universidad Central “Marta Abreu de Las Villas”; 2 Universidad de La Habana
Capraria biflora, L. es una especie silvestre que crece en lugares húmedos,
abundantes en el Caribe, en las Antillas y en América; es utilizada en varios países
para enfermedades asociadas con el dolor y la inflamación. Se comprobó su acción
antiinflamatoria, para ello se utilizaron ratas machos, Sprague Dawley con peso
entre 160 y 220 gramos. La fase experimental se llevó a cabo empleando la
metodología descrita en el Drug Discover Pharmacological Assay, constituyéndose
los grupos de prueba los cuales recibieron las dosis 25, 50 y 100 mg/Kg de peso
del producto y los controles, se determinó el porciento de inflamación y el de
inhibición durante 6 horas.
Los valores obtenidos en cada parámetro se procesaron por los test de Kruskal
Wallis y Friedman evidenciándose que el crudo tiene efecto antiinflamatorio, al igual
que el extracto acuoso de donde proviene. Se determinó que el producto evaluado
provoca mayor inhibición de la inflamación a las dosis de 50 y 100 mg/Kg de
peso. Todos los análisis de Friedman para el porciento de inflamación de las
diferentes dosis demostraron que los cambios a lo largo del tiempo fueron
significativos y llegaron a ser altamente significativos en los grupos de dosis de 50 y
100 mg/kg.
Al cabo de las cinco horas de haber comenzado el experimento el porciento de
inhibición aumentó con la dosis, lo cual indicó una relación dosis respuesta a partir
de la dosis 50 mg/kg. Además la dosis de 25 mg/kg no ofreció cambios
significativos, lo cual permitió sugerir que el crudo evaluado a esta dosis no posee
efectividad como antiinflamatorio.
25
O 07
Effect of agelasina B on the intracellular calcium mobilization in
breast cancer cells (MCF-7)
Adriana Pimentel1,2, Iriana Zambrano1, Jais Nieves1 , Felipe Sojo2 , Héctor Rojas3,
Alirica I. Suarez4, Reinaldo Compagnone5, Francisco Arvelo2 y Gustavo Benaim1,2
Centro de Biociencias y Medicina Molecular, Instituto de Estudios Avanzados (IDEA). 2Laboratorio de
Biofísica, Instituto de Biología Experimental, Universidad Central de Venezuela. 3Laboratorio de
Permeabilidad Iónica, Instituto Venezolano de Investigaciones Científicas. 4Laboratorio de Productos
Naturales, Facultad de Farmacia, Universidad Central de Venezuela. 5Laboratorio de Síntesis Orgánica,
Facultad de Ciencias, Universidad Central de Venezuela. Caracas, 1080, Venezuela
1
We have demonstrated that agelasine B, a compound purified from a sea sponge
(Agelas clathrodes), shows differential cytotoxic properties. Thus, in breast cancer
cells (MCF-7), the IC50 is 2.22 g/ml., significantly different with respect to the
observed in fibroblasts (IC50 23.43 g/ml), rising the possibility of its use on breast
cancer therapy. When assayed on a cell suspension of MCF-7 loaded with the Ca+2
indicator FURA-2, agelasine B was able to induce an increase of the intracellular
Ca+2 concentration ([Ca+2]i). This was due to the liberation of Ca+2 from the
endoplasmic reticulum, as could be seen by the use of confocal microscopy, as
previously reported [1]. We also demonstrated that agelasine B is able to inhibits
the activity of the sarco(endo)plasmic reticulum Ca+2-ATPase (SERCA) with the
same efficiency to classical inhibitor of this Ca+2 pump, such as thapsigargin and
cyclopiazonic acid, showing that agelasine B is able to differentially kill these cells
through the inhibition of the SERCA and the subsequent disruption of [Ca+2]i
homeostasis.
Acknowledgments: Grants from C.D.C.H.-U.C.V. PG-03-00-6049/2005 & FONACIT G-2001000637 to
G.B.
References
1.
Colina, C. et al. (2005), Biochem. Biophys Res. Commun., 336, 54-60.
26
O 08
In vitro antifungal activity of ethanolic extract of Artemisia
ludoviciana ssp. mexicana on Botrytis cinerea
Tapia-Rodríguez Aurelio1, Cortés-Rodríguez Marco A.2, Hernández-García
Alejandra1, Macías-Rodríguez Lourdes I.1, Álvarez-Ramírez Ma. Teresa1, MartínezPacheco Mauro1, García-Chávez Abraham1 y Salgado-Garciglia Rafael1
Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo, Instituto de Investigaciones Químico-Biológicas,
Edif. B1, Ciudad Universitaria, C.P. 58060, Morelia, Michoacán, MÉXICO. [email protected].
2Centro de Investigación y Desarrollo del Estado de Michoacán (CIDEM), Calz. Juárez 1446, C.P. 58060,
Villa Universidad, Morelia, Michoacán, MÉXICO.
1
The in vitro effect of ethanolic extracts from Artemisia ludoviciana ssp. mexicana
(Willd.) Keck (Mexican white sagebrush), a medicinal species cultivated in Mexico
[1], was studied against Botrytis cinerea. We evaluated in vitro the effect of crude
extracts from Mexican white sagebrush (leaves and stems) on mycelia form (2 mm2)
and conidia germination (1 x 106/mL), assaying by the agar-solid diffusion and disc
diffusion methods, using potato dextrose agar (PDA) medium (28°C). A.
ludoviciana ssp. mexicana plants were collected at locations within Michoacan State
and they were identified and authenticated at the Herbarium of the Biology Faculty,
University of San Nicolas de Hidalgo. The characterization (GC-MS) of the crude
extract reveals the presence of different terpenes, borneol was the most abundant
component (23%). This extract had an inhibition activity of 100% on mycelium
growth and spores germination at a final concentration 170 µg/mL. Six fractions
were purified by TLC and activity monitored with bioassays using B. cinerea conidia
by disc diffusion method, the Fraction V (FV) showed the most strong inhibitory
activity (100%), similar results were observed with the crude extract and positive
control (Tecto 60®, Tiabendazol 60%) at 1 mg/mL. The borneol (86%) and camphor
(12.5%) present in FV, were the active compounds with fungicidal properties. The
antifungal effect of the extract and active principles of A. ludoviciana spp. mexicana
was studied on in vitro strawberry plantlets.
References
1.
Rzedowski, G.C and Rzedowski J. 2001. Flora fanerogámica del Valle de México, 2nd. Edition,
Inst. de ecología and CONABIO, Xalapa, Ver. México. p. 927.
27
O 09
Inhibición de -glucosidasa y -amilasa a partir de los extractos
totales de Justicia colorata, Artocarpus altilis y Adiantum poiretii
Jaramillo Ximena, Ojeda Santiago, Guerrero Trotsky
Planta de Productos Naturales, UTPL, San Cayetano Alto s/n, 11 01 608, Loja-Ecuador.
Se evaluó la actividad inhibitoria de los extractos metanólicos de tres especies
vegetales nativas del sur del Ecuador: Adiantum poiretii (Culantrillo), Artocarpus
altilis (Fruto del pan) y Justicia colorata (Insulina), empleando los métodos
espectofotométricos descritos por TSUJITA para -amilasa [1] y por MATSUI para glucosidasa [2]. Los resultados fueron expresados como CI50 en ug/mL
(concentración del inhibidor requerida para inhibir el 50% de la actividad
enzimática). En el ensayo de inhibición de -amilasa, a diferencia de los extractos
metanólicos de Justicia colorata (IC50=1756ug/mL) y Adiantum poiretii
(IC50=2495ug/mL), Artocarpus altilis no presentó un efecto dosis-respuesta
apreciable respecto al control positivo Glucobay® (IC50=328ug/mL), ensayado a
una concentración de 500 ug/mL [Fig.1]. En el ensayo de inhibición de glucosidasa, los tres extractos mostraron un efecto dosis respuesta a partir de
10ug/mL [Fig 2]. Los valores de IC50 establecidos con este ensayo para las tres
especies fueron 575ug/mL para Adiantum poiretii, 1089ug/mL para Artocarpus altilis
y 1256ug/mL para Justicia colorata, frente al control positivo Glucobay®
(IC50=808ug/mL) ensayado a una dosis de 1000ug/ml.
Fig. 1. IC50 sobre -amilasa.
Fig. 2. IC50 sobre -glucosidasa.
Podemos concluir que Adiantum poiretii es una potencial fuente de principios
activos que podrían contribuir a la disminución de la hiperglucemia postprandial
retardando la absorción intestinal de los carbohidratos de la dieta.
Acknowledgements: Universidad Técnica Particular de Loja (UTPL), Instituto Ecuatoriano de Seguridad
Social – Loja (IESS).
References
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2.
Tsujida, T. et al. (2006), O.M.P.I., WO/2006/03/030929 A1.
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29
O 10
Efecto antibacteriano de la infusión de raíces de Perezia
tyrsoidea en la tifoidea aviar experimental en Gallus gallus
comercial
Ma. Teresa Alvarez Ramírez1, Rafael Salgado Garciglia2 y Luis José Flores
Alvarez1
1Lab.
Parasitología y Nutrición. Fac. Biología, Edif. B4. 2Lab. Biotecnología vegetal. IIQB. Edif. B3.
Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo, Ciudad Universitaria, C.P. 58060, Morelia,
Michoacán, MÉXICO.
La Salmonella enterica serovar Gallinarum causa la enfermedad sistémica llamada
tifoidea aviar en aves, produciendo mortalidades mayores del 50%, que afecta la
disminución en su producción de carne y huevo (1). Por otro lado, en la medicina
tradicional Mexicana se conoce que las raíces de cola de zorra (Perezia spp.)
tienen propiedades laxantes, antiparasitarias, antibacterianas y antitumorales (2),
hoy se sabe que el principal metabolito secundario es una p-benzoquinona
sesquiterpénica (Perezona MSP) (3). El objetivo de este trabajo fue valorar el efecto
de las infusiones de raíces de P. tyrsoidea en la tifoidea aviar. El diseño fue al
azar, con 6 grupos con 10 repeticiones cada uno. Grupos de experimentación: 1B380 y 2nana problema, 3B-380 y 4nana control, 5B-380 y 6nana blancos. Con un
nivel de signficancia del P<0.05. (4 grupo se desafiados (DL50) 108 UFC) y 200
ug/kg/d de MSPt tratamiento). Los resultados en ANDEVA y Tukey mostraron
diferencia estadísticas de P<0.05 entre grupo problema respecto a grupos
controles en la respuesta inmune celular y humoral, tamaño y lesiones en órganos:
linfoides primarios, hígado, pulmón y corazón e índice de mortalidad. Se concluye
que la aplicación de MSP contribuye en regular la inflamación de órganos y la
respuesta inmune célular y humoral de las aves, a diferencia de las que no
recibieron el tratamiento, en las que se presentó una mortalidad (60%), con
morbilidad considerable en sus procesos inflamatorios en órganos linfoides,
corazón e hígado, aspecto que los predispone a paros cadiorespiratorios.
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Alvarez. Ma. T., Ledesma N., Tellez G., Molinari JL., Tato. P. 2003. Comparasión of the immune
responses against Salmonella enterica serov Gallinarum infection between naked neck chikens
and comercial chiken line . Avian Pathology. 32: 193-203
2.
Martinez Máximo 1969. Las plantas medicinales de México. Ed. Botas. México. P.158
3.
Cárabez, A, Sandoval, Z.F. The actión of the sesquiterpenic benzoquinone, perezone, on electron
transport in biological menbranes. Arch. Biochem. Biophys. 260.: 293-300.
30
O 11
Actividad citotóxica, fototóxica y antioxidante de extractos
acuosos de plantas de los Andes venezolanos
Díaz, L.E1., Medina A.L1., Marti-Mestres2, G., Vian L2.
1Facultad de Farm.acia Universidad de Los Andes.. Mérida Venezuela 5101. 2Facultad de Farmacia.
Universidad de Montpellier I. Montpellier, Francia.
Algunas plantas tienen compuestos biológicamente activos para el tratamiento de
las disfunciones del tejido de la piel.[1] En virtud de esto, se evaluó la actividad
citotóxica, y fototóxica en células de piel así como la actividad antioxidante, de
extractos vegetales acuosos a fin de
proponerlos para la terapéutica
dermatológica. Muestras de plantas fueron colectadas en los Sectores de Campo
de Oro, Santa Rosa y Av Las Americas en la cuidad de Mérida-Venezuela, llevadas
al laboratorio, secadas a 45°C por 72 horas y molidas. El extracto acuoso se
preparo por maceración a 7°C por 24 horas, se decantó, centrifugó y colectó el
sobrenadante. La citotoxicidad de los extractos se determinó en queratinocitos
(HaCaf) y fibroblastos (BALB/c 3T3), cultivados en medio DMEM [2]. El % de
viabilidad se evaluó después de 24 horas de incubación a 37°C por el Test de Rojo
Neutro [2] . La fototoxicidad fue evaluada en fibroblastos (BALB/c 3T3) [3]. La
actividad antioxidante se valoró por el Test DPPH [4]. Todos los extractos no
mostraron citotóxicidad a partir de la dilución 1/50 para los dos tipos celulares. Las
muestras no fueron fototóxicas a la dilución 1/100, a excepción de la Erithryna
edulis semilla que mostró un 88% de viabilidad en la placa irradiada. Amaranthus
dubuis y Cassia espectabilis mostraron actividad antioxidante en el mismo orden
del ácido ascórbico en el Test de DPPH. Los resultados que las plantas estudiadas
pueden ser utilizadas para la terapia dermatológica.
Referencias:
1.
Mullika Traidej Chomnawang., Suvimol Surassmo., Veena S. Nukoolkarn., Wandee Gritsanapan,
2007.Effect of Garcinia mangostana on inflammation caused by Propionibacterium acnes.
Fitoterapia 78,401-408.
2.
Test Method Protocol for Solubility Determination. Ín vitro Cytotoxicity Validation Study. Phase III.
2003. Prepared by The National Toxicology Program (NTP) Interagency Center for the Evaluation
of Alternative Toxicological Methods (NICEATM).
3.
OECD Guideline for testing of chemical: In vitro 3T3 NRU Phototoxicity Test. Anonymous.
Anonymous. 2004.
4.
Sanchez M, Concepción., Larrauri, José and Calixto, Fulgencio. 1998. A Procedure to Measure
the Antirradical Efficiency of Polyphenols. J Sci Food Agric. 76, 270-276.
31
Food and Health
Alimentazione e Salute
Alimentación y Salud
X XVII Congresso Italo-Latinoamericano di Etnomedicina “Bernardino d’Ucria”
PL 3
Metodi cromatografici multidimensionali in chimica degli alimenti
Giovanni Dugo
Dipartimento Farmaco-chimico, Facoltà di Farmacia, Università di Messina, viale Annunziata, 98168
messina, Italy
Nel mondo della chimica degli alimenti vi è un crescente interesse per lo sviluppo di
tecniche separative cromatografiche sempre più rispondenti alle moderne esigenze
analitiche, mirate ad uno studio approfondito dei campioni, con particolare
riferimento a componenti presenti in tracce, ormai fondamentali per definire qualità e
genuinità delle matrici alimentari in esame.
La risoluzione cromatografica di tutti i componenti di miscele complesse e la loro
identificazione in una sola analisi e in tempi molto brevi richiede un’elevata capacità
risolutiva, non adeguatamente garantita da approcci convenzionali. Per questo
motivo, negli ultimi anni sia le tecniche multidimensionali classiche (“heart-cutting”),
che le più recenti tecniche multidimensionali “comprehensive” hanno trovato
un’ampia diffusione.
In questa presentazione verranno descritti i risultati delle nostre ricerche nel campo
della chimica degli alimenti utilizzando tecniche cromatografiche multidimensionali,
accoppiate in alcuni casi alla spettrometria di massa. In particolare, verrà illustrato
l’uso di un sistema gas cromatografico multidimensionale (MDGC) di ultima
generazione per l’analisi chirale di un olio essenziale di rosmarino; inoltre, verranno
illustrate delle applicazioni di gascromatografia “comprehensive (GC x GC) per
l’analisi degli acidi grassi presenti negli oli di pesce; infine, verrà mostrato l’utilizzo
della cromatografia liquida “comprehensive” (LC x LC) in accoppiamento alla
spettrometria di massa per la determinazione dei trigliceridi e degli esteri del
colesterolo nel siero umano (LC x LC-APCI-qMS) e dei polifenoli nel vino [in questo
caso usando uno spettrometro di massa ibrido a trappola ionica/tempo di volo (ITTOF)].
33
O 12
Actividad antioxidante y contenido de polifenoles en la fruta de
granada (Punica granatum L.), guayaba (Psidium guajava L.) y
mora (Rubus sp.)
Méndez-Corao G1, Carpio E1 y Pérez E2, Fermin G3
1Bioquímica Clínica Facultad de Farmacia y Bioanálisis, 2Laboratorio de Bioquímica Adaptativa, Facultad
de Medicina. 3Facultad de Ciencias. Universidad de Los Andes, Campo de Oro, 5101 Mérida-Venezuela.
e-mail [email protected]
La actividad antioxidante de las frutas esta estrechamente relacionada con la buena
salud, y con el contenido de polifenoles que barren radicales libres. Se estimó el
contenido de polifenoles y la actividad antioxidante de tres frutas de gran
popularidad. Los resultados se muestran en las siguientes tablas.
Tabla 1. Concentración de polifenoles presentes en la granada, guayaba y mora medidas contra
estandares de: fenol, ácido caféico y ácido tánico.
Descripción
Granada
Guayaba
Mora
Acido tánico
Acido Caféico
Fenol
y = 0.0042x + 0.0339 y = 0.0112x + 0.0328 y = 0.0091x +0.0902
R2 = 0.9978
R2 = 0.9942
R2 = 0.9679
Promedio DO
Concentración
Concentración
Concentración
0.336
71.9
27.1
27.1
0.734
166.7
62.6
70.7
0.187
36.5
13.8
10.6
Tabla 2. Actividad antioxidante determinadas por: ∙OH, A∙, ABTS y AOA.
I
II
Concentración (Radical Hidroxilo) (Anión Superóxido)
(mg/mL)
% de Inhibición
% de Inhibición
Granada
1
23.7
54.0
Guayaba
1
10.3
26.4
Mora
1
18.8
32.5
Acido Lipoico
1 µM
34.2
29.2
Melatonina
1 µM
73.7
54.2
Quercitina
1 µM
73.0
54.7
Descripción
III
(ABTS)
(mM)
8.86
0.25
0.10
3.79
7.90
9.69
IV
(AOA)
(mM)
0.25
0.04
0.24
0.32
0.85
0.91
Agradecimiento Al CDCHT-ULA por el financiamiento en el proyecto FA-347-05-03-B.
Referencias
1.
Singleton V. et al. (1999). Meth Enzymol 299. 152-178.
2.
Halliwell B. et al (1987). Anal. Biochem. Vol. 165. 215 – 219.
3.
Rice-Evans C. et al. (1991). Burdon and Knippenberg. Amsterdam: Elsevier. Vol. 22.
34
4.
5.
O 12
Miller NJ. Et al. (1996). Redox Report 2:161-171.
Re R. Et al. (1999). Free Radical Biology & Medicine 26(9); 1231-1237.
35
O 13
Diferentes metodos analíticos para el control de calidad de
productos herbolarios
Noemí Waksman, Jonathan Pérez-Messeger, Aurora Garza-Juárez, Ricardo
Salazar-Aranda, María de la Luz Salazar-Cavazos
Departamento de Química Analítica, Fac. de Medicina, UANL, PO Box 2316, 64460, Monterrey, N.L.,
México
Para reconocer el valor terapéutico de la Fitoterapia se debe evaluar la seguridad
de los productos con los mismos criterios aplicados a medicamentos. Los
principales problemas de los extractos herbáceos es que se trata de sistemas
multicomponentes, altamente complejos. En este aspecto, el desarrollo de métodos
analíticos, principalmente cromatográficos (CLAR, HPTLC y Cromatografía de
gases) ha contribuido enormemente a afrontar la complejidad de estos productos,
no sólo para valorar sus constituyentes sino también para obtener una huella
dactilar de los mismos. Si bien México ya dispone de una Farmacopea Herbolaria,
aún son muchos los preparados medicinales que se expenden en hierberías donde
el control de calidad es nulo. Concientes de esta problemática, en los últimos años
hemos aplicado diversos métodos para el control de calidad de los productos
herbolarios ofrecidos en el mercado. En una primera etapa hemos desarrollado
métodos por ccd que tuvieran la capacidad de ser utilizados como parte de un
rastreo primario en cualquier laboratorio de salud1. Algunos de dichos métodos han
sido comparados con los resultados obtenidos por CLAR para validar los resultados
obtenidos por ccd. Es sabido, además, que una de las estrategias más completas
es la elaboración de perfiles cromatográficos y su análisis por medio de cálculos
quimiométricos. Damiana (turnera difusa), es una planta medicinal mexicana para la
cual no hay metodología analítica desarrollada, hemos obtenido su perfil
cromatográfico, el cual se trató de correlacionar con los resultados de la actividad
antioxidante2 de los diferentes extractos obtenidos con el objetivo de establecer,
además, un modelo de predicción de actividad biológica, de tal manera que el
producto herbal como un todo, sea considerado como el componente activo.
Referencias
1.
Rosalba Ramírez-Durón, Noemí Waksman de Torres et al. (2007), JAOAC, 90, 920-924.
2.
A.M. Nederkassel et al, (2008), J. Chromat. A,1096, 177-186.
36
O 14
Habits of consumption of UHT milk after chemical frauds in
Brasil: a matter of education
Pardo R.B., Matioli L., Osaka D.M., Nagai L., Simoni A.G., Thomaz A.G., Rocha
E.P., Meneguim G.A.O., Guimarães P.H.L.C., Murari C.S., Omura M.H., Paris A.,
Escouto L.F.
Faculdade de Tecnologia (FATEC) – Curso de Tecnologia em Alimentos – Av. Castro Alves, 62. CEP:
15.006-000 – Marília/SP – Brasil
In October - 2007, in Minas Gerais State/Brasil, a scandal involved the inclusion of
peroxide, sodium hydroxide and sodium citrate to enhance the low quality of milk
used to produce UHT milk. Considering that the occurrence of such chemical frauds
would cause an abrupt and intense reduction of milk consumption, particularly UHT
milk, the present study was performed in Marília-SP/Brasil. In order to verify
modifications in habits of consumption and criteria of choice of UHT milk after the
facts, 86 questionnaires were applied to consumers in eight supermarkets of the
city. The results showed that 84.88% of all interviewed consumed UHT milk daily.
Among these only 3 (3.49%) changed, temporarily, this for another kind
(pasteurized, powdered or raw) and 76 (88.37%) continued buying it. Out of these
76 consumers, 89.47% maintained old criteria to choose UHT milk: price (33.82%),
quality (30.88%), practicability (7.35%), the three at the same time (25%), habit
(1.47%) or brand (1.47%). Among 37 people that included quality to select the milk:
24.32% did not know how to define it; 27.03% associated quality to good sensory
characteristics; 8.11% told that brand defines quality; 13.51% answered that quality
is a product of high nutritional value; and 27.03% offered no definition. Among the 8
(10.53%) consumers that adopted new criteria: 62.5% decided avoid the brand
involved in the frauds and 37.5% started observing packing conditions and period of
validity. Out of 86 UHT milk consumers: 6.98% condemned it as a cause of any
health disturb; 80.23% denied knowing the definition of UHT; and among 19.77%
that tried to define it, 100% were completely wrong. UHT milk consumers in MaríliaSP/Brasil maintain habits of consumption and criteria of choice based on
misinformation and thus accept, without any reply, a product that lacks quality
and/or safety.
37
O 15
The determination of polyphenols content in white mulberry
leaves
Ciampi E., Alonzo G., Sinacori A.
Dipartimento di Ingegneria e Tecnologie Agro Forestali. Università degli Studi di Palermo. Viale delle
Scienze 13. 90128 Palermo, Italy. Fax +39091484035. e-mail: [email protected]
Cultivation of mulberry, particularly Morus alba L., was introduced in Europe
between the ninth and the twelfth centuries together with sericulture. Mulberry as
both Morus alba L. and Morus nigra L. Species, is a rustic plant, well suited for the
Mediterranean climate and which is also appreciated for its fruits. Found in the past
useful in medicinal applications, is now, from recent studies, indicated as potential
health beneficial for the high content in polyphenol substances. Mulberry leaves
from 13 varieties, grown in the experimental field of the University of Palermo,
Agriculture Faculty, have been investigated for their content in antioxidant
substances and particularly for polyphenols. A fast and simple spectrophotometric
method for these analyses was developed. The total phenolic content was in the
range 953-332 mg gallic acid equivalent /100g fresh mater. The highest amount was
observed in the Sinuenze variety while the lowest was in the Kokusò 27 variety.
Keywords: mulberry, plants, polyphenolic, leaves, antioxidants.
38
O 16
Analítica micrográfica de las semillas de Chenopodium quinoa
Willd. “quinoa” Chenopodiaceae
Teresita Di Bernardi, Ivan Romero, S.M. Carpano y, E. D. Spegazzini
LABRAM- Farmacobotánica. Depto. Cs. Biológicas. Fac. Cs. Exactas. UNLP. 47 y 115 La Plata (1900).
Argentina. Tel.: 54-0221-423-0121, int. 36. E-mail: [email protected]
La quinoa fue el alimento básico de los incas durante siglos ligado a su religión y
cultura. Con la llegada de los españoles su cultivo fue sustituido por el maíz y las
papas, y en muy poco tiempo la producción de quínoa desapareció, excepto en una
pequeña fracción de la población nativa que continuó con su cultivo por tradición.
La FAO y la OMS califican la quinoa como un alimento único por su altísimo valor
nutricional, que puede sustituir notablemente a las proteínas de origen animal, pues
contiene un balance de proteínas y nutrientes más cercano al ideal para el ser
humano que cualquier otro alimento. La harina de quínoa se encuentra descripta en
el CAA (artículo 682), como: “...el producto obtenido por la molienda de las semillas
desecadas, sanas y limpias del Chenopodium quinoa Wild, privadas
mecánicamente o por acción de álcalis de sus tegumentos”.1
Dado que actualmente hay un resurgir de los pseudocereales resulta necesario
contar con métodos seguros y eficaces para el reconocimiento del alimento en
especial cuando el mismo se encuentra fragmentado o pulverizado. En el presente
trabajo se establecerán parámetros micrográficos y reacciones histoquímicas que
permitan caracterizar e identificar a la droga genuina. Chenopodium quinoa es una
planta herbácea cuyas semillas perispermadas, lenticulares de 1,5 a 2,5 mm. de
diámetro blanco harinoso, pericarpio claro. El perisperma presenta almidones muy
pequeños y granos de aleurona. Se analizó material proveniente de herboristerías y
dietéticas. Se efectuaron macerados y cortes histológicos de semilla, se practicaron
reacciones histoquímicas con solución de yodo ioduro de potasio (Lugol), para la
identificación de almidones, reacción xantoproteica para proteínas y con
floroglucina clorhídrica para lignina. Se realizaron diseños con microscopio
Olympus con tubo de dibujo y fotomicrografías con cámara Olympus digital. La
micrografía es un método microanalítico rápido de fácil ejecución, de bajo costo y
permite establecer el status taxonómico de una especie.
Referencias
1.
CAA (Código Alimentario Argentino)
39
Anthropology
Antropologia
Antropología
X XVII Congresso Italo-Latinoamericano di Etnomedicina “Bernardino d’Ucria”
PL 4
Estudio etnográfico de las relaciones hombre-entorno vegetal en
el contexto de las estrategias de búsqueda de la salud en dos
regiones de Argentina
Marta Alicia Crivos
CONICET – UNLP, Paseo del Bosque s/n, La Plata -Argentina
Los estudios etnográficos abordan, a una escala micro-analítica, los factores y
dinámicas inherentes a la relación hombre/entorno que caracterizan la vida
cotidiana de diferentes grupos humanos en una sociedad cambiante. En los
estudios antropológicos actuales, cobra creciente relevancia la consideración del
valor adaptativo de las culturas y su variabilidad interna; esto es, del espectro de
intereses y estrategias individuales y grupales que en cada población hace posible
sostener y/o explorar nuevas alternativas de vida humana en ambientes
específicos.
Los modos de adaptación al medio natural que la cotidianeidad de los habitantes de
zonas rurales nos muestra, provee un conocimiento que resulta indispensable si se
desea propiciar el desarrollo sostenible de los recursos naturales de un área y con
ello la calidad de vida de las poblaciones inextricablemente ligadas a ella. Así, los
procesos de selección y valoración - positiva o negativa - de los componentes del
entorno utilizados por los hombres en estas sociedades, se vinculan íntimamente
con las nociones de bienestar y salud que operan en cada caso.
Numerosas investigaciones en diversas áreas de la salud pública y sobre todo en el
campo de la epidemiología plantean que es una constante en los países
subdesarrollados la presencia de ciertas patologías como indicadores de la pobreza
y situación marginal de sus habitantes.
En el marco de investigaciones etnográficas e interdisciplinarias en los Valles
Calchaquíes (provincia de Salta) y en el Valle del Cuña Pirú (provincia de
Misiones), el abordaje de los itinerarios frente a enfermedades de alta prevalencia,
hizo posible acceder al espectro de alternativas que, con un fuerte anclaje en los
recursos del medio natural y las tradiciones locales, se amplía incorporando nuevos
elementos y combinaciones al ritmo del avance de la tecnología de las
comunicaciones y el transporte.
En el valle Calchaquí una población relativamente homogénea producto de una
larga historia de contactos interétnicos que integra componentes culturales
indígenas europeos y criollos- se distribuye en emplazamientos permanentes a
diferentes alturas, en valles y cerros. En el valle del Cuña Pirú grupos étnicos
diferentes comunidades Mbya-Guaraní y descendientes de inmigrantes de países
42
europeos y limítrofes comparten un territorio con características bio-físicas
comunes, la selva.
La diversidad étnica y las características socio-económicas de las poblaciones
asentadas en ambas regiones biogeográficas hacen posible explorar la incidencia
de múltiples variables en las respuestas convergentes o divergentes a
problemáticas comunes enfermedades frecuentes en un medio ambiente particular
Nuestro trabajo en torno a las estrategias frente a enfermedades de alta
prevalencia a nivel local en ambos enclaves, nos permite identificar factores y
criterios que intervienen en la toma de decisiones respecto a un amplio espectro de
alternativas terapéuticas1. A lo largo del proceso de búsqueda de la salud distintos
actores transitan diferentes ambientes intercambiando experiencias, articulando el
adentro y el afuera, viejos y nuevos recursos, lo cual exhibe la complejidad y
variabilidad inherente a estos procesos en el presente.
Surge entonces como pertinente abordar las estrategias de búsqueda de la salud
como un conjunto de actividades orientadas a la determinación de la causa,
diagnóstico y superación de episodios concretos de enfermedad que tienen su
origen y anclaje en el ámbito doméstico. El estudio de estas actividades nos
permite ver que ellas trascienden los límites de la Unidad Doméstica y articulan
distintos niveles de organización de la vida comunitaria. En este sentido, es posible
identificar redes de relaciones que vinculan a miembros de las Unidades
Domésticas (el nivel micro) con instituciones y organizaciones a escala local,
regional, nacional y/o global. Desde este enfoque los grupos indígenas o
campesinos no deben entenderse como comunidades aisladas sino en relación con
las sociedades nacionales y transnacionales.
Concibiendo la “enfermedad” como un estado de desajuste temporal al medio (May,
1958)2, problema recurrente al cual tarde o temprano cada individuo en todo grupo
humano debe enfrentarse, los procesos de búsqueda de la salud fueron abordados
a través del estudio de episodios de enfermedad o casos.
Nuestro trabajo en dos comunidades Mbya Guarani de la Provincia de Misiones y
en un asentamiento rural de los Valles Calchaquíes aplicando la metodología de
casos al estudio de episodios concretos de enfermedad nos permitió recuperar
tales trayectorias individuales y acceder al conocimiento y prácticas efectivamente
involucradas en la identificación de la enfermedad, asignación de causas,
significado de signos y síntomas, redes sociales que moviliza, factores y criterios
que intervienen en la toma de decisiones respecto de su diagnóstico y recursos
involucrados en su tratamiento.
De este modo, los recursos, los actores y sus vínculos a lo largo del proceso de
búsqueda de la salud se ofrecen como unidades amigables para el estudio de las
alternativas médicas que vinculan el adentro y el afuera de las comunidades
humanas debido a su naturaleza difusa y no corporativa. Como entidades
43
territorialmente basadas, los recursos naturales y las comunidades no se
desplazan, sólo los individuos que son parte de ellas lo hacen integrando diferentes
y espacialmente separadas alternativas de cura.
En este punto la transmisión de los conocimientos tradicionales, por medio de la
narrativa y las prácticas, permite acceder a las expectativas de cada generación
respecto de las siguientes acerca del mantenimiento de ciertas relaciones
beneficiosas hombre/entorno. Entre ellas aquellas que hacen posible afrontar
situaciones de malestar/perturbación como lo es la enfermedad.
Estudiar los procesos de búsqueda de la salud en dos enclaves diferentes y
considerando la variabilidad biológica, étnico-cultural y socioeconómica que
reconocemos en estas dos regiones, nos permitió apreciar la vigencia renovada de
prácticas tradicionales de procedencia diversa, analizar las nuevas modalidades
que adquieren en los nuevos contextos regionales, globales y evaluar sus
tendencias en términos comparativos.
Referencias
1.
Crivos, Marta. 2004. “Contribución al estudio antropológico de la medicina tradicional de los Valles
calchaquíes (Salta, Argentina)”. Tesis de Postgrado. Universidad Nacional de La Plata. PrEBi.
Proyecto de Enlace de Bibliotecas. SeDiCI. Servicio de Difusión de la Creación Intelectual
http://sedici.unlp.edu.ar?id=arg-unlp-tpg-0000000083. Sy, Anahí. 2008. “Estrategias frente a la
enfermedad en dos comunidades Mbya Guaraní de la Provincia de Misiones. Aporte de la
metodología de casos a la investigación Etnográfica de los procesos de salud-enfermedad.” Tesis
Doctoral en Ciencias Naturales. UNLP
2.
May, Jacques M. 1958. Ecología de las enfermedades humanas. En: Estudios sobre Ecología
Humana. Estudios Monográficos III, Washington, Unión Panamericana, pp. 91-112.
44
O 17
Identificación de las plantas medicinales utilizadas en el
asentamiento Tarumã-Mirim (Amazonas Brasil)
Costa, R. C1., Nunez, C. V.2
Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia, Núcleo de Pesquisas em Ciências Humanas e Sociais,
Av. André Araújo, 2936, Aleixo, Manaus, AM, 69060-000, Brasil. E-mail: [email protected]. 2Instituto
Nacional de Pesquisas da Amazônia, Coordenação de Pesquisas em Produtos Naturais, Av. André
Araújo, 2936, Aleixo, Manaus, AM, 69060-000, Brasil.
1
Son las experiencias del cuotidiano (historia en movimiento) que en el tiempo (largo
o corto) de la vivencia de los grupos sociales en una área que fundamentan el
conocimiento al respecto de las plantas medicinales transmitidas dentro dos valores
culturales de cada grupo. Los que más conocen, aquellos que más detienen el
etnoconocimiento son los campesinos e indios, pues son ellos que en sus modos
de vida poseen un contacto diario con la dinámica y las potencialidades de la
naturaleza. Evidentemente no son culturas cerradas, reciben influencias, en
diferentes grados, de la cultura urbana y/o de la cultura de la medicina científica
alopática. Las inserciones de la cultura de consumo de medicamentos
industrializados en detrimento del etnoconocimiento de las plantas medicinales y la
valorización del desmate de áreas contribuyeron para una derrocada de las plantas
como elementos de salud cuotidiana. En ese aspecto, es preciso inventariar los
saberes ambientales que manipulan las plantas en el asentamiento Tarumã-Mirim,
como elemento de preservación cultural. Otra razón para este estudio es la
ausencia de informaciones fitoquímicas a respecto de las plantas; cuales las
enfermedades que ocurren en el asentamiento que son tratadas, o no, con las
plantas de los propios asentados. En el asentamiento muchos cultivan plantas
medicinales al rededor de las casas, que son utilizadas principalmente para hacer
tés, también hay el uso de cáscaras, raíces y árboles fructíferos. En esta primera
fase del trabajo fueron identificadas 94 plantas con más de 150 usos bajo las más
diferentes formas de preparo. Es el etnoconocimiento que actúa cuando algún
problema de salud aparece y es el que salva en la ausencia del servicio público de
salud.
Agradecimientos: PPBio/INPA/MCT por el financiamiento del proyecto. A todas las personas contactadas
del Asentamiento Tarumã-Mirim, por las prestimosas informaciones.
45
O 18
Galenic dialogue? Biomedicine and tradicional medicine in
Mexican indigenous contexts
Adriana Gómez Aiza1, Sergio Sánchez Vázquez1, Laura Gómez Aiza2
Área Académica de Historia y Antropología, ICSHu - Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo,
Km. 4 carretera Pachuca-Actopan, CP 48900, Pachuca de Soto, Hidalgo, México. 2 Centro de
Investigaciones Biológicas, ICBI, Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo, Km. 3.5 carretera
Pachuca-Tulancingo, CP 42083, Pachuca de Soto, Hidalgo, México
1
When facing the vindication of traditional knowledge on health-illness-attention
matters, much is questioned about the superior or inferior, effective or fraudulent
character of different types of alternative medicines. Some perceptions of health and
illness cause misconception, tension and even rejection in our ways understanding
and acknowledging certain healing processes. By the same token, the public health
network tends to ignore and disallow those practices. However, at the empiric local
level, people use self-healing strategies that combine or interlink different expertise
as if in a dialogue, forcing us to reconsider the historical and cultural contexts in
which medical experience functions. Likewise, this leads to rethink the
establishment of power relationships that conditions specific actions and their
possible changes. Here, we offer a critical reflection on the interaction of indigenous
medicine and biomedicine in Mexico, on the light of research difficulties faced when
recording and processing information about identification and classification of
therapeutic plants among Otomi, Tepehua and Nahua populations of Hidalgo
County.
46
O 19
Plantas medicinales usadas por los indios Arara, Volta Grande
do Xingu, Pará, Brasil
Nunez, C. V.1, Costa, R. C.2
1Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia, Coordenação de Pesquisas em Produtos Naturais, Av.
André Araújo, 2936, Aleixo, Manaus, AM, 69060-000, Brasil. E-mail: [email protected]. 2Instituto
Nacional de Pesquisas da Amazônia, Núcleo de Pesquisas em Ciências Humanas e Sociais, Av. André
Araújo, 2936, Aleixo, Manaus, AM, 69060-000, Brasil.
El universo de las plantas usadas por los Indios Arara de la Volta Grande do Xingu,
Pará, Amazonia Brasileña es muy rico. En la cultura indígena, los hombres conocen y
usan más las plantas de la floresta mientras que las mujeres plantan al rededor de las
casas las plantas medicinales, que pueden o no ser nativas. El pajé, que es el
curandero de la tribu, utiliza las plantas siempre en número impar (1,3,5,7), nunca
emparejadas (2,4,6). Las junciones son echas entre árboles con cipós (lianas) o entre
árboles y arbustos. Todos los remedios de que necesitan los consiguen en la floresta.
Hay un intercambio grande de culturas, dónde junto con plantas con nombres bien
indígenas, como Pudadá, hay otras como Mastruz, una planta del nordeste de Brasil.
Algunas plantas tienen varios usos. Entre ellas podemos citar la Copaíba, donde el
aceite del tronco es usado contra veneno de escorpión y culebras de todo tipo. El
aceite también es cicatrizante, colocado en cima del corte, con el cuidado de no mojar
porque sino se pudre todo el tapón. Otro uso del aceite es como diurético (3 gotas en
un poco de agua). Si toma mucho, se afloja todo, por eso se debe beber poco. Para
la garganta se mescla el aceite con grasa de gallina y toma. Otras plantas tienen
apenas una utilización, como Pudadá, donde las cáscaras son puestas en agua y se
baña la persona que tenga picazones, incluso de mosquito. Hay todo un cuidado con
las mujeres, donde se usa el té de las hojas de Jucá para mal de la mujer, para el
hígado. La fruta es usada para inflamación. Los indígenas Arara tienen un gran
conocimiento empírico de la química de las plantas, dónde usan las cáscaras de la
Maçaranduba para disentería, hirviendo o dejando en agua fría hasta que el agua se
quede rosa. Tienen un conocimiento muy importante sobre el tiempo y la forma de
administración. Para malaria, mesclan en agua Canapu, con quina-quina y Picão.
Toma una dosis pequeña (3 dedos, es muy amargo) de un trago solo por la tarde y no
baña. Al día siguiente toma a las 6 horas de la mañana y baña en seguida. A la tarde
toma nuevamente y no baña. Por todo eso, tenemos mucho más que aprender con
los indios que viven en la floresta Amazónica. Ellos tienen un conocimiento empírico
que debemos respetar y valorizar, así como su cultura y modo de vida, para que
puedan continuar reproduciéndose como seres sociales y culturales.
47
O 19
Agradecimientos: PPBio/INPA/MCT por el financiamiento del proyecto. A los señores José Carlos Arara
y Leôncio Ferrera Arara, por las prestimosas informaciones.
48
Ethnobotany and Ethnomedicine
Etnobotanica ed Etnomedicina
Etnobotánica y Etnomedicina
PL 5
Etnobotánica de las plantas medicinales de la
Patagonia Argentina usadas contra dolencias
gastrointestinales
Ana Ladio y Soledad Molares
Laboratorio Ecotono. C.R.U.B. Universidad Nacional del Comahue-INIBIOMA. Quintral 1250. Bariloche
(8400). Río Negro. E-mail: [email protected]
Las dolencias gastrointestinales y los síntomas asociados a ellas son el motivo de
diversos tratamientos y prácticas en todo el mundo. En este trabajo, se presenta
primeramente una revisión cuantitativa de la información etnobotánica Mapuche
publicada hasta el momento para la región patagónica de Argentina y Chile. Se
estudiaron dieciséis artículos etnobotánicos. Se registró un total de 505 especies
medicinales, 304 nativas (60%) y 196 exóticas (39%). Las plantas son hierbas
(56%), arbustos (29%) y árboles (13.5%), y en menor proporción enredaderas
(1.4%), hemi-parásitas y parásitas (0.5%). Llamativamente, el 26 % de las plantas
se usan principalmente contra dolencias gastrointestinales y hepáticas.
Por otra parte, con el objeto de estudiar en detalle los procesos de selección de las
especies utilizadas para este tipo de dolencia, indagamos sobre los criterios
culturales y biológicos involucrados. Con este fin, se realizaron entrevistas a 30
habitantes de una comunidad rural Mapuche, y se analizaron los datos mediante
estadística no paramétrica. Nuestros resultados muestran que la selección y uso de
especies vegetales parece relacionarse muy fuertemente a criterios quimiosensoriales. Se registraron 75 etnoespecies, pertenecientes a 40 familias botánicas.
Lamiaceae, Asteraceae y Chenopodiaceae fueron las más citadas. La mayoría de
las especies (69%) presenta características de sabor y/o aroma. El número de
registros organolépticos se correlaciona positivamente con los valores de
consensos de las especies, es decir que las plantas más citadas entre los
pobladores son las que presentan mayores virtudes aromáticas o gustativas.
Además, para los pobladores estas percepciones se consideran útiles para la
búsqueda de sustitutos cuando las especies escasean o desaparecen del lugar.
La información que se ofrece puede ser utilizada como guía para futuras tareas de
prospección de especies promisorias para la salud, y como información de base
para la elaboración de estrategias de conservación bio-cultural.
49
PL 6
Le piante e l’apoptosi
Maurizio Grandi
La Torre, via Mario Ponzio 10, Torino; www.mauriziograndi.it [email protected]
La morte cellulare ha un ruolo fondamentale nello sviluppo del sistema immunitario: da
Lei emerge la nostra identità e la nostra capacità di distinguere il self dal non self. Troppo
pochi i nostri geni per determinarla. La rete si forma attraverso una serie di dialoghi
cellulari in cui il caso e la morte giocano un ruolo centrale. La complessità è il risultato di
un processo che unisce sopravvivenza e funzione. Una diversità generata dal caso,
attraverso, un adattamento scelto attraverso la morte che viene dall’interno:
autodistruzione dall’attivazione di esecutori costruiti dalla cellula mediante informazioni
presenti nei loro geni. Programma significa pre-scritto. Ogni cellula ha un programma
(pre-scritto), circa la capacità di indurre o reprimere la propria autodistruzione, a seconda
delle interazioni presenti o passate con le altre cellule che costituiscono il corpo.
Autodistruzione è base dell’omeostasi, mantiene l’identità e l’integrità. La cellula che
muore emette segnali che modificano il comportamento delle cellule vicine, incluse
quelle che la stanno ingerendo (APOPTOSI). Cancro è mancanza di suicidio
programmato e/o di riparazione del danno. Ogni esecutore di morte è architetto
impegnato ad un tempo a distruggere e a costruire. La sopravvivenza quotidiana delle
cellule dipende dalla percezione dei segnali delle altre, che ne impediscono il suicidio. La
vita deriva dalla continua negazione dell’autodistruzione, fenomeno garantito solo fino
all’età della riproduzione. Scema in quello stesso momento, punto contingente di
equilibrio fra questi conflitti. Il cancro non è legato ad una mutazione indipendente, ma
alla rottura dell’omeostasi, che è il logo Biochimico. La progressione neoplastica è il
risultato di un “Io pirata”, che reprime il programma dell’Io debole ad alta instabilità
genetica. Nel farlo riassume le caratteristiche, dei procarioti ed eucarioti sotto stress. Bcl
2, mdm2, hanno omologhi a livello batterico, così come i geni SOS. Su quest’ipotesi,
abbiamo studiato, a livello preclinico (biochimico e biofisico) e clinico l’attività di
preparazioni vegetali e formulazioni che nel passato antico e prossimo hanno mostrato
ad un tempo attività antibatterica e coordinante le funzioni cellulari dell’organismo. Si
giustificherebbe con metodologia fisica il fenomeno dell’apoptosi e della coerenza di
specie indotta dall’ATAR dei Faraoni che è ad un tempo l’unzione degli infermi del Cristo
di Nazareth. Mhyrra, Cannella, Cassia, Acorus Calamus ne sono gli ingredienti. Cosi
come l’Evernia prunastri (la cipria delle nonne).Profumi. Antibiotici. Antineoplastici, ad un
tempo, attraverso la ricoordinazione cellulare, mediata dalla morte cellulare (l’apoptosi).
Bibliografia
Ameisen JC. La Sculture du vivant. Le suicide cellulaire ou la mort créatrice (1999, 2nd ed.2000). Paris:
Edition du Seuilri
50
PL 6
Grandi M. La Myrrhe activité thérapeutique en cancérologie, Phytothérapie (2004) Num.5: 142-147, Springer
Grandi M. L’accompagnement par les plantes dans le voyage entre les vies, Phytothérapie (2007 )5:1-7 Springer
51
O 20
Estudio etnobotánico de las plantas medicinales empleadas por
Yurak hampi yachakkuna (hierbateros), Rikuy hampi yachakkuna
(visionarios), Kakuy hampi yachak (sobador) y Wachak hampi
yachak (partera) de la etnia Saraguro - Ecuador
José Miguel Andrade*1, Chabaco Armijos1, Omar Malagón1, Vladimir Morocho1,
Hernán Lucero1, Paola Vita Finzi2, Giovanni Vidari2, José Cartuche3
1 Instituto de Química Aplicada (UTPL), 2 Universidad de Pavia, 3 Dirección Provincial de Salud de Loja
(departamento de salud indígena) [email protected] / [email protected]
El estudio se realizó en la Parroquia San Lucas (Fig 1) durante el 2007 con la
colaboración de 6 Hampi yachakkuna (sanadores comunitarios), dos Rikuy hampi
yachakkuna (visionarios), un Kakuy hampi yachak (sobador) y una Wachak hampi
yachak (partera), cuya edad oscila entre los 60 y 80 años y con experiencia en el
uso de especies medicinales sobre los 25 años.La información se obtuvo mediante
entrevistas. Los lugares de recolección fueron: Acacana, Pichic, Duco, Inguera,
Aguarongo, Ingapirca y Ciudadela. Un total de 183 plantas fueron reportadas como
conocidas y utilizadas por los Hampi yachakkuna, distribuidas en: 68 familias, 129
géneros y 179 especies. Las familias más representativas son: Asteraceae con 30
spp, Lamiaceae con 14 spp, Arecaceae con 9 spp, Solanaceae y Geraniaceae con
8 spp cada una, Amaryllidaceae y Brassicaceae con 7 spp individualmente, las
familias Piperaceae, Lycopodiaceae y Ericaceae con 6 spp respectivamente. Del
total, 96 spp son utilizadas por los Rikuy hampi yachakkuna, 69 spp usadas por los
Yurak hampi yachakkuna, 52 spp utilizadas por la Wachak hampi yachak y
finalmente 12 spp es utilizados por un Kakuy hampi yachak (Fig. 2). Sobre la
enfermedad tratada: 47 especies se usan con fines mitológicos, 24 spp para el
sistema nervioso, 13 spp para el resfrío, 12 spp para infecciones, 9 spp para la
fiebre y 8 spp para la inflamación del hígado y riñones. Con respecto a la parte de
la planta usada, para 55 spp se utiliza toda la planta, 40 spp las ramas, 34 spp las
flores, y de 30 spp solo las hojas. La forma de prepararlas son: machado (52 spp),
hervida (51 spp), infusión (47 spp) y uso directo (33 spp). Predominó la
administración oral (110 spp), uso tópico (45 spp), baños (17 spp), a través de
limpias (9 spp), y vapores (2 spp). De las 183 especies el 57.37% son silvestres (105
spp) y el 42.63% son cultivadas en huertos familiares (78 spp). La mayoría son
nativas (101 spp), introducidas (68 spp) y finalmente 14 especies endémicas (Fig. 3).
Agradecimientos A los Hampi yachakkuna Mama Aurelia, Taita Asunción, Taita Segundo, Taita Vicente,
Mama Alegría, Taita José, que de manera incondicional manifestaron sus conocimientos y sabidurías,
que se ven reflejados en esta investigación y que será de ayuda para la comunidad de San Lucas. Un
52
especial agradecimiento especial al laboratorio B2 de la Universidad de Pavia y a Bolivar Merino curador
del herbario Loja.
Fig.1 Mapa de la Parroquia San Lucas indicando los
puntos de colecta de las especies
Fig.2 Número de especies utilizadas por cada
Yachack
Fig.3 Estatus y Número de especies
Referencias
1.
Ríos, M., M. J. Koziol, H. Borgtoft Pedersen / G. Granda (Eds). 2007 Useful Plants of Ecuador:
Aplications, Challenges and Perspectivas. Ediciones Abya Yala. Quito – Ecuador. 79p.
2.
Valencia, R; Pitman, N; León, S y Jorgensen, P. (Eds).2000. Libro Rojo de las Plantas Endémicas
del Ecuador. Pontificia Universidad Católica del Ecuador, Quito – Ecuador. p. 489
53
O 21
Fuentes naturales de Galantamina en cuatro especies
Colombianas de Amaryllidaceae, metabolito utilizado en el
tratamiento de la enfermedad de Alzheimer
Fabio Cabezas1, Andrés Yanza1, Santiago Martínez2, Carles Codina3, Jaume
Bastida3 y Francesc Viladomat3
Departamento de Química. Grupo: Química de Compuestos Bioactivos. Facultad de Ciencias
Naturales, Exactas y de la Educación. Universidad del Cauca. Popayán, Colombia. Email:
[email protected] FAX:572-8209060. PBX: 572-8209800 Ext. 2320. 2Departamento de
Agroindustria. Grupo: Química de Compuestos Bioactivos. Facultad de Ciencias Agropecuarias.
Universidad del Cauca. Popayán, Colombia. 3Departamento de Productos Naturales, Fisiología Vegetal y
Edafología. Facultad de Farmacia. Universidad de Barcelona (España).
1
Uno de los problemas mentales de alta incidencia en Europa y varios países de
América es la enfermedad de Alzheimer. La Galantamina (GAL), es un metabolito
ampliamente utilizado en su forma salina para el tratamiento de dicha enfermedad a
un alto costo para el paciente. Este producto natural es aislado de varios géneros
propios de la cuenca del Mediterráneo y del centro de Europa, particularmente de
los géneros Leucojum, Galanthus y Narcissus entre otros.
En nuestros estudios fitoquímicos las especies colombianas Eucharis amazonica,
E. grandiflora, Caliphruria subedentata y Phaederanasa dubia, con distribución
geográfica restringida, con endemismo en alguna de ellas, pero la mayoría
amenazadas de extinción, han mostrado presencia del metabolito en su forma libre,
lo cual ha sido comprobado por comparación con sus constantes físicas,
propiedades cromatográficas y espectroscópicas: c.c.d., Dicroismo Circular, IR,
UV., RMN 1H, 13C con muestras obtenidas de otras fuentes de origen natural.
La importancia de la presencia de este compuesto en las especies mencionadas
ofrece una oportunidad de desarrollos en el campo de la agroindustria en nuestra
región.
54
O 22
Protocol for cultivation and chemotypes differentiation of wild
gentian populations on Gran Sasso and Monti della Laga Park
Menghini L1, Epifano F1, Leporini L1, Luzzi R1, Tammaro F2, Curini M3
Dipartimento di Scienze del Farmaco, Università “G. d’Annunzio”, via dei Vestini 31, 66013 Chieti, Italy,
[email protected]; 2Facoltà di Biotecnologie, Piazzale Tommasi 2, 67010 Coppito (AQ), Italy;
3Dipartimento di Chimica e tecnologia del farmaco, Via del Liceo, 06123 Perugia, Italy
1
In this study we report results of research project on Gentian roots of wild Gentiana
lutea from six populations, differing in altitude, soil and exposition, collected in the
title National Park in 2006 and 2007. In order to identify the presence of selected
chemotypes, concentrations of gentiopicroside, gentisic acid, loganic acid, total
phenols and antiradical activity were determined using HPLC-DAD, UV-VIS
spectrophotometry and DPPH test. The most aboundant compound, in all samples,
results gentiopicroside (57,98-104,42 mg/g d.w., hi and low range), followed by
loganic acid (range 21,38-39,48- mg/g d.w.) and gentisic acid 0.57-1.26 (21,3839,48- mg/g d.w.). Total phenols contents were between 1,12 and 0,85% d.w. of
powder. A relation, not linear, exists between total phenols content and antiradical
activity. All wild samples showed good phytochemical profile with difference that can
be explained in terms of hyper-productive ecotypes rather than selected
chemotypes. Results confirmed that wild flora of Gran Sasso and Monti della Laga
National Park could be a useful source of high quality plant materials.
On seeds collected in wild, tests to evaluate seeds germination, roots elongation,
and dynamics of aerial and radical development were assessed. Experimental
cultivation were started and followed for two years in order to analyze the critical
points for productive implant. A complete protocol, from seeds collection to field
cultivation of gentian, for productive purpose of medicinal herbs products, were also
developed.
Acknowledgements: Authors wish to thank European community Project LEADER+, P.S.L. ARCA
ABRUZZO and Gran Sasso e Monti della Laga National Park, Assergi (L’Aquila, Italy) for financial and
resource supports
References
1.
European Pharmacopoeia. 4.5 Ed. 2003. Strasbourg (France).
55
O 23
Calceolaria chelidonioides Humb. Bonpl. & Kunth.: new galenic
formulations against Herpes Simplex Types I and II
Deborah Quintanilha Falcao1,2, Edilaine Rijo Costa3, Ricardo Machado Kuster1,
Francoise Nielloud2, Laurence Vian2 and Fabio de Sousa Menezes4
Nucleo de Pesquisas de Produtos Naturais, Unicersidade Federal do Rio de Janeiro, Brazil; 2Faculte de
Pharmacie, Unniversite de Montpellier, Montpellier, France, 3Faculdade de Farmacia, Universidade
Federal do Rio de Janeiro, Brazil, 4School of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, Trinity College
Dublin, Dublin, Ireland.
1
Calceolaria chelidonioides, never studied before, was chosen for this work based on
an ethnopharmacological inventory survey ran with the rural community of Alto de
Macabu. The aim of this study was isolate and identify the main chemical
constituents produced by this species as well as to evaluate pharmacological and
toxicological aspects driving the efforts to the development of a topic galenic
formulation. The essential oil composition was analyzed and five unusual
compounds were found. Using several different chromatographic techniques it was
possible to isolate and to identify several compounds in different fractions from the
crude ethanol extract of stems and flowers (CEEF) with special interest to
verbascoside. In vitro and in vivo toxicological activities were carried out using
CEEF showing no cytotoxicity, phototoxicity, mutagenicity and irritant power,
indicating though its safety. CEEF and its fractions his have shown antioxidant, antimicrobial and anti-virus activity. The ethyl acetate fraction from flowers has shown
the best activity against both HSV-1 and HSV-2, with some specificity for the type 2.
Based on toxicological and pharmacological results and also the economic viability,
CEEF was chosen for the development of a topic galenic formulation against
Herpes virus. Also, it was possible to correlate the activity observed for the crude
ethanol extract of flowers against HSV-2 and its content of verbascoside. Two
formulations were proposed; one nanoemulsion and one microemulsion containing
5% of CEEF standardized in 14.5% of verbascoside. The formulations were
evaluated by the verbascoside penetration in the skin, used as the extract chemical
marker. The microemulsion showed the desired effects, allowing a verbascoside
reservoir on the target tissue, the epidermis. Based on these arguments, it could be
concluded that the proposed microemulsion reached the initial formulation
requirements, however, further studies are needed specially the development of a
new model for the antiviral evaluation for the final formulation that was not possible
for this work.
Acknowledgements: CAPES and CNPq for fellowship and financial support.
56
O 24
Aproximación descriptiva y analítica al empacho en Bolivia
Roberto Campos Navarro
Departamento de Historia y Filosofía de la Medicina; Facultad de Medicina, Universidad Nacional
Autónoma de México; Ciudad Universitaria, México
El empacho es una categoría nosológica popular que se conoce en Bolivia, y en
general en toda Iberoamérica. Se trata de una enfermedad del aparato digestivo
originada por la excesiva ingestión de alimentos, así como irregularidades en la
digestión de las viandas e incluso la ingestión de elementos poco o nada digeribles
como tierra, papel, chicles u hollejos de frutas y verduras. Se presenta sobre todo
en niños menores de 2 años, pero también puede afectar a los adultos. El cuadro
clínico se asocia con malestar general, dolor abdominal tipo cólico, evacuaciones
diarreicas o estreñimiento, vómitos y en algunos casos fiebre. El tratamiento tiene
como objetivo principal la limpieza del tubo digestivo, lo cual se logra mediante la
utilización de purgantes y productos que provoquen el vómito: plantas medicinales,
aceites, medicamentos de patente, emplastos, sustancias químicas y algunas
maniobras como masajes y estiramientos específicos de la piel en la región dorsolumbar (“tirar o quebrar el cuerito”). La prevención está encaminada a evitar los
alimentos descompuestos, sucios, “pesados” o que contengan hollejos (por
ejemplo, frijoles o porotos, chícharos, garbanzos, etc.) En esta ponencia
presentamos las características del empacho en Bolivia, estableciendo su
causalidad, cuadro clínico, tratamientos y prevención. Se han consultado
documentos que van del siglo XVII (1612) hasta la actualidad (2008), siendo los
autores misioneros, médicos indígenas, médicos académicos, naturistas,
antropólogos y botánicos.
57
O 25
Evidencia científica del uso etnomedico antiviral de especies
vegetales de Cuba
J. A. González-Lavaut1, S. Prieto-González1, K. González-García1, M. GarcíaTorres2, R. Monteagudo2, O. Gordo-Álvarez1, N. García-González1, O. Fidalgo2, A.
Álvarez-Reyes1
Centro de Química Farmacéutica, Calle 200 y Ave. 21, Atabey, Playa, Ciudad de la Habana, Cuba.
Teléfono: 208-5103. E-mail: [email protected] ; 2 Instituto Finlay, Cuba
1
En Cuba, se ha utilizado popularmente muchas especies vegetales para el
tratamiento de diversas enfermedades y siempre ha sido una práctica cotidiana que
hoy toma más auge. El desarrollo científico ha propiciado el interés por las plantas
medicinales y las sustancias naturales bioactivas. El retorno a lo natural ha sido
propiciado por el desarrollo científico de los fitomedicamentos y al mayor
conocimiento del riesgo-beneficio de los fármacos sintéticos. Una gran variedad de
plantas en todo el planeta y sus extractos respectivos contienen diferentes
compuestos químicos con actividad biológica, que pueden producir efectos
terapéuticos variados; por lo que hoy día la evidencia científica está llamada a
validar el uso popular. En el Centro de Química Farmacéutica se trabaja
fuertemente en las investigaciones con especies vegetales, para encontrar las
evidencia científicas del uso etnomédico de ellas, particularmente de las
relacionadas con procesos virales. En este trabajo se exponen nuestra experiencia
metodológica y los resultados sobre como dirigir las investigaciones con especies
vegetales para la búsqueda de agentes antivirales, teniendo en cuenta que los
conocimientos etnomédicos constituyen un instrumento de información muy potente
que ha permitido y permite guiar, con cierta discriminación, las investigaciones
científicas actuales en la búsqueda de nuevas terapias, ante una elevada
diversidad de plantas superiores por explorar. Además se muestran algunos
resultados de la evaluación de especies colectadas en el país.
58
O 26
Il Narciso (Narcissus poeticus L., Amaryllidaceae), dal mito dei
poeti classici alle recenti applicazioni dei suoi principi attivi in
cosmesi ed in medicina
Fernando Tammaro
Corso di laurea in Scienze e Tecnologie erboristiche e cosmetiche Università L’Aquila.
[email protected]
La bellezza ed il profumo del narciso erano conosciuti fin dall’antichità classica
greco-romana. La più antica citazione del nome narkissos si trova nell’“Inno a
Demetra“ risalente al periodo omerico (VIII a.C.). La mitologia associa al nome di
Narciso il mitico fanciullo amato dagli dei per la bellezza (1). Il nome di origine greca
(nàrké = stordimento) fa riferimento alle sue proprietà velenose ed ipnotiche
(narcotiche) (2),(3). Il narciso viene riportato da Omero, Sofocle, Teofrasto e da altri
autori greci ed ancora in Plinio e nei versi di poeti latini quali Ovidio e Virgilio.
Pertanto C. Linneo, lo studioso che dette il nome scientifico alle piante, nella sua
monumentale opera Species plantarum del 1737 denomina questa pianta per
l’attenzione ad esso riservata dai poeti, Narcissus poeticus (la pianta dei poeti). Il
mito di narciso ha ispirato artisti in ogni epoca. Sue raffigurazioni sono negli
affreschi di Pompei (Casa di Ottavio Quarto) ed in quelli del Museo Archeologico
Romano; varie opere letterarie si sono ispirate a questo mito (ad es. Shirley, Gide) e
pittori di varia risonanza ne hanno tratto ispirazione, tra cui Caravaggio ed anche
compositori importanti (ad es. la 3° sinfonia di Brahms è detta Narciso). Di questa
specie Flora Europea (4) riconosce 2 sottospecie (razze geografiche) la subsp.
poeticus che ha distribuzione nell’Europa meridionale centro occidentale (ed in
particolare nella regione mediterranea, dalla Spagna alla Francia fino alla Penisola
italiana) e la subsp.radiiflorus che si rinviene invece nella Penisola balcanica e
nell’Europa centro-orientale (dall’Austria, Ungheria fino alla Romania comprendendo
la ex Jugoslavia, Albania e la Grecia). Morfologia - Il narciso è una pianta erbacea
fornita di un bulbo profondo, con foglie radicali, strette e lineari , al centro delle quali
si innalza lo stelo che termina con il bellissimo fiore bianco, grande da 4 a 5 cm di
diametro, solitario, pendente. La corolla al centro porta una piccola corona gialla, a
forma di coppa, con il margine crenulato rosso. Odore soave. Fioritura in primavera,
da aprile a maggio. La pianta è tossica ed i bulbi hanno proprietà vomitive,
probabilmente dovute alla narcisina un alcaloide che agisce sul sistema nervoso e
che provoca infiammazioni allo stomaco. L’impollinazione avviene per mezzo di
insetti. Ecologia - La pianta si rinviene nelle praterie montane e submontane umide,
da circa 1200 fino a 1600 m, appartenenti ai mesobrometi ed arrenatereti. Nel Piano
delle Rocche (Abruzzo aquilano), esteso per circa 50 Km, in un’altitudine media di
59
1300 m, si rinvengono densi popolamenti di Narcissus poeticus. L’Altopiano delle
Rocche è geomorfologicamente il fondo di un antico lago pleistocenico (risalente
all’ultima glaciazione quaternaria, risalente aa 12-13 mila anni). La presenza di
substrato limo argilloso e la falda superficiale determinano il persistere di un più
lungo mantenimento dell’umidità edafica. Questa condizione ecologica rende
possibile pertanto l’esistenza di vegetazioni mesofite (mediamente umide) o anche
in tratti a maggior depressione dove l’acqua permane formando zone umide per i
mesi primaverili la presenza di piante igrofile. Etnobotanica - Galanthus nivalis e le
piante sistematicamente vicine (Narcissus, Leucojum, Amaryllis) contengono la
galantamina. Esse sono usate nella medicina popolare da molto tempo quale
antidoto ai veleni atropinici (prodotti da solanacee tossiche, quali stramonio,
belladonna, giusquiamo,ecc.) (5). Nell’Odissea, Mercurio dà ad Ulisse una pianta
interpretata come Galanthus, per proteggersi dalla bevanda velenosa della maga
Circe, mentre i suoi compagni, non premuniti da questo antidoto, si sono ritrovati
trasformati in porci. Si tratta pertanto di una pianta con alcaloidi atropinici di cui
l’antidoto è una specie con attività agonistica colinergica. La descrizione di Omero
“la radice era nera, i fiori bianchi come il latte” fa orientare proprio verso Galanthus
nivalis. Da 61 anni, a fine maggio, nell’Altopiano delle Rocche (Provincia di L’Aquila)
si festeggia il Narciso con una caratteristica sfilata di carri ricoperti dei fiori di questa
specie, a simboleggiare l’inizio della buona stagione nei paesi di montagna. La
scoperta della galantamina - A partire dagli anni 1950, tenendo presente gli usi
popolari del Galanthus nivalis, in Bulgaria nel 1956 Paskov estrae un alcaloide da
Galanthus nivalis, da cui il nome Nivalina, dato al prodotto. Questo nuovo alcaloide
rapidamente viene utilizzato nelle patologie neurologiche e neuromuscolari. Nel
1990 viene confermato il meccanismo d’azione per inibizione della
acétilcolinesterasi. Numerosi studi e saggi clinici nella cura dell’ Alzheimer
confermano la sua efficacia (6). La galantamina fu scoperta in Galanthus woronowii
Losinsk e prese il suo nome dal genere Galanthus. Attualmente è l’alcaloide delle
Amaryllidaceae utilizzato in medicina occidentale per la cura della malattia
d'Alhzeimer. Essa inibisce l’acetilcolinesterasi e stimola i recettori nicotinici
presinaptici, da cui un aumento del tasso
d’acetilcolina neuromediatore. La galantamina
fu successivamente rinvenuta in varie altre
piante delle Amaryllidacaee, appartenenti ai
generi Leucojum, Narcissus e Lycoris,
Eucharis, a testimoniare che tale alcaloide ha
un’ampia distribuzione in questa famiglia.
Attualmente è stata rinvenuta in varie specie, quali: Galanthus woronowii, G. nivalis,
G. elwesii, G. ikariae; Leucojum aestivum; Narcissus tazetta ssp. tazetta, N.
peudonarcissus & ibridi; Lycoris aurea, L. squamigera; Hippeastrum ibridi; Eucharis
60
amazzonica; Caliphruria subedentata. Un gran numero di alcaloidi, che evidenziano
attività biologiche, inclusa l’inibizione della acetilcolinesterasi ed azione
antineoplastica, cardiovasculare e immunostimulatoria sono state isolate da piante
della famiglia Amaryllidaceae (7). Galanthamine-type isolata da piante dei generi
Crinum, Hymenocallis (Pancratium), Leucojum, Lycoris, Narcissus. Uso in
profumeria. I fiori di narciso sono intensamente profumati e sono utilizzati per
profumi; in modo particolare essi vengono a tal fine coltivati in varie zone delle Alpi
Francesi. (500 kg. di fiori danno 1 kg. al massimo di essenza). Il narciso è
adoperato per ricavare profumi che i francesi denominano absolue, cioè prodotti
difficili da utilizzare allo stato puro (essendo troppo forti) e che invece sono
adoperati in diluizioni, sia sciogliendoli in alcol a 96% (per usare come profumi,
acque di toeletta) o in un supporto oleoso per farne creme cosmetiche, olio per
massaggi o profumi per chi non sopporta l’alcol dei profumi. L’absolue del narciso
(ottenuto per macerazione dei fiori) è utilizzato per fabbricare profumi femminili che
richiamano odori candidi e di leggerezza. Esso inoltre rientra nella elaborazione di
altri profumi fiorali fantasia. Con un litro di essenza absolue si producono circa 3000
litri di profumo di alta qualità. Tale materia è pertanto assai preziosa e costosa. Uso
nella floricoltura - Il narciso è oggetto di coltivazione, anche, nella floricoltura
specializzata per largo commercio del fiore reciso. Nel giardinaggio il Narciso è
oggetto di due tipi colturali: in piena terra od in vaso. In piena terra ci si può servire
di essi per formare bordure di aiuole o cespi distribuiti qua e là nei tappeti erbosi, o
ad ornamento di sottobosco, sul margine delle macchie d'arbusto, sui bordi di laghi
e di ruscelli, ecc.. Prospettive applicative in Italia Centrale - Alcune
amministrazioni pubbliche (Parco Regionale del Sirente-Velino; Comuni
dell’Altopiano delle Rocche, Provincia dell’Aquila, Regione Abruzzo, ecc.) hanno
promosso ricerche finalizzate all’utilizzo del Narciso per cosmesi (saponi e profumi)
dal fiore ed alcaloidi (galantamina ed altri ) dal bulbo. Le ricerche si pongono inoltre
lo scopo di identificare ed isolare le lectine, proteine che hanno la caratteristica di
legarsi specificamente ad oligosaccaridi, formando glicoproteine, che stanno
trovando numerosi campi di applicazione (insetticidi biologici, anti-VIH, OGM) (8).
Bibliografia
1.
Ovidio, Metamorfosi libro III, 339-346; 507-510.
2.
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62
Chemistry of Natural Products
Chimica delle Sostanze Naturali
Química de Productos Naturales
PL 7
Violet-perfuming chemistry: new synthetic ionone odorants with
increased odour potency
Marco Luparia, Valentina Merlini, Giuseppe Zanoni, Giovanni Vidari
Department of Organic Chemistry, University of Pavia, Via Taramelli 10, 27100 Pavia, Italy
With the increasing launch rates of perfumes, there is an increasing demand for new
odorants. A slight structural modification of known odorants can meet this need
because it often results in a significant change of the olfactory properties. The
human olfactory system, being constituted by about 390 of G protein–coupled
receptors [1], uses combinatorial coding schemes to encode odor entities [2].
Consequently, the de novo rational design of more efficient odorants based on the
concept of a molecular complementarity to a receptor surface, as is the case for
most drug–receptor interactions, is considered to be virtually hopeless [3].
Therefore, design of new odorants relies heavily on structural similarities to a
reference compound. Ionones 1 – 3, occurring in the headspace of different flowers
in bloom, constitute one of the most important groups of perfume components, and
are of great economical value in the creation of violet and many other perfume
notes. Different synthetic ionone derivatives, having one or more additional carbon
atoms in the enone chain or attached to the ring, seco-structures or even additional
rings, have been prepared. Considering the whole of odour features of ionone
analogues, we concluded that bulky hydrophobic groups flanking the 3-oxosubstituent play a major role in the interactions of ionones with their odour receptors
(OR). As part of a programme of synthesis of enantiomer-enriched norterpenoid
odorants [4], we have, therefore, initially focalized our attention on the synthesis of
some C-13 alkyl -ionone homologues 4 – 8, aimed at defining the effects of
different substituents on the cyclohexene double bond in modulating the odorant
properties of the parent ionones. In this communication we describe the synthesis of
4 – 8. Our approach was based on a common building block, obtained in 97% ee by
enzymatic kinetic resolution of racemic -cyclogeraniol. The target compounds were
eventually obtained in a very high chemical and stereochemical purity [5]. Their
odour properties were carefully evaluated (P. Kraft, Givaudan Schweiz AG,
Fragrance Research), and the threshold of the ethyl derivative 4, 0.085 ng/l of air,
was more than thirty times lower than natural -ionone 1, 2.7 ng/l of air, and of the
same order of magnitude as γ-ionone 3, 0.07 ng/l of air, which is regarded as the
most powerful and pleasant of natural ionones. In parallel molecular modelling
studies, we have investigated the conformational space of these compounds, as
well as that of parent ionones 1 – 3. Actually, knowledge of the 3D geometry of well
known odorants can provide some insight into the molecular features associated to
63
a given odour, at least to the predominant note(s) at the threshold level, where only
the receptor(s) of highest affinity are presumably elicited [6]. The modelling study
showed a shift of the conformational preference of the butenone chain from a
pseudo-axial orientation, favored in 1, to a pseudo-equatorial one, favored in 2 and
3, suggesting a positive correlation between this steric factor and the increased
olfactory potency of 2 and 3 compared with 1. In contrast, although the hindrance of
the alkyl group at C(5) has no significant effect on the overall conformational
behavior of synthetic 4 – 8, it appears, however, to be significantly related to the
increased odour potency of 4 – 8 with respect to parent ionone 1. Moreover,
conformational analysis of compound 4 suggested that freezing the two carbons
alkyl substiuent at C(5) in a precise orientation, as in a rigid structure, might lead to
more potent odorants. This stimulated the synthesis of three new bicyclic derivatives
of ionones 1 and 3, namely compounds 9 – 11. We were pleased to find that their
13
4
3
5
(S)
2
8
9
1
6
11
12
7
1
5
10
O
2
O
6
9
O
O
3
O
7
O
4
O
8
O
10
O
O
O
11
odour thresholds were in the range of 0.01–0.09 ng/l air, which are the lowest
among all ionone derivatives.
Acknowledgements: the Italian MIUR for partial financial support (PRIN funds).
References
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2.
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Doszczak, L. Kraft, P. et al., Angew. Chem. Int. Ed. 2007, 46, 3367.
64
PL 8
Marine natural products in Guatemala
Cóbar Pinto, Oscar Manuel
Department of Organic Chemistry and Natural Products Research Laboratory; School of Chemical
Sciences, University of San Carlos, Guatemala. e-mail: [email protected]
Marine Natural Products Chemistry is referred to the isolation, structure elucidation,
organic synthesis and biomedical properties of secondary metabolites from marine
origin. The field of marine natural products was born in the 40`s and has been
growing to date with about 20,000 compounds (2,000 bioactive) reported. The
research in Guatemala began in 1998 with the study of the sedative properties of an
Atlantic Ocean sponge Haliclona rubens. The research work is developed in four
areas; isolation and structure elucidation of new compounds, synthetic modifications
of known compounds to increase their biological activity, synthesis of known
compounds to test their biomedical properties and in vitro culture of tunicates to
isolate bioactive compounds.
Isolation and Structure Elucidation of New Compounds.
• Sarcodyctiin tipe diterpenoids (Caribbaedyctins 1 and 2) from a Caribbean
gorgonian octocoral Erithropodium caribaeorum.
O
O
O
O
O
O
Synthetic Modifications of Known Compounds to Increase Their Biological
Activity.
• 6-urocanic esters of Asbestinins.
Synthesis of Known Compounds to Test Their Biomedical Properties.
• 2,2,6,6-tetramethylpiperidin alkaloids (Calyxamines A and B).
• 2,4-diphenyltetrahydrofurans (Calyxolanes A and B).
65
O
O
N
H
Calyxamine A
•
Calyxolane B
Citotoxicity, Antibacterial and Antifungical Properties of Briareins A and B from
the Caribbean Gorgonian Octocoral Briareum asbestinum.
OAc
OAc
OAc
CH2
OAc
AcO
H
AcO
BuO
Cl
HO
Briarein A
CH2
OAc
OAc
H
AcO
O
Cl
HO
Briarein B
O
O
O
In vitro culture of tunicates to isolate bioactive compounds.
CH 3
O
O
O
O
H
S
H
HO
O
NH
OH
OCH 3
N
O
CH 3 O
CH 3
N
H
CH 3
CH 3
HO
ET-743
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Velásquez, P.; Cóbar, O. M. Biological Activity and Main Family of Secundary Metabolites from the
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of San Carlos, Guatemala. 45 pp.
66
O 27
Hemisynthesis of ent-15-oxo-kaur-16-en-19-oic acid from entkaur-16-en-19-oic acid
Alfredo Usubillaga,1 Rosa Aparicio,2 Yndra Cordero3, Agni Saavedra1
1 Univeridad de Los Andes, Instituto de Investigación,Facultad de Farmacia y Bioanálisis, Universidad de
Los Andes (ULA), Mérida, Venezuela 5101, 2 PIQA,Facultad de Ciencias, ULA, Mérida, Venezuela 5101.
Applied Ciences Doctoral Program, Faculty of Engineering, ULA, Mérida, Venezuela 5101.
It has been found that ent-kaurenic acid (1) has diverse biological activities1. On the
other hand 15-oxo-kaur-16-en-19-oic acid (3) produces apoptosis on prostate
cancer cells2. This compound is not found as a natural product and it was obtained
by hemisynthesis from 15α-acetoxy-(-)-kaur-16-en-19-oic acid. This last kaurene
derivative can be isolated from Espeletia schultzii but it is not particularly abundant.
Since ent-kaurenic acid is an abundant component of the resin of most Espeletiinae,
it was considered convenient to obtain 15α-hidroxy-kaur-16-en-19-oic acid (2) from
1 by allylic hydroxylation. Subsequent oxidation would render the desired 15-oxo
compound. Ent-kaurenic acid was obtained from the leaves of Espeletia
semiglobulata3 , 5.0 g of 1 was dissolved in dioxan and treated with SeO2/H2O2 at
room temperature for 4 hr4. Dilution with water and extraction with diethyl ether
yielded the crude product which was submitted to flash chromatography. Elution
with hexane-EtOAc (4:1) rendered 2 (mp 222-224oC, 56% yield) which was
dissolved in acetone and treated with chromic acid (Jones reagent) to yield the
desired product 3. It is considered that this method will provide a sufficient quantity
of 3 for further biological tests.
OH
COOH
1
COOH
2
O
COOH
3
Acknowledgement:The authors are indebted to Fonacit (Project ULA 200700857)
References
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4.
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67
O 28
Natural products and derivatives from Ferulago
campestris [Apiaceae]
Nicoletta Faraone1, Sergio Rosselli1, Antonella Maggio1, Maurizio Bruno1, Vivienne
Spadaro2
Dip. Chimica Organica, Università di Palermo, viale delle Scienze – parco d’Orlens II – 90128 Palermo,
Italy; 2 Dip. Scienze Botaniche, Università di Palermo, via Archirafi 38, 90123 Palermo, Italy;
1
The genus Apiaceae (Umbelliferae) is a rich source of secondary metabolites belonging
to coumarin type. This communication reports the isolation of five natural coumarins and
of an esterified monoterpene from the roots of Ferulago campestris (Besser) Grec.
collected in Sicily. From the petroleum ether extract, the osthol, a previously known
prenylated coumarin was obtained1. Furthermore, three abundant coumarins, differing for
the esters moiety, were isolated and identified. In these compounds a six endo-trig
cyclization involving the prenyl chain occurred and a pyrane ring fused with the coumarin
nucleus was formed. These cyclized coumarin having a senecioyl, angeloyl and benzoyl
ester group have been identified as the previously known grandivittin, agasyllin and
aegelinol benzoate respectively2. Moreover, the angeloyl ferulol3, a monoterpene
carrying an angelate ester group, was also isolated from the petroleum ether extract. The
investigation of dichloromethane extract resulted in the isolation of felamidin4, an isomer
of aegelinol benzoate, in which the prenyl chain gave a five exo-trig cyclization resulting
in a coumarin with a tetrahydrofurane fused ring.
CHO
O
H3CO
O
O
O
O
O
Angeloyl ferulol
Osthol
O
O
O
O
O
Felamidin
O
O
Grandivittin
O
O
O
O
O
O
O
Agasyllin
O
O
O
O
Aegelinol benzoate
A set of ester derivatives of the base-catalysed hydrolysis product of the grandivittin,
agasyllin and aegelinol benzoate has been synthetized. These derivatives will be tested
for their cytotoxic properties.
References
1.
Estévez- Braun, A., Gonzàlez, A. G. (1997) Nat. Prod. Rep., 14, 465-475
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69
O 29
Composición química y actividad antibacteriana del Schinus
molle
María Gualtieri1, Maria Luisa Di Bernardo2, Maria Ysabel García2, Nurby Ríos1, Ciro
Villalobos1, Yilen Fung1, Néstor Uscátegui2, Frank Sosa1, Maria del Carmen
Araque3, Silvio Barreto3
Laboratorio de Investigación de Medicamentos Orgánicos. 2GITAEF-Grupo de Investigaciones en
Toxicología Analítica y Estudios Farmacológicos. 3Laboratorio de Microbiología Molecular. Facultad de
Farmacia y Bioanálisis, Universidad de los Andes. Mérida-Venezuela.5101. [email protected].
1
El presente trabajo muestra un estudio químico y biológico del Schinus molle L.
(Anacardiaceae), conocido comúnmente como el árbol de pimienta o Pirú. Se
encuentra ampliamente distribuido en toda la América, desde las tierras bajas,
hasta alturas de 3600-3900 m.s.n.m. en las regiones andinas. También es cultivado
en la zona del Mediterráneo en el sur de Europa [1]. El material vegetal fue
recolectado en la localidad de Selenunte-Sicilia, Italia, a 40 m.s.n.m. e identificado
bajo el vaucher Nº 05, en el Herbario MERF de la Facultad de Farmacia y
Bioanálisis, de la Universidad de Los Andes, Venezuela. Las partes aéreas fueron
desecadas a temperatura ambiente, se sometieron a extracción con etanol con un
rendimiento del 32.42 %. Las semillas se extrajeron con hexano con un rendimiento
del 5.63 % [2]. El estudio químico se baso en la determinación de componentes
con bondades terapéuticas, por Espectroscopia de Absorción Ultravioleta,
realizando un barrido espectrofotométrico de 225-350 nm. Los resultados obtenidos
evidencian la presencia de compuestos con actividad narcótica, antihistamínica,
anticonvulsivante, antimicrobiana, diurética y efecto insecticida [3]. La actividad
antimicrobiana del extracto etanólico y hexanoico fue determinada por el método de
difusión en agar contra bacterias Gram positivas y Gram negativas [4]. Los
resultados mostraron que tanto el extracto etanólico como el aceite de las semillas
presentan actividad únicamente contra bacterias Gram positivas, mostrando valores
de CIM para Staphylococcus aureus y Enterococcus faecalis (16μg/mL).
Agradecemos: A Lorenzo Giancontieri, por participar en la recolección del material vegetal.
Referencias
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Machado et al. 2007. Prog Neuropsychopharmacology Biol Psychiatry, 31: 421-428.
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70
O 30
Phytochemical study of Commiphora erythraea
Maria Carla Marcotullio, Claudio Santi, Gildas Norbert Oball-Mond Mwankie,
Massimo Curini
Dipartimento di Chimica e Tecnologia del Farmaco-Sez. Chimica Organica, via del Liceo 1, 06123,
Perugia, Italy.
Commiphora species (Burseraceae) are small trees or shrubs that grow wild in
Somalia and Ethiopia and produce resinous exudates that constitute myrrh. [1] C.
myrrha is the chief source of myrrh today, but C. erythrea was the principal source
of ancient and classical time. Commiphora erythrea resin is traditionally used on
livestock against ticks and as antimicrobial.
While a great number of studies have been published on C. myrrha, there are only
few on C. erythrea. Most of these studies are on the composition of the essential oil
(opopanax), that is rich in mono- and sesquiterpenes. [2] The hexane extract of C.
erythrea showed the presence of three furanosesquiterpenes (1, 2 and 3). [3] The
phytochemical study we undertook on the MeOH extract of the resin led to the
isolation of several sesquiterpenes some of which, such as alismol 4, [4] have not
been previously isolated from Commiphora spp.
O
O
1
RO
H
O
O
2 R=Ac
3 R=OMe
HO
H
4
The biological activities of C. erythrea have been studied.
References
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71
O 31
Un biflavonoide aislado de los tallos de Bauhinia cumanensis
H.B.K.
Sosa-Moreno, Adakarleny y Rosquete-Porcar, Carmelo
Laboratorio de Productos Naturales. Departamento de Química. Facultad de Ciencias. Universidad de
Los Andes. Mérida 5101. Venezuela.
El género Bauhinia (Caesalpinaceae) se encuentra distribuido mundialmente en las
zonas templadas y tropicales1. Algunas de sus especies son empleadas en la
medicina popular para el tratamiento de diversas enfermedades: Bauhinia forficata
presenta actividad hipoglicemiante2; Bauhinia malabarica es activa contra
Plasmodium falciparum3; Bauhinia variegata tiene efecto hepatoprotector en ratas
diabéticas4; la infusión de los tallos de la especie Bauhinia cumanensis es utilizada
como reconstituyente físico y potenciador sexual5. Del extracto etanólico de los
tallos de Bauhinia cumanesis H.B.K, recolectados en Mucujepe en el camino
Matadero-La Tampa, Estado Mérida, Venezuela, se han aislado varios compuestos
como: ent-kauran-16 -ol (I), (-)-4´-hidroxi-7-metoxiflavano (II), entre otros5, en este
trabajo reportamos el aislamiento de un biflavonoide (III)
OH
OH
H3CO
O
(I)
(II)
OH
OH O
HO
O
HO
OH O
O
OCH3
(III)
Referencias
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72
O 32
Chemical investigation of red brazilian propolis
Cinzia Lotti1; Anna Lisa Piccinelli1; Osmany Cuesta Rubio2; Francesco De Simone1;
Luca Rastrelli1
Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Università degli Studi di Salerno, Via Ponte Don Melillo, 84084
Fisciano (SA), Italy; 2 IFAL (Istituto de Farmacia y Alimentos) Universidad de La Habana, Cuba
1
Propolis is a mixture of various amounts of beeswax and resins collected by the
honeybee from plants, particularly from flowers and leaf buds and this material is
thought to serve as a defense substance for bee's hives [1]. Recent literature
reported some biological functionalities of propolis, such as antibacterial, antiviral,
fungicidal, anti-inflammatory, and anti-carcinogenic activities [2,3]. The constituent
of propolis varies with different kinds of plants collected by bees, in particular
propolis originating from temperate zones possesses a similar chemical
composition, the main constituents being phenolic compounds (flavonoids, cinnamic
acids, and derivatives) [4,5] while propolis from tropical zones contains different
classes of natural products, among them polyprenylated benzophenones [6,7]. This
research work is part of a study on tropical zones propolis began with the study of
Cuban propolis. The methanolic exstract of Brazilian (Alagoas) red propolis samples
were analyzed by 1D and 2D-NMR (nuclear magnetic resonance), HPLC-PDA (high
performance liquid chromatography with photodiode array detector), and
HPLCESI/MS (high performance liquid chromatography with electrospray ionization
mass spectrometer) techniques. The structures of new compounds were elucidated
by analysis of their spectroscopic data, while known compounds were identified on
the data comparison with data in literatures. Chemical investigation on tropical bee
glu revelated that in a red-type Brazilian propolis sample has led to the isolation of
16 flavonoids (3 isoflavones, including a new 7,3’-dihydroxy-5’methoxyisoflavon, 4
isoflavans, and 6 pterocarpans, 2 flavanones and 1 chalcon) some of which
compounds already isolated in Cuban and Brazilian red propolis [8]; then
polyprenylated benzophenones especially a mixture of guttiferone E/xanthochymol
and other analogues; purple pigment, Retusapurpurin A [9] d other minority
pigments. Furthermore was made a chromatographic comparison to the red
Brazilian propolis extract and its resin; this comparison has revealed the presence
in the resin only of the flavonoidic portion indicating a different botanical original of
that red propolis sample. Aim of this study was also to optimize the extraction
process of red Brazilian propolis. The objective of research was to obtain an extract
with the highest content of compounds and the lowest content of inert substances
(waxes).
73
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74
O 33
Estudio de los componentes volátiles de las hojas de Ambrosia
cumanensis H.B.K. que crece en el Estado Mérida. Venezuela
Instituto de Investigaciones. Facultad de Farmacia y Bioanálisis. Universidad de Los Andes. Mérida,
Venezuela. Urb. Campo de Oro.
Ambrosia cumanenses H.B.K. (Altamisa, artemisa) pertenece a la familia de las
Asteraceae. La especie es utilizada contra la fiebre, como antiespasmódico,
diurética, antirreumática, antihelmíntica y antiséptica. En el presente trabajo se
estudia los componentes volátiles de las hojas frescas de esta planta. Estas fueron
sometidas a extracción por arrastre con vapor de agua utilizando una trampa de
Clevenger. Los componentes del aceite fueron separados e identificados por GCMS, empleando un equipo Hewlett Packard 5973 GC/MS a 70 eV, equipado con un
inyector automático, utilizando una columna capilar HP-5MS (30 m, 0.25 mm, 0.25
µm). Se empleó una temperatura inicial de 60 ºC (1 min) y luego se calentó a razón
de 4 °C/min hasta 260 ºC (20 min). Se inyectó una muestra de 1.0 mL de una
solución al 2% del aceite esencial en n-heptane con reparto de 100:1. Se utilizó una
temperatura de inyección de 200 ºC. La identificación de los componentes de los
aceites se realizó mediante comparación computarizada de los espectros obtenidos
con los espectros de una Librería Wiley (6ta Edición) y calculo de los índices de
Kováts. Se identificaron 14 componentes, los mayoritarios resultaron ser: canfor
(10.6 %), gamma-curcumeno (21.2 %), biciclogermacreno (21.7%), beta-selineno
(31.9%).
Referencias
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75
O 34
Studio chimico-analitico di una specie vegetale della selva
amazzonica: il Croton baillonianus (Euphorbiaceae)
Benavides A.1, Napolitano A.1, Bassarello C.1, Carbone V.2, Fuertes C.3, Piacente
S.1, Pizza C.1
Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Università di Salerno, Via Ponte Don Melillo, 84084 Fisciano
(SA), Italia; 2Centro di Spettrometria di Massa Proteomica e Biomolecolare, Istituto di Scienze
dell'Alimentazione del Consiglio Nazionale delle Ricerche, Via Roma 52 A-C, 83100 Avellino, Italy;
3Facultad de Farmacia y Bioquimica, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Peru
1
Ampiamente diffuso nelle regioni tropicali e subtropicali di entrambi gli emisferi, il
genere Croton (Euphorbiaceae) comprende all’incirca 1300 specie. In ragione di
siffatta distribuzione ed ampiezza si comprende l’elevata diversità chimica
attribuibile alle piante del genere e responsabile del loro largo impiego, in qualità di
piante medicinali, in Africa, in Asia e soprattutto in Sud America. In tale contesto si
inserisce il Croton baillonianus (Aubl.), specie endemica dell’Amazzonia Peruviana
e conosciuta dagli indigeni con il nome comune di “mosquero”. L’infuso ottenuto
dalle sue foglie è a pieno titolo uno tra i rimedi più utilizzati nella medicina
tradizionale Amazzonica per la sua azione antisettica, cicatrizzante ed antiulcera,
nonché per il trattamento degli stati infiammatori e del cancro [1].
In considerazione delle interessanti attività biologiche (antibatterica ed antiossidante
[2], antivirale [3] ed antinfiammatoria [4]) attribuite agli estratti e/o ai singoli composti
isolati dalle piante appartenenti al genere, si è proceduto allo studio chimicoanalitico degli estratti metanolico e cloroformico delle foglie di C. baillonianus. Allo
scopo di ottenere un quadro compositivo che rendesse conto anche dei composti
minoritari presenti nella pianta, si è deciso di seguire un approccio analitico che,
accanto al più tradizionale metodo fitochimico, prevedesse il ricorso ad esperimenti
NMR mono- e bidimensionali ed a metodiche spettrometriche, quali la cromatografia
liquida accoppiata alla spettrometria di massa convenzionale e multicollisionale
(HPLC/ESI-ITMSn) e la gas-cromatografia accoppiata alla spettrometria di massa. In
accordo con quanto riportato per altre specie appartenenti al genere, tale studio ha
permesso di caratterizzare la pianta in esame per la presenza di un numero elevato
di alcaloidi, per la maggior parte derivanti dalla via biosintetica della L-tirosina,
accanto ad un certo numero di flavonoidi bioattivi.
Riferimenti
1.
Soukup, J. (1987), Vocabulario de los nombres vulgares de la Flora peruana y catalogo de los
generos. Editorial Salesiana. Lima.
2.
Desmarchelier, C. et al. (1997), J. Ethnopharm., 58, 103-108
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Ubillas, R. (1994), Phytomedicine, 1, 77–106
4.
Chen, Z. et al. (1994), Plant. Med., 60, 541–545
76
O 35
Identification of Amaryllidaceae alkaloids in Pancratium
canariense by GC-MS
L. Torras, I. Berkov, J. Bastida, C. Codina, F. Viladomat
Departament de Productes Naturals, Facultat de Farmàcia, Universitat de Barcelona, Avda. Diagonal
643, 08028, Barcelona, Catalunya, Espanya
Amarylliaceae plants are known to contain several bioactive characteristic
compounds known as Amaryllidaceae alkaloids. Some of them display
acetylcholinestherase inhibition activity, such as galanthamine, used in the
treatment of Alzheimer’s disease as an approved drug under the formal name of
Reminyl®. Bulb methanol extract of Pancratium canariense (Amaryllidaceae)
inhibited acetylcholinesterase at a concentration of 100 µg/mL (54.38 ± 3,95 %),
indicating the presence of acetylcholinesterase inhibitors. Classical phytochemical
isolation and structural elucidation is time and solvent consuming, but analysis of
plant metabolites by GC-MS has proved to be fast and reliable [1].
Bulbs, leaves and fruits from Pancratium canariense were studied for their
composition of Amaryllidaceae alkaloids by GC-MS techniques. Plant material was
collected in postflowering season in “Barranco del Sao” (Agaete, NW Gran Canaria
island), and extracted with methanol. Alkaloid fractions were obtained after
dissolving the dry methanol extract in 2% H2SO4. The extract was washed with
diethyl ether and basified with 25% ammonia to pH 9-10, and the alkaloids were
extracted with ethyl acetate. The ethyl acetate extract was evaporated to obtain a
dry extract, which was dissolved in methanol for GC-MS analysis.
Alkaloids were identified by comparing their GC-MS spectra and Kovats retention
index (RI) with those of standard reference spectra from the NIST 05 database
(NIST Mass Spectral Database, PC-Version 5.0 – 2005, National Institute of
Standarization and Technology, Gaithersburg, MD), or with those of authentic
compounds previously isolated and identified by other spectrometric methods
(NMR, UV, CD, MS) by our group. The RI of compounds was measured with a
standard n-hydrocarbon calibration mixture (C9-C36) using AMDIS software.
GC-MS analyses of these extracts resulted in the detection of 30 Amaryllidaceae
alkaloids. The alkaloid pattern of bulbs was dominated by lycorine (51% TIC) and
haemanthamine (16%) type alkaloids, while the alkaloid pattern of leaves was
dominated by haemanthamine (65%) and lycorine (15%) type compounds. The
alkaloid pattern of fruits was dominated by lycorine (37%), galanthamine (29%) and
haemanthamine (27%) type compounds.
References
77
1.
Lisec, J. et al. (2006), Nat. Protocols, 1, 387.
78
O 36
Nuovi metaboliti aromatici ad attività antiossidante da Carex
distachya
Severina Pacifico1, Antonella Maggio2, Maurizio Bruno2
Seconda Università degli Studi di Napoli, Dip. di Scienze della Vita, via Vivaldi 43, I-81100, Caserta (IT);
Università degli Studi di Palermo, Dip. di Chimica Organica, viale delle Scienze – Parco d’Orleans II, I90128 Palermo (IT).
1
2
La cosmopolita famiglia delle Cyperaceae comprende circa 4000 specie, in gran
parte legate agli ambienti umidi ed acquitrinosi, distinte in ben tre sottofamiglie e
settanta generi. Di essa diversi esemplari hanno trovato e trovano ampio impiego
nelle medicine popolari africana, sudamericana ed europea per la cura dei più
disparati disordini e patologie [1,2]. Carex distachya Desf., appartenente alla
sottofamiglia delle Caricoideae, è una specie largamente presente nella macchia
Mediterranea. L’analisi fitochimica di C. distachya, condotta mediante ausilio di
diverse tecniche cromatografiche, ha portato all’isolamento di cinquantasette
metaboliti secondari, trentaquattro dei quali sono stati isolati e caratterizzati per la
prima volta [3-9]. La delucidazione delle caratteristiche strutturali delle molecole,
realizzata mediante uso di tecniche spettrometriche, spettroscopiche e di molecular
modelling, definisce C. distachya come un organismo metabolicamente complesso
ed eterogeneo. L’eterogeneità della pianta si esplica nella diversa, e in alcuni casi
peculiare caratterizzazione molecolare delle sostanze organiche naturali da essa
prodotte e in una loro definita ripartizione tra le componenti epigee ed ipogee. La
valutazione della capacità antiossidativa delle molecole isolate, condotta ricorrendo
a metodi distinti suggerisce il potenziale ruolo di siffatte molecole quali fattori
protettivi nel debellamento dello stress ossidativo, causa, nel mondo odierno, della
senescenza precoce e dell’insorgenza di numerose patologie cronico-degenerative
[10]. L’efficacia antiossidante è risultata fortemente dipendente dalle caratteristiche
molecolari dei metaboliti ed i dati ottenuti consentono di continuare tale ricerca
sottoponendo le stesse molecole a saggi su sistemi cellulari sottoposti a stress
ossidativo.
References
1.
Ngo Bum, E. et al. (1996) J. Ethnopharmacol., 54, 103.
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Fiorentino, A. et al. (2007) Bioorg. Med. Chem. Lett., 17, 636.
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Fiorentino, A. et al. (2008) Tetrahedron, 64, 778.
Leborgne, L. et al. (2002) Arch. Mal. Coeur Vaiss, 95, 805.
80
O 37
Synthesis of glucosyl esters of kaurenic acid, 15-oxo-kaur-16en-19-oic acid, and 15α-acetoxi-kaur-16-en-19-oic acid
Alfredo Usubillaga,1 Rosa Aparicio,2 Yndra Cordero3, Agni Saavedra1
1 Univeridad de Los Andes, Instituto de Investigación,Facultad de Farmacia y Bioanálisis, Universidad de
Los Andes (ULA), Mérida, Venezuela 5101, 2 PIQA,Facultad de Ciencias, ULA, Mérida, Venezuela 5101.
Applied Ciences Doctoral Program, Faculty of Engineering, ULA, Mérida, Venezuela 5101.
It has been found that ent-kaurenic acid (1a) has diverse biological activities1. On the
other hand 15-oxo-kaur-16-en-19-oic acid (2a) produces apoptosis on prostate cancer
cells2. Since 1a, 2a, and 3a are insoluble in water, in order to improve its solubility,
carbohydrate esters were prepared by reaction of silver kaurenates with 2,3,4,6-tetra-Oacetyl-bromo-D-glucopyranose (A-Bromide). An alternative method to obtain
carbohydrate esters is the Mitsunobu3 reaction but the carboxylic OH in ent-kaurenic
acids is very hindered which leads to very low yields. Therefore glucosyl esters of 1a, 2a,
and 15α-acetoxi-kaur-16-en-19-oic acid (3a) were prepared shaking for 72 hours the
silver salts with A bromide in the dark, in dry benzene solution. The reaction products
were filtered, the filtrates were evaporated to dryness under reduced pressure and the
products were purified over silicagel using hexane-AcOEt or hexane-acetone mixtures. If
the presence of water is avoided 30% yields of the protected carbohydrate esters 1b,
2b, and 3b could be obtained. Mild hydrolysis with NH3 in anhydrous MeOH rendered the
free glucose esters 1c, 2c, and 3c. It has been found that 1a is effective in vivo against
murine melanoma B16F1 in C57BL16 mice at 1.0 mg/Kg4 Biological test with 1c showed
that it increased mice survival time in about 50%. No biological tests with 2c and 3c have
yet been performed.
HOH2C
AcOH2C O
AcO
AcO
A AcO
HO
HO
B
O
HO
OAc
O
C O
O R
1a R=H
1b R=A
1c R=B
C O
C O
O R
O R
2a R=H
2b R=A
2c R=B
3a R=H
3b R=A
3c R=B
Acknowledgement:The authors are indebted to Fonacit (Project ULA 200700857)
References
1.
Ghisalberti, E.L.(1997) Fitoterapia LXVIII (4), 303-325.
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Ruiz, Y., et al (2008) Phytochemistry 69, 432-438.
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Sosa-Sequera, M., et al (1998). Comunic. Cien. Tecn.(Arg.) 3129-32.
82
Biotechnology
Biotecnologia
Biotecnología
PL 9
Supercritical Fluid Extraction: application to herbal medicine
Ernesto Reverchon
Università di Salerno, Dipartimento di Ingegneria Chimica e Alimentare, Via Ponte Don Melillo 1, 84084
Fisciano, Salerno
Herbs and plants contain many compounds that show therapeutic activities. These
active principles are traditionally extracted using liquid solvents based techniques;
these processes are relatively simple to be implemented; but, suffer several
limitations. They are often non selective towards the compounds to be extracted;
therefore, several unwanted compounds are as a rule co-extracted. The use of
organic solvents pollutes the extracts and contributes to the pollution of the
extraction residues and of the environment. In some cases process temperatures
and interactions with the organic solvents induce the degradation of the active
principles.
A “green” alternative to the use of organic solvents is the supercritical fluids
extraction (SFE), in which mainly supercritical carbon dioxide (SC-CO2) is used. A
supercritical fluid is a compound used at pressures and temperatures above its
critical values. In the case of SC-CO2 Tc = 31.1°C and pc = 73.8 bar; these are
process conditions that can be readily obtained. Moreover, SC-CO2 is readily
available, cheap and its use in SFE does not contribute to pollution.
Why and when a supercritical fluid can behave as a solvent in an extraction
process? Above the supercritical conditions the supercritical fluid can assume
densities varying from about 0.2 to about 0.95 g/cm3; since its solvent power is
connected to density, it means that it can vary in a wide range of values, miming the
solvent power of several organic solvents, principally the ones that show affinity with
non-polar or moderately polar solutes. Moreover, the supercritical solvent can be
immediately and completely released from the extracts by reducing the pressure
down to ordinary gaseous conditions. A supercritical fluid retains some properties of
gases; for example can diffuse in solid matrices at a rate that is about two orders of
magnitude higher than that of liquids. In conclusion, the general advantages of
supercritical fluids extraction are tunable selectivity during extraction, very fast
processing and the absence of pollution.
For all these reasons (mainly) SC-CO2 has been applied to analytical, laboratory
and industrial scale, to produce extracts from vegetables, trying to improve those
obtainable using traditional processes, in food, nutraceutical and pharmaceutical
fields. Some successes of this technology are coffee decaffeination and herbal
pesticides separation (for example pyrethrins and nimbin extraction), hops
81
extraction, fragrance isolation and pharmaceutical compounds isolation (for example
artemisinin).
Many applications of SFE are possible in traditional (herbal) medicine. Only to cite
traditional Chinese medicine, almost 2000 plant materials are officially listed in this
pharmacopoeia. Since at present, only general rules have been given for SFE, each
extract has to be studied and optimized singularly. It given an idea of the amount of
work that can still be performed.
One of the limitations of the use of SC-CO2, is that it is poor solvent for highly polar
compounds that are frequently the active ingredients in herbal medicine. To
overcome this limitation, some authors tried to modify the solvent power of SC-CO2
adding small percentages of other solvents. But, operating in this manner, organic
solvents will be again present in the extracts. Therefore, a new approach has been
proposed that is demonstrating more effective: the supercritical antisolvent
extraction (SAE). In this process the primary extract is obtained using a
conventional organic solvent; then, the formed solution is contacted with SC-CO2 in
a spray tower. All the liquid solvent is immediately extracted and the solute
precipitates into the tower as a solvent free powder. An examples of the possible
applications of SAE, that has been already studied, is the separation of
phospholipids from soybean oil.
References
Reverchon, E.; De Marco, I., Advancements in supercritical fluids extraction of natural matter, J.
Supercrit. Fluids, 38, 146-166 (2006).
82
PL 10
Chemistry and biotechnology:
etoposide-type anticancer drugs
novel
routes
to
Bruno Botta
Dipartimento di Chimica e Tecnologie del Farmaco, Sapienza Università di Roma, P.le A. Moro 5, 00185
Roma (Italy); e-mail address: [email protected]
A purified peroxidase from plant cell cultures1 of Cassia didymobotrya was shown to
catalyze a peculiar dehydrogenation of dibenzylbutanolide 1 - postulated intermediate
in the biosynthesis of podophyllotoxin - converting it to the corresponding benzylidenebenzoyl-γ-butyrolactone (2, 60% yield), following the classical kinetics of peroxidases.
OH
OH
O
PTase
O
OH
O
O
O
O
O
MeO
O
OMe
MeO
O
3
OMe
Pero xidase
O
O
O
O
MeO
OMe
OH
OH
1
2
The recent identification2 of genes encoding a novel family of soluble aromatic
prenyltransferases (PTase) from Streptomyces sp. and the 3D structural
characterization of one of these proteins prompted us to prenylate precursor 1
selectively at the free phenolic hydroxyl group using a novel PTase isolated from
Streptomyces sp., to yield the O-prenylated derivative 3. Besides their notable
physiological role in the biosynthesis of aminocoumarin antibiotics, PTases are
physiologically involved in highly specific prenyl substitutions; nevertheless, at least
one of them has been shown to exhibit a relaxed substrate specificity. Our current
studies3−6 are suggesting that rational design of the active site followed by sitedirected mutagenesis can be used to adjust the substrate specificity of these
enzymes and expand the scope of prenylation for the production of novel prenylated
flavonoids4 to the benefit of potential therapeutic applications of these compounds in
cancer chemotherapy.
References
1.
Vitali, B. Botta, G. Delle Monache, S. Zappitelli, P. Ricciardi, S. Melino, R. Petruzzelli, B. Giardina
(1998) Biochem. J. 331, 513-519.
2.
T. Kuzuyama, et al. (2005) Nature 435/16, 983-987; F. Pojer, et al. (2003) Proc. Natl. Acad. Sci.
100, 2316-2312; P. Kohel (2005) Nature Chem. Biol. 1, 71-72.
3.
Botta, G. Delle Monache, P. Menendez, A. Boffi (2005) Trends Pharmacol. Sci. 26, 606-608.
4.
Botta, A. Vitali, P. Menendez, D. Misiti, G. Delle Monache (2005) Curr. Med. Chem. 12, 713-739.
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84
O 38
Evaluación de la actividad antifúngica de Dalgerbia granadillo
Pittier para el diseño asistido por química computacional de
preservantes para madera
Martínez-Sotres M.C. y López-Albarrán P.
Facultad de Inganiería en Tecnología de la Madera, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo,
Morelia, Michoacán, 58000, México. Tel.: 52 (443) 3223500 Ext. 3056 and 3057, Fax: 52 (443) 3260379,
E-mail: [email protected].
Para el diseño molecular de preservantes antifúngicos para maderas preciosas y no
preciosas, se desarrolló un novedoso escenario en el cual se propone la
concatenación de los conocimientos sobre composición química de la Dalgerbia
granadillo Pittier (conocida como “zangalicua”), con la caracterización de sus
extractos que inhiben el desarrollo del hongo Trametes versicolor y la simulación
químico-computacional de compuestos diseñados a partir de los compuestos
caracterizados, con las enzimas de dicho hongo asociadas a la degradación de
tejidos lignocelulósicos. Para ello se utilizo el concepto de anclaje molecular
(docking) mediante el software AutoDock 4.0.1. Con lo anterior se diseñó la
modificación molecular adecuada a las estructuras de los compuestos
caracterizados en los extractos de la zangalicua, que generen preservantes
mejorados pero que sean amigables con el medio ambiente. Más aun, el presente
trabajo pretende establecer la metodología que aproveche la inherente capacidad
antifúngica de la zangalicua sin necesidad de que este árbol sea fuente de los
extractos a posteriori, ya que se pretende innovar moléculas en un marco
fisicoquímico-orgánico que sería el fundamento de las tecnologías de preservación
venideras.
Agradecimientos: los autores reconocen el apoyo de la Universidad Michoacana de San Nicolas de
Hidalgo y del Programa al Mejoramiento del Profesorado (PROMEP-SEP).
85
Conclusion
Conclusione
Conclucion
Phytomedicine: to be or not to be?
Núñez-Sellés Alberto J.
Centro de Química Farmacéutica, La Habana, Cuba ([email protected])
Around 80 % of the world population, mainly in the non-developed countries, has in
natural products the first option for medication in Primary Health Care. Sales of
natural products as phytodrugs, food supplements or herbal remedies are worth 100
billion US dollars, with annual increases around 15 % in the United States, Europe
and Japan leading to the widespread use of Phytomedicine. These markets are
becoming more “green” and the population of developed countries is increasing their
concern about health prevention through the consumption of natural products,
vitamins, minerals, etc. and new terms have invaded journals and newspapers as
nutraceuticals, functional foods or cosmeceuticals. The “wealth industry” has
become a competitive field against the “health industry”. Natural products as
disease remedies have an history of near 5 thousand years (Mesopotamy, India,
China, Greece) while isolated pure chemicals or synthetic drugs around 100 years
since Bayer synthesized acetylsalicylic acid (Aspirin) at the end of XIX Century.
However, empiricism says that pure compounds are the only possible
pharmaceuticals (with few exceptions), and natural products are commonly rejected
as drugs by regulatory health agencies because, most of the times, they are
presented as crude extract mixtures with doubts about the reproducibility and
standard manufacture. The question then is: Are natural health products used
because “monoceuticals” are unavailable, or are many of these “natureceuticals”
effective and reproducible? We think that both unavailability and effectiveness are
guiding the increasing use of natural health products. Therefore, the question is
quite simple for the future of Phytomedicine: To be or not to be? We think that it will
be more and more “To be” including also the most developed countries.
Posters
P 001
Marine algae as a source of compounds for bilharzia control
Maricela Adrian-Romero1,2 , Gerald Blunden2, Asmita V. Patel2, David Wright2
Faculty of Pharmacy and Bioanalysis, University of los Andes, Merida ZP-5101-A, Venezuela.
[email protected]; 2 School of Pharmacy and Biomedical Sciences, University of Portsmouth, Portsmouth
PO1 2DT, UK
1
Bilharzia, a disease caused by Schistosoma species, is a parasitic disease affecting
millions of people worldwide. The parasites’ larvae develop in several snail species
of the genus Biomphalaria. Thus treatment with molluscicides of water masses that
serve as transmission sites is an important procedure in the control of the disease.
Demand for cheap molluscicides has led to the investigation of natural sources; in
this communication, we report on the molluscicidal activity of sixty marine algal
species against B. glabrata.
After collection, the algae were dried at 60oC, powdered, extracted with methanol,
and the extracts adjusted to concentrations of 500 ppm. These were then
concentrated to dryness and the residues extracted with volumes of water equal to
those of the methanol removed. These aqueous fractions of the 500 ppm dry
methanol extracts were used in the tests.
Of the species tested, only Fucus serratus, F. vesiculosus, Pelvetia
canaliculata, Ascophyllum nodosum, Halidrys siliquosa, Bifurcaria bifurcata, Dictyota
dichotoma and Halopithys incurva showed significant molluscicidal activity.
Treatment with polyvinylpolypyrrolidone either removed or drastically reduced the
activity of the extracts of F. serratus, F. vesiculosus, P. canaliculata, A. nodosum,
Halidrys siliquosa and Halopithys incurva, which suggested that the active
compounds were polyphenolic. Dialysis of the active extracts against distilled
water separated them into high and low molecular weight fractions. In the two
Fucus species, P. canaliculata and A. nodosum, the activity resided in the high
molecular weight fraction, whereas with the other species, the activity was found
in the low molecular weight fraction. 1H NMR spectroscopic examination of the
active extracts confirmed that the molluscicidal components of the extracts of the
Fucus species, P. canaliculata and A. nodosum were high molecular weight
polyphenols.
91
P 002
Taxonomic study and phytochemical aspects of the genus
Machaerium in Venezuela
Pablo Meléndez and Maricela Adrian-Romero
Department of Pharmacognosy and Organic Drugs, Faculty of Pharmacy and Bioanalysis, University of
Los Andes, ZP-5101-A, Mérida, Venezuela. e-mail: [email protected]
A taxonomic review of the species confined of the genus Machaerium Persoon
(Fabaceae o Leguminosae - Papilionoideae) located in Venezuela is presented. A
research on phytochemistry and/or products of the secondary metabolism found in
most of the species of this genus was carried out in order to clarify the knowledge of
this taxon regarding nomenclature and identification problems that have existed
throughout the history of this taxon, giving details chemotaxonomic and bioactive
compounds, thereby contributing to the chemodiversity underlying many of the
neotropical plants. Following the classic observation study of morphological
characters in the exsiccata, forty species were identified, distributed and collected in
almost all biomes present in Venezuelan territory at altitudes ranging from 0-2000 m
over the sea level. A taxa identification key is presented based on the main pattern
of leaf morphology and the morphological description of each species.
M. capote, M. isadelphum, M. milleflorum and M. seemannii are consolidated as
new records for the Venezuelan flora. The endemicity of: M. cultratum, M. dubium,
M. grandifolium, M. guaremalense, M. orthocarpum, M. striatum, M. tovarense and
M. truxillense, is reaffirmed. The chemical research that, in some species of
Machaerium suggests biomedical or pharmacological application, has determined:
neoflavonoids, isoflavones, isoflavonoids, pterocarpans, triterpenes, isoflavins,
phenylcoumarins, quinoids, cinnamylphenoles, lectins, procyanidins, benzopyrans
and N-methylprolines. This study represents a contribution for the flora of the
Neotropico, with basic information on the phytodiversity of the country.
92
P 003
Antioxidant activity of Ilex paraguariensis extracts and isolated
compounds, during commercial process
Sebastian Turner1, Graciela Ferraro1,2, Claudia Anesini1, Rosana Filip2
1 IQUIMEFA-UBA-CONICET; 2 Pharmacognosy Unit, Faculty of Pharmacy and Biochemistry UBA, Junin
956 2nd floor, Buenos Aires, Argentina. [email protected]
Ilex paraguariensis is used in north-eastern Argentina, southern Brazil and eastern
Paraguay to prepare a tea-like beverage named “Mate” consumed by 30 % of
population at a rate of 1 L/day. In the industrial process, the fresh plant material is
dried over fire, a roasting named “zapecado”, again “dried”, milled and “stored” for
nearly one year to give the commercial product. The aim of this work was to analyze
the variation in chemical composition (cafeoylderivatives, methylxantines and
flavonoids) [1] and the antioxidant properties of aqueous extract from l.
paraguariensis during industrial process: Green leaf (G), Zapecado (ZP), Dried (D),
Stored (S) and of the majority compounds. The antioxidant activity: catalase (CAT),
superoxide dismutase (SOD) and peroxidase (PER) activities were determined by
spectrophotometry assays [2]. Phytochemical composition was studied by HPLC.
Results: Mean±SEM of three experiments made by triplicate. Phytochemical
composition (g % of lyophilized): were found only significantly differences in
caffeine (methylxantine) and rutin (flavonoid): Caffeine: G: 2.8 ± 0.092; ZP: 4.1 ±
0.11; D: 3.8 ± 0.08; S: 4.0 ± 0.057; Rutin: G: 3 ± 0.15; ZP: 3.5 ± 0.028;D: 3.7 ±
0.08; S: 3.7 ± 0.085. Antioxidant activity (EC50(µg/ml): PER: G: 602.5±20; ZP:
436.5±40; D: 460.25±40; S: 501±10; CAT: G: 190.54±19; ZP: 120.22±12; D:
128.8±12; S: 123±12. Chlorogenic, caffeic acids and high concentrations of caffeine
exerted SOD activity (inhibition of adrenaline oxidation), Chlorogenic, caffeic acids,
rutin and caffeine presented CAT activity; Chlorogenic, caffeic acids and rutin
presented PER activity (Figs A,B,C). It can be concluded that the industrial process
could increase the antioxidant activity of I. paraguariensis being caffeine and rutin
the main compounds involved in the effects observed.
0.1
1
10
100 1000 10000
-25
-50
-75
-125
2.0
100
1.5
75
1.0
50
0.5
25
0
0.01
-100
Peroxidase activity
-4
(U/ml)x10
0
CAT activity (U/ml)
A dre na line ox ida tion
(% of c o n tr o l)
2.5
125
25
Compounds (µg/ml)
0.1
1
10
100
1000
0.0
0.1
A
Chlorogenic acid
B
Caffeic acid
1
10
100
1000
Compounds (µg/ml)
Compounds (µg/ml)
C
Caffeine ∆ Rutin
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P 004
Composicion quimica y actividad antibacterial del aceite esencial
de Bursera tomentosa
Moreno J1, Aparicio R2, Velasco J3, Villarreal S4, Rojas Luis B5, Usubillaga A5.
1 Universidad Centroccidental “Lisandro Alvarado (UCLA), Decanato de Agronomía, Tarabana. Barquisimeto,
Edo Lara. Venezuela. 2 Postgrado Interdisciplinario de Química Aplicada, Facultad de Ciencias; 3 Departamento
de Microbiología y Parasitología, Facultad de Farmacia y Bioanálisis; 4 Postgrado en Química de Medicamentos,
Facultad de Farmacia y Bioanálisis; 5 Instituto de Investigaciones de la Facultad de Farmacia y Bioanálisis;
Universidad de Los Andes, Mérida, Venezuela. Email: [email protected]
La familia Burseraceae está distribuida en regiones tropicales y subtropicales. El género
Bursera ubicada en la tribu Bosweliae comprende aproximadamente 40 especies1. Se ha
reportado que producen bálsamos del tipo de las resinas terpenoidales, estos comprenden
mono, sesqui, y triterpenos, raramente se aíslan diterpenoides2. La Bursera tomentosa se
describe como un árbol de 5 a 8 metros de tallo, de hojas caducas o semicaducas
imparipinnadas y oblongas, flores pequeñas, blancas agrupadas en panículas, tiene drupa
oblonga3; la especie está distribuida desde América Central hasta Colombia y Venezuela4, es
conocido como “bálsamo de incienso”, a la cual se le ha atribuido algunas aplicaciones como
planta medicinal y artesanal5. La composición del aceite esencial no ha sido reportada. El
objetivo de este estudio fue analizar la composición química del aceite esencial obtenido de
los frutos de B. tomentosa y determinar la actividad antibacteriana contra bacterias gram+ y
gram- por el método de difusión en agar.6 La especie fue recolectada en una zona restringida
del semiárido del Estado Lara-Venezuela. Fue sometida a hidrodestilación durante tres horas,
obteniéndose 2 mL (0.2 %), el cual fue analizado por cromatografía de Gases acoplada a
espectrometría de Masas (CG-EM). Los compuestos mayoritarios identificados fueron: 1nonano (28.24 %), D-limoneno (3.50 %), Trans-β-cariofileno (47,57%), 1-undeceno (5.53%),
cariofileno (0.57%) y D-germacreno (11,10%). El aceite esencial de B. tomentosa resultó ser
evidentemente inhibitorio del crecimientos bacteriano de Staphylococcus aureus ATCC
25923, Enterococcus faecalis ATCC 29212 y Salmonella Typhi CDC 57, con un valor de
Concentración inhibitoria mínima (CIM) de 80, 120 y 100 μg/mL, respectivamente.
Agradecimiento: Consejo de Estudios de Postgrado (CEP) y CDCHT, Universidad de Los Andes, Mérida, Venezuela.
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96
P 005
Pharmacological evaluation of Brazilian medicinal plants using
to treat cancer
Círia V. Barbosa1, Charles P.A. Zabala1, Pedro G.V. Aquino1, Karlos A.L. Ribeiro
Júnior4, Flávia B.P. Moura1, Magna S. Alexandre-Moreira1, Antônio E.G. Sant’Ana4,
José R.O. Ferreira2, Manoel O. Moraes2, Letícia V. Lotufo2, Cláudia Pessoa2, Sílvia
R. Ramos3, Jaciana S. Aguiar3, Teresinha G. Silva3, João X. Araújo-Júnior1,4
ESENFAR/LaFI/ICBS/Museu de História Natural/Universidade Federal de Alagoas, Cidade
Universitaria, 57092-970, Maceió-AL, Brazil; 2LOE/UFC, R. Cel. Nunes de Melo, 1127, 60430-270,
Fortaleza-CE, Brazil; 3Dept° de Antibióticos, UFPE, R. Prof. Moraes Rêgo, 1235, 50670-901, Recife-PE,
Brazil; 4Instituto de Química e Biotecnologia/UFAL, 57072-970, Maceió AL. Brazil
1
Plants have been used as sources of medicinal agents for millennia. Plant extracts
and derived active principles have served as a major source for new
pharmaceuticals for treatment of malignant tumors [1]. In a previous work [2] we
described the plants most used as anticancer agents, by the population treated on
the Oncology Service of the University Hospital (Maceió-AL). In the course of our
continuing search for bioactive natural products, the aim of this work was evaluate
the toxicological effects of those plants. Initially, the plants were collected, identified,
and the hydroethanolic extracts were prepared. In the pharmacological approach,
the follow assays were done: (1) toxicity against brine shrimp Artemia salina [3], (2)
in vitro test against human tumor cell lines [4] and (3) in vivo evaluation using
Ehrlich tumor in mice. The plants were Annona muricata, Aloe vera, Schinus
terebenthifolius, Hyptis pectinata, Stryphnodendron barbatiman, Euphorbia tirucalli,
Uncaria tomentosa and Cnidosculus urens. The phytochemical screening showed
the presence of e.g. flavonoids, tanins, saponins and alkaloids. The Artemia salina
essay suggested moderate toxicity. In the preliminary in vitro assay only two species
showed moderate cytotoxicity: Anonna muricata (82%, 86% and 71% of inhibition)
against SF295, HCT8 and MDA-MB435 line cells, respectively and Hyptis pectinata
(62% of inhibition) against HCT8 line cells. Both plants presented no hemolytic
effect. In the in vivo tests, the plants inhibited the Ehrlich tumor (40%-82%). Take
together these results suggest that only two plants used by the population showed
potential anti-tumor activity, at least in the used pharmacological models.
Acknowledgements: FAPEAL, CNPq, CAPES, IM-INOFAR, Banco do Nordeste, PPSUS-MS.
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P 006
Vasorelaxante effect induced by the ethanolic extract of
Aspidosperma tomentosum in the isolated rat mesenteric artery
Fabíola F. Furtado1, Camila P. Menezes1, Raline M. Anjos1, Anne M.S. Leão2,
Cíntia D.F. Costa2, Edla A. Herculano2, João X. Araújo-Júnior2,3, Antônio E.G.
Sant’Ana3, Êurica A.N. Ribeiro2, Isac A. Medeiros1
Laboratório de Tecnologia Farmacêutica (LTF)/UFPB, 58051-970, João Pessoa–PB. Brazil.
ESENFAR/UFAL, Cidade Universitria, 570972-970, Maceió-AL, Brazil; 3Instituto de Química e
Biotecnologia/UFAL, Cidade Universitria, 57072-970, Maceió AL. Brazil.
1
2
Aspidosperma tomentosum Mart. is popularly known as “peroba-do-campo” and its
stem has been used as wood and the seeds in art and craft manufactures [1]. The
methanol crude extract of dried leaves showed antiproliferative activity [2], but it was
not found any study in the cardiovascular system. This study was aimed to elucidate
the action mechanism involved in the vasorelaxant effect induced by the ethanolic
extract from de stem of Aspidosperma tomentosum (ATEH) in rat superior
mesenteric artery. The rat superior mesenteric artery was removed and it was
cutted in rings (1-2 mm), which were maintained in organ baths containing Tyrode’s
solution at 37 oC and gassed with carbogen. In intact isolated rat superior
mesenteric artery rings, ATEH (0,03; 0,1; 0,3; 1; 3; 10; 30; 100 and 300 g/mL, n=6)
induced relaxations of tonus induced by 10 M of Phe (EC50=35.3±5.8 and Emax=
97.8±1.2%). In denuded endothelium rings pre-contracted with Phe or KCl (80 mM),
the concentration-response curve to ATEH was not significantly changed
(EC50=29.0±4.2 and 28.6±2.3; Emax= 97.7±1.7 and 95.3±4.7%, respectively). ATEH
(30, 100 and 300 g/mL) also was capable to strongly antagonize the concentrationresponse curves to CaCl2 (3 M–30mM). In denuded endothelium rings precontracted with BAYK8644 it induced relaxations (EC50=29.0±4.2 and
Emax=97.3±1.3%). The present study demonstrated that the ATEH produced a
concentration endothelium independent vasorelaxation in superior mesenteric artery
rings, which may probably be due to an inhibition of the Ca2+ influx through voltageoperated Ca2+ channels.
Acknowledgements: FAPEAL, CNPq, CAPES, IM-INOFAR, LTF, UFPB, UFAL, PPSUS-MS.
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99
P 007
Componentes volatiles de Solanum bicolor Roemer and Schultes
Arias E, Pérez A, Rojas L, Usubillaga A
Instituto de Investigaciones de la Facultad de Farmacia y Bioanálisis. Universidad de Los Andes. Mérida
Código Postal 5101.Venezuela. e-mail: [email protected]
La familia Solanaceae consta de 95 géneros y alrededor de 3000 especies1, el
género Solanum se encuentra representado por unas 2000 especies distribuidas en
regiones tropicales y templadas del mundo, esta integrado en Venezuela por 150200 especies. Solanum bicolor es un arbusto o árbol pequeño, de 1-5m de altura,
hojas membranáceas, ovadas o elípticas, con pubescencia blanco amarillenta2.
Esta planta fue recolectada en el sector Campo Claro en Mérida, estado Mérida, e
identificada en el Herbario MERF de la Facultad de Farmacia y Bioanálisis de la
Universidad de los Andes en Mérida-Venezuela. Las hojas fueron sometidas a
extracción por de arrastre con vapor de agua, empleando la trampa de Clevenger,
durante 3 horas, obteniéndose un aceite esencial de color amarillo. Para la
identificación de los componentes se empleó un cromatógrafo de gases marca
Hewlett Packard 6890 serie II, acoplado a un espectrofotómetro de masas HP5973. La columna empleada fue la HP-5 de 30 metros de largo y 0.25 mm de
diámetro. Los componentes mayoritarios identificados fueron: trans cariofileno
(23.18%), 1-pentadeceno (22.64%), germacreno (12.24%), biciclogermacreno
(8.04%) y delta-canideno (3.60%). Para nuestro conocimiento este es el primer
reporte de los componentes volátiles de esta especie.
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100
P 008
Evaluación de la actividad del extracto acuoso y fracciones de
hojas de Urera baccifera sobre tres mediadores de inflamación
B. Badilla1, N.T. Weng1, F. Chaves2, L.J. Poveda1
. Laboratorio de Fitofarmacología, Instituto de Investigaciones Farmacéuticas (INIFAR) Universidad de
Costa Rica. San José Costa Rica. email: [email protected] 2. Instituto Clodomiro Picado.
Facultad de Microbiología. Universidad de Costa Rica.
1
La planta Urera baccifera (Urticaceae) se conoce popularmente como ortiga brava o
chichicaste y es utiliza en algunas zonas de Costa Rica en forma de infusión para
tratar cuadros inflamatorios. En estudios previos (1) se encontró que el extracto
acuoso de sus hojas muestra actividad antiinflamatoria en el modelo de pata
inducido por carragerina y su fracción acuosa final mostró la mayor actividad
biológica. Así mismo se demostró por medio del modelo de contorsiones
abdominales inducidas por el ácido acético, que dicho extracto tiene propiedad
analgésica periférica. Dada la importancia de esta planta se explora el posible
mecanismo farmacológico que explica la acción antinflamatoria. El presente estudio
pretende medir los efectos del extracto acuoso y sus fracciones sobre mediadores
importante del proceso inflamatorio como la cicloxigenasa (COX), la tromboxano
sintasa y la óxido nítrico sintasa inducible (iNOS). Se ensayaron en todos los
modelos tres concentraciones a saber, 250, 500 y 1000 mg/ml. En el modelo de
agregación plaquetaria (2) solamente la concentración de 1000 mg/ml de extracto y
de la fracción acuosa mostró inhibición significativa de agregación plaquetaria con
respecto al control. Dicha concentración es mucho mayor a las reportadas para
drogas antiagregantes tradicionales como el ácido acetilsalicílico (AAS). En el
ensayo de molonil dialdehído (MDA) (3) nos se pudo evidenciar influencia
importante ni del extracto ni de sus fracciones. En los dos modelos de producción
de óxido nítrico (NO) realizados, ni el extracto crudo ni sus fracciones mostraron
cambios importantes de los niveles de NO, tanto en macrófagos (4) como en
astrositos de rata (5). En síntesis el extracto acuosos de Urera baccicera, junto con
sus fracciones no mostraron influencia importante sobre la síntesis de prostanoides
ni sobre la producción de NO. Se recomienda evaluar la influencia del extracto
crudo y fracciones sobre otras dianas farmacológicas interesantes en el proceso
inflamatorio. Tales como quimocinas, citocinas, factor nuclear kB, y lipooxinegana etc.
Referencias
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102
P 009
Estudio comparativo de la composición química del aceite
esencial de hojas y tallos de Euphorbia caracasana
(Euphorbiaceae) colectado en Mérida-Venezuela
Shirley Baldovino, Janne Rojas, Luis Rojas, Antonio Morales
Grupo Biomoléculas orgánicas, Instituto de Investigaciones, Facultad de Farmacia y Bioanálisis, Mérida,
Venezuela
El género Euphorbia es el mas grande de la familia Euphorbiaceae, comprende
cerca de 5000 especies [1]. La mayoría se caracterizan por contener un latex
altamente irritante de la piel y han sido objeto de investigaciones químicas y
farmacológicas. Estudios anteriores han reportado diterpenos del tipo tigliano,
ingenano, dafnano, jatrofano y esteres diterpenicos con propiedades antitumorales
y carcinogénicas [2]. La presente investigación tiene como objeto el estudio de la
composición química del aceite esencial de tallos y hojas de Euphorbia caracasana
Boiss recolectada en el sector Miyoi, Pueblo Llano, Mérida-Venezuela, no reportada
hasta el momento. Las hojas frescas (4 Kg) y los tallos (2 Kg) finamente cortados y
triturados se sometieron por separado a hidrodestilación por 4 horas, utilizando una
trampa de Clevenger. El aceite obtenido, hojas (0,2 ml; 0,005 % m/v) y tallos (0,1
ml; 0,0025 % m/v) se secó sobre sulfato de sodio anhidro y fue analizado por
cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas en un equipo GC-MS
system, modelo 5890. En las hojas se identificaron nueve (9) compuestos de los
cuales trans-β-cariofileno (31.69 %), D-germacreno (21.35 %) y α-humuleno (16.81
%) se observaron como mayoritarios, mientras en los tallos se identificaron diez
(10) compuestos siendo longifoleno (22.62 %), oxido de cariofileo (11.70 %) y ciscariofileno (10.54 %) los observados en mayor proporción. Estos compuestos
fueron identificados por comparación de sus espectros de masas con la base de
datos Wiley 6th ed. y datos reportados en la literatura [3].
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103
P 010
Antiulcer and healing properties from one Vernonia polyanthes
Less. fraction – histological analysis
Barbastefano V1, Cola M2, Luiz-Ferreira A1, de-Faria F M1, Takayama C1, Rinaldo
D3, Hiruma-Lima C A4, Pellizon C H4, Vilegas W3, Souza Brito, A R M1
Departamento de Fisiologia e Biofísica, Instituto de Biologia, UNICAMP, Campinas/SP, Brasil;
Departamento de Farmacologia, Centro de Ciências Biológicas, UFSC, Florianópolis/SC, Brasil;
3Departamento de Química Orgânica, Instituto de Químicas, UNESP, Araraquara/SP, Brasil;
4Departamento de Fisiologia, Instituto de Biociências, UNESP, Botucatu/SP, Brasil;
1
2
Background: The chloroformic crude extract from Vernonia polyanthes Less.
(Asteraceae), a Brazilian savannah plant popularly known as “assa-peixe”, had
been already investigated for its antiulcerogenic properties. The outstanding results
previously obtained leaded our lab to evaluate the methanolic fraction from this
chloroformic crude extract. Objectives: The methanolic fraction (MVP) from the
chloroformic crude extract of Vernonia polyanthes was evaluated for its
antiulcerogenic and healing properties employing two experimental models and
histological analysis. Methods: To obtain MVP, the chloroformic crude extract from
Vernonia polyanthes was fractionated by column chromatography (Silica Gel 60).
The antiulcerogenic activity of MVP, in the doses of 3, 6 and 12 mg/kg, was
evaluated in male Wistar rats, with the absolute ethanol-induced gastric ulcer model
(1 mL, 1 hour before sacrifice). The healing properties of the best dose was
investigated in the acetic acid (30%, 50 L)-induced ulcer model. Rats were
sacrificed just after a 14 days treatment period. The quality of the healing process
was evaluated in histological assays (H&E, PAS). Results: MVP presented
significant antiulcerogenic activity in lower doses (3, 6 and 12 mg/kg). The lowest
dose (3 mg/kg), which presented 77,6% of ulcer inhibition, were then evaluated for
its healing activity. MVP treatment for 14 days reduced in 75,2% the ulcer area in
acetic acid-induced gastric ulcer and showed elevated mucus secretion (PAS) and
better mucosa cell organization (H&E). Conclusions: MVP protects the gastric
mucosa in a very low dose, in both acute and sub-acute experimental models.
Acknowledgements: FAPESP, CNPq
104
P 011
Antimicrobial activity of coumarins from the roots of
Ferulago campestris [Apiaceae]
Adriana Basile1, Sergio Sorbo2, Antonella Maggio3, Sergio Rosselli3, Maurizio
Bruno3, Francesco Maria Raimondo4, Vivienne Spadaro4
Department of Plant Biology, University of Naples Federico II, via Foria 223, 80139 Napoli, Italy; 2Centro
Interdipartimentale di Servizio per la Microscopia Elettronica C.I.S.M.E., University of Naples Federico II,
via Foria 223, 80139 Napoli, Italy; 3 Dip. Chimica Organica, Università di Palermo, viale delle Scienze –
parco d’Orlens II – 90128 Palermo, Italy; 4 Dip. Scienze Botaniche, Università di Palermo, via Archirafi 38,
90123 Palermo, Italy;
1
Madonie Park, located in western of Sicily, represents a mountainous region that
encompasses a diversity of climatic conditions ranging from mediterranean to alpine. The
flora plays a leading role in the territory of the Park and a rich biodiversity is present. It
houses more than the half of the 2600 sicilian species and about 200 of them are
endemic. The vegetable species present in the Park are characterized by a wide range
of secondary metabolites and a gene pool of biodiversity to protect and to conserve.
Ferulago W. D. J. Koch is a perennial genus of the Apiaceae family distinguished by the
presence of persistent bracts and bracteoles. The genus comprises about 40 species
widely distributed in the temperate zone of both hemispheres, especially in Central Asia
and Mediterranean area. Some Ferulago species are used since ancient times in folk
medicine for their sedative, tonic, digestive, aphrodisiac properties and have been used
in the treatment of intestinal worms and hemorrhoids. Moreover they are used against
ulcers, snake bite, as well as headache and diseases of the spleen. The genus is
characterized by the presence of coumarins [1-3] and volatile compounds. Ferulago
campestris (Besser) Grec. (F. galbanifera (Mill) Kock. = Ferula ferulago L.), known with
the folk name of “finocchiazzo”, is an annual or perennial herb with small flowers in
simple or compound umbels. Previous phytochemical studies on F. campestris revealed
the presence of monoterpene coumarins, sesquiterpene lactones [4], and of an essential
oil isolated from a plant growing wild in Turkey. In this communication we report the
antimicrobial activity against several bacteria cell lines of three natural coumarins
(grandivitn, agasyllin, aegelinol benzoate) isolated from the roots of F. campestris
collected in Sicily and of the hydolysis product (aegelinol). Aegelinol and agasyllin
showed a good activity against Gram+ and Gram- bacteria especially against
Staphylococcus aureus, Salmonella typhi, Enterobacter cloacae and Enterobacter
aerogenes.
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106
P 012
Comparison of Bryophyte bioactivities
Adriana Basile1, Sergio Sorbo2, Barbara Conte1, Rosa Castaldo Cobianchi1
Department of Plant Biology, University of Naples Federico II, via Foria 223, 80139 Napoli, Italy; 2Centro
Interdipartimentale di Servizio per la Microscopia Elettronica C.I.S.M.E., University of Naples Federico II,
via Foria 223, 80139 Napoli, Italy
1
Bryophytes have been traditionally used as medicinal plants to cure cuts, burns,
external wounds and several diseases (1). We compared two interesting
bioactivities, antibacterial and antioxidant, in bryophytes species that are resistant to
environmental stress. Plants lack a circulating adaptive immune system to protect
themselves against biological attack; they have evolved defence mechanisms,
which are either constitutive or inducible (2). Biological organisms are also provided
with antioxidant systems able to control and neutralize free radicals and reactive
oxygen species (ROS), produced both physiologically and by several agents (3).
We compared the antibacterial activity of extracts from the mosses Pleurochaete
squarrosa and Rhynchostegium riparioides and the liverwort Lunularia cruciata. The
antibacterial activity was assessed by the Ericcson and Sherris broth dilution
method (MH broth) and expressed as minimum inhibitory activity (MIC) values (4).
Acetonic extracts were generally active against all the bacterial strains employed,
above all the Gram-negative bacteria. This is particularly interesting because Gramnegative bacteria comprises species, such as Pseudomonas aeruginosa and
Proteus species, responsible for severe infections and often resistant to
conventional antibiotics. Antibacterial activity was inducible by oligogalacturonides in
Lunularia cruciata.
Antioxidant activity was tested by a luminol-dependent chemiluminescence (CL)
assay on leucocytes in whole blood (WBL) and on isolated polymorphonucleates
(PMNs) (5). The acetonic extracts from the moss Pleurochaete squarrosa and the
liverwort Lunularia cruciata showed strong antioxidant activities. Finally, the
antioxidant activity was modulated by growth conditions such as heavy metals and
heat overall in Pleurochaete squarrosa and Scorpiurium circinatum. The finding of
PMN inhibition indicate a potential anti-inflammatory activity in the examined
bryophyte species.
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P 013
Actividad antimicótica en extractos de Smilax campestris Griseb.
– Smilacaceae - y en Plantago major L. – Plantaginaceae
Battista Stella M, Garcia Gabriela F, Rugna Ana Z, Wagner Marcelo L, Gurni Alberto A.
Cátedra de Farmacobotánica. Departamento de Farmacología. Facultad de Farmacia y Bioquímica,
Universidad de Buenos Aires. Junín 956, 4° piso (1113) Buenos Aires. República Argentina.
[email protected]
Para la elaboración de medicamentos fitoterápicos con acción antimicótica se
utilizan en algunas formas farmaceúticas extractos vegetales. De tal forma, en
Guatemala se ha estudiado el efecto antimicótico de diferentes especies de Smilax
L. autóctonas, con buenos resultados y se utilizan en el mercado en forma de
óvulos1. Con respecto al Plantago major L., se encontró información sobre su
utilización como antimicótico en cremas2.
Por lo tanto, el objetivo de este trabajo es determinar la presencia de actividad
antimicótica en hojas de Smilax campestris Griseb. y en hojas de Plantago major
L. Se utilizaron extractos acuosos y metanólicos al 80% de las hojas de S.
campestris y de P. major. Se analizaron las actividades de los extractos sobre
distintos hongos ambientales de Aspergillus níger y Penicillium sp. y se comparó su
actividad con una curva patrón realizada con concentraciones conocidas de
ketoconazol.
Se determinó actividad antimicótica para las dos especies vegetales analizadas
tanto en los extractos acuosos como en los metanólicos. En el caso de S.
campestris se obtuvo actividad antimicótica en los extractos metanólicos, pero los
extractos acuosos resultaron inactivos para las poblaciones de hongos estudiadas;
en cambio, en P. major la actividad de ambos extractos resultó similar sobre los
hongos analizados.
Por lo tanto, pudo determinarse que tanto las hojas de Smilax campestris Griseb.
como las de Plantago major L. tienen actividad antimicótica, por lo que se
continuará avanzando en estos estudios para el uso de estas especies en la
medicina popular.
Referencias
1. Cáceres, A. (1998). “Zarzaparrilla” Plantas medicinales del
género Smilax en Centroamérica” Turialba, Costa Rica. 3442.
2. Rodríguez Pargas, A; León Padilla, M; Hernández
Rodríguez, A y Junco Barranco, J. (1996). “Actividad
109
P 013
antifúngica in vitro de una crema de Plantago major L.”
Rev Cubana Plant Med v.1 n.3 Ciudad de la Habana.
110
P 014
Análisis del aceite esencial de las hojas de la Ageratina articulata
(Sch. Bip. ex Hieron.) R. M. King & H. Rob., que crece en Mérida
Venezuela
Betancourt N, Rojas L, Carmona J. y Usubillaga A.
Venezuela. Urb. Campo de Oro. e-mail: [email protected]
El género Ageratina consta de 250 especies concentradas en México, América
Central y los Andes, y pocas especies en los Estados Unidos, Canadá, el Caribe y
sur del Brasil. De diferentes especies de este género se han aislado flavonoides,
glicosidos, lactonas sesquiterpénicas, cumarinas, alcaloides y terpenos. La
Ageratina articulata (Sch.Bip.ex hieron.) R.M.King & H. Rof., (Asteraceae), es una
planta herbácea, que crece por encima de los 1800msnm, para nuestro
conocimiento esta especie no ha sido estudiada previamente. En el presente
trabajo se estudia los componentes volátiles obtenidos de las hojas de A. articulata,
esta fue recolectada en el sector la antena Mérida, Estado Mérida. El trabajo
consistió en aislar los componentes volátiles por arrastre con vapor de agua
utilizando una trampa de Clevenger, estos se identificaron por GC-MS, empleando
un equipo Hewlett Packard 5973 GC/MS a 70 eV, equipado con un inyector
automático, utilizando una columna capilar HP-5MS (30 m, 0.25 mm, 0.25 µm). Se
empleó una temperatura inicial de 60 ºC (1 min) y luego se calentó a razón de 4
°C/min hasta 260 ºC (20 min). Se inyectó una muestra de 1.0 mL de una solución al
2% del aceite esencial en n-heptane con reparto de 100:1. Se utilizó una
con los espectros de una Librería Wiley (6ta Edición). Se determinaron los índices
de Kováts analizando conjuntamente las muestras con una mezcla de n-alcanos. El
aceite esencial obtenido de las hojas presentó un rendimiento de 0.03 %. Del
análisis del aceite por CG-EM se lograron identificar 15 componentes de las hojas
frescas; de estos los mayoritarios resultaron ser: beta-elemeno (5.2%), transcariofileno (6.1%), beta-cubebeno (20.3%) y biciclo-germacreno (5.0%). Este aceite
esencial resultó ser rico en sesquiterpenos.
Referencias
1.
Badillo, V.M. (2001). Lista actualizada de las especies de la familia Compuestas (Asteraceae) de
Venezuela. Ernstia 11.
111
P 015
Nutaceutical character of some new Olea europaea L. selections
Serrilli A.M.1, Petrosino L.1, Padula G.2, Ripa V.3, Pannelli G.3, Bianco A.1
1Dipartimento di Chimica Sapienza Università di Roma, piazzale A. Moro, 5 00185 Roma; 2Dipartimento
di Ortoflorofrutticoltura, Università degli Studi di Firenze; 3CRA-OLI sezioni di Rende e Spoleto.
Olea europæa L. (Oleaceae) is a typical plant of the Mediterranean area and it has
been associated with the Mediterranean culture. It is the only specie in the
Mediterranean Basin of the Olea genus and it is the only specie of this genus with
edible fruits.
The aim of this work is to analyse the phenolic fraction present in olives of several
new selections obtained by breeding [1]. Phenols represent the more important
nutraceutical components present in table olives and in virgin olive oil. An increasing
interest in these compounds is due to their antioxidant and health enhancing
properties. The major phenolic compounds in olive are oleuropein 1 tyrosol 2,
hydroxy-tyrosol 3 and cinnamic acids as coumaric 4 and caffeic 5 acids.
O
O
OH
COOCH3
R
O
HO
OH
O-glc
1 Oleuropein
R
COOH
HO
OH
2 Tyrosol, R=H
3 Hydroxytyrosol, R=OH
4 Coumaric acid, R=H
5 Caffeic acid, R=OH
Studies on the phenolic fraction have been conducted on some of the advanced
selections grown in Umbria, Basilicata and Calabria during 2005-2007.
The analysis of the extracts of olives from several selections, that were before
evaluated agronomically and morphologically, allowed to subdivide the selections in
three different groups on the base of the oleuropein/cinnamic acid ratio [2]. Such
variability in phenols amounts and in its composition is indicative of a various
compatibility of the fruit with its destination as functional food, and/or a various
sensory expression of the corresponding oil.
Acknowledgements: SEINOLTA Project – MIPAF- Ministero dell’Agricoltura e Foreste (Italy).
References
1.
Bellini E., (1992), Acta Hortic., 317: 197-208.
2.
Serrilli A.M et al. (2008), Adv. Hort. Sci., 22 (2) in press.
112
P 016
New Diterpenoids from Salvia miniata Fernald (Lamiaceae).
Bisio A1, Romussi G1, Russo E1, Cafaggi S1, Fraternale D2, Ricci D2, De Tommasi
N3
1 Dipartimento di Chimica e Tecnologie Farmaceutiche e Alimentari, Università di Genova, Via Brigata
Salerno 13, 16147 Genova, Italia 2 Istituto di Botanica, Università di Urbino, Via Bramante 28, Urbino,
Italia, 3 Dipartimento di Scienze Farmaceutiche,Università di Salerno, Via ponte Don Melillo, 84084
Salerno, Italia.
Salvia miniata Fernald [1], is a Mexican species whose aerial part exudate showed
herbicide activity against common weeds (Papaver rhoeas L. and Avena sativa L.)
in a preliminary test. Our research is devoted to the identification of growth inhibitors
with diterpene and triterpene skeletons, whose herbicidal activity has been
described in literature [2], contained in the surface exudates that are generally
known as natural pesticides [3].
The surface exudate, obtained by rinsing the plant material with CH2Cl2, and
subjected to repeated column chromatography on Sephadex LH-20 and silica gel
and to reversed-phase semi-preparative HPLC, yielded two new clerodane
diterpenoids (1, 2) identified by IR and NMR analysis, including TOCSY, COSY,
HSQC and HMBC experiments.
O
O
O
Me
O
Me
O
OH
O
O
Me
O
O
O
O
O
1
2
Acknowledgements: The work was developed within the EU INTERREG ALCOTRA project
“Developpement des Potentialites du Genre Salvia : Nouveaux Produits” n.231.
References
1.
Epling, C. (1940) A Revision of Salvia, subgenus Calosphace. In: Repertorium Specierum
Novarum Regni Vegetabilis. Vol.110. Fedde F., University of California Press: Berkley, California.
2.
Vyvyan, J.R. (2002) Tetrahedron 58, 1631-1646.
3.
Dayan, F.E., Duke, S.O. (2003). Pesticide Outlook, 8, 175-178.
113
P 017
Secondary metabolites from Adenosma caeruleum R. Br.
(Scrophulariaceae)
Bruzual De A, Maryan C1; Braca, Alessandra1 and De Tommasi, Nunziatina2
1 Dipartimento di Chimica Bioorganica e Biofarmacia, Università di Pisa, Via Bonanno 33, 56126 Pisa,
Italy; 2 Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Università di Salerno, Via Ponte Don Melillo, 84084
Fisciano (SA), Italy
The genus Adenosma (Scrophulariaceae family) counts of about 15 species
widespread in South and South East Asia, China, and and Pacific Islands. All its
species are herbs, erect or creeping, blackened when dry, and frequently aromatic.
A. caeruleum R. Br., known in Vietnam as “nhan tran” is a perennial herb, 30-100
cm tall, with erect stems, widely distributed in the mountains of North Vietnam where
its dried aerial parts are used in folk medicine for the treatment of jaundice, bile, and
liver diseases as well as illness of women after child birth [1]. In continuation of our
studies on substances from Vietnamese medicinal plants, we isolated and
characterized different secondary metabolites from the aerial parts of this species.
The n-butanol soluble fraction of the methanolic extract was separated by column
chromatography using Sephadex LH-20 with methanol as eluent. Finally, the
compounds were purified by preparative RP-18 HPLC and characterized by using
spectroscopic and spectrometric methods (NMR, ESI-MS) as apigenin 7-O-β-Dglucuronopyranoside [2] and apigenin 7-O-β-D-glucopyranoside [2] belonging to the
class of flavonoids and crenatoside [3], verbascoside [4], cistanoside F [5],
campneoside I [6], campneoside II [6] that are phenylpropanoids. Other secondary
metabolites are in course of characterization.
To our knowledge this is the first time that phenylpropanoids are reported in the
genus Adenosma.
Reference
1.
Do tat Loi. (1997) Glossary of Vietnamese Medicinal Plants and Drugs, Publishing House for
Science and Technics, Hanoi. 633
2.
Flamini G; Antognoli E; Morelli I.”Two flavonoids and other compounds from the aerial parts of
Centaurea bracteata from Italy”. Phytochemistry 2001, 57, 559-564.
3.
Afifi, M.S.; Lahloub, M.F.; El-khayaat, S.A.; Anklin, C.G.; Ruegger, H. and Sticher, O. “Crenatoside:
A novel Phenylpropanoid glycoside from Orobanche crenata”. Planta Medica 1993, 59, 359-362.
4.
Liu, Y.; Wagner, H. and Bauer, R. “Phenylpropanoids and flavonoids glycosides from Lysionotus
pauciflorus”. Phytochemistry 1998, 48, 339-343.
5.
Imakura,Y.; kobayashi, S. and Mima, A. “Bitter phenylpropanoids glycosides from Campsis
chinensis”. Phytochemistry 1985, 24, 139-146.
6.
Nicoletti, M.; Galeffi, C.; Messana, I.; Marini-Bettolo, G.; Garbarino, J. and Gambaro, V.
“Phenylpropanoids glycosides from Calceolaria hypericina”. Phytochemistry 1988, 27, 639-641.
114
P 018
Componentes volatiles de Tagetes pusilla de los Andes
Venezolanos
Diolimar Buitrago y Luis Rojas
Ins titu to de Inves tiga ciones . F acu lta d de F armac ia y Bioan ális is . Unive rs ida d de
L os An des . Apa rtad o Po sta l 510 1. Mé rida -Venez ue la .
El género Tagetes, pertenece a la familia Asteraceae, tribu Tageteae.
Dentro de este género encontramos alrededor de 60 especies. Como
continuación de nuestras investigaciones sobre la flora andina
venezolana, se decidió estudiar la composición química del aceite
esencial de Tagetes pusilla Kunth, hierba con inflorescencias de color
amarillo que presenta un olor característico al anís, de allí que es
comúnmente conocida como “anis serrano” en Perú (1), “anis del
llano” en Ecuador (2) y “anisillo” en Venezuela; esta planta aromática
posee propiedades antiinflamatorias, antioxidantes (3),
antimicrobianas (1) y antivirales (4). El material vegetal se recolectó
en El Valle, Edo. Mérida-Venezuela y sus partes aéreas fueron
sometidas a hidrodestilación, utilizando la Trampa de Clevenger. La
separación de los componentes se realizó en un Cromatógrafo de
Gases Hewlett Packard HP 6890 acoplado a un Detector de Masa
Hewlett Packard modelo 5973 equipado con una columna HP-5MS de
30m × 0.25mm. El programa utilizado fue el siguiente: temperatura
inicial 60 °C (1 min), luego se incrementó hasta 260 °C a razón de 4
°C/min (20 min). La identificación de sus componentes se efectúo
mediante comparación computarizada con una librería Wiley MS Data.
El aceite esencial obtenido presentó un rendimiento de 0,38%,
identificándose como componentes mayoritarios dos monoterpenos: el
trans-anetol (69,97%) y el 4-alil-anisol (30,03%).
R e fe re nc ias
1 . Alzamora, L. et al. (2001), An . Fac. Med. (Peru), 62 (2), 156 -1 61
2 . Qu in te ro , D. e t al. (200 6 ), La Vena dita. Ecua do r
3 . De las He ras , B. e t a l. (19 98 ), J . Ethnop ha rm,61 (2 ), 1 61 -16 6
4 . Abad , M.J. et al. (1999), Ph ytoterap y Reserch, 13 (2 ) 142-146
115
P 019
Componentes volatiles de las flores de Lantana trifolia L. que
crece en Merida Venezuela
Burgos E., Rojas L., Usubillaga A.
Instituto de Investigaciones. Facultad de Farmacia y Bioanálisis. Universidad de Los Andes. Urb. Campo
de Oro. 5101.
El género Lantana (Verbenacea), esencialmente americano, comprende unas 40
especies en Sudamérica. Lantana trifolia L. es originaria del Neotrópico, desde el
Norte de sur América hasta Perú. Las hojas y flores tienen propiedades
emenagogas corrigiendo flujos de menstruación y sangre, así mismo se han
utilizado para curar gripes crónicas y mejorar problemas del hígado; son ricas en
aceite esencial con cariofilenos, aldehídos y alcaloides como lantanina, muy
semejantes a la quinina y de efecto antiespasmódico, también poseen mucílagos,
taninos y resina. El objetivo de este trabajo fue extraer los compuestos volátiles de
las hojas por hidrodestilación, empleando la trampa de Clevenger por tres horas
obteniendo de 1Kg de hojas, 1 mL de aceite. La identificación de estos se realizó
mediante un sistema GC/MS Hewlett Packard MSD 5973, con una columna de
fenil-metil-polisiloxano de 30m por 0,25mm (HP-5), con ayuda de una librería Wiley
MS Data (6ª Edición, 275K Spectra). Se determinaron los índices de Kováts
analizando conjuntamente la muestra con una mezcla de n-alcanos obteniendo un
aceite de color amarillo con un rendimiento de 0,1%. Un total de 35 constituyentes
fueron identificados siendo los mayoritarios: copaeno 3.84%, cariofileno 19.85%,
gamma-muuroleno 36.90%.
Referencias
1.
Rotman, A. el al. (2006), Darwiniana, 44(2): 514-518.
2.
López-Palacio (1977). Flora de Venezuela: Verbenaceae, Universidad de Los Andes.
116
P 020
Aislamiento de Galantamina en cuatro especies Colombianas de
Amaryllidaceae
Fabio Cabezas1, Andrés Yanza1, Santiago Martínez2, Carles Codina3, Jaume
Bastida 3 y Francesc Viladomat3
Universidad del Cauca, Departamento de Química. Calle 5 N° 4-70. Popayán, Colombia.
Universidad del Cauca. Departamento de Agroindustria. Calle 5 N° 4-70. Popayán, Colombia.
Universidad de Barcelona. Departamento de Productos Naturales. Av. Joan XXIII. 08028. España.
1
2
3
Uno de los problemas mentales de alta incidencia en Europa y varios países de
América es la enfermedad de Alzheimer. La Galantamina (GAL), es un metabolito
ampliamente utilizado en su forma salina para el tratamiento de dicha enfermedad a
un alto costo para el paciente. Este producto natural es aislado de varios géneros
propios de la cuenca del Mediterráneo y del centro de Europa, particularmente de
los géneros Leucojum, Galanthus y Narcissus entre otros.
En nuestros estudios fitoquímicos las especies colombianas Eucharis amazonica1,
E. grandiflora2, Caliphruria subedentata3 y Phaederanasa dubia4, con distribución
geográfica restringida, con endemismo en alguna de ellas, pero la mayoría
amenazadas de extinción, han mostrado presencia del metabolito en su forma libre,
lo cual ha sido comprobado por comparación con sus constantes físicas,
propiedades cromatográficas y espectroscópicas: c.c.d., [ ], Dicroismo Circular, IR.,
UV.,RMN 1H, 13C con muestras obtenidas de otras fuentes de origen natural. La
importancia de la presencia de este compuesto en las especies mencionadas
ofrece una oportunidad de desarrollos en el campo de la agroindustria en Colombia.
Agradecimientos: Universidad del Cauca, Universidad de Barcelona por su apoyo.
1.
2.
Referencias
Cabezas, F.; Ramírez, A.; Codina, C.; Bastida, J.; Viladomat, F, New Alkaloids from Eucharis
amazonica (Amaryllidaceae). Chem. Pharm. Bull. Tokio: , v.51, n.3, p.315 - 317, 2003.
Herrera Velásquez, Maria del Rosario, 1999, Aislamiento y elucidación de alcaloides de la familia
Amaryllidaceae (Eucharis grandiflora, Cyrtanthus elatus, Espirantes citrina, Hymenocalis tubifolra)
tesis doctoral, universidad de Barcelona.Cabezas, F.; Ramírez, A.; Codina, C.; Bastida, J.;
Viladomat, F, New Alkaloids from Eucharis amazonica (Amaryllidaceae). Chem. Pharm. Bull.
Tokio: , v.51, n.3, p.315 - 317, 2003Yanza Bravo, Alexander Andrés, 2008, Determinación y
cuantificación de Galantamina en Phaedranassa dubia (Amaryllidaceae) por HPLC
(Amaryllidaceae) y su relación con macronutrientes y micronutrientes de sus suelos, tesis pregrado
en
química,
Universidad
del
Cauca
117
P 021
Cactaceas medicinales de Arequipa
Fátima Cáceres H., Leoncio Mariño H., Jose Zuñiga C.
Area de Botánica. Departamento Académico de Biología. Universidad Nacional de San Agustín.
Arequipa; Ignazio Poma, Dipartimento di Agronomía Ambientale e Territoriale. Universidad di Palermo.
Italia.
Se ha realizado un estudio de las Cactaceas medicinales de la provincia de
Arequipa en el Marco del Proyecto Plantas Medicinales de la Region Arequipa, con
la finalidad de dar a conocer sus usos e importancia en la etnomedicina.
El trabajo se ha realizado en los distritos de Chiguata, Yanahuara, Yura, Mollebaya,
Tiabaya, y la Joya. El área de estudio comprende entre los 1200 a 3500 m snm.
La metodología de estudio es a través de encuestas y entrevistas, a personas con
cierto conocimiento sobre el uso de estas especies y curanderos del pueblo. Los
datos han sido procesados cuantitativamente, tomando en cuenta el acuerdo entre
informantes.
Los resultados dan cuenta de 6 especies de Cactaceas de uso etnomedicinal en
la provincia de Arequipa, dando a conocer su descripción botánica, hábitat,
distribución, propiedades y usos, partes utilizadas, formas de uso, época de
floración, fructificación y comercialización.
Según evaluación realizada en la provincia, las especies que más se usan y
comercializan son Neoraimondia arequipensis (Meyen) Backeberg “sapayhuarmi”,
para contrarrestar la menopausia en las mujeres, Corryocactus
brevistylus(Schumann ex Vaupel) Britton & Rose “sancayo” para la deficiencia
hepática, manchas en la cara y para prevenir el cáncer al estomago, Tunilla
soehrensii Britton & Rose “ayrampo”, para las aftas bucales en los niños y como
refrescante del estomago en personas recién operadas, Opuntia ficus indica Mill.
“tuna”, para bajar el azúcar en la sangre ocasionado por la diabetes,
Austrocilindropuntia subulata subsp. exaltata Backeberg “pataquisca” para la
gastritis y Cumulopuntia ignescens “pushca”, para evitar la caída del pelo y
controlar la caspa.
Se presentan mapas de distribución e ilustraciones con fotografías.
118
P 022
Plantas medicinales que se desarrollan a 2230 m snm en la
region Arequipa. Peru
Fátima Cáceres Huamani, Benito Albarracin Valdivia, Leoncio Mariño Herrera,
Alberto Cáceres Huambo
Área de Biología Gral y Botánica del Departamento Académico de Biología. Facultad de Ciencias
Biológicas y Agropecuarias. Universidad Nacional de San Agustín. Arequipa; Ignazio Poma, Dipartimento
de Agronomía Ambientale e Territoriale. Universidad de Palermo. Italia.
Se presenta un estudio realizado en Arequipa con plantas medicinales que se
desarrollan a 2230 msnm, con la finalidad de determinar e inventariar las plantas de
uso medicinal mas utilizadas, origen y desarrollo del cultivo, analizando la
frecuencia de uso, formas de uso y comercialización de las mismas en los
mercados locales y distritos del cercado de Arequipa. Perú.
La metodología se realizo a través de encuestas etnobotánicas en los mercados
locales, campos de cultivo de las comunidades de Arequipa y para la
determinación se recurrió al herbario local a través de muestras representativas y
confección de un herbario.
Los resultados nos dan cuenta de 36 especies, 34 géneros y 18 familias de plantas
etnomedicinales. Dichas especies se desarrollan en la campiña de Arequipa entre
los meses de Abril a Diciembre, se comercializan con frecuencia y son las mas
utilizadas como Eucalyptus globulus “eucalipto”, Schinus molle “molle”, Brassica
rapa ssp campestris “nabo silvestre”, Valeriana officinalis “valeriana”, Ruta
graveolens “ruda”, Taraxacum officinalis “diente de león”, Plantago major “llantén” y
Chenopodium ambrosioides “paico” y la forma de obtención es a través de la
cosecha de las mismas al estado silvestre. De los 4 distritos evaluados, Sabandia
cuenta con la mayor diversidad de especies medicinales, que se desarrollan en
forma silvestre en los campos de cultivo y huertos de los campesinos. Dos especies
se cultivan con fines comerciales locales como Valeriana officinalis y Ruta
graveolens. El acuerdo entre informantes nos dan a conocer su uso mas frecuente
como son problemas digestivos, respiratorios o hepáticos, la mayoría de ellos
utilizados en forma directa a través de infusiones, cocimientos y algunas veces en
jugos.
El uso mas frecuente que se le da a estas especies tiene que ver con sus
propiedades terapéuticas, como son la presencia de flavonoides y aceites
esenciales, destacando con frecuencia la mayoría de estas especies agrupadas
en la familia Asteraceae, Apiaceae y Lamiaceae.
Se presenta un inventario completo, con fichas de las especies mas importantes en
la región y se ilustran con fotografías.
119
P 023
Identificación y control de plantas medicinales, usadas en
sistemas de salúd en la región de Fernandópolis – São Paulo
Ely E. S. Camargo1,2, Anselmo G. Oliveira1, Breno A. Nesso2, Cássia F. Oliveira2,
Liliane F. Decandio2, Graziele S. Ferlete2
1
2
Facultad de Ciencias Farmacéuticas – UNESP, Rodovia Araraquara-Jaú, Km 1, Araraquara – SP.
Fundación Educacional de Fernandópolis – FEF, Av. Teotônio Vilela, S/N, Fernandópolis – SP.
Deste 1978 la O.M.S. reconoce medicamentos fitoterápicos, vários programas públicos
fueron implantados en diversos municípios brasileros, Este trabajo presenta un estudio
farmacognóstico envolviendo las espécies Ruta graveolens, Chenopodium
ambrosióides, Solidago chilensis, usadas en la región de Fernandópolis. Las espécies
fueron colectadas en la huerta municipal y sistematizadas en la FEF. Para el estudio
farmacognóstico y microbiológico se utilizo metodologias discriminadas en farmacopéas,
con el objetivo de proponer una metodologia para identificación y control de las
espécies. Los resultados obtenidos mostraron que Solidago chilensis, conocida
popularmente como arnica-brasilera, presento un teor de flavonóides de 0,055%m/m y el
análisis fitoquímico preliminar de las hojas y flores constató la presencia de glucósidos
cardiotônicos; flavonóides como flavonol, flavanona y alcalóide presente apenas en las
hojas, en la determinación de cenizas totales se obtuvo 13,1% e insolúbles en ácido
1,8%, la pérdida por secage fué de 9,54%. La Ruta graveolens cuyo nombre popular es
arruda, obtuvimos un teor de flavonóides de 0,049%m/m y el análisis fitoquímico
preliminar de las hojas evidenció la presençia de alcalóide, flavonóides como isoflavona
y flavona, las cenizas totales fué de 15,1% e insolúbles en ácido 0,62%, la pérdida por
secage fué de 11,53%. En Chenopodium ambrosióides, conocida popularmente como
hierva-de-santa-maria, presentó un teor de flavonóides medido en 0,032%m/m, se
verifico la presencia de Flavonol y Flavanona, el índice de cenizas totales obtenido fué
de 14,5% e insolúbles en ácidos fué de 0,81% y pérdida por secage fué de 9,54%. En la
investigación antimicrobiana, se observó un pequeño halo de inhibición con el extracto
de la Ruta graveolens y de la Solidago chilensis, o sea, no huvo un crescimiento
microbiano en vuelta del disco impregnado con los respectivos extractos. Otros tests
específicos deven ser evaluados para garantizar la calidad de las plantas medicinales, lo
que viene intentandose hacer a través del programa del DAF/MS.
Referencias
1.
BRASIL, Ministerio da saúde. Agência Nacional de Vigilancia Sanitária. Resolução (RE) 89 de 16 de março
de 2004. Determina a publicação da lista de Registro Simplificado de Fitoterápicos junto ao sistema de
Vigilancia Sanitária. Diário Oficial da União, Brasilia, março de 2004. seção 1.
2.
Matos, Fracisco José de Abreu. Farmacias Vivas: Sistema de utilização de plantas medicinais projetado para
pequenas comunidades. 4 ed. Rev. Ampl.. Fortaleza: UFC, 2002.276p;
120
3.
4.
P 023
Simões, Caudia Maria Oliveira (Org) et al. Farmacognosia: da planta ao medicamento. 5 ed. Rev. Ampl..
Porto Alegre: Editora da UFRGS, 2003
World Health Organización (WHO). Monographs on selected medicinal plants. Genebra, 1999. 289p.
121
P 024
Estudio del aceite esencial y evaluación de la actividad alexitera
de Mikania micrantha Kunth (guako)
Camargo Francisco J.1, Torres Ana M.1, Ricciardi Gabriela A.1, Agrelo de Nassiff
Ada E.1, Dellacassa Eduardo 2, Ricciardi Armando I.A.1
Cátedra de Toxicología y Química Legal, FACENA. Universidad Nacional del Nordeste. Corrientes.
República Argentina. e-mail: [email protected]; 2 Cátedra de Farmacognosia y Productos
Naturales, Facultad de Química. Universidad de la República. Montevideo. Uruguay.
1
Mikania micrantha es una especie utilizada, como infusión, contra picaduras de
víboras (1) y en extractos como antibacteriano (2) y antifúngico (3). En su aceite
predominan hidrocarburos terpénicos y sesquiterpénicos (4,5).
Se colectó material vegetal en Corrientes (A. Rolón) en otoño (I) y verano (III),
obteniendo los aceites esenciales por destilación por arrastre con vapor de agua.
Se cuantificaron sus componentes por GC/FID, identificándolos por GC/EM y por
Índices de Kovats.
La actividad contra veneno de Bothrops neuwiedi diporus “yarará chica” se evaluó
por el tiempo de coagulación normal (TC) con la técnica del plasma recalcificado, la
dosis coagulante mínima (DCM) y la Inhibición de la actividad coagulante del
veneno de los extractos de partes aéreas macerados en agua (M1), alcohol (M2) y
hexano (M3) y de los aceites, midiendo el TC con el agregado de la mezcla
previamente incubada de veneno: extracto o aceites (30 minutos a 37 ºC).
Se identificaron el 95% de los componentes de I y de III con presencia mayoritaria
de hidrocarburos terpénicos y sesquiterpénicos entre los que se destacan α-tuyeno
(15-16%); α-pineno (15-10%) α-felandreno (tr-10%); α-terpineno (6-tr%); limoneno
(tr-5%); β-cariofileno (5-7%); germacreno D (10-5%) y biciclogermacreno (5-4%)
con proporción poco significativa de oxigenados (<10%).
M3 (verano) y III presentaron actividad anticoagulante lo que sugiere que
correspondería, frente a un accidente ofídico, usar esta especie recolectada en
verano.
Referencias
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2.
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Okunade AL J Ethnopharmacol. 1998 63 (3): 253-63
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5.
Camargo, FJ, Torres, AM; Agrelo de Nassiff, AE.; Ricciardi, AI.; Dellacassa, ES Comunicaciones
Científicas UNNE 2005
122
P 025
Fast preparative separation of flavones from Syngonanthus
dealbatus Silv. by HSCCC (High Speed Countercurrent
Chromatography)
Marcelo Aparecido da Silva, Wagner Vilegas, Lourdes Campaner dos Santos
Department of Organic Chemistry, UNESP, São Paulo State University, Instituto de Química de
Araraquara, C.P. 355, Zip Code: 14801-97, Araraquara, SP, Brazil. E-mail address:
[email protected], (Santos, L. C.)
Syngonanthus dealbatus Silv. is used as ornamental flower and represents an
important source of income to the population of Minas Gerais State. Taxonomic
studies to delimit the genus, about which there is still some confusion, and the
biological investigation into the isolated molecules are of great importance, because
several molecules possess antioxidant, citotoxic and mutagenic activities. We report
here the isolation of relevant flavonoids derived from MeOH extracts from capitulae
of S.dealbatus using HSCCC. Capitulae of S.dealbatus were collected at
Diamantina, MG, Brazil (voucher - SANO 2975) was deposited at the Herbarium of
the IB-USP. Capitulae of S. dealbatus (300 g) were separated, powdered and
successively macerated with Hex (2L), DCM (2L) and MeOH (2L), being left for one
week in each solvent. The MeOH extracts (850 mg), was subjected to HSCCC. The
semple solution was prepared by dissolving the MeOH extracts in the mixture
solution of lower phase and up phase (1:1) of the solvents system used for HSCCC
separation (EtOAc:H2O, 1:1). Then the apparatus was rotated forward at 850 rpm,
while the mobile phase (upper phase) was pumped into the column in a head to
tail,direction at a flow-rate of 1.0 ml min-1. The retention of the stationary phase for
this solvent system was 83.0 % at 850 rpm. Fractions 72-102 (590 mg total) was
submitted the HSCCC, gradient elutions has happened in four stages composed of
(A) EtOAc:n-BuOH:H2O (4.1:0.9:5.0, of the fractions 0-41), (B) EtOAc:n- BuOH:H2O
(3.6:1.4:5.0, of the fractions 42-74) and (C) EtOAc:n-BuOH:H2O (3.1:1.9:5.0, of the
fractions 75-103) (D). From the HSCCC experiment, we were able to isolate
flavonoids (1-3) which exhibited an increase in the mobile phase. Fractions 21-26 (8
mg) afforded 1. Fractions 46-58 (11 mg) afforded 2. Fractions 79-86 (10 mg)
afforded 3. Compounds 1, 2 and 3 were identified by their NMR spectra and by
comparison with previous data reported in literature.
OH
OH
R2
O
R1
OH
Compounds
1
2
3
R1
H
C-Gal
C-Gal
R2
OH
CH3O
OH
O
123
P 025
Acknowledgements: FAPESP, CNPq, CAPES.
124
P 026
Studio critico preliminare sullo stato attuale della collezione di
Salvia nei Giardini Botanici Hanbury
Erica Campodonico1, Barbara Ruffoni1, Pier Giorgio Campodonico3, Paola Profumo,
Angela Bisio2, Giovanni Romussi2
CRA-FSO Unità di ricerca per la Floricoltura e le specie Ornamentali, corso Inglesi 508, 18038 Sanremo
(I). 2Dipartimento di Chimica e Tecnologie Farmaceutiche e Alimentari, Università di Genova, Via Brigata
Salerno 16147 Genova, (I). 3Giardini Botanici Hanbury, Università di Genova, corso Montecarlo 40, La
Mortola, 18039, Ventimiglia (I)
1
Si riportano i risultati preliminari del lavoro di catalogazione effettuato presso i
Giardini Botanici Hanbury (Ventimiglia, Italia) delle specie di Salvia appartenenti alla
locale collezione. Il criterio seguito è stato quello fitogeografico, in base alle diverse
aree di origine, seguendo la sistematica del genere riformata da Alziar ed Hedge. Le
zone geografiche di biodiversità del genere sono sei: Stati centro-meridionali degli
U.S.A. e California, 40 taxa (17 in California); Messico, 300 taxa; Sud-America 210
taxa; Europa, Africa Mediterranea ed Asia Occidentale, complessivamente 210
taxa; Sud-Africa, 70 taxa; Asia Orientale, 90 taxa.
L’elenco dei taxa del genere Salvia L. riportato nel catalogo Hortus mortolensis,
pubblicato nel 1995 da Campodonico, è stato confrontato sia con i taxa presenti
attualmente, sia con quelli presenti nei cataloghi precedenti, allo scopo di verificare
se nel corso di oltre un secolo, l’acclimatazione di specie provenienti da altre zone
del mondo in questo Orto Botanico è stata efficace, e se quindi il clima ne consente
una coltivazione ottimale.
Sono state anche citate sinonimie evidenziate nel corso del tempo.
References
.Alziar, Gabriel: “Catalogue synonimique des Salvia L. du monde (Lamiaceae)" Biocosme, Revue
d’histoire naturelle, 5 (3-4)-1988 ; 6 (4)-1989 ; 9 (2-3)-1992 ; 10 (3-4)-1993.
Hedge, I.C. 1974: “A revision of Salvia in Africa including Madagascar and the Canary Island”.
Campodonico, Pier Giorgio; Orsino, Francesco; Cerkvenik, Cristina: 1995 “Enumeratio plantarum in
Horto Mortolensi cultarum” Microart’s Eds., Recco (Genova, Italy).
Erhardt, Walter; Götz, Erich; Bödeker, Nils; Seybold, Siegmund 2000: “Zander – Dictionary of plant
names’’ 16th edition. Eugen Ulmer GmbH & Co. Eds., Stuttgart, Germany.
Cronemeyer, Gustav 1889: “Systematic catalogue of plants growing in the open air in the garden of
Thomas Hanbury F.L.S.” Printed by G. A. Koenig, Erfurt.
Dinter, Kurt 1897: “Alphabetical Catalogue of Plants growing in the open air in the garden of Thomas
Hanbury F.L.S.” Printed by Waser Brothers, Genoa.
Berger, Alwin 1912: “Hortus mortolensis”. West, Newman & Co., Hatton Garden, London.
Ercoli, Mario; Lorenzi, Maurizio and Lady Hanbury O.B.E. 1938: “La Mortola Garden Hortus Mortolensis.”.
Oxford University Press. London: Humphrey Milford.
125
P 027
Anti-inflammatory activity of green beans from Coffea robusta L.
methanolic extract in rats: morphological observations
D’Angelo V.1, Campolo L.1, Trovato A.1, Zichittella L.2, Lo Cascio P.2, Pergolizzi S.2
1
2
Pharmaco-Biological Department, School of Pharmacy, SS. Annunziata, 98168 Messina, Italy
Department of Foods and Environmental Sciences. Sal. Papardo, 98168 Messina, Italy
Caffein [1,3,7-trimetilxantine] is a natural alkaloid presents in coffee, tea, guarana
and mate plants. Some authors describe a stimulating action in CNS, diuretic,
vasodilatatory, bronchodilatatory properties [1,2] and also evidence hepathic lipolisis
of caffeine. It also inhibits cyclooxigenase-2 (COX-2) and inducible nitric oxide
synthase (iNOS) expression [3]. The antioxidant effects of polyphenols from coffee
beans have been previously reported [4].
In this study the anti-inflammatory activity (carrageenan-induced paw oedema test)
of a methanolic extract from green beans of Coffea robusta L. (Rubiaceae) has
been examined in the rat.
The extract was applied topically in an ointment form, after the carrageenan
injection. The ointments were prepared using methanolic extract (140 and 420 mg/g
of drug) and vaseline, resulting in concentration of 7% and 21% (w/w), and a
ointment containing caffeine in the same concentration, which were then topically
applied on the paw of rats. Male Wistar rats (180-200 g) were treated with green
coffee, caffeine and commercial ointment; the last group was control. The
commercial ointment was used as a standard anti-inflammatory drug. Specimens
from skin were processed for histological observations.
Results showed that the treatment with extract and caffeine ointment (21%) reduced
the paw oedema measured 3h after carrageenan administration, suggesting an antiinflammatory activity upon topical administration. Morphological data evidenced
decreased number of both inflammatory cells and vessels; the thickness of
epidermis was reduced comparing with control samples.
These data suggest that methanolic extract of green coffee beans decreases
inflammation in the rats.
References
1.
Lupi, O. et al. (2007), J. Cosmet Dermatol., 6, 102-107
2.
Meringhe, S. et al. (2007), Mol. Pharmacol., 72, 395-406
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4.
Ramalakshmi, K. et al. (2007), J. Foods Science, 72, S333-S337
126
P 028
Etnobotanica e bioattività di specie officinali siciliane coltivate
Maria Canzoneri
Regione Siciliana. Assessorato Agricoltura e Foreste. Azienda Regionale Foreste Demaniali.
Dipartimento – Palermo, Via Libertà, 97. e-mail: [email protected]
La ricerca si prefigge lo scopo di definire le condizioni più adatte alla coltivazione e
alla diffusione, nel territorio siciliano, di piante medicinali native note nella tradizione
popolare locale. Viene descritta l’ etnobotanica 1 delle specie: Antillys vulneraria L.
subsp. busambarensis (vulneraria), Borago officinalis L. (borragine), Calaminta
nepeta (L.) Savi subsp. nepeta (nepetella), Cichorium intybus L. (cicoria),
Foeniculum vulgare Miller subsp. vulgare (finocchio selvatico), Hypericum
perforatum (L.) (iperico o erba di S. Giovanni), e Sideritis italica (Miller), (Sideritis
siciliana). Gli studi farmacologici2 e le indagini svolte sulla loro utilizzazione
dimostrano che le specie borago, antillys, calaminta e hypericum hanno in comune
proprietà vulnerarie; cicorium e foeniculum agiscono come depurativi; in particolare,
la prima sull’attività epatica come coleretico, la seconda su quella gastro-intestinale
come carminativo.
Borragine, cicoria, vulneraria, iperico e finocchio vengono utilizzati in preparazioni
fitoterapiche presenti in commercio. Calaminta nepeta (L.) Savi e Sideritis italica
(Miller), sono state oggetto di studi più recenti3,4 che hanno messo in luce l’attività
antimicrobica (C. nepeta) e antibatterica (S. italica) degli oli essenziali in esse
contenuti.
Viene descritta la realizzazione di un “campo catalogo” di queste specie, in un’area
a circa 150 metri sul livello del mare, che sta consentendo di verificare che esse si
adattano facilmente in coltura con metodi naturali, ad eccezione della vulneraria.
Le piante saranno oggetto di ulteriore valorizzazione attraverso progetti di ricerca e
divulgazione mirati a riconoscere e sfruttare il potenziale farmacologico,
agrotecnologico e farmaceutico costituito dalle specie officinali native della Sicilia.
Il campo catalogo è stato realizzato con fondi dell’Azienda Regionale Foreste
Demaniali.
Riferimenti
1.
F. Lentini, F.M. Raimondo, Quad. Bot. Ambientale Appl., 1990, 1, 103-117; F.M. Raimondo, F.
Lentini, Naturalista sicil., 1990, S IV (3-4), pp 77-99; V. Ilardi, F.M. Raimondo,Quad. Bot.
Ambientale Appl., 1992, 3: 41-51; Azienda Foreste Demaniali, Il popolamento vegetale della
riserva dello Zingaro, 1998.
2.
P. Gastaldo, Compendio della FLORA OFFICINALE ITALIANA. Piccin; Padova, 1987
3.
Serena Riela, Maurizio Bruno,Carmen Formisano, Daniela Rigano, Sergio Rosselli, Maria Luisa
Saladino, Felice Senatore, J. Sep. Sci. 2008, 31, 1110 – 1117
127
4.
P 028
Basile A., Senatore F., Gargano R., Sorbo S., Del Pezzo M.,Lavitola A., Ritieni A., Bruno M.,
Spatuzzi D., Rigano D. , Vuotto M.L, Journal of Ethnopharmacology , 2006, 107: 240–248;
128
P 029
Componentes volátiles de las hojas de Ottoa oenanthiodes
Kunth
Carnevali M¹, Contreras M¹, Rojas L¹, Burgos E¹, Usubillaga A¹.
¹ Instituto de investigaciones de la facultad de Farmacia y Bioanálisis. Universidad de Los Andes. Urb.
Campo de Oro. Mérida. Código Postal 5101.Venezuela. Email: [email protected].
Ottoa oenanthiodes pertenece a la familia Umbelliferae es conocida como cebolla
de los páramos¹. Es una hierba pequeña, con raíz gruesa, tallo erecto, hojas
pequeñas poco desarrolladas con vainas cilíndricas y largas. Presenta flores color
blanco o crema, agrupadas en umbelas compuestas. Mide aproximadamente de 15
a 17 cm. de alto y habita en lagunas pantanosas. Se localiza en los Andes desde
México hasta Ecuador y en Venezuela en los paramos ². Para nuestro conocimiento
no hay reportes sobre los componentes volátiles de esta especie. La separación de
estos se realizó por hidrodestilación empleando la trampa de clevenger por cuatro
horas y media obteniendo de 800 g de planta 1.5 ml del aceite ligeramente amarillo.
La identificación se realizo por un sistema GC/MS hewlett packard MSD 5973 con
una columna de fenil−metil−polisiloxano de 30 m x 0.25mm (HP−5) y con la ayuda
de una librería Wiley MS Data (sexta edición, 275K Spectra). Se lograron separar
13 componentes, siendo los mayoritarios, dos componentes de origen fenolico: 2vinyl-1-benzofurano (31.21%) y 3-metoxi-2-naftalenol (34.71%).
Agradecimientos: Dirección de asuntos estudiantiles DAES − ULA.
Referencias
1.
Henrri Pitier. 1978. Manual de las plantas usadas de Venezuela y su suplemento. Editorial Arial,
S.A. Barcelona (España).
2.
L. Schine. 1960. Plantas comunes de Venezuela. Revista de la facultad de agronomía de la
Universidad central de Venezuela. Maracay (Venezuela).
129
P 030
Cultivation of wild medicinal species: opportunities and
constraints
A. Carrubba, C. Catalano, R. Bontempo
DAAT-Dip.to Agronomia Ambientale e Territoriale (Dep. for Land and Environmental Agronomy),
Università di Palermo, Viale delle Scienze, 90128 Palermo (Italy). e-mail: [email protected]
In medicinal plants (MPs), the transition from “discovery” to “cultivation” stage
involves a decreasing recourse to their collection from the wild, accompanied by an
increasing interest in their suitability into agricultural or silvicoltural cropping systems
[1]. Collecting from the wild, although is surely the oldest method for obtaining MPs,
allows to satisfy very limited needs and is hardly suitable to an industrial use,
because: 1) gathering from the wild does not guarantee the quantitative and
qualitative uniformity that nowadays are well defined requirements of the
consumers. Spontaneous yields are difficult to quantify and sometimes may be
overestimated, above all when random and unforeseen phenomena generate a
lowering of natural stocks. 2) Specialized production allows to reduce the depletion
of natural stands. 3) Cultivation allows to exploit uncommon or rare plant species,
dealing with some pharmaceutical interest but not represented in the wild in a
satisfactory amount. MPs have been scarcely addressed to breeding activity, and
even when cultivated they show (as a result of their evolutive process) many traits
typical to the wild species that represent crucial constraints to their agronomical
exploitation. Among these: 1) an indeterminate growth habit, common to many MPs,
that forces the plant to a continuous production of flowers and fruits; 2) seeds
dehiscence, developed by plants in order to facilitate their dissemination; 3) a low
competitivity in field towards other species (weeds).
Does cropping technique influence, and to what extent, the yield response of MPs?
Fertilization, tillering or irrigation generate modifications in the growth environment
of plants; other cropping techniques cause variations in the temperature,
photoperiod and moisture conditions; the elimination of all companion plants causes
competition to shift from interspecific (typical of natural stands) to intraspecific
(typical of field crops); with varying plant population, cultivation alters plant
geometry, height and distribution of reproductive organs, with significant
consequences as the marketable product is represented by seeds. In MPs, in which
all qualitative and quantitative traits are extremely important, deeper and careful
studies should be addressed to the choice of the most proper cropping technique.
References
1.
Schippmann, U. et al. (2002) Impact of cultivation and gathering of Medicinal Plants on biodiversity:
global trends and issues. FAO, Rome.
130
P 031
Phenological and agronomical evaluation of chamomile in
Mediterranean environments
A. Carrubba, C. Catalano, R. Bontempo, V. Ascolillo
Chamomile (Chamomilla recutita (L.) Rausch.) is an annual crop, known worldwide
as one of the major medicinal herbs. Its flower heads are reported in the official
Pharmacopoeia of 26 countries [1]. In order to evaluate the suitability of chamomile
to a low-input field cropping management into a semiarid Mediterranean
environment, a long-term research activity has been carried out in the experimental
farm “Sparacia” (Cammarata – AG – Sicily); hereby we report the results obtained
on plants grown in self-seeded experimental plots in 2007/08. Plants development
was observed from November 2007 up to (visually assessed) flowers appearance.
Blooming started in middle February, and in middle April (after 60 dd from the onset
of flowering), the plants were collected. All flowers of 10 sample plants were sorted
according to their stages of development, namely: I - buds; II – ligulate fl. developed;
III – tubulate fl. more or less opened; IV – decaying [2]. The numerical proportion of
such flower stages was used to calculate the blossom index (BI), that in our
collection time (16/04/2008) averaged a value of 0.23. The mean BI value originated
from strongly different individual values, even if most flowers were belonging to the
stage III (23 flower heads per plant), in which essential oil content was stated to be
the highest [3]. The major data measured on plants are shown in table 1. In our trial,
chamomile has confirmed a good aptitude to self-seeding, expressing a good yield
level, even in lack of significant technical inputs.
Table 1. Sparacia (Cammarata, AG, Sicily), 2008. Observations on Chamomile (Chamomilla recutita (L.)
Rausch). Each value is the average of 10 measurements ± standard deviation.
Plants height (cm)
Layer of flowers (cm))
Number of ramifications
58.80 ± 11.64
17.30 ± 9.19
17.50 ± 12.71
Plant weight (g)
Herbal
Fresh
Dry matter
product
21.88 ± 17.72 4.30 ± 3.66
3.9 2± 3.33
Flower weight/plant (g)
Herbal
Fresh
Dry matter
product
5.58 ± 4.34
1.36 ± 1.14
1.20 ± 1.02
References
1.
Baghalian et al. (2008), Scientia Horticulturae, 116, 437-441.
2.
Franz, C. (1986), Acta Hort., 188, 157-162.
3.
Franz, C. (1980), Acta Hort., 96, 317-321.
131
P 032
Plant species for mucilages as crops for Mediterranean
environments
A. Carrubba, V. Ascolillo, C. Catalano, R. Bontempo
Mucilages contained inside Psyllium (Plantago spp.) husks deal with cholesterollowering effects, a mild and effective laxative activity, and insulin sensitivity
improvement
capacity
and therefore may play
beneficial effects on
human health[1].
We report the results of a
trial performed on 96
Psyllium
samples
obtained from 2004 to
2007
from
four
evaluation trials about
the use of different
techniques for nonchemical weeds control,
Weight of 100 seeds and swelling capacity of Psyllium samples of
carried on in the
different origin; ⃝ : 2003/04; ✴ : 2004/05; ∆ : 2005/06; ⃟ : 2006/07. experimental
farm
Solid lines represent mean values; dotted lines mark mean values ±
“Sparacia” (Cammarata –
standard deviations; each point is the average of four repetitions.
AG – Sicily; 37° 38’ N;
13° 46’ E). According to [2], the equilibrium percent swelling (Ps) of the Psyllium
samples was calculated as: Ps= (Ws – Wd)/Ws x 100, where Ws: weight of swollen
seeds and Wd: weight of dry seeds. The experiment was repeated twice for each
seed sample, and the statistical analyses were applied by means of the statistical
package SAS 9.1. No effect was found to be exerted by the diverse agronomic
techniques, but a strong clustering of data was found in 2 over 4 collection years.
Climatic and environmental features may therefore play on swelling ability of
Psyllium seeds a more significant role than cropping technique.
References
1.
Yu, L. et al. (2003), Food Chem., 82: 243–248.
2.
Singh, B. et al. (2007), Carbohydrate Polymers, 69: 631–643.
3.
Applequist W.L. (2006), Taxon, 55, 1: 227–238.
132
P 033
Essential oils from Ecuadorian herbs, as inhibitors of microbial
growth in meat products
Cazar M.E, Idrovo A, Cazar A
Universidad del Azuay. Laboratorio de Biotecnología de Productos Naturales. Avda. 24 de Mayo 7-77 y
Hernán Malo. CP 01.01.981. Cuenca. Ecuador
Essential oils are substances obtained from plants, by means of some distillation
processes. The main components of these substances are terpenes, associated to
other volatile components (1). Higher plants produce terpenes as a defense towards
pathogens attack. Biological activities of monoterpenes include insecticides,
antifeedants and antimicrobial compounds (2). Antimicrobial properties of herbs and
spices have been recognized and used since ancient times. However, a renewed
interest in natural preservation appears to be stimulated by present food safety
concerns, growing problems with microbial resistance and a rise in production of
minimal processed food joined with the use of natural preservers (3). In the present
work, we tested the antibacterial activity of essential oils mixtures from rosemary
(Rosmarinus officinalis), cumin (Cuminum cyminum) and basil (Ocimum basillicum),
as inhibitors of the microbial growth in hamburgers. A mixture experimental design
was performed to establish antagonistic or synergistic effects between the essential
oils studied as food preservers. Response variables were total bacteria, coliforms
and enterobacteria. The calculated model allowed us to identify the mixture which
inhibits the microbial growth in meat.
Response variable
Coliforms
Enterobacteria
Total bacteria
Special Cubic Model
0.669B + 0.284R + 0.34C – 0.242BR + 0.942BC + 2.473RC – 11.787BRC
5.431B + 3.381R + 14.703C – 6.076BR – 19.668BC – 15.681RC – 100.209BRC
10.576B + 6.588R + 18.277C + 55.44BR + 9.664BC + 10.069RC – 291.256BRC
The calculated models showed that basil – rosemary mixtures inhibit the growth of
total bacteria and coliforms. Mixtures prepared with the three essential oils have an
antagonistic effect in all the responses studied. Moreover, a sensorial analysis with
the meat products and the essential oils mixtures was performed in order to find the
effect of the preserver mixture in flavor, odor and color of hamburgers. The basil –
rosemary mixture presented the best acceptance from the panel. This finding shows
the possibility to replace chemical food preservers with essential oils.
References
1.
Bandoni A. (2000). Los Recursos Vegetales Aromáticos en Latinoamérica. Editorial de la
Universidad Nacional de La Plata. Argentina.
133
2.
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application techniques against rye bread spoilage fungi. JAM., 94, 665 – 668.
134
P 034
Determinaciones fisicoquímicas en frutos de Guayaba (Psidium
guajava) proveniente de México
Chavez G.L.R., Cortés P.C.J., Yahuaca J.B., Bartolomé C. C.
Fac. Q.F.B., Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Tzintzuntzan 173, Col. Matamoros,
Morelia Mich, C.P. 58240, México.
La guayaba, originaria de América, se encuentra dispersa desde México hasta
Brasil (1). Se consume en fresco, preparación de aguas de fruta, conservas y
dulces. En México, la región de Michoacán ocupa el primer lugar nacional en
producción de guayaba. El fruto es una baya globosa con una especie de corona en
la punta, verde, tornándose amarilla al madurar con semillas envueltas en la pulpa.
En su maduración ocurren cambios externos de sabor y textura, descenso del
contenido de almidón, incremento de la concentración de azúcares, reducción de la
concentración de ácidos, cambio de coloración del pericarpio y perdida de firmeza
(2). En este trabajo se evaluaron las características fisicoquímicas de frutos de
guayaba (Psidium guajava) y su evolución en el proceso de maduración para
establecer el nivel de calidad. Los parametros determinados fueron: color, tamaño,
grados Brix, uniformidad, simetría, proporción de semillas, daño general y firmeza.
El objeto de estudio fueron guayabas seleccionadas de primera calidad de la región
de Zitácuaro, Mich., México. El ensayo estuvo conformado por 5 lotes de 10
unidades cada uno con 3 repeticiones. Los resultados obtenidos nos permiten
concluir que de acuerdo a la norma del Codex Alimentario los frutos analizados se
clasifican como de calidad primera teniendo un peso de entre 75 a 100g y defectos
leves. En el color, se observa un cambio del verde en estado no maduro del fruto al
amarillo en fruto maduro. La firmeza, se ve disminuida al transcurrir el tiempo.
Referencias
1.
Mata B. I., Rodríguez M.A., 1990, Cultivo y producción del Guayabo, Ed. Trillas.
2.
Adsule, R.N. y Kadam, S.S. 1995. Guava. En: Mitra, S(Ed). Postharvest physiology and storge of
tropical and subtropical fruits. CAB. Internacional. Pág. 145-160.
135
P 035
Actividad antiulcerogênica de la fraccion acetato de la especie
Indigofera suffruticosa Mill.
Cola M1, Barbastefano V1, Luiz-Ferreira A1, Vinagre A. M1, Farias-Silva E1, Calvo T.
R2, Hiruma-Lima C. A3, Pellizon C. H3, Vilegas W2, Souza Brito A. R. M1
Departamento de Química Orgânica, Instituto de Química, UNESP, Araraquara/SP, Brasil;
3Departamento de Fisiologia, Instituto de Biociências, UNESP, Botucatu/SP, Brasil.
1
2
El género Indigofera es uno de los seis mayores géneros de la familia
Leguminosae. La especie Indigofera suffruticosa es muy utilizada para el
tratamiento de las úlceras gástricas en algunas comunidades indígenas. El proceso
de formación de la úlcera gástrica envuelve el desequilibrio de los mecanismos
defensores y agresores de la mucosa gástrica. En este trabajo fue evaluada la
actividad antiulcerogênica de la fracción acetato (fAc) de las partes aéreas de I.
suffruticosa. La fracción metanólica fue obtenida por maceración en MeOH,
siguiendo por filtraje y concentración en rotavapor. La fracción acetato (fAc) fue
obtenida dividiendo-se una parte del extracto metanólico de I. suffruticosa (3 g) en
una mezcla de EtOAc/agua (1:1). La actividad antiulcerogênica fue evaluada con la
inducción sub-crónica de úlcera gástrica con ácido acético 30%. Los ratones,
después de la inducción, fueron tratados con el control negativo (tween 80, 12%),
control positivo (cimetidina, 100 mg.kg-1) y fAc (100 mg.kg-1). La análisis histológica
de la mucosa gástrica fue echa empleando-se los ensayos de coloración por H&E y
reactivo de Schiff (PAS). fAc disminuyó significativamente las lesiones gástricas
(40% en la dosis de 100 mg.kg-1). En los estómagos colorados por H&E, observó-se
en el control negativo la renovación desordenada del epitelio y margen de la úlcera.
Además, la formación de glándulas fue desordenada. Mientras, en los animales
tratados con cimetidina o fAc observó-se un alargamiento de las glándulas mucosas
situadas en la región de regeneración. Detectó-se en estos grupos grandes
cantidades de muco adherido à mucosa, confirmado por la técnica de PAS (color
púrpura). Los resultados demuestran que fAc reduce las áreas lesadas, y
comprueba la actividad cicatrizante de la especie evaluada.
Acknowledgements: Apoyo financiero: CNPq
136
P 036
Alkaloids and biological activity of ethanolic extract from
Rollinea fendleri
Colman.-Saizarbitoria T., Ibarra S., Capputto A. , Pastorello M., Sterm A., Amesty A.
Laboratorio de Bioensayos y Productos Naturales, Laboratorio de Modelado Molecular, Facultad de
Farmacia, Universidad Central de Venezuela, Caracas, Venezuela.
The Annonaceae family have many alkaloids, some of them with cytotoxic,
antiprotozoal, antivirus, antibacterial and cardiovascular activities. In this research
we report for the first time phitochemistry and biological activities studies of the
leaves of Rollinea fendleri. The ethanolic extract was obtained by Soxhlet extraction
for 12 hours. Three oxoaphorphine alkaloids were isolated from the extract, using
successive chromatography over silica gel. The structures of O-metilmoshatolina,
Lysicamine and Liriodenine were established by spectroscopic methods (UV, FT-IR,
EM, 1H-RMN y 13C-RMN). Antimicrobial activity (1) of the ethanolic extract was
determined against 6 bacterial strains, Gram-positive bacteria (2 species), Gramnegative bacteria (3 species) and fungi (1 specie). The agar disc diffusion test was
used to determine the sensitivity of the ethanolic extract, showing activities against
Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis. Also the ethanolic extract was
submitted to evaluation of the antiinflammatory activity in rats, using the
pharmacologic models of carrageenin-induced pedal oedema (2). We used 4 groups
of male rats: Group I (intraperitoneal; negative control), Group II (oral route;
phenylbutazone 80 mg/Kg), Group III and Group IV (oral route; 60 and 80 mg of
extract). The inflammation was calculated after 1h and 3h post treatment. The antiinflammatory effect of the ethanol extract of the leaves of Rollinea fendleri has been
studied and it was found to be significant when compared to the standard drugs.
Acknowledgment: Financial support from CDCH. 06.00.6994-2007.
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137
P 037
Hypoglycemic effect and antioxidant activity of the ethanolic
extract of Cecropia metensis
Colman-Saizarbitoria, T., Osorio, M., Ciangherotti, C., Amesty, A.
Laboratorio de Bioensayos y Productos Naturales and Laboratorio de Modelado Molecular. Facultad de
Farmacia. Universidad Central de Venezuela.
Oxidative stress and oxidative damage to tissues are common end points of chronic
diseases such as atherosclerosis, diabetes, and rheumatoid arthritis. Venezuelan
popular medicine of the east part of the country has used the Cecropia metensis
(Yagrumo) leaves infusion as antidiabetic. The investigation objective was to
determine the hypoglycemic effect and the antioxidant activities of the ethanolic
extract of C. mentensis. The ethanolic extract (EEY1) was obtain from the leaves
after 12 hours extraction on a Sohxlet. The oral acute toxicity of EEY1 was
evaluated among male INH mousses (18 -20g) to obtain a DT50 > 250 mg/Kg. pc.
Furthermore, the DL50 > 1000ppm was determined via Artemia salina Leach method
(1). The EEY1 hypoglycemic effect (2) was analyzed in male rats Sprague-Dawley,
by giving a single oral dose for each group that differ in concentration (100mg/Kg,
300mg/Kg, and 1000mg/Kg correspondingly), we noted the highest reduction
(37,27%) of the glucose levels with the concentration de 300mg/Kg., after 5 hours
post-administration. Glibenclamida (10mg/Kg) was used as reference drug,
showing similar activity of the ethanolic extract. The antioxidant activity at room
temperature was studied by methods based on 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl
(DPPH ) (3). Kinetics of anti-radical activity showed that the reaction between
DPPH and the extract of leaves was rapid and reached the steady state in 2 min.
showing K = 583.33±23.57(seg.-1 M-1 ). These results validate the popular practice
to use Cecropia metensis leaves infusion as an effective hypoglycemic infusion. We
conclude that Cecropia metensis possess both hypoglycemic and antioxidative
activities and that their proper use may help decrease the oxidative load in diabetes
mellitus.
Acknowledgment: Financial support from CDCH. 06.00.6994-2007.
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138
P 038
Componentes volátiles de Galinsoga parviflora (Asteraceae) que
crece en los Andes Venezolanos
Contreras M.1, Rojas L.1, Carnevali M.1, Arzola J.2, Usubillaga, A.1
Instituto de Investigaciones. Facultad de Farmacia y Bioanálisis. 2Jardín de Plantas. Facultad de
Farmacia y Bioanálisis. Urb. Campo de Oro. Universidad de Los Andes. Mérida-Venezuela. Email:
[email protected]
1
Galinsoga parviflora (Asteraceae) es una hierba de origen americano, conocida
comúnmente como albahaca silvestre, se distribuye desde Estados Unidos a
Sudamérica. En el presente trabajo se aislaron los componentes volátiles de las
hojas (250 g) de G. parviflora por arrastre con vapor de agua utilizando una trampa
de Clevenger. Para la separación e identificación de los compuestos se utilizó la
GC-MS, empleando un equipo Hewlett Packard 5973 GC/MS a 70 eV, equipado
con un inyector automático, utilizando una columna capilar HP-5MS (30 m, 0.25
mm, 0.25 µm). Se inyectó una muestra de 1.0 µL de una solución al 2% del aceite
esencial en n-heptane con reparto de 100:1, a una temperatura de inyección de 200
ºC. La identificación de los componentes del aceite se realizó mediante
comparación computarizada de los espectros obtenidos con los espectros de una
Librería Wiley (6ta Edición). Se determinaron los índices de Kováts analizando
conjuntamente la muestra con una mezcla de n-alcanos. Un aceite de color amarillo
fue obtenido con un rendimiento de 0.001%. Un total de 18 constituyentes fueron
identificados siendo los mayoritarios: 1-pentadecano (58.56%), - farneseno
(11.17%), 1-octadecano (5.37%) -bisaboleno (4.98%).
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139
P 039
Componentes volátiles de la Carramboa littlei Aristeg.
(Asteraceae) especie endémica de los Andes Venezolanos
Cordero de Rojas Y.1, Rojas L.1, Usubillaga A.1, Gilberto Morillo G.2
Instituto de Investigaciones, Facultad de Farmacia y Bioanálisis. 2Facultad de Ciencias Forestales y
Ambientales. Universidad de Los Andes. Urb. Campo de Oro 5101. Mérida-Venezuela.
1
El género Carramboa (familia Asteraceae), perteneciente antiguamente a las
Espeletias, fue creado por Cuatrecasas y comprende 7 especies, dentro de las
cuales se encuentra la Carramboa littlei Aristeg., endémica de los paramos andinos
y perteneciente a la sub-tribu Espeletiinae. A nivel popular la decocción de las hojas
y cataplasmas son utilizadas contra el asma y las afecciones pulmonares, debido a
sus propiedades sudoríficas, antibronquiales y antigripales. En el presente trabajo
se realiza el estudio de los componentes volátiles de la C. littlei. Estos fueron
aislados de las hojas frescas, por arrastre con vapor de agua, e identificarlos por
GC-MS, empleando un equipo Hewlett Packard 5973 GC/MS a 70 eV, utilizando
una columna capilar HP-5MS (30 m, 0,25 mm, 0,25 µm). Se empleó una
temperatura inicial de 60 ºC (1 min) y luego se calentó a razón de 3 °C/min hasta
260 ºC (20 min). Se inyectó una muestra de 1,0 mL de una solución al 2% del
aceite esencial en n-heptane con reparto de 100:1. Se utilizó una temperatura de
inyección de 200 ºC. La identificación de los componentes del aceite se realizó
mediante comparación computerizada de los espectros obtenidos con los espectros
de una Librería Wiley (6ta Edición). Se determinaron los índices de Kováts
analizando conjuntamente la muestra con una mezcla de n-alcanos. Del análisis de
los componentes volátiles se identifico como componentes mayoritarios:
germacreno D (50 %) y 19-oxo-ent-kaur-16-ene (21,82 %). Es la primera vez que se
reportan los componentes volátiles de esta especie.
Referencias
1.
140
P 040
Effetti salutistici del vino: analisi e quantificazione di composti
stilbenici lungo la filiera produttiva
Crosta L., Tolomeo M., Grippi F., Curione A.,Oliveri F.,Gebbia N.
Consorzio di Ricerca sul Rischio Biologico in Agricoltura, Via G.Marinuzzi 3, 90129, Palermo, Sicilia
Questa ricerca nasce dall'osservazione di uno stretto collegamento nell'uomo, tra
moderato consumo di vino rosso e bassa incidenza di malattie cardiovascolari e
tumori(1). Per il mercato mondiale, il contenuto di stilbeni (S) è un parametro importante
nella valutazione della qualità dei vini. Agli S appartiene il trans-resveratrolo (R), legato al
cosiddetto “paradosso francese”, dovuta all’azione anti-aggregante piastrinica, antiinfiammatoria, vasodilatatrice, di modulazione del metabolismo lipidico e di prevenzione
dei tumori. Altro S è il piceatannolo (P), o astringinina(2), un antileucemico ed
antiossidante, ritenuto la forma attiva di R in differenti sistemi in vitro di cellule tumorali.
Vista l’importanza degli S per la salute e la posizione geografica della Sicilia, fattori che
potrebbero aumentare la produzione di sostanze salutistiche, il Co.Ri.Bi.A., Consorzio di
Ricerca sul Rischio Biologico in Agricoltura e Centro Regionale per la sicurezza dei
prodotti agroalimentari, ha svolto un'indagine per valutare il contenuto di R e di altri S. La
ricerca è stata effettuata nei vini siciliani valutando l'influenza di fattori agronomici ed
ambientali sulla loro produzione. Le analisi sui vini sono state effettuate su cento
campioni di vini rossi siciliani e i risultati sui contenuti di S sono stati relazionati alle
condizioni pedoclimatiche dei terreni e alle modalità di vinificazione. Le analisi sulle uve
sono state effettuate considerando tre vitigni autoctoni siciliani. In una successiva fase, è
stato valutato l'andamento delle concentrazioni di S, attraverso diverse filiere produttive
vitivinicole siciliane. Si è osservata la variazione nel contenuto di S nelle fasi di
produzione del vino stesso. Le ricerche condotte dal Co.Ri.Bi.A. hanno evidenziato la
presenza di R e P nei vini e nelle uve rosse siciliane. Da sottolineare che P è uno S mai
presente nei prodotti enologici ed in uve di altre regioni. In letteratura, si riporta di uve e di
vini non siciliani in cui la biosintesi di P è stata stimolata sperimentalmente mediante
radiazioni UV. Inoltre è emerso che il Perricone, vitigno autoctono siciliano, produce vini
con elevate quantità di P e R e che nel Nero d'Avola, anch’esso autoctono, sono presenti
due interessanti S, ad oggi mai rilevati in uve ed in altri frutti commestibili. Questi dati
apportano ai prodotti viticoli ed enologici siciliani un valore aggiunto di tipo salutistico,
sottolineando anche la peculiarità della regione siciliana che, per le sue condizioni
pedoclimatiche, riesce a dar vita a prodotti agricoli di grande rilievo.
La ricerca è stata finanziata dall'Assessorato Agricoltura della Regione Siciliana
Bibliografia
1.
Gebbia N., Bavaresco L., Fregoni M., Civardi S., Crosta L., Ferrari F., Grippi F., Tolomeo M., Trevisan M.
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P 040
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Bavaresco, L. , Fregoni, C., Cantù, E., Trevisan, M., (1999),. Drugs Exptl. Clin. Res. XXV, 57-63.
142
P 041
Antioxidant properties and tyrosinase inhibitory activity of the
leaves from Trichilia emetica Vahl. (Meliaceae)
D’Angelo V1, , Miano TC1, Perna V1, Mecchio A1, Sanogo R2, Germanò MP1,
Pharmaco-Biological Department, School of Pharmacy, University of Messina, SS. Annunziata, 98168
Messina, Italy. 2 Traditional Medicine Department, B.P. 1746, Bamako, Mali, Africa
1
Trichilia emetica Vahl. (Meliaceae) is a tree commonly used in folk medicine of Mali
for the treatment of various diseases. The leaves are used in the form of decoction
for the cure of scabies, malaria, wounds, hypertension, burns, intestinal parasites,
cutaneous infections, rheumatism and lumbago. The complement fixation ability of
the polysaccharides from Trichilia emetica leaves has been reported [1]. In addition,
the antitrypanosomal activity in vitro has been also described [2].
In this study, an extract (methanol:10% acetic acid, 85:15) from Trichilia emetica
leaves with a high total phenolic content, expressed as gallic acid equivalents (GAE)
(203.48 mg/g of extract), has been evaluated for its antioxidant properties in vitro [3,
4]. Results showed antiradical activity against 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH)
(IC50 = 50.68 µg/ml) and inhibitory effects on methyl linoleate (MeLo) autooxidation
(IC50 = 3.97. µg/ml).
Moreover, the extract has been found to inhibit the oxidation of L-3,4dihydroxyphenylalanine (L-DOPA), catalyzed by mushroom tyrosinase [5] with an
IC50 of 7.58 µg/ml, using kojic acid as reference standard (IC50 of 1.56 µg/ml).
Results suggest the presence in the extract from Trichilia emetica leaves of active
constituents with high potential to be further developed into effective antioxidant,
antibrowning and depigmenting agents.
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143
P 042
Chemical profile of Astronium graveolens by ESI-IT-MS/MS
Viviane C. da Silva1, Clenilson M. Rodrigues1, Veridiana V. de Rosso2, Adriana Z.
Mercadante2, Lourdes C. dos Santos1, Alba R. M. Souza Brito3 and Wagner
Vilegas1
UNESP, São Paulo State University, Institute of Chemistry, CP 355, CEP 14800-900, Araraquara, SP,
Brazil; 2UNICAMP, State University of Campinas, Faculty of Food Engineering, CP 6121, CEP 13083862, Campinas, SP, Brazil; UNICAMP, State University of Campinas, Institute of Biology, CP 6109, CEP
13083-970, Campinas, SP, Brazil.
1
Brazilian medicinal plants have proved to be a rich source of compounds that might
be useful for the development of new pharmaceutical agents. The genus Astronium
(Anacardiaceae) comprises nearly 34 species. It is the typical genus occurring at
savannas existing in the north and north-east of Brazil. The species A. urundeuva,
known as ‘aroeira’, A. fraxinifolium (‘gonçalo-alves’) and A. graveolens (‘guaritá’) are
used in the folk medicine to treat allergy, inflammation, diarrhoea and ulcer [1]. It
has been shown that the secondary metabolites are key-compounds that may be
correlated to the pharmacological activities observed [2]. In order to obtain
qualitative information about of chemical composition, hydroalcoholic extracts from
leaves and stems of Astronium graveolens were directly injected into a BrukerDaltonics Ion-Trap-ESI equipment. Results showed that A. graveolens contain a
complex mixture of polyphenols consisting mainly of gallic acid derivatives
(gallotannins) and flavonoids: gallic acid, methyl and ethyl gallates, mono- to
hexagalloyl-glucose, HHDP-glucose, galloyl-HHDP-glucose, caffeoylglucose,
galloylquinic acid, chlorogenic acid, quercetin-3-O-rhamnoside, myricetin-3-Orhamnoside, myricetin-3-O-hexoside, quercetin-3-O-pentoside, myricetin-3-O-(Ogalloyl)-rhamnoside and quercetin-3-O-(O-galloyl)-rhamnoside. Thus, ESI-ITMS/MS using direct flow injection of the hydroalcoholic extracts from Astronium
graveolens provided a fingerprint of the content of the secondary metabolites
present, without the need of preparative chromatographic separation.
Acknowledgements: FAPESP (Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo).
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144
P 043
Phytochemical and pharmacological evaluation of mangrove
bark: assay in ulcer model
de-Faria, F.M.1, da-Silva, M.A.3, Barbastefano, V.2, Luiz-Ferreira, A.2, Almeida,
A.C.A.2, Takayama, C.2, Silva, M.S. 2, Dunder, R.J.2, Vilegas, W.3, Souza-Brito,
A.R.M.2
Departamento de Farmacologia, Faculdade de Ciências Médicas, UNICAMP, Campinas/SP, Brasil;
3Departamento de Química Orgânica, Instituto de Químicas, UNESP, Araraquara/SP, Brasil.
1
2
Proanthocyanidin (PA), which belongs to the condensed tannin class, has been
previously reported to their protective and preventive effects against vascular injury,
gastric ulcers, lipid metabolism and oxidative stress [1]. Rhizophora mangle L. bark,
a rich source for these compounds, is widely used for medicinal purposes among
Caribean countries [2]. The preventive anti-ulcer effect of three different polarities
fractions, aqueous (AqF), ethyl acetate (AcF) and buthanolic (BuF), was accessed
in absolute ethanol-induced gastric ulcer model in the doses of 100, 50, 25, 12.5,
6.25, 3, 1.5 and 0.5 mg.Kg-1, except AqF which was tested up to the 6.25 mg.Kg-1
dose. Major compounds were identified through thin layer chromatography (TLC)
method. AcF and BuF prevented gastric mucosa damage significatively in all doses,
while AqF showed significative values only at the doses of 100 and 12.5 mg.Kg-1.
Catechins (Ca), a PA monomer, were detected by TLC in all fractions. Ca´s high
antioxidant properties and anti-ulcer activity [3], previously described in scientific
literature, corroborate our results.
Acknowledgements: FAPESP, EMBRAPORT
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145
P 044
Estudio comparativo de la actividad analgésica de los extractos
acuosos de Cestrum nocturnum L y Cestrum buxifolium Kunth
en un modelo murino de dolor visceral
De Jesus Sara1, Orsini Giovannina2, Raddatz Maria3, Ciangherotti Carlos1.
Unidad de Cultivo Celular, Facultad de Farmacia, Universidad Central de Venezuela, Caracas,
Venezuela. 2 Herbario Ovalles Facultad de Farmacia, Universidad Central de Venezuela, Caracas,
Venezuela. 3 Unidad de Biología Molecular, Facultad de Farmacia, Universidad Central de Venezuela,
Caracas, Venezuela.
1
El Cestrum nocturnum L y el Cestrum buxifolium Kunth son plantas tóxicas
pertenecientes a la familia Solanaceae, distribuidas en varias regiones de
Venezuela. El C. nocturnum L. es conocido por sus propiedades antiinflamatorias,
antiepilépticas, antibacterianas y antineoplásicas, mientras que el C. buxifoluim
Kunth ha sido evaluado recientemente en nuestro laboratorio, mostrando una
potente actividad analgésica y antiinflamatoria. En este trabajo nos propusimos
evaluar y comparar la actividad analgésica de los extractos acuosos de estas dos
especies, en el sentido de contribuir con la caracterización farmacológica del
genero Cestrum. Para ello se utilizó el método de Koster, que consiste en
determinar el número de contorsiones abdominales en ratones luego de la
inyección intraperitoneal de ácido acético al 0,6%. Los animales recibieron los
siguientes tratamientos: NaCl al 0,9% (control), 23 mg/kg de extracto de C.
nocturnum L., 23 mg/kg de extracto de C. buxifolium Kunth, 100 mg/kg de ácido
acetilsalicílico (analgésico no esteroideo de referencia), 3 mg/kg de sulfáto de
morfina (analgésico opioide de referencia); 30 minutos antes de la aplicación del
estimulo doloroso. Seguidamente se observaron y cuantificaron las contorsiones
presentadas por los animales en un período de 20 minutos. Ambas especies
produjeron un efecto analgésico comparable a los analgésicos de referencia, siendo
más potente el extracto acuoso de C. buxifolium Kunth. Estos resultados revelan
evidencia de la actividad analgésica como un efecto biológico común de estas
especies y abren la posibilidad de encontrar nuevos y potentes compuestos
analgésicos dentro del genero Cestrum.
146
P 045
Coumarins from Pteurocaulon alopecuroides Lamarck inhibit
nitric oxide generation in human lung epithelial Calu3 cells
Andrew Purcell1, Cristiane Silva Silveira2, Maria Auxiliadora Coelho Kaplan2, Marek
Radomski1 and Fabio de Sousa Menezes1
1School of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, Trinity College Dublin, Dublin 2, Ireland; 2Nucleo de
Pesquisas de Produtos Naturais, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, Brazil.
Pterocaulon alopecuroides Lamarck belong to the family Asteraceae. Aerial parts of
this plant have been collected in Rio de Janeiro state, Brazil, in 2005. Several
pharmacological activities have been studied for the genus Pterocaulon, including
tumour inhibition and anti-proliferate activity on leukaemia cell line U-937. From the
crude ethyl acetate extract of the aerial parts of this plant, two coumarins have been
isolated and identified by NMR techniques, 5-(2’,3’-hidroxy-3’-methylbutiloxy)-6,7methylenedioxycoumarin
(I)
and
7-(2’,3’-hidroxy-3’-methylbutiloxy)6methoxycoumarin (II). We have studied the effects of these compounds on the
release of nitric oxide (NO) in human lung epithelial Calu-3 cells. The two coumarins
have been dissolved in DMSO (1 and 10nM each) and incubated for 24 hours with
Calu3 cells. Control experiments were performed with DMSO (using 1.2 or 12μL).
The release of NO was measured using electrochemical sensor (Apollo 4000, WPI).
The incubation of Calu-3 cells with DMSO led to increased generation of NO (5.0 ±
0.8μM, n=3), an effect inhibited by coumarins (3.0 ± 0.5μM, n=3 for coumarin I and
3.4± 0.4μM, n=3 for coumarin II). It wasn’t observed difference between the two
concentrations of the coumarins used in this study. The results show that coumarins
from Pteurocaulon alopecuroides reduce generation of NO in Calu-3 cells. The
pharmacological significance of these results remains to be studied.
Acknowledgments: CNPq and SFI for fellowship and financial support.
147
P 046
Effects of two essential oils of Calycolpus moritzianus (O. Berg)
(Myrtaceae) against Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) larvae
Teresa Diaz1, Flor D. Mora1, Jorge L. Avila2, Luis B. Rojas3, Alfredo Usubillaga3 and
Samuel Segnini4
Departamento de Farmacognosia y Medicamentos Orgánicos, Facultad de Farmacia 2 Grupo de
Química Ecológica, Facultad de Ciencias, 3Instituto de Investigaciones, Facultad de Farmacia
4Laboratorio de Ecología de Insectos, Facultad de Ciencias. Universidad de Los Andes, Mérida, 5101,
Venezuela.
1
Calycolpus moritzianus (O. Berg) Burret Vaught (syn Psidiopsis moritziana O. Berg
and Psidium caudatum McVaugh), known in Venezuela as “cinaro”, is one of the
nine species of Calycolpus genus (Myrtaceae) [1]. Previous studies on the
essential oil of the leaves of this plant collected in Venezuela showed three main
constituents: trans- -cariophylene (21.9 %); -pinene (10.9 %) and viridiflorol (9.7 %)
[2]. A mixture of fruits and flowers of C. moritzianus collected on March 2008 at La
Pedregosa, Mérida state, Venezuela, were hydrodistilled [3] yielding 0.8 % of
essential oil. Analysis by GC-MS allowed the identification of 25 compounds which
made up 95% of the oil [4]. The three major constituents were -caryophyllene (18.0
%), -pinene (17.2 %) and limonene (14.3 %). The essential oils from the leaves as
well as the oil from the fruits and flowers were evaluated for activity against thirdinstar larvae of Aedes aegypti mosquitoes [5]. The mortality was observed after 24
h. The LC50 value was 48±3.4 ppm for the leaves oil and 44.5±4.3 for the fruits and
flowers oil.
Acknowledgements: The authors would like to thank FONACIT (Fondo Nacional de Ciencia y
Tecnología), Ministerio de Ciencia y Tecnología, Caracas, Venezuela (project Nº F-2000001633).
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148
P 047
Composición química y actividad antibacteriana del aceite
esencial de Coleus amboinicus Lour., contra patógenos entéricos
Judith Velasco1, Luís B. Rojas2*, Tulia Díaz3 y Alfredo Usubillaga1
1Departamento de Microbiología y Parasitología, 2 Instituto de Investigación. 3Departamento de Bioanálisis Clínico,
Facultad de Farmacia y Bioanálisis, Universidad de los Andes, Mérida - Venezuela. 5101. E-mail: [email protected]
Coleus amboinicis Lour., (Labiatae), es una planta aromática conocida popularmente
como “Oreganón”. Está ampliamente distribuida en Venezuela, se usa en la medicina
tradicional para el tratamiento de desordenes del tracto renal e infecciones del tracto
urinario, así como en problemas digestivos1. De acuerdo al Jardín Botánico de Missouri,
Plectranthus amboinicus es sinónimo de C. amboinicus. En un estudio fitoquímico del
género reportaron monoterpenos, sesquiterpenos, diterpenos y compuestos fenólicos1.
Otros investigadores aislaron ácidos triterpenicos, flavones, flavonona y flovononol de
las hojas de C. amboinicus 2,3. Considerando la información etnobotánica de
C.amboinicus se analizó la composición química de su aceite esencial y la actividad
antibacteriana contra 27 aislados de pacientes con enfermedad diarreica aguda (EDA) y
6 cepas de referencia. Las partes aéreas de C. amboinicus, fueron colectadas en el
Jardín de plantas medicinales de la Facultad de Farmacia y Bioanálisis. Las hojas
frescas (1 kg) finamente cortadas, se sometieron a hidrodestilación durante 3 horas
usando una trampa de Clevenger. El aceite obtenido (0.05%), fue analizado por
cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (GC/MS), en un equipo
HP GC-MS system, modelo 5973. Se identificaron 15 compuestos, siendo el carvacrol
(65.2%) el mayoritario. La actividad antibacteriana realizada por el método de difusión en
agar4, mostró actividad contra todos los patógenos entéricos de origen clínico
ensayados (Salmonella sp., Shigella sp., E. coli diarreogénicas y Vibrio sp.) y contra 5
cepas de referencia (Staphylococcus aureus ATCC 6538, Enterococcus faecalis ATCC
29212, Escherichia coli ATCC 25922, Klebsiella pneumoniae ATCC 23357, Salmonella
typhi CDC 57), con valores de Concentración Inhibitoria Mínima (CIM)5 de 10 µg/ml y de
10 a 30 µg/ml, respectivamente. Este es el primer estudio sobre actividad antibacteriana
del aceite esencial de C. amboinicus contra patógenos entéricos.
Agradecimientos: Al Fondo Nacional de Ciencia y Tecnología (FONACIT), al Ministerio de Ciencia y Tecnología,
Caracas, Venezuela (Proyecto F-2000001633) y al CCDHT-ULA-Mérida (Proyecto FA-380-06-03-A), a las Licenciada en
Bioanálisis Ana Aparicio, Emma Araujo y María Eugenia Nieves por donar las cepas de origen clínico.
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Institute, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, Pennsylvania 19087-1898 USA.
150
P 048
Actividad antiinfluenza de un nuevo cianoglicosido de Codiaeum
variegatum
Jorge Eduardo Forero 1, Liliana Avila 3, Natalia Taborda1, Paula Tabares 3, Albeiro
López 2, Fernando Torres 3, Winston Quiñones 3, María A. Bucio 4, Yolanda MoraPérez 4, María Teresa Rugeles1, Pedro Joseph-Nathan 4, Fernando Echeverri 3,*
Grupo de Inmunovirología, Sede de Investigaciones Universitarias, Universidad de Antioquia, Medellín,
Colombia, 2Grupo Biogem, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional Medellín
Colombia, 3Grupo de Química Orgánica de Productos Naturales; Sede de Investigaciones
Universitarias, Universidad de Antioquia, PO Box 1226 Medellín, Colombia , 4Departamento de Química,
Centro de Investigación y de Estudios Avanzados del Instituto Politécnico Nacional, México, D.F.,
México.
1
En un estudio bioguiado para buscar sustancias antivirales de plantas de la familia
Euphorbiaceae se aisló de Codiaeum variegatum un solido cristalino, cuya
estructura se asigno a un nuevo cianoglicosido con base en sus espectros de RMN
1D y 2D, EM y Difracción de Rayos X y cuya biosíntesis parece involucrar valina.
Este compuesto tiene efectos sobre el virus de la influenza sin afectar sus
propiedades hemoaglutinantes.
Es la primera vez que se reporta esta actividad en esta clase de sustancias, que
además en primera instancia, no parece implicar riesgos por el impedimento para
liberar cianuro, que es la parte tóxica de la molécula.
H
H
OH
OH
3
2'
O
1'
4
1
OH
OH
O
2
N
4'
3'
6'
5'
H
Agradecimientos. COLCIENCIAS (Colombia) y Programa Alfa EULADIV (EU).
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151
P 049
Actividad antimicobacteriana de Virola flexuosa, V. calophylla, V.
carinata y Dugandiodendron yarumalense
Eduard Baquero1, Winston Quiñones1, Wellman Ribon2, Fernando Echeverri1*
1Grupo Química Orgánica de Productos Naturales, Universidad de Antioquia, Medellín-Colombia; 2 Grupo
de Micobacterias, Instituto Nacional de Salud, Bogotá-Colombia
La aparición de cepas resistentes y multiresistentes a los agentes antituberculosos,
son una amenaza para la progresión de la tuberculosis hacia una pandemia global,
la cual actualmente afecta alrededor de un tercio de la población mundial. Esta
problemática hace necesaria la búsqueda de nuevas sustancias
antimicobacterianas a partir de diversas fuentes, dentro de las cuales las plantas de
las familias Myristicaceae y Lauraceae, son de interés por sus actividades
antimicrobianas y diversidad química. Mediante el uso de técnicas cromatográficas
y de RMN, y bioensayos colorimétricos con MTT (TEMA), se obtuvieron fracciones
de los extractos etanólicos de hojas de V. flexuosa y D. yarumalense y corteza de
V. calophylla con efecto inhibitorio ≥90% frente a M. tuberculosis H37Rv. De las
seis sustancias aisladas de V. flexuosa, se encontró que el lignano etoxicubebina y
la flavona titonina (CMI 27 y 33 g/ml, respectivamente) presentaron las mayores
potenciales inhibitorios. Estos hallazgos permiten reafirmar a los bosques tropicales
como reservorios de sustancias con uso potencial en el entendimiento de la
biología del bacilo y para el tratamiento de la tuberculosis.
OCH2CH3
OCH3
O
O
H3CO
O
O
OH
O
Titonina
O
O
etoxicubebina
Agradecimientos: COLCIENCIAS (Colombia) y Programa Alfa EULADIV (EU).
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152
P 050
Physical and sensory evaluation of a non gluten cake formulated
with Agaricus brasiliensis mushroom
Bassan J.C., Bueno M., Ferreira G.A.O., Escouto L.F.S.
Faculdade de Tecnologia “Estudante Rafael Almeida Camarinha” – Curso de Tecnologia em Alimentos –
Fatec – Av. Castro Alves 62, 17506-000 – Marília - SP / Brasil; [email protected]
Celiac disease is defined as an inflammatory enteropathy caused by gluten
hipersensibility. It is estimated that approximately 1:100 or 1:300 people around the
world are affected by such disease, whose treatment is based on a correct diet in
which is prohibited the consumption of products containing weath, oats, barley and
rye. Many researches are being developed to substitute such cereals and to supply
the lack of non gluten products in the market. Considering its high, but still little
explored, nutritional and sensory characteristics, the inclusion of the mushroom
A.brasiliensis as an ingredient is an excellent option for celiac cookery. This study
was performed to verify the acceptability of a non gluten cake, sort of sponge cake,
prepared with the mushroom Agaricus brasiliensis. The product was submitted to
physical and sensory evaluation. The physical indicators were: roasted bake (g),
volume (cm3), specific volume (cm3/g), density (g/cm3), cooking loss (g) and
conversion index. Sensory analysis indicators were: colour, smell, flavour and
texture. The acceptability index was expressed in percentage. The results were
evaluated by ANOVA and the averages were compared using Tukey test. Related
indicators presented a significant difference in level of 1%. 239 tasters evaluated the
product and 94,97% out of these were students, 76,56% between 16 and 26 years
old and 64,44% women. In hedonic scale, the sum of all 7, 8 and 9 results led to an
acceptance of 82,20%. More than 79% would buy the cake. Among all the tasters,
61,50% did not know the mushroom and only 38,49% showed some knowledge
about it. According to these data, the non gluten cake using the mushroom A.
brasiliensis was accepted, with an acceptability index of 83,22%, in a group mainly
represented by young people, students and women.
153
P 051
Habits of consumption of UHT milk after chemical frauds in
Brasil: a matter of education
Pardo R.B., Matioli L., Osaka D.M., Nagai L., Simoni A.G., Thomaz A.G., Rocha
E.P., Meneguim G.A.O., Guimarães P.H.L.C., Murari C.S., Omura M.H., Paris A.,
Escouto L.F.S.
Faculdade de Tecnologia (FATEC) – Curso de Tecnologia em Alimentos – Av. Castro Alves, 62. CEP:
15.006-000 – Marília/SP – Brasil; [email protected]
In October - 2007, in Minas Gerais State/Brasil, a scandal involved the inclusion of
peroxide, sodium hydroxide and sodium citrate to enhance the low quality of milk
used to produce UHT milk. Considering that the occurrence of such chemical frauds
would cause an abrupt and intense reduction of milk consumption, particularly UHT
milk, the present study was performed in Marília-SP/Brasil. In order to verify
modifications in habits of consumption and criteria of choice of UHT milk after the
facts, 86 questionnaires were applied to consumers in eight supermarkets of the
city. The results showed that 84,88% of all interviewed consumed UHT milk daily.
Among these only 3 (3,49%) changed, temporarily, this for another kind
(pasteurized, powdered or raw) and 76 (88,37%) continued buying it. Out of these
76 consumers, 89,47% maintained old criteria to choose UHT milk: price (33,82%),
quality (30,88%), practicability (7,35%), the three at the same time (25%), habit
(1,47%) or brand (1,47%). Among 37 people that included quality to select the milk:
24,32% did not know how to define it; 27,03% associated quality to good sensory
characteristics; 8,11% told that brand defines quality; 13,51% answered that quality
is a product of high nutritional value; and 27,03% offered no definition. Among the 8
(10,53%) consumers that adopted new criteria: 62,5% decided avoid the brand
involved in the frauds and 37,5% started observing packing conditions and period of
validity. Out of 86 UHT milk consumers: 6,98% condemned it as a cause of any
health disturb; 80,23% denied knowing the definition of UHT; and among 19,77%
that tried to define it, 100% were completely wrong. UHT milk consumers in MaríliaSP/Brasil maintain habits of consumption and criteria of choice based on
misinformation and thus accept, without any reply, a product that lacks quality
and/or safety.
154
P 052
Cytotoxic triterpenes from Lepechinia speciosa (A. St. Hill) (Lamiaceae)
Esteves, P. F. 1,2, Menezes, F. S. 1,3
1 Laboratório de Estudo Químico de Espécies de Lamiifloreae (LAQUEL), Centro de Ciências e da Saúde Bloco A-2º andar- Sala 04, Cidade Universitária, Ilha do Fundão, Universidade Federal do Rio de Janeiro, CEP:
21941-590, Brazil. 2 Programa de Pós-graduação em Biotecnologia Vegetal, Centro de Ciências e da Saúde Bloco K-2º andar- Sala 032, Cidade Universitária, Ilha do Fundão, Universidade Federal do Rio de Janeiro, CEP:
21941-590, Brazil. 3 School of Pharmacy, Trinity College Dublin, University of Dublin-Dublin 2-Ireland.
Studies indicate that extracts or substances isolated from plants have a potent cytotoxic activity
and species of Lamiaceae family show this activity [1,2,3,4]. The Lepechinia genus
(Lamiaceae) is source mainly of tricyclic diterpenes, flavonoids and pentacyclic triterpenes
[5,6,7]. Triterpenes are potent anti-inflammatory, analgesic, antitumor and others [8], while
diterpenes possess cytotoxic effect [9]. As the literature does not report study with Lepechinia
speciosa, we analyzed the cytotoxic effect and investigated the chemistry composition of
bioactive fraction. Cytotoxic activity was tested on rat basophilic leukemia cell using lactate
dehydrogenase released method. All fractions were dissolved in DMSO at 10mg/ml and
diluted to concentration of 100mcg/ml. The absorbance of the samples was measured at
490nm using an ELISA reader. The test was performed in triplicate. The results were
measured in percentage and compared against a positive control, Triton X-100 2% solution,
and a cytotoxic standard, Terfenadine (100mM). The bioactive fraction was dissolved in
CHCl3, treated with Na2CO3 5% and filtered. The aqueous fraction was treated with
concentrated HCl and extracted with CHCl3. The chloroformic fraction was treated with
ethereal CH2N2. The identification of compounds was realized by gas chromatography
coupled to mass spectroscopy. All the fractions tested showed cytotoxic effect and were upper
than Terfenadine (66.43%). But the strong cytotoxic effect was observed in ethyl acetate and
dichloromethane fractions (94.5 and 91.2%, respectively). Chemical investigation of the
bioactive dichloromethane fraction led to the characterisation of a mixture of ester of fatty acids
(Palmitic acid methyl ester) and acid triterpenes (Oleanolic acid methyl ester and Ursolic acid
methyl ester). The presence of acid triterpenes are common in Lepechinia genus, however is
the first time that the occurrence of ester of fatty acids in this genus is reported.
Acknowledgements: CNPq
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156
P 053
Analgesic activity of the Litchi chinensis seeds
Fernández-Zurita R.G.1, Ortiz-Moreno A.1, Chamorro-Cevallos G.1, HernándezNavarro Ma. D.2, Vázquez-Sánchez J.1, Sánchez-Frías I.R.1
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, IPN. Prolongación Carpio y Plan de Ayala S/N, C. P. 11340,
Cd. de México. D.F., México. Tel. Fax. (55) 57 29 60 00 ext. 62359, e-mail:
[email protected], [email protected]; 2 Facultad de Química. UAEM. Paseo Colón esq.
Paseo Tollocan. C.P. 50180. Toluca, Estado de México, México. Tel. Fax. (01722) 217 38 90 ext. 130
1
In the Chinese traditional medicine, seeds, leafs, pericarp and Litchi chinensis pulp
have been used as a mixture or infusion. Particularly the seed has used because of
the belief it possesses strong analgesic power, which turns it into an alternative. The
aim of this investigation was to asses the analgesic activity of raw litchi seeds. To
achieve this, male mice were randomly divided into 5 groups consisting 7 animals
each, administered orally isotonic saline solution (Group 1: Control); indomethacine
at 10mg/kg (Group 2); raw Litchi chinensis seed at 100, 200 and 400 mg/kg
respectively (Groups 3, 4 and 5). Hot plate technique was used to determine the
analgesic activity. After 30 minutes of latency, animals were placed individually in
the hot plate at 55 + 0.1ºC and time of response to the stimuli in seconds was taken.
The seed at 100mg/kg showed analgesic activity in a period of 1 to 5 hours
compared to Indomethacine (p=0.022, p=0.022, p=0.009, respectively), and also the
seed at 200mg/kg overcame the analgesia Indomethacine as well, at 3 hours of
experimentation (p=0.044). The results indicate that Litchi chinensis seed exerted
central analgesic activity; it is suggested to realize peripheral analgesic assessment
to corroborate this results.
Acknowledgments: Instituto Politécnico Nacional, Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología.
157
P 054
Efecto hipoglucemiante de las hojas de Neem (Azadirachta
indica) en un modelo de diabetes en ratón
Olvera-García, O. 1, Arcos-Guerrero, B.Y. 1, Barrera, H.J.M. 2, Chanona-Pérez J.J. 3,
Peralta-Cruz, J. 4, Mendoza-Pérez, J. 5, Herrera Bucio, R. 6, Morán López, G. 6,
Fregoso-Aguilar, T.1
1Depto. de Fisiología.2Depto. de Ecología Vegetal. 3Depto. de Ing. Alimentos. 4Depto. de Química
Orgánica. 1,2,3,4Escuela Nacional de Ciencias Biológicas-IPN. Prol. Carpio y Plan de Ayala, México, D.F.
11340. 5Instituto de Ciencias de la Salud-Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo. 6Instituto de
Investigaciones Químico Biológicas-Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo en Morelia,
Michoacán.
INTRODUCCIÓN. El árbol de Neem (Azadirachta indica) pertenece a la familia
Meliácea y es nativo de la India. En México, se tiene reportada su presencia
desde 1982 en varios estados del país. El uso terapéutico de la especie, se ha
limitado a herbolaria y fitoterapias locales de conocimiento popular.1
OBJETIVO. Estudiar la actividad hipoglucémica y antioxidante de dos compuestos
naturales (Nimbim y Nimbidina), en las hojas Neem en un modelo de diabetes tipo I
en ratón. METODOLOGÍA. Se prepararon infusiones en agua y extractos
alcohólicos de hojas de Neem siguiendo el método experimental de Chattopadhyay
et al.2 Se separaron 5 fracciones del extracto alcohólico mediante CCF, las cuales
se purificaron mediante HPLC. Se indujo diabetes con STZ (120mg/kg) en ratones
machos cepa NIH. Se formaron 5 grupos (n = 10) experimentales a los cuales se
les administró uno de los siguientes tratamientos: (1) control absoluto
(normoglucémico); (2) Control diabético (3) diabéticos + tolbutamida vía oral; (4)
diabéticos + infusión de Neem (12 %) y (5) diabéticos + extracto de Neem (10 %)
Las mediciones de glucosa sanguínea se realizaron semanalmente. Los hígados
de los animales fueron aislados para realizar estudios de morfología y conteo de
núcleos mediante el procesamiento fractal de imágenes. RESULTADOS Y
DISCUSIÓN. En las fracciones obtenidas se identificaron las moléculas de nimbin y
nimbidine. La infusión tendió a disminuir los niveles de glucosa y el extracto (10%
m/v) presentó efecto hipoglucemiante pero no llevó a los ratones a un estado
normoglucemico. El estudio mediante análisis de imágenes indica que los ratones
con tratamiento incrementaron en el número de núcleos con respecto a los ratones
diabéticos. CONCLUSIÓN. Los resultados preliminares dejan abierta la posibilidad
de utilizar el extracto de hoja del árbol Azadirachta Indica (Neem) como un
coadyuvante al tratamiento farmacológico para la diabetes en México.
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159
P 055
Attività antiproliferativa di differenti estratti di Iris pseudopumila
Tineo su linee cellulari tumorali umane
Filomena Conforti1, Carmen Formisano2, Daniela Rigano2, Francesco Menichini1,
Felice Senatore2
Department of Pharmaceutical Sciences, University of Calabria; via Pietro Bucci, I-87036 Rende (CS),
Italy; 2 Department of Chemistry of Natural Products, University of Naples “Federico II”, via D. Montesano
49-80131 Naples, Italy
1
Il genere Iris comprende più di 300 specie ed ibridi ed è il genere più vasto della
famiglia delle Iridaceae. L’utilizzo delle parti sotterranee di diverse specie di Iris è da
tempo noto nella medicina tradizionale europea: i rizomi di I. germanica L., I.
florentina L. o I. pallida Lam., infatti, complessivamente noti come Rhizoma iridis,
hanno goduto di una grossa popolarità grazie alle loro riconosciute proprietà
catartiche, diuretiche, stimolanti ed espettoranti [1]. Iris pseudopumila Tineo e’ una
specie endemica dell’Italia meridionale, dove cresce spontaneamente come pianta
ornamentale. Può essere gialla o violetta, e si trova soprattutto nei terreni sassosi e
poco profondi. Dai rizomi e dai fiori di questa specie sono stati recentemente isolati
diversi flavonoidi e isoflavonoidi, alcuni dei quali hanno mostrato attività
antiossidante e antibatterica [2]. Allo scopo di approfondire lo studio dell’attività
biologica della specie in esame, in questa comunicazione riportiamo lo studio
dell’attività citotossica di vari estratti di I. pseudopumila su tre differenti linee cellulari
tumorali umane (MCF-7, ACHN e C32). L’attività citotossica è stata condotta
usando il saggio SRB sviluppato dal National Cancer Institute [3]. L’estratto
cloroformico dei rizomi ha dimostrato la più alta attività citotossica contro la linea
cellulare C32 (melanoma melanotico) con un valore di IC50 di 57 μg/ml.
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160
P 056
Preventive administration of Opuntia ficus-indica (L.) Mill. fruit
juice reduces UV radiation damage in hairless rat
Galati EM1, Pergolizzi S2, Monforte MT1, Contartese G1, Lanuzza F3 , Tripodo
MM4
Dipartimento Farmaco-Biologico - Università di Messina, Vill. SS Annunziata, 98168 Messina, Italy;
Dip. di Scienze degli Alim. e dell’Amb. - Università di Messina, Salita Sperone 31, 98166 Messina, Italy;
3 Dip. RIAM Università di Messina, Piazza S. Pugliatti, 98122 Messina, Italy; 4 Dip. di Chimica Organica e
Biologica- Università di Messina, Salita Sperone 31, 98166 Messina, Italy
1
2
Opuntia ficus indica (L.) Mill. is a native species of Central America. It is widespread
also in the Mediterranean area, where is cultivated for various aims. In Sicily it is
cultivated mainly for its sweet fruits, nutritionally interesting for their content of
nutraceutics.
For a long time, the authors studied biological activities of mucilage and pectin
extracted from cladodes of Opuntia ficus-indica, cultivated in specialized areas in
Sicily (1, 2).
Other papers of the same authors reported the fruit juice antioxidant, antiulcer and
hepatoprotective activities in rat (3, 4).
In this work the authors investigate about the protective effect from UV radiation
damage in hairless rats, by a preventive administration of prickly pear juice. Ten rats
were treated with the fruit juice (3 ml by gavage) for 15 days. From 13th to 15th day,
the whole dorsum was irradiated, for 20 min, by UVB radiation (294 nm). Another
group of ten rats, treated in the same conditions, underwent UVA radiation (366
nm). Specimens were processed for histological examination. The observations
were compared with control rats, treated with distilled water. The results
demonstrate that the skin of treated rats shows a less thick epidermis, with a
significant decrease of sunburn cells. Besides, in the derma there are less infiltrating
cells, indicating a reduced inflammation.
These data suggest that juice pre-treatment offers some protection from both UV
radiations. Opuntia ficus-indica fruit juice contains a group of antioxidant substances
(flavonoids, betalains and vitamin C) that probably are responsible of the observed
effects.
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2.
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162
P 057
Metabolitos secundarios de las partes aéreas de Badilloa
venezuelensis (Badillo) K. & R.
Elier Galarraga-Montes, Alí Bahsas y Juan Manuel Amaro-Luis
Los Andes (ULA). Mérida. Estado Mérida. VENEZUELA -5101.
La Badilloa venezuelensis (Badillo) K. & R., es una planta endémica de los páramos
andinos de Venezuela1, apreciada por los campesinos andinos para el tratamiento
de enfermedades infecciosas del tracto digestivo. Sobre la base de esta hipótesis
se abordó su estudio fitoquímico, el cual condujo al aislamiento, a partir del extracto
en CH2Cl2 de sus partes aéreas, de tres flavonoides y dos diterpenos. Estos
compuestos fueron purificados por repetidos procesos cromatográficos en columna
y cromatografía preparativa en placas de gel de sílice. La caracterización
estructural de los mismos se realizó mediante el análisis detallado de sus espectros
de IR, EM, RMN-1H, RMN-13C y 2D-RMN (1H,1H-COSY, HSQC y HMBC ), con lo cual
se pudo concluir que las estructuras corresponden a los flavonoides 5-Hidróxi-6, 7, 8,
4´-tetrametóxiflavona [1] Casticina [2], Artemetina [3] y los nuevos diterpenos ent15-Monopinifolato de Metilo [4] y Ácido ent-Badillóico [5].
R
OCH3
OH3C
O
OH3C
COOCH3
OCH3
OH
H
COOH
O
ent-15-Monopinifolato de Metilo [4]
[1] R=H
[2] R= OH (Casticina)
[3] R = OCH3 (Artemetina)
O
O
OH
H
COOH
Ácido ent-Badillóico [5]
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163
P 058
Studio preliminare sulle emissioni di MITC nell’aria a seguito
della geodisinfezione di aree serricole
Gambino L.1; Merulla M.1, Amato F.1, Flori P.2
E.S.A. - Laboratorio Agroalimentare e Ambientale (L.AG.AM. ESA PA) via Partanna Mondello 50/A, 90151, Palermo, Italy;
Dipartimento di Protezione e Valorizzazione Agroalimentare, Università di Bologna Viale Fanin 46, 40127 Bologna, Italy
1
2
L’esposizione dell’operatore agli agrofarmaci riveste da sempre grande importanza sanitaria,
specie in condizioni di ambiente controllato, dove la presenza nell’aria dei loro residui1 può
avere risvolti tossicologici. E’ noto infatti come i preparati normalmente utilizzati nella
produzione vegetale volatilizzino in misura più o meno elevata determinando concentrazioni
evidenti del principio attivo nell’aria. Questo fenomeno permette sia di conoscere lo stato di
contaminazione dell’aria in ambiente controllato, sia di determinare i tempi di rientro e dei livelli
di esposizione dell’operatore agricolo2. In riferimento a tale problematica il LAGAM-ESA-PA ha
condotto uno studio preliminare avente l’obiettivo: i) di dotarsi delle strumentazioni e delle
tecniche necessarie per il controllo dei residui degli agrofarmaci nell’aria; ii) di mettere a punto
le metodologie analitiche necessarie per la conduzione di tale tipo di controllo; iii) di verificare la
presenza nell’aria dei residui di metil-isotiocianato (MITC), quale conseguenza della pratica di
disinfezione del terreno. I trattamenti ai patogeni fungini
attraverso l’impiego di preparati a base di metham sodio
Fig. 1
causano infatti lo sviluppo nell’aria di metil-isotiocianato3 la cui
presenza necessita di essere valutata, oltre che per gli effetti
di carattere tossicologico sopra ricordati, anche per gli
eventuali risvolti di carattere ambientale4. Lo studio ha
evidenziato come la disinfezione del terreno con metham
sodio determini, già il giorno del trattamento, l’emissione
nell’aria di MITC a livelli di 1000 µg/m3 (Fig.1) e come nei primi 5-6 giorni la concentrazione del
fumigante decada progressivamente, per raggiungere, dopo 10 giorni, livelli di circa 10 µg/m3.
Nei giorni successivi il principio attivo risulta ancora presente e rilevabile in modo regolare, pur
se a livelli contenuti (0,3 µg/m3). La valutazione dei residui presenti nell’aria, in particolare,
nelle produzioni di serra, da un lato esamina l’esposizione dell’operatore e dei tempi di rientro,
dall’altro valuta i risvolti che le frazioni volatili degli agrofarmaci possono avere nei confronti
dell’uomo e delle colture, anche nell’ottica di un più attento controllo delle produzioni a
“marchio di qualità”, le quali, a seguito dei fenomeni di co-distillazione, evaporazione e ricaduta
dei residui, possono risultare contaminate anche per via indiretta.
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165
P 059
Colección digitalizada de plantas medicinales de la región del
lago de Patzcuaro
García Calderón María Alfa, Chávez Garibay Luis Raúl, María de la Luz Ceja
Mendoza.
Facultad de QFB de la UMNSH, Tzintzuntzan
Michoacán, México.
No.173 Colonia Matamoros, C.P. 58240, Morelia
Antecedentes: en el año 1999 realizamos colectas de plantas medicinales en
diversas regiones del estado de Michoacán, los ejemplares secos se digitalizaron
en un disco que contiene los nombres comunes, usos y las fotografías de 180
plantas, en el año 2006 publicamos otro disco conteniendo una colección
digitalizada de plantas medicinales en su habitat de las comunidades indígenas de
la región Morelia. El presente trabajo consiste en una colección de plantas
medicinales de la región del lago de Pátzcuaro, zona que se caracteriza por ser la
de mayor población de indígenas en el estado. El objetivo es preservar los
conocimientos milenarios sobre las plantas medicinales en uso, indicando las
coordenadas en las que se encuentran y utilizando fotografías para la observación
del habitat. Se utilizó como metodología la investigación de campo con 5 médicos
tradicionales indígenas, que nos indicaron, el nombre común de la planta, el uso, la
parte de la planta que se utiliza, la forma de uso y la cantidad de hierba a utilizar.
Ésta información la capturamos en formato electrónico y se grabó en un disco, junto
con fotografías de las plantas correspondientes. Logramos obtener información
cruzada con el apoyo de los 5 médicos tradicionales, obteniendo una colección de
250 plantas medicinales de la región. Se solicitó la colaboración del personal de la
facultad de biología de la U.M.S.N.H. con la finalidad de registrar las plantas con su
nombre científico, en caso de que ya estén identificadas.
166
P 060
Actividad antifúngica de Eupatorium cardiophyllum (B. L. Rob)
García-Sánchez Edgar, del Río R. E., Román L. U., Hernández J. D., Calderón M.
A., Martínez Muñoz R.E., Salgado Garciglia R., Raya D., Flores A., Morales M. E. y
Martínez-Pacheco M.M.
Instituto de Investigaciones Químico Biológicas de la Universidad Michoacana de San Nicolás de
Hidalgo, Edificio B-3, Cd. Universitaria, Francisco J. Mújica s/n, Col. Felicitas del Río, Morelia,
Michoacán, México. C.P. 58 000. e-mail: [email protected].
Una alternativa en el uso de los antifúngicos de síntesis química son los derivados
de plantas. En la búsqueda de nuevas propuestas antifúngicas se obtuvieron
extractos hexánicos de diferentes órganos de E. cardiophyllum, una planta
endémica en la región y de la que se reportó que ejerció un efecto sobre el
crecimiento bacteriano [1]. En una continuación del estudio, el propósito de este
trabajo fue determinar el efecto antifúngico en aislados silvestres de hongos
patógenos de importancia económica: Colletotrichum acutatum (aislados de fresa),
Fusarium oxysporum (aislados de papa) y Rhizoctonia sp. (aislados de suelo de
una huerta de aguacate). Se utilizó el método de difusión en agar, cajas Petri con
agar papa dextrosa, se colocaron tres discos de papel filtro en donde se aplicaron 6
mg (6 l) de los extractos totales y libre de grasas, como controles se utilizaron el
tiabendazol (+) y el etanol (-). Sobre cada papel filtro se colocaron inóculos
miceliales (5 mm) de cada uno de los aislados fúngicos. Se determinó el índice de
crecimiento micelial. Se observó que los extractos desengrasados de hoja y flor
presentaron un efecto fungicida en los tres hongos, Rhizoctonia sp. fue el mas
sensible enseguida C. acutatum y F. oxysporum. Por primera vez se detectó que
los extractos hexánicos de E. cardiophyllum presentaron una actividad antifúngica.
1.0
0.9
0.8
0.7
b
c
b
IC
0.6
b
c
b
c
a
0.5
0.4
a
2 día
3 día
4 día
0.3
0.2
0.1
0.0
C. acutatum
F. oxysporum
Rhizoctonia sp
Figura 1. Efecto fungitóxico del extracto hexánico de flor de E. cardiofillum.
Agradecimientos: este trabajo fue financiado por UMSNH-CIC 2.1MMP-2007 y PROMEP NPTC-117.
E.G.S., M.A.C. y D.R.G. (becarios del CONACYT). AFG, RSG y MMMP (CA154). REMM (estudiante de
medicina). REdR, LUR y JDH (vinculación)
Referencias
167
1.
P 060
Edgar García-Sánchez, R.E. del Río, L.U. Román, J.D. Hernández, M.A. Calderón, D. Raya, M.M.
Martínez-Pacheco, A. Flores y M.E. Morales. (2007). SILAE, La Plata, Argentina.
168
P 061
Actividad hipolipidemiante del aceite de la semilla de Persea
americana en ratón
Pahua-Ramos, María Elena; Ortiz-Moreno, Alicia; Chamorro-Cevallos, Germán,
Mojica-Villegas, María Angélica, Garduño-Siciliano, Leticia
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, Instituto Politécnico Nacional. Prolongación de Carpio y Plan
de Ayala s/n. Col. Plutarco Elías Calles. Delegación Miguel Hidalgo. C.P. 11340. México, D. F
El aguacate (Persea americana) es el fruto del árbol del mismo nombre originario
de Mesoamérica, que se cultiva en las regiones de México y Guatemala. La semilla
de aguacate tiene un contenido de aceite entre el 2.4 al 2.8 % aproximadamente, el
cual es utilizado en la industria cosmética por su contenido de ácidos grasos, para
elaborar cremas, shampoo y tratamientos capilares. En este trabajo se evaluó la
posible actividad hipolipemiante del aceite de la semilla de aguacate en un modelo
murino de hipercolesterolemia, para lo que se emplearon ratones macho de la cepa
ICR, que se distribuyeron de manera aleatoria en 4 grupos de experimentación,
administrándoles vía intragástrica: aceite mineral (AM) y aceite de semilla aguacate
(AA) en dosis de 31.3 mg / kg, 62.5 mg / kg y 125 mg / kg respectivamente durante
6 días. Durante este tiempo, se les proporcionó una dieta hiperlipidémica molida ad
libitum. Al término del tratamiento, se determinaron en suero las concentraciones de
colesterol total, triacilglicéridos, colesterol-HDL y colesterol-LDL. Los resultados
evidenciaron actividad hipolipemiante del AA, mostrando un reducción hasta del
20% en la concentración de colesterol, 45% en triacilglicéridos y 65% en colesterolLDL, además de un incremento del 110% en colesterol–HDL. Estos datos
concuerdan con el efecto observado en estudios previos utilizando el aceite de la
pulpa de aguacate.
Trabajo apoyado por proyecto SIP-IPN, México.
169
P 062
Efecto de la Spirulina máxima en la calidad espermática en
ratones hipercolesterolémicos
Mojica-Villegas María Angélica1, Garduño-Siciliano Leticia1, Chamorro-Cevallos
Germán1, Hernández- Ochoa María Isabel2.
Laboratorio de Toxicología Preclínica. Departamento de Farmacia. Escuela Nacional de Ciencias
Biológicas – Instituto Politécnico Nacional. 2Department of Veterinary Biosciences-University of Illinois,
Urbana Champaign, U.S.A.
1
La hipercolesterolemia representa un factor de alto riesgo para las enfermedades
coronarias y es la principal causa de muerte en hombres. Se ha reportado que
concentraciones elevadas de colesterol y/o triglicéridos en plasma están asociadas
con una pobre calidad de semen y detrimento en la función testicular que producen
infertilidad masculina. Se ha observado que la administración conjunta de un
agente antioxidante y un hipolipemiante tienen un efecto protector y mejoran la
fertilidad. La Spirulina es un alga azul verde filamentosa unicelular que posee
propiedades hipolipemiantes y antioxidantes, entre otras. A ratones macho CD1 se
les alimentó con una dieta hiperlipidémica durante 6 días con y sin tratamiento de
Spirulina máxima (dosis de 800 mg/kg) vía intragástrica, Al término de este tiempo
se hizo el análisis del perfil lipídico en suero; se obtuvieron espermatozoides y se
evaluó su calidad. Los resultados muestran una diferencia significativa en las
concentraciones de colesterol total y colesterol LDL en los animales que recibieron
la dieta hipercolesterolémica, con respecto al grupo testigo. Sin embargo, aunque
no se presentó una disminución significativa en las concentraciones de colesterol
total y de colesterol LDL en los ratones tratados con la dieta hiperlipidémica y
Spirulina, se observó un efecto protector en los parámetros de calidad espermática
en los que la movilidad espermática aumentó en un 21.2%, la viabilidad
espermática en un 21.9 % y la cuenta espermática en un 17.6% con respecto al
grupo hipercolesterolémico.
152
P 063
Sicilian pistachio nut extract inhibits inflammatory response in
lipopolysaccharide-stimulated macrophages
Gentile C, Tesoriere L, Iovino C, Angileri F, Allegra M, Livrea MA.
Dipartimento Farmacochimico Tossicologico e Biologico, Università di Palermo, Via Archirafi 32, 90128
Palermo, Italy
The genus Pistacia contains only 11 species among which edible Pistacia vera is by
far the most important economically. In Italy, the pistachio nut is grown mainly in
Sicily, and a cultivar of high quality is typical of Bronte. We have recently showed
that a hydrophilic extract from Sicilian pistachio (PHE) possesses high antioxidant
potential, and contains substantial amounts of bioactive components, such as
vitamin C, trans-resveratrol, proanthocyanidins and isoflavones [1]. Redox-regulated
transduction pathways are essential in triggering the inflammatory response [2]. In
the present study, the activity of PHE has been investigated for the first time in an
inflammation model constinting of lipopolysaccharide (LPS)-activated RAW 264.7
macrophages. PHE from 1 to 20 mg nut decreased the release of mediators such
as NO and TNF-α, and the expression of inducible NO synthase (iNOS) and
cyclooxygenase-2, in a dose-dependent manner. Pistachio nut is a remarkable
source of the isoflavones daidzein and genistein, known to decrease NO production
in LPS-activated macrophages by inhibiting iNOS activity, and iNOS protein and
mRNA expression [3]. When compared to the activity of purified either genistein or
daidzein, assayed at the same molar amounts found in the extract, PHE was a more
potent inhibitor of NO production. Our data suggest that other components and/or
combined effects among nut components, can play a major role in modulating the
inflammatory response in macrophages. These properties of pistachio nut could be
of interest in dietary programs aimed at preventing pathologies characterized by
excessive NO production.
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Gentile C., Tesoriere L., Butera D., Fazzari M., Monastero, M., Allegra M., Livrea M.A., 2007, J.
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153
P 064
Application of HPLC-MS with a C-30 reversed phase column for
the separation and identification of carotenoid esters in Citrus
juices
Daniele Giuffrida, Andrea Salvo, Francesco Salvo, and Giacomo Dugo
Università di Messina, Facoltà di Scienze MM.FF.NN., Dipartimento di Scienze degli Alimenti e
dell’Ambiente, Contrada Papardo, Salita Sperone 31, 98166, Messina, Italy
Carotenoids represent an important class of widely distributed natural pigments.
Many key roles are ascribed to carotenoids in biological processes such as
photosynthesis and mammalian vision, and the potential health benefits of a diet
rich in carotenoids have been indicated in recent studies. The largest number of
carotenoids found in any fruit are those of citrus fruits: more than 100 different
compounds and their isomers have been reported. Citrus species are therefore
considered as the most complex natural source of carotenoids The study of
esterified carotenoids in natural sources is rather limited, partially due to the high
degree of complexity that can be found, and it has been generally focused on a
certain carotenoid and its esters. In this study we report on the application of liquid
chromatography-atmospheric pressure chemical ionization mass spectrometry [LC(APCI)MS] in the identification of free carotenoid and carotenoid esters in Kumquat
and Clementine juices obtained from fruits cultivated in Sicily. The polymeric C-30
stationary phase has demonstrated superior resolution for carotenoid separation in
comparison to traditional C-18 columns. Alkaline saponification is usually performed
before carotenoid extracts analysis by HPLC, thus no information concerning
carotenoid esters in natural samples can be obtained. Because carotenoid esters
are known to be more stable than free carotenoids, we determined for the first time
the main native carotenoid esters present in those juices, thus providing a
carotenoid ester profile characteristic for this products. By using this stationary
phase together with the use of PDA and APCI-MS detectors it was possible to
identify in the samples several different carotenoids, both in their free and esterified
forms including mono-esters and di-esters, therefore providing information on the
native carotenoid esters composition present in the samples. The information
concerning the natural esterified forms could help in the chemical characterization of
these juices. The amount of carotenoids present was also determined, in view of
the important provitamin A capacity attributed to these phytonutrients.
Acknowledgements: The authors gratefully thank the “CRA” (Consiglio per la Ricerca e la
sperimentazione in Agricoltura), and the Italian MUIR.
154
P 065
Utilización de Kluyveromyces fragilis para producir biomasa en
un fermentador de 500 litros, crecida en suero de leche
González I, Lara J, Cadet Y.
Departamento de Ciencia de los Alimentos de la Facultad de Farmacia de la Universidad de los Andes,
Mérida-Venezuela.
El hombre ha visto con mucha preocupación como en las últimas décadas se ha ido
degradando progresivamente el ambiente, y por ende, se han destruido los
recursos naturales y se han ido contaminando los habitas existentes en la tierra,
entre ellos los ríos, mares y lagos. La levadura Kluyveromyces fragilis, es capaz de
fermentar la lactosa. Se ha demostrado que es posible disminuir la carga orgánica
del suero de la industria quesera. Se puede producir simultáneamente biomasa de
la levadura en fermentadores de 750 litros. Esta biomasa puede ser un
complemento proteico para la alimentación de animales monogastricos. Se
caracterizó el suero de leche proveniente de la Planta de Lácteos Santa Rosa antes
y después de la termo coagulación ácida a pH de 4.5 utilizando ácido sulfúrico a 90
º C durante 30 minutos. Con los valores óptimos de lactosa, fosfato de amonio, pH
y temperatura, se estudió el comportamiento de la levadura de la colección de
cultivos americanos ATCC 8554, perteneciente al cepario del Laboratorio de
Fermentaciones e la Facultad de Ciencias de la Universidad de Los Andes, en un
fermentador de 750 litros, LAB-U, con un volumen de trabajo de 500 litros. Se
tomaron muestras de 200 ml para determinar el consumo de lactosa, proteínas,
crecimiento celular y pH al final de cada fermentación, la biomasa obtenida se llevó
a una desecadora en bandejas a 70 º C durante 48 horas. La biomasa seca se
pulverizó, se pesó y se caracterizó. Los resultados obtenidos muestran una
biomasa con un 49.5 % de proteínas; 38.46 % de carbohidratos; 2.61 % de grasa;
1.49 % de humedad y 9.44 % de cenizas. El rendimiento fue de 1.1 g/L. La
fermentación del suero con Kluyveromyces fragilis, permitió una disminución de la
carga orgánica hasta un 99.6 %, disminuyendo los problemas de la contaminación
ambiental.
155
P 066
Actividad antimicrobiana de la Azadirachta indica frente al
Propionibacterium acnes y Staphylococcus aureus
Catherine Villalta1, Yulimar Sánchez1, María Gualtieri2, Soumi De Montijo1. María
Carolina González3, Juan Carmona4.
1Laboratorio de Vacunas, Departamento de Microbiología. 2Laboratorio de Investigación de
Medicamentos Orgánicos. 3Universidad Nacional Experimental Politécnica Antonio José de Sucre.
4Herbario MERF . Facultad de Farmacia y Bioanálisis. Universidad de Los Andes. Mérida- Venezuela.
[email protected] [email protected]
Azadirachta indica A. Juss (Melaceae) es un árbol ampliamente distribuido en los
estados Lara, Zulia, Sucre, Aragua y Mérida (Venezuela). Conocido popularmente
como Neem, contienen varios componentes químicos, de especial interés como
terpenoides (azadiractina) [1]. Es utilizado en la medicina tradicional como
antidiabético, antimalárico, antimicrobiano [2]. El objetivo de este estudio es
evaluar la actividad antimicrobiana de los extractos etanolicos de las hojas y el
aceite de Azadirachta indica A. Juss (Neem) frente a bacterias gram positivas por el
método modificado de Hayes y Markovic [3]. La especie vegetal fue recolectada en
la Lagunillas (Mérida- Venezuela), a una altura de 1200 m.s.n.m. 100g de hojas
secas y molidas fueron sometidas a extracción en un equipo Soxhlet a 65°C
durante 6 horas, con un rendimiento de 5.79% del extracto etanólico de las hojas.
49g de las semillas secas y molidas fueron sometidas a extracción en un equipo
Soxhlet a 65°C durante 6 horas, con un rendimiento de 19% del extracto hexanoico
del aceite. El extracto etanólico resultó ser evidentemente inhibitorio del
crecimiento bacteriano de las cepas en estudio. El extracto hexanoico resultó ser
evidentemente inhibitorio del crecimiento bacteriano de las cepas en estudio [4].
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156
P 067
Free radicals and antioxidants in two oxidative stress cell
models: unexpected results
Maria Clelia Guerra1, Stefano Costa1, Rinaldo Cervellati2, Ester Speroni1
1
Department of Pharmacology, University of Bologna, Via Irnerio 48, Bologna 40126, Italy; 2Department
of Chemistry G. Ciamician, University of Bologna, Via Selmi 2, Bologna 40126, Italy.
Oxidative stress is reported to be strictly related to pathogenetic mechanisms and
play a central role in several molecular toxicities [1,2]. It seems reasonable to
hypothesize that antioxidant molecules and/or free radical scavengers can protect
from oxidative stress induced damages through quenching the free radicals
reactions [3].
Leontopodic acid (LA) is a full substituted hexaric acid derivative isolated from
Leontopodium alpinum Cass. commonly known as “Edelweiss” (Asteraceae family).
This molecule exibits significant chemical antioxidant power [4]. The aim of the
present study was to evaluate LA capacity to counteract induced oxidative stress in
some cell models. Two different in vitro oxidative stress models were adopted. The
first through the exposure of the LLC-PK1 cell line to ochratoxin A (OTA) and the
second one through the exposure of the differentiated SH-SY5Y cells to amyloid
beta (Aβ). The effects of a pre-treatment (24 h) with LA on induced ROS production
and cytotoxicity were evaluated in the two models. Surprisingly, the results showed
that while LA decreased ROS production, it did not increase cell survival.
Aknowledgements: the authors wish to thank Fondazione (Carisbo, Bologna, Italy), Fondazione Cassa di
Risparmio di Imola (Bologna, Italy), for financial support and Prof Hermann Stuppner and Prof Stefan
Schwaiger, Institut für Pharmazie, Abteilung Pharmakognosie, Leopold-Franzens-Universität Innsbruck,
for supplying leontopodic acid.
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157
P 068
Dioscorea composita, fuente de diosgenina. Síntesis de
dioximas esteroidales con actividad antitumoral
Ma. Guadalupe Hernández Linares1, Gabriel Guerrero Luna1, Jesús Sandoval
Ramírez2, Socorro Meza Reyes2, Sara Montiel Smith2, Ma. Antonieta Fernández
Herrera2, R. Ricardo Morales Robledo2
1 Universidad del Istmo, Escuela de Ingeniería Química. Ciudad Universitaria, Sto. Domingo Tehuantepec, Oax.
C.P.70760. [email protected]. 2 Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, Facultad
de Ciencias Químicas. Ciudad Universitaria. Puebla, Pue., C. P. 72570. Tel/fax: (01-222) 229-5500, ext. 7382
[email protected]
La Dioscorea composita (barbasco) se ha utilizado durante mucho tiempo en la medicina
tradicional mexicana1,2 y como componente de preparados para la menopausia. Mediante
extractos alcohólicos se ha obtenido dioscina (1), glicósido que por hidrólisis ácida o
enzimática provee diosgenina (2), que durante mucho tiempo se ha empleado para
producir hormonas sexuales. Recientemente se ha descubierto a 2 potencial como agente
anticancerígeno.3,4 El análisis estructural de compuestos con actividad biológica
comprobada, permite inducir el diseño de compuestos; en nuestro trabajo se presenta la
transformación de la diosgenina en compuestos potencialmente antitumorales.5,6 La
extracción se realizó modificando la metodologia ya reportada en la literatura.6 El tubérculo
de barbasco se secó, pulverizó y tamizó para realizar la extracción con sistema 9:1
isopropanol-diclorometano, en caliente, proporcionando a 1, como compuesto mayoritario.
HO
O
O
HO
HO
OH
O HO
HO
O
O
O
O
F3B-OEt2
O
HO
O
O
O
Reactivo
de Jones
NH2OH-HCl
AcOH, 0°C
O
HO
HO
1, dioscina
EtOH / Py
O
2, diosgenina
3
N
4
O
OH
N diosgenin-3,6-dioxima
HO
Esquema 1. Obtención de diosgenin-3,6-dioxima (4).
La sapogenina 2 se oxidó selectivamente con el reactivo de Jones, obteniendo la diona 3
(sin afectar la cadena lateral espirocetálica), la cual se trató con hidroxilamina, generando la
dioxima 4. Los compuestos se obtuvieron con altos rendimientos y fueron caracterizados
espectroscópicamente: IR, UV, masas, RMN de 1H y de 13C y [α]D. Del derivado 4 se
evaluará su actividad antitumoral y se proseguirá con la síntesis de otros compuestos.
Referencias
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159
P 069
Micrografía analítica comparativa de tres tubérculos andinos:
“oca”, “papa lisa” y “mashua”
Gurni Alberto A1, Bassols Graciela1, Schimpf Jorge2 y Vignale Nilda Dora2
Facultad de Farmacia y Bioquimíca, Universidad de Buenos Aires, Junín 946, 4º (1113) Buenos Aires,
Argentina; 2Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad Nacional de Jujuy, Alberdi 47 (4600) S. S. de
Jujuy, Argentina
1
El control de calidad botánico de los alimentos derivados de vegetales se realiza
mediante su comparación con los parámetros de identificación micrográfica de la
especie, previamente obtenidos aplicando el método micrográfico a la parte de la
planta utilizada como materia prima.
Con el propósito de aportar valor a los agroalimentos derivados de los tubérculos
andinos: Oxalis tuberosa Mol., “oca”, Tropaeolum tuberosum Ruiz et Pav,
“mashua” y Ullucus tuberosus Lozano, “papa lisa”, se aborda su análisis
micrográfico, con el propósito de definir los caracteres de valor diagnóstico
mediante los cuales se podrá establecer el origen genuino de los alimentos
derivados.
Las técnicas micrográficas utilizadas son la reducción a polvo de las muestras de
tubérculos y la disociación leve con NaOH 5% acuoso, a 100ºC durante 5 min.; los
productos obtenidos se observan al microscopio óptico.
En “oca” se observa almidón elíptico, con hilio excéntrico y estrías marcadas;
epidermis pavimentosa, de células poligonales, de pared delgada y con contenido.
En “mashua” el almidón es esférico o ligeramente elipsoidal, con hilio excéntrico y
estrías poco marcadas; la epidermis es pavimentosa, de células poligonales de
borde liso y pared gruesa. En “papa lisa”, el almidón presenta formas diversas, con
hilio excéntrico y estrías marcadas, mientras que la epidermis es pavimentosa, de
células poligonales y de pared delgada.
La morfología de los granos de almidón, que comparten la posición del hilio,
constituye el elemento diferencial de mayor importancia mientras que la epidermis
aporta información complementaria.
160
P 070
Polifenoles de especies argentinas del género Tripodanthus
(Loranthaceae)
Marcelo L. Wagner, Rafael A. Ricco, Fernando G. Ranea y Alberto A. Gurni
Cátedra de Farmacobotánica, Departamento de Farmacología, Facultad de Farmacia y Bioquímica,
Universidad de Buenos Aires. Junín 956 (1113) Buenos Aires. República Argentina.
[email protected]
Tripodanthus (Eichl.) Tiegh. es uno de los géneros que conforman la familia
Loranthaceae. En la Argentina crecen dos especies: T. acutifolius (R. & P.) Tiegh. y
T. flagellaris (Cham. & Schlecht.) Tiegh [1] . Ambas son utilizadas en la medicina
popular por su supuesta acción hipotensora atribuida a las semejanzas, en su
hábito hemiparásito, con el muérdago europeo (Viscum album L. –Viscaceae-). Los
polifenoles presentan un variado rango de actividades biológicas, entre las que se
pueden mencionar la acción hepatoprotectora, antioxidante y antihipertensiva, entre
otras. El objetivo de este trabajo fue determinar los perfiles de polifenoles de ambas
especies. Se estudiaron hojas y tallos de ejemplares que crecen sobre diferentes
hospedantes. El aislamiento y la caracterización de los polifenoles se efectuó por
métodos estándar [2,3]. Las estructuras de los compuestos fueron determinadas
mediante estudios espectroscópicos y por comparación con testigos y con datos
bibliográficos. Del estudio comparativo se pudo inferir que T. flagellaris presentó
una mayor complejidad en la glicosidación. En cambio, T. acutifolius no produjo
triglicósidos ni proantocianidinas. Estos resultados aportan parámetros fitoquímicos
que podrían ser utilizados para el control de calidad de estas especies.
Compuesto
Flavonoles
Flavan-3-ol
Flavan-3,4-diol
Proantocianidina
T. acutifolius
Quercetina
Quercetina-3-O-glucósido
Quercetina-3-O-rhamnosilglucósido
Quercetina-3-O-arabofuranósido
(+) Catequina
(-) Epicatequina
T. flagellaris
Quercetina
Quercetina-3-O-glucósido
Quercetina-3-O-rhamnosilglucósido
Quercetina-3-O-Glucorhamnosilglucósido
(+) Catequina
(-) Epicatequina
Catequina-4 -ol (leucocianidina)
ND
ND
B6: [catequina-catequina]
B8: [catequina-epicatequina]
ND: no detectado
Agradecimiento: A la Universidad de Buenos Aires por el subsidio otorgado en cuyo marco se realizó
este estudio Proyecto UBA B083
Referencias
1. Abbiatti, D., 1946. Las Lorantáceas Argentinas. Rev. Museo de la Plata VII (sección Botánica) 18, 1-110.
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Springer-Verlag, Berlin and New York, pp. 1-175.
Markham K.R., 1982. Techniques of Flavonoid Identification. Academic Press, London, pp. 1-113.
162
P 071
Ácido elágico, potente antioxidante obtenido de la Bursera
xochipalensis
Juan Diego Hernández-Hernández, R. Velázquez-Jiménez, J. C. Guzmán-Martínez,
I. Tapia-Quintero, C. Armenta-Salinas y Luisa Urania Román-Marín.
Instituto de Investigaciones Químico-Biológicas de la UMSNH, Ed. B-1, Cd. Universitaria, C.P. 58030,
Morelia, Mich., [email protected].
En la Cuenca Superior del Río Papaloapan, la Depresión del Balsas y la Vertiente del
Pacífico en la Zona Occidental de la República Mexicana, habitan cerca del 80% de la
totalidad de las especies conocidas del género Bursera en América, las dos últimas
regiones se caracterizan por la biodiversidad, la abundancia y el endemismo. Nuestro
estudio sistemático del género Bursera (1,3), del cual forma parte el contenido químico de
varias especies de Burseraceae que pertenecen a la sección Bullockia (2) y a la cual
pertenece la Bursera xochipalensis, una especie arborea (hasta 10 m de altura), resinosa
de olor agradable, sus relaciones más cercanas son con B. glabrifolia, B. aloexylon, B.
fragantíssima y B. graveolens, las tres últimas son muy arómáticas, es considerada
endémica de los Estados de Guerrero y Oaxaca, habita en los bosques tropicales
caducifolios de altitudes entre 500 y 1250 m.s.n.m. De los extractos hexánicos de los tallos,
se obtuvieron mayoritariamente los monoterpenos limoneno, β-felandreno y mirceno, los
triterpenos, α-amirina y β-lupeol y de las fracciones de polaridad entre DCM-AcOEt se
obtuvo un sólido blanco no cristalizable de p.f. > 300 ºC, insoluble, el cual se logró disolver
en una solución de NaOH al 5%; dió la prueba positiva con cloruro férrico revelando la
presencia de oxhidrilos fenólicos. Su espectro de RMP mostró una señal en la región de
los H aromáticos en 7.46 ppm y una señal ensanchada entre 3.0 y 3.8 ppm (OH), las
cuales fueron muy poco informtivas, en su espectro de RMC-13, aparecieron siete señales
que ayudaron a la caracterización del mismo. La obtención del derivado tetracetilado y
tetrametilado, permitió establecer la cantidad de oxhidrilos disponibles en la molécula. La
purificación de este producto natural, presentó dificultad debido a su escasa solubilidad, su
aspecto polvoso dio la apariencia de impurezas de naturaleza polimérica. Este compuesto
se obtuvo de la B. lancifolia, bursera de corteza exfoliante rojiza, que no pertenece a la
misma sección, incluída en la sección Bursera, arborea muy aromática. El ácido elágico,
descrito en la literatura, del que se reporta un reconocido valor antioxidante, como pesticida
natural, como promotor de la muerte celular natural en las células cancerosas sin dañar las
células normales, por lo que se encuentra relacionado directamente con la prevención y
tratamiento en métodos alternativos contra el cáncer, es un compuesto que hasta ahora no
ha sido descrito su aislamiento de plantas que pertenecen al género Bursera.
Bibliografía
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Juan D. Hernández-Hernández, et al. J. Nat. Prod., 68, 1598-1602 (2005).
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164
P 072
Método rápido de ruptura del enlace glicosídico de la dioscina
por tratamiento con F3B-OEt2
Ma. Guadalupe Hernández Linares1, Jesús Sandoval Ramírez2, Socorro Meza Reyes2,
Sara Montiel Smith2, Ma. Antonieta Fernández Herrera2, Gabriel Guerrero Luna1
1Universidad del Istmo, Escuela de Ingeniería Química. Ciudad Universitaria s/n, Barrio Sta. Cruz Tagolaba
4a Secc., Sto. Domingo Tehuantepec, Oax. C.P.70760. [email protected]
2Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, Facultad de Ciencias Químicas. Av. San Claudio esq. Blvd.
14 Sur. Puebla, Pue., C. P. 72570. Tel/fax: (01-222) 229-5500, ext. 7382 [email protected]
Las familias dioscoreaceae y agavaceae conforman un gran número de especies útiles
en medicina tradicional mexicana.1 En el estado de Oaxaca, México,2 se han encontrado
especies ricas en saponinas, como el barbasco, (Dioscorea composita), que contiene el
glicósido dioscina (1). El amplio espectro de actividad biológica de 1, como agente
antitumoral, antiviral, antifungal y antiinflamatorio, ha sido motivo de atención.3,4 En este
trabajo se reporta una nueva metodología para aislar 2 de manera rápida a partir del
barbasco. El tubérculo de barbasco seco, finamente pulverizado se extrajo con una
mezcla de isopropanol-diclorometano, en caliente, proporcionando un 5% (en peso) de
varios glicósidos en donde 1, corresponde al compuesto mayoritario.
HO
O
O HO
HO
HO OH
HO
Extracción
alcohólica
O
O
O
F3B-OEt2
O
HO
HO
O
O
O
AcOH, 0°C
O
1, dioscina
HO
2, diosgenina
Esquema 1. Obtención rápida de diosgenina (2).
Se han reportado diversas metodologías de hidrólisis del enlace glicosídico de 1
empleando HCl, HClO4 y H2SO4, a reflujo durante varias horas.5 La ruptura del glicósido
se llevó a cabo limpiamente, por acción de AcOH y F3B-OEt2, a baja temperatura, en
corto tiempo y sin apertura del espicocetal sapogenínico.6 La aglicona 2 se caracterizó
comparándola con muestras auténticas y con los datos de la literatura. Cuando la
reacción se hace adicionando Ac2O, se obtiene el acetato de 2. Se presentarán
evidencias espectroscópicas,7 detalles de la reacción y propuesta mecanística.
Referencias
1.
Pérez-García, E.A.; Meave, J.; Gallardo, C. Acta Bot. Mex. 2001, 56, 19-88.
2.
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Yu, B.; Tao, H. J. Org. Chem. 2002, 67, 9099-9102.
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Sandoval, R. J.; Meza, R. S.; del Río, Rosa E.; Hernández, L. G.; Suárez, R. A.; Rincón S.; Farfán,
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Agrawal, P.K.; Jain, D.C.; Gupta, R.K.; Thakur, R.S. Phytochemistry 1985, 24, 2479–2496.
166
P 073
Effect of different avocado oils on plasma lipid levels
Hernández Marcela1, Ortiz Alicia1, Garduño Leticia1, Dorantes Lidia1, Chamorro
Germán1
I Escuela Nacional de Ciencias Biológicas. Instituto Politécnico Nacional. Prolongación de Carpio y Plan
de Ayala s/n Col. Santo Tomás Del. Miguel Hidalgo, CP. 11340 Apdo. Postal 42-186.México
1
Different dietary approaches have been recommended to lower blood cholesterol
concentrations (1, 2). Many authors have suggested that monounsaturated fatty
acid can be used instead of complex carbohydrates or polyunsaturated fatty acids
as a substitute for saturate fatty acids (3, 4). Recently, the monounsaturated
avocado oil has gained a great importance because of its oleic acid; carotenoid and
phytosterol content due to all these molecules are associated with the cholesterol
reduction (5). The goal of this study was to evaluate the effect of the extra virgin
avocado oil obtained by a novel technique developed by Dorantes and Ortiz along
with other avocado oils in mice. Three groups were fed on different diets
supplemented with either refined Hass avocado oil or IPN extra virgin avocado oil or
New Zeland extra virgin avocado oil containing 5% (w/w) of the mentioned oils and
5% corn oil meanwhile the control group was fed on diet containing 10% (w/w) corn
oil for 4 weeks. Blood samples were taken at the beginning, after 15 days of
treatment and at the end of it. Total cholesterol, HDL-cholesterol, LDL-cholesterol
and triglycerides were evaluated in the serum. The consumption of diets
supplemented with extra virgin avocado oils provoked a significant lowering (P<
0.05) on the triglyceride concentration and do not provoked an alteration on the total
cholesterol, HDL-c and LDL-c concentrations. On the group fed on corn oil diet we
observed a significant increase (P<0.05) on the total cholesterol concentration.
Between the two extra virgin avocado oils proved we found that IPN oil had a better
effect on lowering the total cholesterol (8.63% vs. 3.65% of reduction) and LDL-c
(9.75% vs. 8.23% of reduction).The model proved in suggested that the dietary
substitution with extra virgin avocado oils could help to reduce the triglyceride
concentrations and to maintain the total cholesterol, HDL-c and LDL-c.
Acknowledgements: IPN, CONACyT,
References
1.
Bethesda,M (1989),National Institute of Health, 89,2925.
2.
Grundy, S. et al. (1982), Nutrition Commitee. Circulation, 65, 839A-54A.
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5.
Berger, A. et al. (2004), Lipids in Health and Disease, 3, 5.
167
P 074
Análisis fitoquímico preliminar y evaluación hepatológica de la
semilla de Litchi chinensis Sonn en modelo murino
Hernández-Navarro MD1, Montes de Oca-Jáuregui S1, Sánchez-Bérmudez L1,
Gómez-Oliván LM1,Camarillo-Romero ES1, Ortiz-Moreno A2, Fernández-Zurita RG2,
Hernández-Ortega MM2, Germán-Faz C2.
Facultad de Química. UAEM. Paseo Colón esq. Paseo Tollocan. C.P. 50180. Toluca, Edo. Méx.,
México. TelFax +55 (722) 2173890 ext. 130. 2ENCB. IPN, Prol. Carpio y Plan de Ayala S/N, C.P. 11340,
México, DF. México. TelFax +55 (55)57296300 ext. 62359. e-mail. [email protected];
[email protected]
1
El uso indiscriminado de plantas medicinales pueden ejercer daños a nivel
orgánico; por lo que, es necesario realizar ensayos toxicológicos que permitan
elucidar su margen de seguridad y posible mecanismo de toxicidad. El propósito del
presente estudio fue determinar la presencia de componentes activos en la semilla
del fruto de litchi (Litchi chinensis Sonn) empleada en la medicina tradicional china
como antidiarreico y analgésico, así como su posible hepatotoxicidad en un modelo
murino. Se realizó un análisis fitoquímico preliminar para identificar los principios
activos presentes en la semilla de litchi. Se evaluó la toxicidad aguda en ratones
ICR y en base a la DL50 obtenida, se seleccionaron las dosis para el estudio de
hepatotoxicidad. La semilla de litchi fue administrada por vía intragástrica a dosis de
100, 200 y 400 mg/kg durante 30 días y al término del tratamiento, se determinaron
los niveles séricos de enzimas hepáticas. Los hígados disectados fueron analizados
histológicamente. Del análisis fitoquímico preliminar se identificó la presencia de
taninos, flavonoides y azúcares reductores. La DL50 obtenida fue >4000 mg/kg. No
se encontraron diferencias estadísticas entre las concentraciones séricas de
enzimas hepáticas ni se observaron daños tisulares respecto al lote control. Se
concluye que los activos fitoquímicos identificados, lejos de inducir un efecto
adverso son considerados importantes antioxidantes que coadyuvan a la
homeostasis hepatocelular. La administración de semilla de litchi de hasta 400
mg/kg por 30 días en el modelo utilizado, no generó alteraciones de las enzimas
transaminasas ni daño en el parénquima hepático; sin embargo, son necesarios
otros estudios para confirmar su inocuidad y seguridad de consumo en la medicina
alternativa tradicional.
Acknowledgements (italic): 1.Proyecto UAEM 2440/2007, 2.CICMED-UAEM. 3.CIESA.UAEM.
168
P 075
In vitro activity of four (2-nitropropenil)-thiophene compounds
against Trypanosoma cruzi
Cristina Herrera1, Gabriel Vallejos2, Randall Loaiza1, Rodrigo Zeledón3, Andrea
Urbina3, Marcos Carola2, Silvia Sepúlveda-Boza2
1 Universidad de Costa Rica, San Pedro de Montes de Oca, San José, Costa Rica; 2 Universidad de
Santiago de Chile; 3 Universidad Nacional, Barreal de Heredia, Costa Rica.
Chagas disease is a parasitic disease caused by Trypanosoma cruzi, producing a
great economic and public health impact in Latin America1. There are only two drugs
available, nifurtimox and benznidazol which are more effective during the acute phase
of the disease with more limited actions
at the chronic phase and some side
effects might appear leading to
treatment interruption2,3. This indicates
the need for new efficacious, selective
and well tolerated drugs. In this work, we
determined the in vitro activity of four
semi-synthetic compounds related to (2nitropropenil)-thiophene (Figure 1)
against the parasitic and culture forms of
T. cruzi. Controls of citotoxicity were
performed on Vero cells. The IC50 value
for each compound was calculated
(Figure 2). According to our results,
there are important differences between
toxic concentrations against Vero cells
and active concentrations against all
parasitic forms, which suggest some
specificity of the four compounds for the
parasites as compared to mammalian
cells.
Also,
amastigotes
and
epimastigotes
exhibited
different
degrees of susceptibility to the different
compounds. The most remarkable differences correspond to compound N1 which
could be improved by chemical modifications of the molecule in order to increase
activity and decrease toxicity.
References
1.
Dias JPC, Silveira AC & Schofield CJ 2002. Mem. Inst. Oswaldo Cruz. 97:603-612.
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Coura JR & De Castro SL 2002. Mem. Inst. Oswaldo Cruz. 97: 3-24.
170
P 076
Actividad antibacteriana de una epifita y su forofito
Herrera F. María del Carmen1, Tapia A. Rafaela2, García S. Ma. del Consuelo2,
Espinosa S. Inés2, Hahn Otto1, Vega A. Elisa2.
Departamentos de 1Biologia y 2Ciencias de la Salud. Universidad Autónoma Metropolitana
IztapalapaMexicoD.F. Apto. Postal 55-535. e-mail [email protected]. [email protected]
Tillandsia recurvata es una epífita de amplia distribución en el Valle de Zapotitlán
Puebla. Abunda sobre Cercidum praecox. T. recurvata se emplea en medicina
tradicional mexicana para tratar diferentes padecimientos de piel, digestivos y
respiratorios. C. praecox se utiliza como analgésico , en el Noreste de Argentina la
emplean para tratar afecciones bronquiales, trastornos digestivos, afecciones
renales y como alucinógeno.
Se determinó la actividad antibacteriana in vitro de T. recurvata y C. praecox. Para
T. recurvata se empleó la planta completa, se prepararon los extractos por
maceración durante 48 horas a temperatura ambiente empleando hexano, acetato
de etilo, metanol y agua. Para C. praecox se emplearon las hojas secas y molidas ,
obteniendo los extractos de la misma manera que para T. recurvata. Los extractos
se filtraron, concentraron y se prepararon diluciones, que se aplicaron a discos de
papel filtro en cantidades de 1.0; 10.0 y 100 g/disco. Como control negativo y
positivo se usaron dimetilsulfóxido y una mezcla de penicilina-estreptomicina
respectivamente. Las cepas bacterianas empleadas fueron B. subtilis, S. aureus, S.
typhi, S. flexneri, E. coli, P. mirabilis y S. typhimurium en concentración de 3x108
bacterias/ml. Los cultivos y los discos se incubaron a 37°C durante 24 horas. Los
resultados se evaluaron midiendo el halo de inhibición. Los extractos de T.
recurvata obtenidos con hexano y metanol inhibieron el crecimiento de
microorganismos gram negativos, el de Acetato de etilo inhibió el crecimiento de
microorganismos gram negativos y gram positivos. En el C. praecox, el extracto
metanólico inhibió a B subtilis y a todas las bacterias gram negativas. El de acetato
de etilo inhibió el crecimiento de P mirabilis y S. Aureus. El hexánico inhibio el
crecimiento de P.mirabilis el obtenido con acetato de etilo inhibió el crecimiento de
P. mirabilis y S. Aureus.
Palabras clave: tillandsia, cercidium.inhibición, extractos
171
P 077
Caracol de jardín Helix aspersa fuente de proteina
Herrera F. Ma. Del Carmen1, V. Melo2, J. Rivero1, O. Hahn1.
1UAM-I Av. San Rafael Atlixco 186, Col Vicentina C.P. 09340, Iztapalapa. México D.F. 2UAM-X. Calz.del
Hueso 1100. Col Villa Quietud. Coyacaán, C.P. 09460. México D.F., [email protected],
[email protected], [email protected]
En México, como en otros países del mundo, existe un alto grado de desnutrición
debido a problemas socio-económicos. Principalmente en regiones rurales y
subrurales los campesinos tienen una alimentación monótona y deficiente en
proteínas, lo que da como resultado una disminución en la capacidad de trabajo así
como vulnerabilidad a diversos padecimientos, principalmente respiratorios y
gastrointestinales. El caracol Helix aspersa, invertebrado muy apreciado en
diversos países de Europa está ampliamente distribuido en el campo y en jardines
urbanos, y disponible en México principalmente en la temporada de lluvias. Se llevó
a cabo un estudio de este molusco para determinar la disponibilidad, identificación y
evaluación de nutrimentos en base seca de acuerdo a la metodología del AOC
(1995). Los resultados obtenidos fueron: proteínas 61.05%; lípidos 5.61%; materia
inorgánica 9.70%; fibra 0.81%; extracto libre de nitrógeno ó carbohidratos solubles
23.83%. Los caracoles tienen un alto contenido en proteínas y minerales, mayor
que otros alimentos de consumo tradicional; son una buena fuente de energía
proveniente de los carbohidratos solubles, bajos en grasas y con un contenido de
fibra insignificante, por tanto se recomienda su consumo acompañado de otros
alimentos ricos en fibra, están disponibles a lo largo del año con mayor abundancia
en época de lluvias y son de fácil captura. Su consumo en México es básicamente
como botana. Se separan de su concha golpeándola ligeramente después de
congelarlos.
172
P 078
Fatty acid composition of lipids in wild underutilized green
leaves of Mexico
Ma. del Carmen Herrera1, Virginia Melo2, Jorge Rivero1, Otto Hahn1, Cristina
Sánchez2, Consuelo Moreno2
Hueso 1100. Col Villa Quietud. Coyoacan, C.P. 09460. México D.F. [email protected],
The health of wild underutilized green leaves of Mexico are not well recognized by
nutritional and medical scientists, but intake by population in Mexico are below
recommendations. There are not reports that link wild green leaves consumption
with reduced risk of chronic diseases such as cardiovascular and cancer diseases.
Important components of underutilized green leaves include fatty acids particularly
monounsaturated (MUFA) and polyunsaturated (PUFA), like omega 3 and omega
6 that have positive impact on human health. The lipid content and fatty acid (FA),
composition are affected by several factors, as environment cultivar, madurity,
species, harvest, diet and preparation techniques.
Although underutilized green leaves are generally acceptable by people of rural
communities and urban cities as human foodstuff; most species of fresh green
leaves verdolaga (Portulata oleracea L.), chaya (Cindoscolus chayamansa M.), and
quelite (Chenopodium berlandieri M.), quintoniles (Amaranthus hybridus). Were
studied to promote benefits among population.
The results were:
Plants
Verdolaga, Portulaca
olaracea L.
Chaya, Cindoscolus
chayamansa M.
Quelite, Chenopodium
berlandieri M.
Quintoniles,
Amaranthus hybridus
MUFA
PUFA
3
TFA
SFA
0.35
0.84
0.61
1.35
0.16
0.41
0.72
0.51
1.83
0.21
0.12
0.71
0.56
1.39
0.27
0.29
068
0.65
1.31
0.35
173
P 079
Procambarus bouvieri O. an underutilized animal
species source of macronutrients for human nutrition
Ma. del Carmen Herrera1, Virginia Melo2, Jorge Rivero1, Otto Hahn1, Cristina
Sánchez2, Consuelo Moreno2.
Hueso 1100. Col Villa Quietud. Coyoacan, C.P. 09460. México D.F. [email protected],
Procambarus bouvieri O. is a crayfish consumed in Mexico since ancient times by
different social groups with high demand as a good source of macronutrients. It can
be gathered in fresh water banks, rivers, streams, dams, ponds and swamps all
year round, among aquatic vegetation, in clean and oxygenated water. This
crustacean species is important as foodstuff by its size as well as their nutritional
value. Research was carry out to assess macronutrient composition of edible tissue
of this organism. Cryfish were collected with a water net at bank river of Santa
Catarina dam at Michoacán State in México, during wet and dry seasons. Samples
of 12 cm length were transport in plastic containers with dam water to be identified
and qualitative and quantitave analyzed in dry basis by AOAC 1995 Methods. Data
obtained: crude proteins 55.45%., inorganic material 11.77%., crude lipids 12.29%.,
crude fibre 1.89%; soluble carbohydrates 18.60%. Crayfish is a good source of
macronutrients, are available all year round, but must be storage refrigerated or
frozen for intake after long time.
174
P 080
Estudio de los componentes volatiles de Annona muricata L. y la
Annona cherimolia Mill., que crece en el estado Mérida,
Venezuela
Hoyos Z, Rojas L, Carmona J, Usubillaga A.
Instituto de Investigaciones, Facultad de Farmacia y Bioanálisis, Universidad De Los Andes Urb. Campo
de Oro C.P. 5101 Mérida, Venezuela. Email: [email protected].
La Anonna muricata L. y la Anonna cherimolia Mill., corresponden al orden
Magnoliales, familia Annonaceae. Son árboles de unos 5 a 8 metros de altura
aproximadamente; Aunque ambas crecen en América Tropical, la Anonna
cherimolia Mill. es propia del clima subtropical siendo cultivable en clima tropical a
alturas mayores de 900 metros s.n.m.; La primera posee una fruta muy delicada de
color verde oscuro cubierta de espinas suaves de cáscara muy delgada; el fruto de
la Anonna cherimolia Mill. tiene forma cordiforme, cubierto de escamas, y es de
color verde pálido. Ambas son utilizadas por sus propiedades anticancerígenos,
antimicrobianas y antifúngicas gracias a la diversa cantidad de acetogeninas que
poseen. En este trabajo se realiza un estudio comparativo de los aceites volátiles
de estas dos especies de Annonáceas para lo cual se empleó 420g de partes
aéreas de la Anonna muricata L., y 330g de la Anonna cherimolia Mill., que fueron
sometidas a hidrodestilación empleando la trampa de Clevenger por 3 horas
obteniendo 0.3 ml de un aceite de color amarillo y 0.4 ml de un aceite blanquecino
respectivamente. El análisis de los aceites de las dos especies de annona, se
realizo por cromatografía de gases empleando un equipo de Marca Pekín Elmer
modelo Autosystem equipado con una columna AT-5 de 60m de largo y 0,25 mm
de diámetro, también se uso un sistema GC/MS Hewlett Packard MSD 5973 con
una columna de fenil-metil-polisiloxano de 30 m x 0,25 mm (HP-5). La identificación
de los componentes se realizo con ayuda de una librería Wiley Ms Data (sexta
edición, 275 K Spectra). Se obtuvo como componentes mayoritarios: para la
Anonna muricata L. el beta-Cariofileno 21,27%, alfa-Bergamontene 7,89%,
Germacrene D 8,83%, Valencene 14,20% y para la Anonna cherimolia Mill. el
Germacrene D 46,56%, bicyclogermacrene 11,66%, beta-Cariofileno 6,08%,
Germacrene B 5,51%.
Referencia
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175
P 081
Composición química del aceite esencial de las hojas de
Artemisia absinthium L. que crece en Tovar-Edo MéridaVenezuela
Mora F.2, Huelvas P.2, Rojas, L.1, Usubillaga, A.1
1Instituto de Investigaciones. Facultad de Farmacia y Bioanálisis; 2Jardín de Plantas. Facultad de
Farmacia y Bioanálisis. Urb. Campo de Oro; Universidad de Los Andes. Mérida-Venezuela.e-mail:
[email protected]
El género Artemisia pertenece a la familia Compositae (Asteraceae) y está
representado por cerca de 350 especies. La Artemisia absinthium (Ajenjo) es un
arbusto aromático originario de Europa. Es utilizado como aperitivo, en
complicaciones gastrointestinales, carminativo. El aceite esencial de esta planta ha
sido estudiado en diferentes países y se han reportado diversos quimiotipos,
muchos de ellos difieren según su origen1. En el presente trabajo se reporta, por
primera vez, el análisis de los componentes volátiles del A. absinthium que crece en
Tovar (950 m.s.n.m.), Edo Mérida-Venezuela. Hojas frescas de la planta fueron
sometidas a hidrodestilación empleando la trampa de Clevenger por dos horas
obteniendo de 1Kg de hojas, 1,2 mL de aceite. La identificación de los
componentes se realizó mediante un sistema GC/MS Hewlett Packard MSD 5973,
con una columna de fenil-metil-polisiloxano de 30m por 0,25mm (HP-5). La
identificación de se realizó con ayuda de una librería Wiley MS Data (6ª Edición,
275K Spectra). Un total de 30 constituyentes fueron identificados siendo los
mayoritarios: alfa-tujona (55,13%), canfeno (2,56%) y Chamazulene (10,47%).
Referencias:
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Basta, et al (2007). J.Essent. Oils Res., 19, 316-318.
2.
Adams (1995). Identification of Essential Oil Components by Gas Chromatography Mass
Spectroscopy. Allured Publishing.Illinois.
176
P 082
Analysis of commercial products containing proanthocyanidins:
evaluation of different methods
Comai S, Dall’Acqua S and Innocenti G
Department of Pharmaceutical Sciences, University of Padova, Via F. Marzolo 5, I-35131 Padova, Italy.
Herbal medicine and functional food markets are experiencing a fast grow and
development. Proanthocyanidins (PAs) and anthocyanidins are constituents of the
berry fruits known to have antioxidant and radical scavenging properties; they are
used for their health promoting effects especially in the cardiovascular field, cancer
and arteriosclerosis as well as for treating non complicated urinary infections. Due to
the diversity of structures within these compounds, the isolation and the analysis of
PAs and the choice of standard reference compounds for the quantitative analysis
remain points of discussion. Nowadays, the amount of PAs is performed with
several methods yielding non comparable values of active principles in different
extracts. Most of the spectrophotometric methods, referred to Bate-Smith assay [1],
are widely applied for the simplicity and applicability. The HPLC methods are
divided in normal and reversed phase using silica or C-8 and C-18 RP columns,
respectively [2,3].
For this reason, we aimed to compare previously published analytical procedures to
set the proanthocyanidin contents in seven commercial products with declared titles
as total PAs varying from 1% to 30% and to propose a RP-HPLC method for their
determination. HPLC methods are in our opinion more suitable, compared to
spectrophotometric ones, because they are more accurate and allow to obtain the
fingerprint of the extract.
The obtained results show that it is difficult to compare the commercial products
when the PAs evaluation is performed with different analytical methods. Our data
show the need of reliable and accurate methods for quali-quantitative PAs extracts
analysis.
References
1.
Bate-Smith, E.C. (1975), Phytochemistry, 14, 1107.
2.
Krenn, L. et al. (2007), Pharmazie, 62, 803.
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Schofield, P. et al. (2001). Anim Feed Sci Tech, 91, 21.
177
P 083
Echinacea spp. microwave assisted extraction, HPLC evaluation
of polysaccharide and secondary metabolites
Dall’Acqua S1, Bisonni G1, Albertin V1, Aiello N2 and Innocenti G1
1
2
Department of Pharmaceutical Sciences, University of Padova, Via F. Marzolo 5, I-35131 Padova, Italy.
CRA-MP, Piazza Mons. Nicolini, 6, 38100 Trento Italy
Echinacea spp. are widely used in the pharmaceutical and nutraceutical marked as
immunostimulating herbal ingredient [1]. Papers point out that some
immunomodulating properties are related to polysaccharide fractions [2]. Recent
data revealed that some echinacea alkammides potently activate CB2 cannabinoid
receptors [3] suggesting a potential role in the immunostimulating mechanism. In
addition, the alkyl amides are the only components of Echinacea extracts found to
cross the intestinal barrier, and they have been reported to display anti-inflammatory
activity.
Despite this echinacoside and chicoric acid are the marker compounds that are
considered for assessing quality of this herbal drug.
In this paper we present the use of microwave assisted extraction of polysaccharide
and secondary metabolites from Echinacea roots. Fast RP-HPLC method was used
for secondary metabolite quantification. In addition quali-quantitative analysis of the
water soluble polysaccharide was performed by HPLC-SEC.
The three different species, E. pallida, purpurea and angustifolia, were considered
and polysaccharides, polyphenols and alkammides were quantified.
Microwave assisted extraction (MASE) could be applied for the quality control of
Echinacea roots as an easy and fast extraction method.
Fast-RP-HPLC and HPLC-SEC methods were developed for the quali-quantitative
analysis of roots.
Acknowledgements: The authors are grateful to Regione Veneto for the financial support (EVUA project)
References
1.
Barrett.B. (2003), Phytomed, 10, 66.
2.
Morazzoni, P. et al. (2005), Fitoterapia, 76, 401.
3.
Raduner, S. et al. (2006), J Biol Chem, 281,14192.
178
P 084
Recursos fitoterapéuticos
inflamatorias
en
las
raquialgias
mecánico-
Jorge Cruz1, Juan Jiménez1, Bienvenida Rodríguez1, Carla Jiménez2, Ricardo
Navarro1, Jesús Sánchez1
1 Universidad de Las Palmas de Gran Canária. Islas Canarias. España;
Madrid. España
2
Universidad San Pablo-CEU.
Introducción: En general las enfermedades del aparato locomotor y en particular las
referidas a la columna vertebral son procesos de gran prevalencia en nuestro
medio. La artritis, y su amplio espectro de patologías, y la artrosis constituyen el
origen fundamental de trastornos del aparato locomotor y por extensión de las
afecciones dolorosas de la columna vertebral: cervicalgias y cervicobraquialgias,
dorsalgias, lumbalgias y ciatalgia,… El uso de la fitoterapia en estas enfermedades
puede suponer no sólo una alternativa al tratamiento con AINEs, sobre todo en
aquellos casos de pacientes polimedicados o que toleran mal este tipo de
tratamientos debido a la aparición de efectos secundarios importantes y precoces,
sino también la posibilidad de combinar ambos tipos de fármacos (de síntesis
química y fitofármacos), con el objeto de disminuir la dosis y, por tanto, reducir la
incidencia o la gravedad de esos efectos adversos.
Objetivo: Seleccionar aquéllas plantas medicinales o medicamentos tradicionales
de plantas de las que, según la bibliografía actualizada, exista suficiente evidencia
científica y garantías de calidad, seguridad y eficacia para su utilización como
opción alternativa o complementaria a la utilización de AINEs en el tratamiento
sintomático del dolor mecánico-inflamatorio provocado por las afecciones de la
columna vertebral.
Especies: Harpagophytum procumbens D.C., Salix purpurea L., Salix daphnoides
Vill., Salix fragilis L., Urtica dioica L., Urtica urens L., Filipendula ulmaria L., Betula
pendula Roth., Betula pubescens Ehrh.
179
P 085
Estudio fitoquímico de la planta Munnozia senecionidis Benth.
Lara J, Rojas L, Carmona J
Instituto de investigaciones. Laboratorio de Productos Naturales, Facultad de Farmacia y Bioanálisis.
Universidad de los Andes. Mérida 5101 Venezuela. e-mail: [email protected]
La planta Munnozia senecionidis Benth. pertenece a la familia Asteraceae. Esta
familia se caracteriza por ser una de las que presenta un mayor numero de plantas
con flor del planeta y abarca unos 1.500 géneros y unas 20.000 especies
distribuidas por todo el mundo1. Gran número de estudios muestran que las plantas
de esta familia han sido utilizadas por sus múltiples propiedades curativas. El
género Munnozia se encuentra distribuido principalmente en países de América del
sur y en menor cantidad en América central2. 600g de hojas frescas de la especie
fueron recolectadas en la vía hacia los pueblos del sur en Mérida estado Mérida,
Venezuela estás fueron secadas y molidas. La extracción y separación de
productos se llevo a cabo utilizando inicialmente hexano, Luego etanol y finalmente
agua para obtener extractos de distintas polaridades. El extracto obtenido de
hexano fue fraccionado en una columna cromatográfica obteniéndose 10
fracciones, en la segunda fracción se detectó mediante TLC la presencia de dos
compuestos, los cuales fueron separados por cromatografía de columna, el análisis
de estos compuestos se realizó empleando técnicas espectroscópicas de RMN 1H,
y RMN 13C y Espectroscopia de Masas evidenciándose que se trata de compuestos
de tipo triterpenos de la serie oleanano. La identificación detallada y total de estos
compuestos se esta llevando a cabo mediante técnicas de RMN bidimensionales.
Referencias
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Fournet, A.; et al. (1993) Phytother Res, 7, 111-115.
180
P 086
Byrsonima fagifolia Niedenzu apolar compounds with
antitubercular activity
C.T. Higuchi1, M. Sannomiya2, F.R. Pavan1, S.R.A. Leite2, D.N. Sato3, S.G.
Franzblau4, L.V.S. Sacramento1, W. Vilegas2, C.Q.F. Leite*,1
Unesp, Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Rodovia Araraquara-Jaú km 01, Araraquara/SP, Brasil,
e-mail: [email protected] ; bUnesp, Instituto de Química. Rua Francisco Degni s/n, Araraquara/SP,
Brasil; cInstituto Adolfo Lutz, Rua Minas, 887, Ribeirão Preto, SP, Brasil; d Institute for Tuberculosis
Research, University of Illinois at Chicago, USA
1
Mycobacterium tuberculosis, the agent of tuberculosis, is responsible for high
mortality, killing worldwide roughly 1.7 million people annually. The increasing of the
multidrug resistant (MDR) tuberculosis (TB) today turns urgent the search of new
synthetic or natural tuberculostatic drugs. Byrsonima fagifolia Niedenzu (IK) is a
native species from Brazilian Cerrado . In Brazilian folk medicine the leaves of B.
fagifolia are used as an antiemetic, diuretic, febrifuge and to treat peptic ulcers. The
aim of this study was to describe the isolation and identification of B. fagifolia leaves
chloroform extract compounds and to determine their antimycobacterial activity. The
fractionation leds to the isolation of active antitubercular compounds alkane
dotriacontane (Minimal Inhibitory Concentration - MIC, 62.5 µg/mL), and
triterpenoids as bassic acid (MIC 2.5 µg/mL), α-amyrin acetate (MIC of 62.5 µg/mL),
a mixture of lupeol, α- and β- amyrin (MIC of 31.5 µg/mL) and a mixture of lupeol,
and acetates of α- and β- amyrin (MIC 31.5 µg/mL). The antimycobacterial activity
was determined by the Microplate Alamar Blue Assay (MABA) and the structures of
promising compounds were determined by spectroscopic analysis. This
investigation constitutes the first report of a chemical and antitubercular study of
apolar compounds from B. fagifolia Niedenzu (IK).
Acknowledgements: FAPESP for grants and financial support
181
P 087
Evaluation of anti-Mycobacterium tuberculosis activity of
fractions from Campomanesia adamantium Berg. (Myrtaceae)
F.R. Pavan1, R.G. Coelho2, C.A.L. Cardoso3, I.D. Coutinho2, N.K. Honda2, S.R.A.
Leite3, D.N. Sato5, W. Vilegas4, C.Q.F. Leite1,*
UNESP, Faculdade de Ciências Farmacêuticas, SP, Brazil ; 2UFMS, Departamento de Química,
Campo Grande, MS, Brazil; 3UEMS, Curso de Química, Dourados, MS, Brazil; 4UNESP, Instituto de
Química, SP, Brasil; 5Instituto Adolfo Lutz, SP, Brasil; e.mail: [email protected]
1
Tuberculosis (TB) remains an important public health problem worldwide and the
epidemiology of TB is severely affected by the development of multi-drug
resistance. Natural products and/or their semi-synthetic derivatives can lead to
novel antimycobacterial drugs. Campomanesia adamantium Berg. (Myrtaceae) is a
small tree and its fruits are widely used to make liqueurs, juices and sweets. The
infusion of the leaves is used in popular medicine as depurative, anti-diarrhoeic,
cleanser, anti-rheumatic and to decrease the blood cholesterol. This study aimed to
evaluate the anti-M. tuberculosis activity of extracts and fractions of C. adamantium
and also to identify and quantify the compounds present in the active fractions.
Eight compounds from C. adamantium were identified as flavanones and chalcones
and six compounds were quantified by HPLC-DAD. The results showed that the
compounds are qualitatively and quantitatively different within of the fractions
analyzed. The fractions exhibited range of 34.7-330.0 mg/g of the compounds
contents analyzed. The anti-M. tuberculosis activity of fractions range from MIC of
39 to >250 μg/mL. The better results of 39 μg/mL were verified for two fractions
contain bigger quantities of the compounds: 5,7-dihydroxy-6,8-dimethylflavanone
and 2´,4´-dihydroxy-6´-methoxy-3´-5´-dimethylchalcone.
Acknowledgements: FUNDECT, FAPESP , CNPq and Capes for grants and financial support and for
Marcos Sobral for the identification of C. adamantium.
182
P 088
Antitubercular activity of metabolites isolated from Phomopsis
stipata
K.A. Prince1, R. Sordi2, A.C.B. Santos1, F.R. Pavan1, A.R. Araujo2, S.R.A. Leite2,
C.Q.F. Leite1
1 Unesp, Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Araraquara, SP, Brasil. 2 Unesp, Instituto de Química,
Araraquara, SP, Brasil. e-mail: [email protected]
In the world there is the urgent need to find out new synthetic or natural
tuberculostatic drugs, due to the increasing of Mycobacterium tuberculosis multidrug
resistant strains. The tuberculosis agent kills roughly 1.7 million people annually.
The aim of this study was to describe the activity against Mycobacterium
tuberculosis of secondary metabolites produced by the endophytic fungus
Phomopsis stipata. The fungus was isolated from plant species Styrax camporum
Pohl, native from Brazilian "cerrado" (savannah-like vegetation). The fungus P.
stipata was cultivated in different media and the crude extracts were obtained from
ethyl acetate extraction. The antimycobacterial activity of crude extracts was
determined by the Microplate Alamar Blue Assay (MABA) using Mycobacterium
tuberculosis H37Rv, and the toxicity was evaluated on the promising extracts using
macrophage cell line culture technique. The antimycobacterial activity of the crude
extracts was different according to the culture medium. According Gu et al., the
crude extracts that exhibit MIC equal to or lower than 125 μg/mL are considered
promising. The crude extract from mold growth on corn medium presented the best
MIC of 31,25 μg/mL, followed by that originating from Potato Dextrose Broth (PDB),
with MIC of 62,5 μg/mL, and from Czapek medium with MIC of 125 μg/mL. For
others extracts the MIC was of 250 μg/ml. The crude extracts of fungus from corn
medium and from PDB, the more assets against M. tuberculosis, showed just little
toxicity on macrophages.
Acknowledgements: This research was financially supported by FAPESP.
183
P 089
In vitro anti Mycobacterium tuberculosis activity of some
Brazilian “Cerrado” plants
F.R. Pavan1, S.R.A. Leite2, C.T. Higuchi1, D.N. Sato3, A.C.B. Santos1, W. Vilegas3,
C.Q.F. Leite1
UNESP, Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Araraquara, SP, Brasil. 2 UNESP, Instituto de Química,
Araraquara, SP, Brasil. 3 Instituto Adolfo Lutz, Ribeirão Preto, SP, Brasil. e-mail: [email protected]
1
The current escalation of multidrug resistant tuberculosis today worries the sanitary
authorities of the whole world, mainly in developing countries, where the situation is
more severe. Thence, it is urgent the search of new synthetic or natural
tuberculostatic drugs. We have screened plants of Brazilian "cerrado" region
(savannah-like vegetation) with activity against Mycobacterium tuberculosis. People
of the area use many native species as natural drugs to treat several illnesses,
including tuberculosis (oral tradition). We tested the chloroform and methanol
extracts of 37 plant species distributed among 17 families from Brazilian cerrado
against Mycobacterium tuberculosis H37Rv. The fresh leaf, bark, fruits, chapter and
scapes of plants were collected at Brejinho de Nazaré, Tocantins State, Brazil
(11°01' S, 48°34' W, elevation 240m). The air-dried and powdered material was
extracted with chloroform and methanol, and the solvents were evaporated at
temperature of 60 ºC to yield the respective extracts. For each one we determined
the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) by Microplate Alamar Blue Assay
(MABA). Gu et al. considered active the plant extracts that can prevent growth of M.
tuberculosis at concentration (MIC value) of ≤128 μg/mL. Crude extracts from 17
plants showed MIC value of ≤ 125 μg/ml and three of 31.2 μg/mL. These results
suggest that the Brazilian cerrado flora may be a source of plants with active antiM. tuberculosis constituents extractable by polar and apolar solvents.
Acknowledgements: This research was financially supported by FAPESP/BIOTA and CNPq.
184
P 090
Citrus bergamia juice reduces risk of aortic wall desease
Leuzzi A.1, Campolo L.1, Lauriano E.R.2, Lauricella G.1, Silvestri G.2, Mondello M.R.1
1
2
Pharmaco-Biological Department, School of Pharmacy, SS. Annunziata, 98168 Messina, Italy
Department of Foods and Environmental Sciences. Sal. Papardo, 98168 Messina, Italy
Citrus bergamia Risso & Poiteau is a small tree (fam. Rutaceae) that grows in the
jonica cost, in Reggio Calabria, which have particular meteo conditions, and also
grows in Brazil. The fruit is used mostly for the extraction of its essential oil from the
peel, widely used in cosmetic, food industries and pharmaceutical [1]. Literature
data show that juice hypolipidemic effect can be correlated to several components
as flavonoid glycosides [2,3], pectins and ascorbic acid, which have high antioxidant
potential and interfere on cholesterol metabolism [4].
Because C. bergamia juice showed hypolipidemic properties and reduces hepatic
and kidney parenchyma diseases [5], our study was focused on C. bergamia juice
anti -atherogenic effects.
The study was performed on the aortic wall of treated rats with hypercholesterolemic
diet and C. bergamia juice, from “Fantastico” and “Femminello” cultivar in Melito
P.S. (RC) for 30 days. A group of control rats was feeded with hypercholesterolemic
diet only. Results show that juice treatment reduces the upsetting of atherosclerosis
plaque within the aortic wall, decreasing the foam cells, when compared with control
rats. Probably C. bergamia juice flavonoids prevent atherosclerosis plaque
formation and could be considered powerful supplement for coronary disease, due
to their LDL anti-oxidation properties [6]. Infact LDL are responsible for flogistic
reaction of atherogenesis [7]. These observations suggest that the positive effect of
C. bergamia may reduce the risk of some cardio vascular diseases by its radical
scavenging function and hypocolesterolemic action.
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Mandalari, G. et al. (2006), J. Agric. Food Chem. 54,197-203
185
P 091
Effects of grape supplementation on acute trinitrobenzene
sulphonic acid–induced colitis in rats
Anderson Luiz-Ferreira1, Ana Cristina Alves de Almeida1, Jailson C. Dias2, Cibele
Lima Albuquerque1, Erika Suzuki3, Eduardo Augusto Rabelo Socca1, Vinícius
Camargo Penteado1, Felipe Meira de-Faria3, Lauro Tatsuo Kubota2, Alba R. M.
Souza-Brito1.
Universidade Estadual de Campinas, Departamento de Fisiologia e Biofísica, Campinas, CP 6109,
Brazil, 2Univeridade Estadual de Campinas, Departamento de Química Analítica, Campinas, CP 6154,
Brazil, 3Universidade Estadual de Campinas, Departamento de Farmacologia, Campinas, CP 6111,
Brazil.
1
Background: The polyphenolic phytoalexin resveratrol is a naturally occurring
stilbene found in a variety of foods, including grapes and red wines. Previous
reports demonstrated that resveratrol regulates many biological activities, among
them oxidation and inflammatory regulation [1, 2]. Infiltration of leukocytes into the
mucosa has been suggested to contribute significantly to tissue necrosis and
mucosal dysfunction associated with colitis [3]. Activated neutrophils catalyze,
through the enzyme myeloperoxidase (MPO), the formation of potent cytotoxic
oxidants [4]. MPO activity is widely used to detect and follow up intestinal
inflammation. Its low activity indicates the anti-inflammatory property of a given
compound [5]. Objectives: Investigate the effects of a mixture of grape skin, pulp
and seeds (FU) on acute experimental trinitrobenzene sulphonic acid (TNBS)induced colitis in rat. Methods: FU (5 g/kg/day, p.o.) was administered during 2
weeks before TNBS colitis induction and during 1 week after. Colons were removed
and lesions were blindly scored according to macroscopic scale. Inflammatory
response was assessed by myeloperoxidase activity (MPO) determination assay.
TNBS inflammation is characterized by an increased colonic wall thickness, oedema
and necrosis. Results: FU reduced colonic damage score and significantly inhibited
MPO activity (TNBS control - 0,073 ± 0.005 versus TNBS FU - 0,042 ± 0,003 units
MPO/g). Conclusions: FU presented anti-inflammatory activity, estimated by the
quantification of MPO activity.
Acknowledgment: FAPESP
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186
P 092
Pharmacognostic study of Ampelozizyphus amazonicus: a
medicinal plant used by the “Quilombolas” of Oriximiná, Brazil
André Luiz Maiocchi Alves Costa1, Danilo Ribeiro de Oliveira2, Suzana Guimarães
Leitão1, Gilda Guimarães Leitão2
Departamento de Produtos Naturais e Alimentos (DPNA), Faculdade de Farmácia, Universidade
Federal do Rio de Janeiro, Centro de Ciências da Saúde (CCS) - Bloco A, 2º andar, salas 4 e 10. Ilha do
Fundão, 21.941-590, Brasil; 2Núcleo de Pesquisa em Produtos Naturais (NPPN), Universidade Federal
do Rio de Janeiro, Centro de Ciências da Saúde (CCS) – Bloco H, 1º andar, 21.941-590, Brasil.
1
Ampelozizyphus amazonicus (Rhamnaceae) is known in Brazilian Amazon
by the common names of “saracura-mirá” or "Indian beer". Its barks and
roots are widely used by the local people to prepare a drink with preventive
properties against malaria, providing a stimulant and depurative effect.
Previous investigations on this plant led to the identification of saponins. In
an ethnobotanical survey conducted by our group among the Quilombola
Communities of Oriximiná City (Pará State, Brazil) semi-structured
interviews were carried out with 60 local people. Among the cited plants,
“Saracura-mirá” stands out for its frequency of use to treat malaria, liver
diseases, gastritis, general inflammations, anemia and diabetes, as well as a
tonic for nerves. The barks of this plant were collected in January 2008 and
were first weeded to remove the suber. After that the bark was slivered and
two methods of extraction were used to obtain a 1%(w/v) final solution in
distilled water. The fist method consisted of Simple Maceration where the
slivers were mixed for 5min and the solution allowed to stand for 24h, and
then filtered. The second method follows the Traditional Recipe from
Quilombolas which consisted of shaking the slivers into the water until the
formation of abundant foam which was slighted. This process is repeated 7
times. The resultant liquids were lyophilized resulting in 11,2±0,3% and
9,6±0,2% yield, respectively. These results show that the extract obtained
according to the traditional method leads to possible reduction of saponin
content present in the foam, corroborating the information about the
traditional method of preparation. According to the Quilombolas, the aim of
this procedure is the elimination of collateral effects from the plant. The
foaming index (FI) of the barks was determined as FI=833, in order to
appraise semi-quantitatively the saponin content of this plant. The result
shows an elevated presence of this class of natural products in the bark of
this plant.
Acknowledgements: Quilombolas Communities from Oriximiná-PA, Brazil; CNPq/PIBIC.
187
P 092
188
P 093
Antiproliferative and antioxidant activities of Tilia x viridis:
contribution of monoterpenes and scopoletin
Maria Gabriela Manuele1, Sebastian Turner1, Roberto Davicino1, Graciela Ferraro1,2,
Claudia Anesini1
1 IQUIMEFA (UBA- CONICET), 2 Pharmacognosy Unit, Faculty of pharmacy and Biochemistry, UBA,
Junin 956 2nd floor, Buenos Aires, Argentina. [email protected]
75
2.5
2.0
1.5
10
50
25
0
0.01 0.1
A
1 10 100 1000 10000100000
Compounds (µg/ml)
1.0
0.5
0
0.01 0.1
P r o life r a tio n (% o f in h ib itio n r e s p e c t
to c o n tr o l)
20
100
1
10
C A T a c t iv it y ( U /m l)
p in e n e s
125
C A T a c t iv it y ( U /m l)
l im o n e n e
A d r e n a lin e o x id a tio n
(% o f in h ib itio n r e s p e c t to c o n tr o l)
A dichloromethane extract (DME) from Tilia cordata presented selective antiproliferative
action on a lymphoma (BW5147) [1]. H2O2 and O2- are related with the modulation of cell
proliferation [2]. In this study the antiproliferative action, by tritiated thymidine uptake, cell
viability, by MTT assay (on BW5147) and the catalase (CAT), superoxide dismutase
(SOD) and peroxidase (PER) activities were studied by spectrophotometry assays of
DME of Tilia x viridis and of the identified compounds (by HPLC and GC-MS). Results:
Mean ± SEM of three experiments made by triplicate: Phytochemical composition (RT
min): limonene (L): 7.37±0.5; α pinene (αP): 4.8 ±0.2; pinene ( P): 5.77±0.3;
Scopoletin (SC): 9.5±0.1. Antioxidant activity (U/ml). DME: CAT: 0.1 µg/ml:
0.450±0.01; 1 µg/ml: 5.8±0.25; 10 µg/ml: 1.77±0.015; 100 µg/ml: 9.6±0.5; SOD: 0.1
µg/ml: 9±0.5; 1 µg/ml: 30±2; 10 µg/ml: 35±2; 100 µg/ml: 40±1; 1000 µg/ml: 60±1.5. PER
(U/mlx10-4): 1 µg/ml: none act.; 10 µg/ml: none act.; 50 µg/ml: 1±0.1; 100 µg/ml:
1.17±0.1; 500 µg/ml: 1.50±0.15; 1000 µg/ml: 1.30±0.1. The compounds presented
CAT,SOD and PER activities (FigsA,B). Antiproliferative action (EC50(µg/ml): DME:
4.70±0.2; L: 35±2; αP:1100±10; P:114.8±8; SC: 251±15(FigC) Cell viability (% of
basal): DME: 5 µg/ml: 89±5; 100 µg/ml: 80±4; 1000 µg/ml: 6±0.2; L: 10 µg/ml: 98±5; 40
µg/ml: 6.6±0.4; 100 µg/ml: 1.3±0.1; αP: 10 µg/ml: 90±5; 40 µg/ml: 30±2; 100 µg/ml:
20±1; P: 10 µg/ml: 98±5; 40 µg/ml: 12±1; 100 µg/ml: 8±0.5; SC: 10 µg/ml: 99±6; 50
µg/ml: 98±4; 100 µg/ml: 99±7; 1000µg/ml: 68±5; 2000 µg/ml: 38±3. The antiproliferative
activity and the decrease in cell viability of DME could be related to the presence of
cumarins and monoterpenes and to the induction of antioxidant activity involved
principally in the elimination of O2-.
0.0
100 1000 10000
Compounds(µg/ml)
B
Limonene ; α Pinene ;
C
125
100
75
50
25
0
0.1
1
10
100 1000 10000
Compounds(µg/ml)
Pinene
References
189
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Arnold R, et al. 2001. PNAS 98, 5550-5555.
190
P 094
Secondary metabolites from Crepis vesicaria L. (Asteraceae)
Nicola Malafronte, Antonio Vassallo, Lorella Severino, Rosario Russo, Salvatore
Florio, Francesco De Simone and Nunziatina De Tommasi
Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Università di Salerno, Via Ponte Don Melillo, 84084 Fisciano
(SA), Italy; 2 Facoltà di Medicina Veterinaria, , Università degli Studi di Napoli Federico II.
1
La Crepis vesicaria L. è una pianta appartenente alla famiglia delle Asteraceae,
comune in tutto il territorio nazionale e nelle isole, dalle regioni pianeggianti fino ad
un’altitudine pari a 1200 m; è rara nella pianura padana, mentre risulta assente in
gran parte delle Alpi. La C. vesicaria ha proprietà simili a quelle della cicoria e del
tarassaco e comuni a molte erbe amare; in particolare presenta proprietà
disintossicante, depurativa, diuretica ed ipoglicemizzante [1]. La C. vesicaria cresce
rigogliosa in aree montane della regione Basilicata; gli allevatori attribuiscono a tale
pianta i numerosi decessi che si verificano nei bovini al pascolo nel periodo della
fioritura. Poiché non esistono evidenze scientifiche in grado di comprovare tale
relazione, è stato intrapreso uno studio bio-assay oriented al fine di isolare i principi
attivi e valutarne l’ eventuale tossicità in vitro mediante l’utilizzo di diversi modelli
cellulari. Lo studio fitochimico è stato effettuato sulla pianta in toto che, dopo un
preliminare sgrassamento con n-esano, è stata sottoposta ad estrazione con
solventi a polarità crescente con CHCl3, CHCL3-MeOH (9:1) e MeOH. Lo studio di
tutti gli estratti, attraverso varie tecniche cromatografiche quali Sephadex LH-20,
DCCC, cromatografia Flash e RP-HPLC, ha portato all’isolamento di numerosi
metaboliti secondari. Dall’ estratto metanolico sono stati isolati luteolin-7-O-α-Lramnopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside [2], luteolin-7-O-β-D-glucopyranoside
[3], acido 3,5 di caffeoylchinico, acido 3,4,5 tricaffeoylchinico, acido 5
caffeoylchinico, canferol-7-O-β-D-glucopyranoside. Dall’ estratto cloroformico,
ancora in corso di studio, sono stati isolati 3-oxo-8 -(4-hydroxyphenyl)acetoxy10(14),11(13)-guaiadien-12,6-olide [4], 8-desacylcynaropicrin [5], onopordopicrin [6].
L’identificazione della struttura di tutti i composti è stata effettuata mediante l’utilizzo
di tecniche NMR mono- e bidimensionali (1H, 13C, 1D-TOCSY, 1D-ROESY, DQFCOSY, HSQC, HMBC) e ESI-MS. Sono in corso test di attività antiproliferativa
miranti ad individuare eventuali correlazioni struttura-attività su linee cellulari murine
e umane in coltura continua.
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Trendafilova, et al., (2007), Biochemical Systematics and Ecology, 35, 544-548.
192
P 095
Taurine prevents from diabetes-induced teratogenesis on mice
Martínez-Galero E1, Lagunes-Ruiz V.E1, Silvar-Tinajero I1, Arroyo-Razo G.A2,
Chamorro-Cevallos G1
1 Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, IPN. Prol. de Carpio y Plan de Ayala s/n, CP 11340, México,
D.F., México. 2 FES-Cuautitlan, UNAM, Av. 1o de mayo s/n, CP 54740, Cuautitlán-Izcalli, Edo. De
México, México.
Women with type 1 diabetes have at an increased risk of products with major
congenital malformations, which have been associated with hyperglycemia, primary
clinical manifestation of diabetes. Several hypotheses have been proposed to
explain the mechanism whereby hyperglycemia induces dysmorphogenesis,
including the increase of glycation. On the other hand, it has been shown that
taurine (T), a sulfur-contained amino acid, improves glucose utilization and
diminishes glycation and the production of advanced glycation end products. Thus,
the purpose of this work was to explore the possibility of T preventing the
teratogenic effect of diabetes on mice.
Female ICR mice were mated and assigned to one of six groups: Control, 0.25% T,
0.5% T, 1% T, 2% T, Diabetes (STZ), STZ + 0.25% T, STZ + 0.5% T, STZ + 1% T,
and STZ + 2% T. Diabetes was induced by an ip injection of 200 mg/kg bw
streptozotocin on gestation day 7. Taurine was supplied ad libitum dissolved in the
drinking water. Blood glucose and HbA1C levels were determined at gestation day
19 before animals were sacrificed to perform the teratogenic evaluation.
Taurine treatment prevented from diabetes-induced exencephaly, hydronephrosis,
lack of general ossification, fused ribs, as well as from hemoglobin glycation and
placental and fetal parameters affectation.
Data suggest that taurine, via its anti-glycation properties, protects from diabetic
teratogenicity.
193
P 096
Composicion quimica y actividad antibacteriana del aceite
esencial de Cordia verbenacea D.C. (Boraginaceae)
Gina Meccia1, Luis B. Rojas1, Judith Velasco2, Tulia Diaz3, Mariana Contreras1,
Sulymar Ramos1, Juan Carmona4
Instituto de Investigacione; 2Departamento de Microbiología y Parasitología; 3Departamento de
Bioanálisis Clínico; 4Herbario. Facultad de Farmacia y Bioanálisis, Universidad de Los Andes, Mérida,
Venezuela.
1
Cordia verbenaceae es un arbusto ampliamente distribuido en México, América
Central, Venezuela, Brasil e islas del Caribe. Es conocido popularmente como
salicina y cariaquito negro1. La decocción de sus hojas se utiliza en la medicina
tradicional para tratar resfriados, fiebre, neumonía, dolores de cabeza, como
expectorante y en ciertas enfermedades gastrointestinales y dermatológicas2. En el
presente trabajo se analizó la composición química del aceite esencial de C.
verbenaceae de los Andes venezolanos y se determinó su actividad antibacteriana.
La planta fue recolectada vía los Pueblos del Sur (Estado Mérida) a 2800 m de
altura. 700 g de hojas frescas fueron sometidas a hidrodestilación durante 3 horas,
obteniéndose 1,5 ml (0,21% de rendimiento). El aceite fue analizado por
Cromatografía de Gases - Espectrometría de Masas y los Indices de Kováts se
determinaron por Cromatografía de Gases. Se identificaron 34 componentes
(94,2%), siendo los mayoritarios: -terpineno (23,9%), biciclogermacreno (11,7%),
germacreno-D (9,9%) y β-cariofileno (8,2%). Ensayos de la actividad antibacteriana
por el método de difusión en agar con discos mostraron actividad contra
Staphylococcus aureus ATCC 6538 y Enterococcus faecalis ATCC 29212, a una
concentración inhibitoria mínima (CIM) de 170 g/ml y 200 g/ml, respectivamente.
Referencias
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Morton, J.F., 1981. Atlas of Medicinal Plants of Middle America. Vol 1. Charles C. Thomas:
Springfield, IL.
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De Carvalho Jr., P.M., Rodríguez, R.F.O., Sawaya, A.C.H.F., Marques, M.O.M., Shimizu, M.T.,
2004. J. of Ethnopharm., 95: 297-301.
194
P 097
Comparative phytochemical analysis and antioxidant properties
of two Italian rocket salads
Melchini A1, Miceli N1, Taviano MF1, Traka M2, Saha S2, Mithen R2, Trovato A1, De
Pasquale R1, Costa C3
Pharmaco-Biological Department, School of Pharmacy, University of Messina, Vill. SS. Annunziata
Messina, 98168, Italy; 2Institute of Food Research, Norwich Research Park, Norwich NR4 7UA, UK;
3Interdepartmental Centre of Experimental, Environmental and Occupational Toxicology, School of
Medicine, University of Messina, Via C. Valeria Messina, 98122, Italy.
1
Cruciferous vegetables are widely studied for their health benefits due partly to the
high content of antioxidants, like vitamin E and C, carotenoids, polyphenols, as well
as characteristic phytochemicals, known as glucosinolates (GLSs), previously
demonstrated to have direct antioxidant effects [1]. In the present study, the GLS
and polyphenol content of hydroalcoholic extracts of the leaves of Eruca sativa Mill.
(salad rocket) and Diplotaxis sp. (wild rocket), grown in Italy, were evaluated. LCMS analysis led to the identification of four aliphatic compounds (glucoraphanin,
sinigrin, 4-mercaptobutyl-GLS, glucoerucin), one indole GLS (4hydroxylglucobrassicin), and a structurally unique GLS containing a intermolecular
disulfide linkage (4-(b-D-glucopyranosyldisulfanyl)butyl-GLS) present in both
species, although the GLS content was higher in Eruca sativa Mill. compared to
Diplotaxis sp. (60% and 20%, respectively). The total phenol content, evaluated by
the Folin-Ciocalteau method [2], was higher in Eruca sativa than in Diplotaxis sp.
extract (42.3±0.35 mgGAE/g extract and 31.0±0.84 mgGAE/g extract, respectively).
The antioxidant properties of Eruca sativa and Diplotaxis sp. extracts were
examined in two in vitro systems; butylhydroxytoluene (BHT) was used as standard.
Free radical scavenging activity (DPPH test) [3] was higher in Eruca sativa than in
Diplotaxis sp. extract (IC50=1.04±0.04 mg/mL and 1.75±0.04 mg/mL, respectively).
In the reducing power assay [4], Eruca sativa extract was more active than
Diplotaxis sp. (20.27 ASE/mL and 28.80 ASE/mL, respectively). These results
suggest that the greater antioxidant activity of Eruca sativa leaf extract is related to
the higher GLS and polyphenol content.
References
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195
P 098
Production and characterization of extracts of Melissa officinalis
with antioxidant and antimicrobial activity
Teresa Mencherini, Patrizia Picerno, Antonia Cau, Nunziatina De Tommasi, Rita
Aquino
Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, University of Salerno, Via Ponte Don Melillo, 84084, Fisciano,
Salerno, Italy.
Melissa officinalis L. (Labiatae) is a perennial edible herb native to the
Mediterranean region. The essential oil is recommended for its antimicrobial activity,
and aqueous extracts exhibit antiviral and antioxidative properties. These biological
activities have been attributed to the essential oil, flavonoids and phenolic acids.
Studies on the essential oil have been extensive, but information on the non-volatile
components is scarce. Thus, we now describe the isolation and characterization of
six new triterpenes (1-6) and four known compounds isolated from an
hydroalcoholic extract of the dried aerial parts of Melissa officinalis L. The structures
of new compounds were established by spectroscopic data analysis. Compound 1 is
an ursane-type saikosaponin characterized by the occurence of six rings, one of
which is an epoxide bridge. Compounds 2-6 are disulfated ursolic (2-4) or oleanolic
acid (5-6) derivatives [1]. The known compounds have been identified as
quadranoside III, salvianic acid A, rosmarinic acid, and luteolin. The major
component of both EtOH:H2O 1:1 extract and its n-BuOH soluble portion was
rosmarinic acid (5.6% and 10.0% w/w of the dry extracts, respectively, determined
by an HPLC analytical method). Both the extracts and rosmarinic showed a good
free radical scavenging activity evaluated by DPPH test, (EC50 = 18.5, 15.2 and 3.1
μg/mL, respectively, in comparison to α-tocopherol, EC50 = 10.1 μg/mL). In
addition, rosmarinic acid and both the extracts were tested for antibacterial and
antifungal activities by a broth microdilution method against several Gram positive,
Gram negative bacteria, a yeast and a mould using gentamicin and nystatin as
controls. Antimicrobial activities were expressed as MIC (minimum inhibitory
concentration) and as MBC (minimal bactericide concentration). Major bacteriostatic
effect was exerted against S. aureus and S. epidermidis, by rosmarinic acid (MIC
0.12 mg/mL) and against B. spizizenii by both the extracts (MIC 0.5 mg/mL).
Reference
1.
Mencherini, T.; Picerno, P.; Scesa, C.; Aquino, R., 2007, J. Nat. Prod. 79 (12), 1889-1894.
196
P 099
Flavonoids from aerial parts in Mutisia Ledifolia Wedd., tribu
Mutisieae (Asteraceae)
María Elena Mendiondo and Berta Estela Juárez.
Fac. Ciencias Naturales e Instituto Miguel Lillo. CONICET. Miguel Lillo 205/251. Fundación Miguel Lillo.
San Miguel de Tucumán. Tucumán. Argentina. E-mail: [email protected]
The aim of this work is to analyze the presence of flavonoids in Mutisia ledifolia
leaves to contribute to their chemical knowledge. Its distribution in Argentina is in
Jujuy, Salta and Tucumán, between the 3000-4200 m. Mutisia ledifolia, well-known
vulgarly as "chinchircoma blanca", is a shrub of 0.5-2 m of height, with intricated
branchs, alternating coriaceous leaves and dimorphic flowers.
The techniques of preparation of samples, for the extraction, chromatographic
separation and purification, hydrolysis and identification of flavonoids are based on
the existing bibliography (Mabry et al., 1970, Markham, 1982 and Harborne, 1998).
According to the obtained chromatographical profiles and the spectral
ultraviolet/visible data, it is inferred that in addition to the aglycon rhamnazin
(quercetin-3,7-dimethylether), the majority isolated compounds are mono and
diglycosides derivative from quercetin and isorhamnetin such as quercetin-3,7diglucoside and isorhamnetin 3-glucoside and others which have been not yet
identified.
These results demonstrate that in the subtribe Mutisieae genera Mutisia exists a
predominance of glycosilated flavonoids, in opposition to the established by
(Emerenciano et al., 1987), who considers a chemosys-tematic glycosilation
paramether of zero.
References
Harborne, J. B. (1998). Phytochemical methods. A guide to modern techniques of plant analysis. Third
Edition. Chapman & Hall. London. New York.
Mabry, T. J., Markham, K. R. & Thomas, M. B. (1970). The Systematic Identification of Flavonoids.
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Emerenciano, V. de P., Ferreira, Z.S., Auxiliadora, M., Kaplan, C., Gottlieb, O.R. (1987). Phytochemistry
26 (12) : 3103.
197
P 100
Análisis de los aceites esenciales de las hojas y flores de la
Chromolaena meridensis (B. L. Rob.) R. M. King & H. Rob., que
crece en Mérida Venezuela
Meza C, Saavedra A, Rojas L, Usubillaga A y Carmona J. Luis.
Venezuela. Urb. Campo de Oro. E-mail: [email protected]
La Chromolaena meridensis (B.L. Rob.) R.M. King & H. Rob., (Asteraceae), es una
planta fructicosa erecta de tallo redondeado cortamente pubescente, tiene hojas
opuestas brevemente perciolada, lanceolada, atenuada, acuminada en ambos
extremos de 4-8 cm de largo y 1-2 cm de ancho. En el presente trabajo se estudia
los componentes volátiles obtenidos de las hojas y flores de la C. meridensis. Esta
fue recolectada en el sector la antena Mérida, Estado Mérida. El trabajo consistió
en aislar los componentes volátiles por arrastre con vapor de agua utilizando una
trampa de Clevenger, estos se identificaron por GC-MS, empleando un equipo
Hewlett Packard 5973 GC/MS a 70 eV, equipado con un inyector automático,
utilizando una columna capilar HP-5MS (30 m, 0,25 mm, 0,25 µm). Se empleó una
temperatura inicial de 60 ºC (1 min) y luego se calentó a razón de 4 °C/min hasta
260 ºC (20 min). Se inyectó una muestra de 1,0 mL de una solución al 2% del
aceite esencial en n-heptane con reparto de 100:1. Se utilizó una temperatura de
inyección de 200 ºC. La identificación de los componentes de los aceites se realizó
mediante comparación computarizada de los espectros obtenidos con los espectros
de una Librería Wiley (6ta Edición). Se determinaron los índices de Kováts
analizando conjuntamente las muestras con una mezcla de n-alcanos. Se extrajo el
aceite esencial de las hojas y de las flores de la C. meridensis, el aceite esencial de
las hojas presentó un rendimiento de 0,02 % y el aceite esencial de las flores tuvo
un rendimiento de 0,01%. Del análisis del aceite por CG-EM se lograron identificar
13 componentes de las hojas y 44 componentes de las flores. De esto se logró
deteminar que los compuestos mayoritarios resultaron ser: beta-cariofileno (13,49
%), beta-germacreno (55.62%) y alfa-humuleno (7.51%) para las hojas y betacaryophyllene (21.50%), ganma-curcumene (46.87%), alfa-humulene (3.20%) para
las flores. Ambos aceites son ricos en componentes sesquiterpénicos.
Referencias
1.
198
P 101
Intestinal motility effects and chemical profile of Operculina
macrocarpa (L.) Urb. roots (Convolvulaceae)
Michelin, D.C.1,2, Rinaldo, D.3, Sannomiya, M.3 ,Vilegas, W.3,Salgado, H.R.N.
1 Programa de Pós-Graduação em Fármacos e Medicamentos, Faculdade de Ciências Farmacêuticas,
Universidade Estadual Paulista Rodovia Araraquara-Jaú, km 1, CEP.14801-902, Araraquara – SP –
Brasil. e-mail: [email protected] ; 2 Curso de Farmácia, Centro Universitário Herminio
Ometto – UNIARARAS - Av. Dr. Maximiliano Baruto, 500 - Jd. Universitário | CEP: 13607-339, Araras SP – Brasil; 3 Departamento de Química Orgânica, Instituto de Química, Universidade Estadual Paulista
Rua Francisco Degni s/n, CEP.14801-902, Araraquara – SP – Brasil.
Operculina macrocarpa (L.) (Urb.), Convolvulaceae, popularly known as 'batata-depurga', is used by the population as a laxative. The aim of this work was to evaluate
the laxative activity of the root of this plant, by intestinal motility test and
phytochemical characterization by HPLC (High Performance Liquid
Chromatography of this specie. The laxative activity was evaluated by different
experimental models for the hydromethanolic extract, tea and caffeic, chlorogenic
and ferulic acid. The results showed that hydroethanolic extract, tea and phenolic
acids had significant activity in experimental model tested. Chemical profile of
ethanolic extract and tea was carried out by HPLC and this technique could identify
caffeic, chlorogenic and caffeic acid dimer. The results obtained in the chemicalpharmacological study of Operculina macrocarpa are fundamental for the future
development of a pharmaceutical product with standarts of safety and efficacy of
use for the population.
Acknowledgements: This work was supported by PADC-FCF-UNESP, CAPES-Brazil and CNPq-Brazil.
References
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Michelin DC. et. al. 2004, Revista Brasileira de Farmacognosia, 14:105.
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Oleszek W. et.al. 2006, Journal of Chromatography A, 1112:78.
199
P 102
Estudio comparativo de los aceites esenciales de Mangifera
indica recolectadas a diferentes altitudes del estado MéridaVenezuela
Molina A, Rojas L, Usubillaga A
Instituto de Investigaciones de la Facultad de Farmacia y Bioanálisis. Universalidad de los Andes.
Urb. Campo de oro Mérida Venezuela C.P. 5101 email: [email protected]
Mangifera indica perteneciente a la familia Anacardiácea, conocida comúnmente
como mango, es un árbol siempre verde de tamaño mediano a grande que
típicamente crece a una altura de 25 metros con una copa redondeada y muy
densa, con hojas verde oscuro y un tronco robusto con corteza gruesa y áspera. El
mango, nativo del Asia tropical, ha sido plantado a través de todo el trópico, de
semiárido a húmedo, y el subtrópico. Las hojas, las flores secas, las frutas verdes,
las semillas, la corteza y la gomorresina se usan medicinalmente para el
tratamiento de una gran variedad de enfermedades, en el tratamiento de heridas de
la piel, enfermedades digestivas y del aparato respiratorio. Se reporta que los
extractos foliares exhiben una actividad antibacteriana y antifungica de amplio
espectro. En el presente estudio se muestra la comparación de los componentes
volátiles de dos individuos de M. indica. El primero fue recolectado en Mérida a
1650 m.s.n.m, y el segundo en el Vigía a 133 m.s.n.m. Para la separación de los
componentes se aplicó la hidrodestilación empleando la trampa de clevenger por 2
horas, obteniendo 0,1 y 0,06 % de rendimiento respectivamente. La identificación
de los componentes se realizó utilizando un sistema GC/MS hewlett packard MSD
5973 con una columna de fenil-metil-polisiloxano de 30m por 0,25mm (HP-5).
Además de utilizar una librería Wiley MS Data (Sexta edición, 275K Spectra). Los
componentes identificados para la especie de Mérida fueron:
Cariofileno(25,15%), -Gurjuneno(34,09%), -Humuleno(15,96%), Ledeno(10,30%)
y en la muestra de el vigía: -Gurjuneno(25,47%), -Humuleno(20,46%), Cariofileno(33,40%), Bicliclobermacreno(8.97%). Los aceites obtenidos de las dos
especies presentan diferencia en cuanto a la presencia de ledeno y
biciclobermacreno y a su rendimiento, esta discrepancia puede ser debida a la
diferencia de altitud y condiciones topográficas del terreno.
Agradecimiento: Dirección de asuntos estudiantiles (DAES) Universidad de los Andes.
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2.
Aristiguieta Leandro (1973), Familias y Géneros de los Árboles de Venezuela: Caracas;
Venezuela.
200
P 103
Aislamiento y caracterización estructural de biflavonas del
Retrophyllum rospigliosii
Roger Montealegre, Ángel Amesty, Alí Bahsas y Juan Manuel Amaro-Luis
Una de las familias más representativa en el grupo de las Gymnospermas son las
Podocarpaceas (Clase: Coniferas1), a la cual pertenece la especie Retrophyllum
rospigliosii De Laubenfels (sin. Podocarpus rospigliosii Pilger). Esta planta se
distribuye a lo largo de la región Andina de Venezuela, específicamente en los
páramos de los Estados Mérida y Táchira. Muchas especies pertenecientes al género
Podocarpus “sensu lato” biosintetizan biflavonoides, cuya importancia
quimiotaxonómica y biológica, se encuentra bien documentada en la literatura2,3. En
conexión con lo anterior, se abordó el estudio de esta especie con la finalidad de
aislar y caracterizar sustancias potencialmente activas desde el punto de vista
biológico y/o farmacológico. Las hojas (secas y molidas) del R. rospigliosii fueron
sometidas a una extracción en EtOAc. En este extracto se detectaron cinco
biflavonoides, los cuales fueron aislados y purificados mediante diversos métodos
cromatográficos4 y repetidos procesos de cristalización. La caracterización estructural
de los mismos se realizó mediante el análisis detallado de sus espectros de IR, EM,
RMN-1H, RMN-13C y 2D-RMN (1H,1H-COSY, HMQC y HMBC), con lo cual se pudo
concluir que las estructuras correspondían a las biflavonas: Amentoflavona (1),
Podocarpusflavona (2), Sciadopitysina (3), 7,7’’-di-O-Amentoflavona (4) y 7, 4’, 7’’, 4’’’tetra-O-Amentoflavona (5). Es de hacer notar que los compuestos antes nombrados
se reportan por primera vez para esta especie. A la luz de los resultados obtenidos, se
discuten algunos aspectos sobre la quimiotaxonomía del género Retrophyllum y sobre
la importancia farmacológica de los biflavonoides aislados.
R1O
O
OH O
OR2
R3O
O
OR4
1
2
3
4
5
R1 = R2 = R3 = R4 = H
R1 = R2 = R3 = H; R4 = CH3
R1 = R3 = CH3; R2 = R4 = H
R1 = R2 = R4 = CH3; R3 = H
R1 = R2 = R3 = R4 = CH3
OH O
Agradecimiento: Este trabajo ha sido financiado por el CDCHT-ULA y por el FONACIT (Subvención S1-97001521).
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P 104
Chemical composition and mosquito larvicidal activity of the
Eugenia triquetra (O. Berg) essential oil from Venezuelan Andes
Flor D. Mora1, Jorge L. Avila2, Luis B. Rojas3, Alfredo Usubillaga3 Samuel Segnini4
Juan Carmona A1 and Bladimiro Silva1
1Departamento de Farmacognosia y Medicamentos Orgánicos, Facultad de Farmaci, 2Grupo de
Química Ecológica, Facultad de Ciencias, 3Instituto de Investigaciones, Facultad de Farmacia
4Laboratorio de Ecología de Insectos, Facultad de Ciencias. Universidad de Los Andes, Mérida, 5101,
Venezuela.
Eugenia is one of the largest genera of Myrtaceae family and several of its species
have been reported to have ethnomedicinal properties [1]. The essential oil of
several Eugenia species has been reported to have α-copaene, β-caryophyllene,
α-humulene, δ-cadinene, trans-nerolidol, and torreyol as common components [24]. The present work reports the composition and mosquito larvicidal activity of
Eugenia triquetra´s oil collected in Venezuela. The essential oil of fresh leaves of
Eugenia triquetra was obtained by hydrodistillation using a Clevenger-type
apparatus [5]. The plant was collected in February 2008 at Pueblo Hondo, Táchira
State, Venezuela, yielding 0.09 % of the oil. Chemical constituents were identified
by GC-MS analysis [6]. Twenty six components (which made up 88.5 % of the
sample) were identified. The major constituents were linalol (17.5 %), limonene
(16.9 %), -pinene (11.6 %), -pinene (8.7%), and p-cymene (3.7 %). The essential
oil was tested against third-instar larvae of Aedes aegypti [7], showing a LC50
value of 64.85 ± 5.56 ppm.
Acknowledgements: The authors would like to thank CDCHT–Mérida–Venezuela (Consejo de Desarrollo
Científico, Humanístico y Tecnológico), and FONACIT (Fondo Nacional de Ciencia y Tecnología),
Ministerio de Ciencia y Tecnología, Caracas, Venezuela (project Nº F-2000001633).
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203
P 105
Análisis de los componentes volátiles de la Pimenta racemosa
var. racemosa que crece en Mérida-Venezuela
Huelvas. P, Mora. F, Rojas. L, Usubillaga. A
Instituto de Investigaciones de la Facultad de Farmacia y Bioanalisis, Universidad de Los Andes, Urb.
Campo de oro Mérida–Venezuela. Email: [email protected]
El género Pimenta está compuesto por 18 especies, pertenecientes a la familia
Myrtacea. Una de estas especies es la P. racemosa var. racemosa, la cual tiene un
origen tropical. De esta se extrae un aceite que comúnmente se conoce como Bay
rum o Malagueta (1-2). Este es utilizado en algunos países tropicales para el
tratamiento de diferentes enfermedades tales como: reumatismo, dolor de muela,
dolor abdominal y enuresis (3). En el siguiente estudio se muestra la separación de
los componentes volátiles de las hojas frescas de P. racemosa var. racemosa
empleando la técnica de destilación por arrastre de vapor de agua y utilizando la
trampa de Clevenger. El análisis del aceite se realizó por cromatografía de gases
empleando un equipo de Marca Pekín Elmer modelo Austosystem equipado con
una columna AT-5 de 60m de largo y 0,25 mm de diámetro, y otro equipo GC/MS
Hewlett Packard MSD 5973 con una columna de fenil-metil-polisiloxano de 30 m x
0,25 mm (HP-5). La identificación de los componentes se realizo con ayuda de una
librería Wiley Ms Data (sexta edición, 275 K Spectra). El rendimiento obtenido fue
del 0,2 %. Los componentes mayoritarios identificados fueron: limoneno (9,88%),
eucaliptol (10,93%) y eugenol (53,23%), esta composición difiere de las especies
reportadas en estudios previos.
Referencias
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204
P 106
Natural products from Zanthoxylum (Rutaceae) plants from the
Costa Rican Flora
Mora, S1; Lerch, F2 ; Castro, V.H.1; Poveda, L3; Gómez, J1 ; and Murillo, R.1*.
Research Center of Natural Products, University of Costa Rica, 2060 San Pedro de Montes de Oca,
Costa Rica. 2 Institute for Pharmaceutical Biology, University of Freiburg, Stefan-Meier Strasse 19,
Freiburg 79104, Germany. 3 Universidad Nacional. Escuela de Ciencias Ambientales. Heredia, Costa
Rica; * Author to whom correspondence should be addressed
1
As continuation of our study of the Costa Rican flora with antibacterial1, antifungal2,
antiviral3 and anti-inflamatory4 activity, we studied two Zanthoxylum species. From
Z. melanostinctum were isolated the compounds 1 to 6 and from Z. setulosum the
lignans 7 – 9, didemethoxy dioxomethylen pinoresinol, 5,6,8-trimethoxy cinamic acid
and β-sitosterol. The aerial parts of both plants were extracted with t-butyl methyl
ether: methanol 8:2; the compounds isolated by chromatographic methods (Column
Chromatography, Middle Pressure Chromatography, TLC and HPLC) and the
structures were elucidated with 1 and 2D Nuclear Magnetic Resonance Methods
(1H-NMR, 13C-NMR, H,H-COSY, gHSQC, gHMBC and NOESY) and Mass
Spectrometry. All compounds are known but 4 - 6 were isolated at the first time in
this genus. We reported the NMR spectroscopical data of compounds 4 to 6.
R1
MeO
OMe
R2
RO
O
O
N
O
1 R = Me
4 R1 = H
R2 = H
2 R=
5 R1 = OMe
R2 = H
6 R1 = OMe R2 = OMe
3 R=
O
MeO
O
MeO
O
HO
O
O
O
HO
MeO
O
O
MeO
O
OH
7
O
OH
8
9
Referencias
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4.
P 106
Chen, J. et al. (2007). J. Nat. Prod, 70, 1444-1448.
206
P 107
Tecniche formulative di un fango termale solfato,
bicarbonato alcalino-terroso con estratti vegetali e oli
volatili
Silvana Morelli1, Massimo De Fina2, Luca Rastrelli1 e Francesco De Simone1
Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Università di Salerno, Via Ponte Don Melillo, 84084, Fisciano,
Salerno, Italy. 2Federfarma Vibo Valentia
1
I fanghi termali rappresentano un tipo di preparazione molto attuale nelle pratiche
estetiche. Sono ottenuti da materiale terroso a grana finissima, che a contatto per
un lungo periodo con le acque termali si impregna dei principi attivi in essa contenuti
(zolfo, oligoelementi, vitamine). A questa importante sinergia di composti naturali, si
aggiungono, a seconda dei trattamenti e delle caratteristiche cutanee (acido
salicilico, vitamina B5, fitoestratti, oli essenziali, derivati marini). Si creano quindi
maschere di fango altamente attive e funzionali, poiché arricchiti di composti
indispensabili alle cure. I fanghi termali sono da secoli rimedi riconosciuti come
rimedi indispensabili nel trattamento di ogni inestetismo del viso e del corpo. Grazie
alla componente argillosa promuovono infatti l'assorbimento delle sostanze
precedentemente applicate. Grazie alla componente termale apportano
oligoelmenti, sali minerali, vitamine indispensabili per i processi biologici cutanei.
Svolgono inoltre un'azione protettiva e rigenerante, riducono i problemi articolari,
migliorano l'irrorazione sanguigna dei tessuti e stimolano il sistema immunitario. In
questo lavoro si riporta uno studio formulativo di incorporazione nei fanghi termali di
fitoestratti e oli essenziali di piante con accertata attività terapeutica ha
rappresentato il punto di inizio del nostro lavoro. L'ipotesi da noi avanzata, e che
dovrà essere valutata con futuri studi di biodisponibilità e di distribuzione
transdermica, é quella che l'incorporazione nel fango termale solfato, bicarbonato
alcalino-terroso prelevato presso l’Azienda termale Terme Capasso, sita in Contursi
terme, di estratti glicolici (altea e bardana) e olii essenziali (menta, Cynnamomum
zeilanicum) ne migliora la disponibilità e l'assorbimento cutaneo per una maggiore
permanenza di questi ultimi a livello della pelle. I dati ottenuti comprovano un sicuro
incremento delle caratteristiche psicoreologiche, ottiche e olfattive, valutate con
parametri chimico-fisici strumentali. Ulteriori studi si rendono necessari oltre per
valutare la biodisponibilità e la distribuzione transdermica di tali formulati, dati
fondamentali per un loro corretto impiego in terapia, anche per approntare nuovi
prodotti, costituiti da matrice argillosa e miscele di oli essenziali e di fitoestratti con
attività biologiche diverse.
Bibliografia
207
1.
2.
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Commercio Industria Artigianato e Agricoltura della Campania. Collana di Studi e Ricerche
dell’Unione Campania. 2000.
208
P 108
Componentes volatiles de las hojas del Thymus vulgaris L.
Morillo M1, Visbal T2, Rojas L3, Cordero Y3 y Usubillaga A3
Programa Doctoral en Ciencias Médicas Fundamentales. Facultad de Medicina. Universidad de Los
Andes. Mérida. Venezuela. 2.Programa Doctoral en Química de Medicamentos. 3.Instituto de
Investigaciones, Facultad de Farmacia y Bioanálisis, Universidad de Los Andes, Mérida, Venezuela.
1
El Thymus vulgaris L, es una planta nativa de la región Mediterránea, familia
Lamiaceae1, entre sus propiedades farmacológicas, en particular del aceite esencial
se encuentra actividad antimicrobiana (contra bacterias y hongos)1,2, esta actividad
ha sido atribuida al thymol y carvacol3. En el presente trabajo se muestra el estudio
de sus componentes volátiles, recolectada en la población de San Vicente de La
Revancha, estado Táchira, a 3329 msnm. Se utilizaron 500g de hojas que fueron
homogenizadas y sometidas a extracción por arrastre con vapor de agua
empleando la trampa de Clevenger. La identificación de los componentes fue
realizada por GC-MS, utilizando un equipo Hewlett Packard 5973 GC/MS a 705 MS
(30 m, 0.25 mm, 0.25 µm), con temperatura inicial de 60°C (1 min) y se calentó a
razón de 4°C/min hasta 260°C (20 min). Se inyecto una muestra de 1.0 µL de una
solución al 2% del aceite esencial en n-heptano con reparto de 100:1, con una
temperatura de inyección de 200°C. Los espectros obtenidos fueron comparados
con la librería Wiley (6ta Edición). Se hallaron los índices de kováts, analizando
conjuntamente la muestra con una mezcla de n-alcanos. El rendimiento resulto ser
de 0.45% sobre hojas frescas. Se detectaron como componentes mayoritarios:
thymol 42.21%; para-cimeno 25.03%; gamma-terpineno 7.36%; carvacrol 4.30%
Referencias
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Lucchesi. M. et. al (2004). Journal of chromatography A. 1043, 323-327
198
P 109
Anti-adhesion activitiy in liophilised extract of Bridelia grandis
(Pierre ex Hutch)
Enrica Capelli1,2, Luigia Favalli1,3, Enrica Lanza1,3, Tatiana Ngueyem4, Erjona
Murati3
Centro di Ricerca Interdipartimentale di Etnobiofarmacia, 2Dipartimento di Genetica e Microbiologia,
Dipartimento di Farmacologia Sperimentale ed Applicata, 4Dipartimento di Chimica FarmaceuticaUniversità di Pavia (Italia) ([email protected])
1
3
Bridelia grandis is a tree of the closed high-forest from Sierra Leone to S Nigeria,
and on into Gabon and Zaïre (1). The pigmies Baka of Cameroon use decoction of
the bark of this plant as a mouth-wash to treat oral thrush. In Ivory Coast the bark is
used either in decoctions or powdered in water as a powerful purgative, diuretic,
aphrodisiac, febrifuge, and to treat urethral discharges, oedemas, dysenteric
diarrhoea and as an anodyne for fever and rheumatic pains. Its activity is due to the
presence of tannins and saponosides. The bark in fumigations has superstitious use
in Gabon to drive away evil influences. The bark is sometimes added to palm-wine
as a women’s medicine in Liberia, perhaps to promote lactation, and an infusion of
bark and leaves is given to newly-delivered women ‘to cleanse’ their milk. In Ivory
Coast the leaves mixed with those of Dichapetalum pallidum (Dichapetalaceae) and
Cola chlamydantha (Sterculiaceae) are used in vapour-baths and in enemas to
relieve rheumatism (2).
In our study we investigated the effect of Bridelia grandis from Cameroon on human
cells to evaluate the toxicity and to search for unknown biological activities. The
water extract of the bark was tested against cells of tumorigenic lines and cells just
obtained from skin and blood of healthy subjects. Mitotic and apoptotic indexes,
adhesion, total cell recovery, were considered before and after treatments using
different concentration and conditions (time 6-24-48 hours; dose: 1-500 µg/ml;
before and after cell adhesion). MTT test was performed for a further evaluation of
survival. It has been observed that doses higher than 1 x 103 µg/ml induce serious
alterations of cultured human cells. Focusing our attention on subtoxic and non toxic
concentrations we observed activities that interfere with cell adhesion.
References
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Recherche Scientifique de Côte d’Ivoire, Abidjan.
199
P 110
Estudio de los componentes volátiles de las hojas de Ambrosia
cumanensis H.B.K. que crece en el Estado Mérida. Venezuela
Ambrosia cumanensis H.B.K. (Altamisa, artemisa) pertenece a la familia de las
Asteraceae. La especie es utilizada contra la fiebre, como antiespasmódico,
diurética, antirreumática, antihelmíntica y antiséptica. En el presente trabajo se
estudia los componentes volátiles de las hojas frescas de esta planta. Estas fueron
sometidas a extracción por arrastre con vapor de agua utilizando una trampa de
Clevenger. Los componentes del aceite fueron separados e identificados por GCMS, empleando un equipo Hewlett Packard 5973 GC/MS a 70 eV, equipado con un
inyector automático, utilizando una columna capilar HP-5MS (30 m, 0.25 mm, 0.25
de 4 °C/min hasta 260 ºC (20 min). Se inyectó una muestra de 1.0 mL de una
con los espectros de una Librería Wiley (6ta Edición) y calculo de los índices de
Kováts. Se identificaron 14 componentes, los mayoritarios resultaron ser: canfor
(10.6 %), gamma-curcumeno (21.2 %), biciclogermacreno (21.7%), beta-selineno
(31.9%).
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200
P 111
Incorporation assays of natural anthraquinones in cancerous
cells
Fernandez I1, Comini L2, Núñez Montoya S2, Rumie Vittar B1, Cabrera J2 and
Rivarola V1
1Dpto. Biol. Molec., Fac. Cs. Exs. Fco-Qca y Nat., UNRC. (5800) Río IV, Córdoba, Argentina. 2Dpto.
Farmacia, Fac. Cs. Qcas., UNC, IMBIV-CONICET. Ciudad Universitaria (5000) Córdoba, Argentina.
e-mail: [email protected]
We have demonstrated previously that four anthraquinones (AQs): rubiadin,
soranjidiol, rubiadin 1-methyl ether and soranjidiol 1-methyl ether, isolated from
stems and leaves of Heterophyllaea pustulata, exhibit photosensitizing properties by
generation of superoxide anion radical and/or singlet molecular oxygen under
irradiation conditions. In addition, we have established that these compounds show
photodynamic activity against the human breast carcinoma cell line (MCF-7c3).
Since photodynamic therapy is based on the combined action of a photosensitizer,
molecular oxygen and light localized inside tumor cell, we studied the ability of these
compounds to enter into cancerous cells, by using the cell line before mentioned.
For that, AQs were dissolved in phosphate-buffered saline (PBS). The monolayer
culture (105-106 cell/mL) was incubated with each AQ during 15 minutes at 37 °C.
Then, the culture medium (extracellular fraction) was removed and the intracellular
fraction was obtained by treating the cells with PBS/SDS (sodium dodecyl sulfate)
2% at -20 °C during 15 min. The control samples were processed without AQ and
under the same working conditions.
AQs were isolated from both intra and extracellular fractions by using CHCl3 in order
to determinate the quali-quantitative composition of these fractions by HPLC.
Whereas, identification was carried out by using standards compounds,
quantification was achieved using the external calibration method [1].
In spite of the results showed that AQ were in the culture medium
(extracellular fraction), these compounds were also accumulated inside
cells. We determined that the four AQs entered into the cells between 10-20
%. Hence, we could get the conclusion that these percentages of AQs are
sufficient to produce a significant photodynamic activity in vitro.
Acknowledgements: This work was supported by FONCYT, CONICET, SeCyT-UNC and SeCyT- UNRC.
References
1.
Adamson, G. et al.(1999), J. Agric. Food Chem., 47, 4184-4188.
201
P 112
Natural anthraquinones: acute toxicity evaluation in vivo
Comini L1, Fernandez I2, Milla L2, Nuñez Montoya S1, Cabrera J1 and Rivarola V2
Dpto. Farmacia, Fac. Cs. Qcas., UNC, IMBIV-CONICET. Ciudad Universitaria (5000) Córdoba,
Argentina. 2Dpto. Biol. Molec., Fac. Cs. Exs. Fco-Qca y Nat., UNRC. (5800) Río IV, Córdoba, Argentina.
e-mail: [email protected]
1
Rubiadin (1) and soranjidiol (2), are two anthraquinones (AQs) isolated from the
phototoxic shrub Heterophyllaea pustulata, popularly known in Argentina as
“cegadera”, because it produces blindness and dermatitis on animals that ingest the
aerial parts of this plant and are exposed simultaneously to sun light. In addition, we
demonstrated that these AQs are photosensitizers, with the ability to produce both
singlet oxygen and superoxide anion under radiation condition.
Considering that an important research line studies photosensitizers compounds
and their potential uses in photodynamic therapy, especially in antitumoral therapy,
we started to evaluate the photodynamic activity of these two metabolites in vitro
against a human breast carcinoma cell line (MCF-7c3), obtaining satisfactory results
[1]. Therefore, the next step will be to evaluate their photodynamic activity in vivo.
In this work, the objective was to study the acute toxicity of these AQs at different
concentrations with the aim to establish the non toxic dose, witch is necessary for
future phototherapeutic studies in vivo that evaluate the tumor rejection when AQs
are administered under irradiation conditions.
Acute toxicity signs were evaluated in Balb/c female mice after the intraperitoneal
injection of three different concentrations of each AQ. The following physiological
parameters in control and AQ-treated animals were analyzed in serum at 1, 2 and 7
days after treatment using diagnostic kits: creatinine, urea and transaminase (GPT).
Not significant differences were observed in GPT, creatinine and urea values
between AQs-treated mice vs. controls animals. Hence, theses results
demonstrated that not exist liver and renal toxicity.
Acknowledgements: This work was supported by FONCYT, CONICET, SeCyT-UNC and SeCyT- UNRC.
References
1.
Fernández, I. et al. (2006), Medicina, 66, 168.
202
P 113
Actividad antiviral de antraquinonas naturales in vitro
Núñez Montoya SC1, Beranek M2, Konigheim BS2, Aguilar JJ2, Contigiani MS2,
Cabrera JL1
1Dpto. Farmacia, Fac. Cs. Qcas., UNC, IMBIV-CONICET. Ciudad Univeristaria (5000) Córdoba,
Argentina; 2Instituto de Virología, Fac. Cs. Médicas, UNC. Ciudad Univeristaria (5000) Córdoba, Arg.
A pesar de la gran oferta de fármacos, aún existen enfermedades que carecen de
tratamientos seguros y eficaces; siendo necesaria la búsqueda de nuevos agentes
terapéuticos. En este sentido, los compuestos procedentes de la naturaleza
constituyen una interesante opción que merece mayor investigación. Nosotros
hemos aislados un grupo de antraquinonas (AQs) con propiedades
fotosensibilizantes a partir de una especie argentina fototóxica, Heterophyllaea
pustulata Hook. f. (Rubiáceas) [1-3]. Asimismo, hemos demostrado que estos
derivados inactivan el virus del herpes simple tipo I (VHS-I) in vitro (actividad
virucida), determinada sobre células Vero mediante el ensayo de captación de Rojo
Neutro (RN) [4].
En este trabajo se evaluó la actividad antiviral de rubiadina (AQ1), 1-metil éter de
rubiadina (AQ2), soranjidiol (AQ3), 1-metil éter de soranjidiol (AQ4), damnacantol
(AQ5), heterofillina (AQ6) y 5,5´-bisoranjidiol (AQ7) contra el VHS-I in vitro.
Para ello, se adicionó 100 ufp de VHS-I a una monocapa de células Vero crecidas
en una placa de 48 pocillos y se incubó durante 1 hs a 4 °C para lograr la adsorción
viral. Posteriormente, se agregaron las AQs que se ensayaron a 6 concentraciones
decrecientes por triplicado y se incubaron durante 72 hs a 37 °C. Se incluyeron
controles de virus, células y de cada concentración de AQ. La actividad antiviral se
midió mediante el ensayo de captación de RN. Los resultados se graficaron en
porcentaje de inhibición (%I) respecto de las concentraciones ensayadas,
calculándose la concentración que inhibe el 50 % del virus (CI50).
Todas las AQs ensayadas inhibieron en diferentes porcentajes al VHS-1 a la
concentración que asegura el 80 % de viabilidad celular (CV80), destacándose 5,5´bisoranjidiol (AQ7) (85,1 %I), 1-metil éter de rubiadina (AQ2) (80,2 %I) y 1-metil éter
de soranjidiol (AQ4) junto a damnacantol (AQ5) con un %I similar (77,4 %I).
Agradecimientos: Este trabajo fue finaciado por SeCyT-UNC, FONCYT y Agencia Córdoba Ciencia.
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203
4.
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Núñez Montoya, S.C. et al. XXVI Reunión Científica Anula de la Sociedad Argentina de Virología2006. Vaquerías, 22–25/10/2006. Córdoba, Argentina.
204
P 114
Estudio comparativo de los componentes volátiles de varios
individuos de la especie Eucaliptus globulos que crecen en el
estado Mérida Venezuela
Oriquin M., Rojas L., Usubillaga A.
Instituto de Investigaciones de la Facultad de Farmacia y Bioanálisis, Universidad de Los Andes, Mérida
Venezuela. e-mail:[email protected]
El género Eucalyptus, familia Myrtaceae, es nativo de Australia, Es un árbol, de 20
m de altura o más, de tronco color grisáceo, es empleado para fines industriales y
también ha sido usado en medicina tradicional como antiséptico y contra
infecciones del tracto respiratorio, como en el caso del resfriado común y
congestión nasal. Estudios previos de los aceites esenciales de las plantas de este
género, demuestran que poseen propiedades terapéuticas en el tratamiento de
infecciones pulmonares. El presente trabajo, pretende realizar una comparación de
los componentes volátiles presentes en distintos individuos ubicados en diferentes
zonas de la cuidad, con el fin de determinar si dichos individuos corresponden a
diferentes razas químicas. Para la extracción de los aceites esenciales: 100g de
hojas frescas, de cada individuo, se sometieron a hidrodestilación, empleando una
trampa de Clevenger durante una hora. El análisis químico de los aceites se llevo
a cabo empleando cromatografía de gases acoplada a espectroscopia de masas
GC/MS utilizando un cromatógrafo de gases 6890 acoplado a un detector de masas
Hewlett Packard 5973 sobre una columna de fenil-metil-polisiloxano de 30 m x 0,25
mm (HP-5). La identificación de los componentes se realizó con ayuda de una
librería Wiley MS Data (sexta edición, 275K espectra). Los cuatro componentes
mayoritarios en la muestra recolectada en el herbario de la facultad de Farmacia y
Bioanálisis encontrados fueron: alfa-phellandreno (8,77 %), para-cymeno (42,97%),
gama-terpeneno (16,17 %), terpineol (6,74 %) y el otro individuo recolectado en
santa Juana de dicha ciudad contiene beta-pineno (16,26%), limoneno (12,59%),
1,8-cineol (13,36%),bicyclogermacreno (32,82%).la variabilidad o discrepancia
observada en la proporción de los componentes en los aceites extraídos evidencia
que se trata de dos razas químicas distintas de una misma especie, siendo unas de
las causas la calidad del terreno y otros factores que comprenden su entorno.
Agradecimiento: Dirección de asuntos estudiantiles. Universidad De los Andes
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P 115
Mechanism underlying the protective effect of Rhodiola rosea
extract on oxidative stress-induced neurodegeneration in vitro
Palumbo DR, Circosta C, Pino A, De Pasquale R, Occhiuto F.
Pharmaco-Biological Department, University of Messina, Vill. SS. Annunziata, 98168, Messina, Italy
Oxidative stress-induced cell damage has long been implicated both in the
physiological process of aging and in a variety of neurodegenerative disorders such
has Parkinson’s and Alzheimer’s diseases.
Rhodiola rosea L. (Crassulaceae), also known as “arctic root” or “golden root”, is a
medicinal plant of traditional medical systems in Eastern Europe and Asia, with a
reputation of stimulating the nervous system, decreasing depression, enhancing
work performance, eliminating fatigue, and preventing high-altitude sickness. At
present, extracts from Rhodiola rosea are used in medical practice as a stimulating
and adaptogenic agent [1]. It has also been found to be a strong antioxidant due to
the presence of several phenolic compounds such as salidroside and rosavins [2].
Although our initial studies have suggested that R. rosea acts as a neuroprotective
agent in oxidative stress, the underlying mechanism has not been elucidated.
In the present study, we examined the effect of standardized extract from R. rosea
on H2O2–induced Ca2+ accumulation using human cortical cell line HCN 1-A
maintained in culture, as a model system to address the mechanism underlying its
protective effect on oxidative stress-induced neurodegeneration.
Exposure of the cortical neurons to H2O2 triggered a series of events including
intracellular Ca2+ accumulation (via voltage-gated Ca2+ channels and ionotropic
glutamate receptors), resulting in apoptotic-like cell death. In the above model,
neuroprotective effects of R. rosea extract and its influence on intracellular calcium
accumulation are reported.
References
1.
Sokolov, S.J. et al. (1985), Khim.-Farm. Zh., 19, 1367
2.
Ming, D.S. et al. (2005), Phytother. Res., 19, 740.
206
P 116
Componentes mayoritarios de un extracto acuoso obtenido de
madera de duramen de Enterolobium cyclocarpum (Jacq) Griseb.
Pamatz Bolaños T., Raya González D., Martínez Muñoz R.E., Ron Echeverría O.A.,
Román L.U., Hernández J.D., Espinoza R.M., Martínez Pacheco M.M., del Río R.E.
Instituto de Investigaciones Químico Biológicas de la Universidad Michoacana de San
Nicolás de Hidalgo, Edificio B-3, Cd. Universitaria, Francisco J. Mújica s/n, Col.
Felicitas del Río, Morelia, Michoacán, México. C.P. 58 000. e-mail:
[email protected]..
La durabilidad natural del duramen de Enterolobium cyclocarpum al biodeterioro, es
una propiedad de interés para el control de plagas. Se obtuvieron extractos del
duramen de cuatro plantas de E. cyclocarpum colectadas en diferentes regiones
(residuos de Cuanajo provenientes de estado de Veracruz, Apatzingán, Tacámbaro,
Tuzantla tres localidades del Estado de Michoacán). Mediante los análisis
químicos, espectrofotométricos y espectroscópicos de estos extractos se comprobó
la variabilidad natural en el contenido de extraíbles. De los extractos obtenidos por
arrastre de vapor del duramen colectado en Apatzingán y Veracruz, se identificó y
purificó al diterpeno manool, en maceración con hexano de la muestra del duramen
colectado en Apatzingan se logró identificar una mezcla de manool y 13-epimanool. Mientras que de los métodos de extracción por decocción se identificó y
purificó como componente mayoritario al D-(+)-pinitol (3-metoxi-1,2,4,5,6-penta
hidroxi ciclohexano) producto natural del grupo de los ciclitoles. Se demostró que el
D-(+)-pinitol no produce toxicidad aguda y que es responsable del efecto
antialimentario disuasivo contra la termita de madera seca Incisitermes
marginipennis. Fueron identificados por primera vez el D-(+)-pinitol y el manool de
la madera de duramen de E. cyclocarpum.
OH
H
HO
H6
4
H
5
HO
H3CO
3
H
H
H
2
1
OH
OH
Figura 1. Espectro de RMN 1H del pinitol en piridina-d5 a 400 MHz
207
P 116
Agradecimientos: este trabajo fue financiado por UMSNH-CIC 2.1MMP-2007, PROMEP NPTC-117 y el
programa de los FOMIX (CONACYT y Gobierno del Estado de Michoacán) (Michoacán 2005-C01-009). OARE,
PBT, RME y REMM (estudiantes de pregrado). DRG (becario CONACYT), LUR, JDH y REdR (vinculación)
208
P 117
A possible chemotherapeutic role of oxyprenylated
natural compounds
Panico AM1, Cardile V2, Garufi F1, Epifano F3, Genovese S4, Pelucchini C4 and
Curini M4
Department of Pharmaceutical Sciences, Faculty of Pharmacy, University of Catania, V.le A. Doria, 6
95125, Catania; 2Department of Physiological Sciences, Faculty of Sciences, University of Catania, V.le
A. Doria, 6 95125, Catania; 3Dipartimento di Scienze del Farmaco, Università “G. D’Annunzio”, Via dei
Vestini 31, 66013 Chieti Scalo (CH); 4Dipartimento di Chimica e Tecnologia del Farmaco, Sez. Chim.
Organica, Università di Perugia, Via del Liceo, 06123 Perugia, Italy.
1
In the last years oxyprenylated natural compounds have been recognized as valuable
biologically active products. So the research on these secondary metabolites
represents a field of current and growing interest. The use of natural chemotherapeutic
agents represents one of the main practical approach to reduce the morbidity and
mortality of cancer. The aim of the present study was to determine the effects of some
oxyprenylated compounds, namely valencic acid 1, isolated from Citrus sinensis L.
and Aegle marmelos (Fam. Rutaceae), 4-isopentenyloxy-3-methoxy benzoic acid 2, 4geranyloxy-3-methoxy benzoic acid 3, both isolated as methyl esters from the liverwort
Trichocolea lanata (Ehrh.) Dumm. (Fam. Trichocolaceae) (Fig. 1) [1], at different
concentrations (1-10-50 μg/ml for 72 h), on the growth (MTT assay) and production of
reactive oxygen species (ROS) by fluorescent method of androgen-sensitive human
prostate adenocarcinoma cells (LNCaP).
R1
R1
R2
R3
1 = -COOH; = -H; = isopentenyl
2 R1 = -COOH; R2 = -OCH3; R3 = isopentenyl
3 R1 = -COOH; R2 = -OCH3; R3 = geranyl
R3O
R2
Fig.1
The tested molecules reduced the cell viability in dose-dependent manner. Interestingly,
ROS level was increased by all compounds, particularly the isopentenyloxy vanillic acid
showed the highest production compared to untreated controls. ROS, that are
potentiated in transformed cells, emerge as key effectors of cell death. In contrast to their
role in promoting cell growth under non-stress conditions, ROS appear to activate and
modulate apoptosis when cells are under stress, condition determined also by
chemiotherapeutic drugs [2]. The present findings depict a possible chemotherapeutic
role of oxyprenylated natural compounds, because they probably provoke an unbalance
between generation of ROS and detoxification by defence enzymes.
209
P 117
References
1.
Epifano, F. et al. (2007), Phytochemistry 68: 939-953.
2.
Benhar, M. et al. (2002), European Molecular Biology Organization Reviews 3: 420–425.
210
P 118
Actividad analgésica y antiinflamatoria del extracto acuoso de la
Mangífera indica L.
Mariella Pastorello1, Carlos Ciangherotti1, Maider Varela1, José López-Gramcko1,
Giovannina Orsini2 y Anita Israel1
Laboratorio de Neuropéptidos. Facultad de Farmacia. Universidad Central de Venezuela; 2Herbario
“Ovalles”. Facultad de Farmacia. Universidad Central de Venezuela.Caracas-Venezuela
1
La Mangífera indica L (Anacardiaceae), es conocida en Venezuela como mango. Sus
hojas y corteza se usan en la medicina popular como antiinflamatorio. Se ha
determinado que la corteza de la M. indica (MI) es rica en mangiferina, un polifenol con
actividad antidiabética, antiinflamatoria, analgésica y antioxidante1. Recientemente se
reportó la presencia de este compuesto en la cáscara del fruto de esta especie2, aunque
los estudios farmacológicos son insipientes. En nuestro laboratorio se demostró el efecto
antioxidante de la cáscara de MI. En el presente estudio evaluamos el efecto analgésico
y antiinflamatorio el extracto acuoso de MI. El extracto se obtuvo por decocción de la
cáscara y liofilización. La actividad analgésica se determinó por la capacidad del MI (100
mg/Kg, i.p; p.o) de disminuir el número de contorsiones inducidas por el ácido acético
0,6% i.p en ratones balb c. El resultado obtenido se comparó con el del ácido
acetilsalicílico (ASA) y morfina. Los animales tratados con MI mostraron un número de
contorsiones similares a los tratados con ASA. La actividad antiinflamatoria se determinó
por el efecto inhibitorio del extracto sobre el desarrollo del edema agudo inducido por la
carragenina tipo IV, en la pata trasera de ratas Sprague-Dawley. Los animales se
dividieron en: Control (NaCl 0.9% i.p), Fenilbutazona (FBZ) (100 mg/Kg, p.o), MI (100
mg/Kg, p.o). Los tratamientos se administraron 30’ antes de la inducción del edema, y
este fue medido por desplazamiento de volumen a través de un pletismómetro digital,
antes, 1h y 3h después de la inyección de la carragenina. El extracto de la MI inhibió en
un 41% y 32% la inflamación a la 1 y 3h, respectivamente, efecto comparable con la
FBZ (AINE de referencia). Estos resultados demuestran que el extracto acuoso de la MI
poseen una importante actividad analgésica y antiinflamatoria, comparable con los
AINES típicos, validando su uso popular.
Referencias
1.
Carvalho AC, Guedes MM, de Souza AL, Trevisan MT, Lima AF, Santos FA, Rao VS. 2007. Planta
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Delporte C, Núñez-Sellés AJ, Delgado R. 2004;50(2):143-9. Leiro J, Arranz JA, Yáñez M, Ubeira FM,
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2.
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Schieber A, Berardini N, Carle R. 2003. J Agric Food Chem ;51(17):5006-11; Berardini N, Knödler M,
Schieber A, Carle R. Inn Food Sc & Emerg Techn. 2005. 6 (4); 442-452.
212
P 119
Estudio de los componentes
hypomalocophyllum Bitter.
volatiles
de
Solanum
A. Pérez, L. Rojas, A. Usubillaga
Instituto de Investigaciones de la Facultad de Farmacia y Bioanálisis. Universidad de Los Andes. Mérida.
Código Postal 5101.Venezuela. e-mail: [email protected]
La familia Solanaceae consta de 95 géneros y alrededor de 3000 especies, se
encuentra distribuida ampliamente en varias regiones del mundo1, el género
Solanum esta representado en Venezuela aproximadamente por unas 150 a 200
especies2 y ha sido centro de atención en lo referente a su potencial químico
farmacológico, puesto que estas plantas biosintetizan metabolitos secundarios
potencialmente activos1. S. hypomalocophyllum fue recolectado en el Páramo la
Culata en el Estado Mérida a 3.000 msnm e identificado en el Herbario MERF de la
Facultad de Farmacia y Bioanálisis de la Universidad de los Andes en MéridaVenezuela. Las hojas frescas (2500g) se sometieron a extracción utilizando la
técnica de arrastre con vapor de agua, empleando la trampa de Clevenger, durante
3 horas, obteniéndose un aceite esencial de color amarillento. Para la identificación
de los componentes se empleó un cromatógrafo de gases marca Hewlett Packard
6890 serie II, acoplado a un espectrofotómetro de masas HP-5973 y una columna
HP-5 de 30 metros de largo y 0,25 mm de diámetro fue. Los componentes
mayoritarios identificados fueron: Cis-3-hexenol (20,18%); (E)-2-hexanol, 1-hexanol
(11,97%) y (Z)-5-octen-1-ol. Este es el primer reporte de los componentes volátiles
de esta especie.
References
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Benítez, C. (1974). Revi. Fac. Agro 7. 25-108.
2.
Benítez, C. Rodríguez, P. (1991). Anales Jard. Bot. Madrid. 49. 67-76.
213
P 120
Antiinflammatory activity of Krameria cytisoides
Jonathan Delgado Peralta, Cuauhtemoc Pérez González, Miguel A. Zavala
Sánchez, Rosa V. García Rodríguez, Salud Pérez Gutiérrez.
Depto Sistemas Biológicos, Universidad Autónoma Metropolitana-Xochimilco. A.P. 23-181, México D.F.
Objetive: To prove the antiinflammatory properties of three extracts of Krameria
cytisoides.
Methods: The edema was induced by the injection of 100 μL of a 1 % carrageenan
solution into the sub-plantar region of the left hind paw of rats (1). A group of rats
was treated orally with 400 mg/kg of one of the extracts (aqueous, methanol or
chloroform extract) 1 h prior to carrageenan injection. At the same time, control
group received the vehicle, while standard reference group was treated with
indomethacin (8 mg/kg). The paw volume was measured by volume displacement
using a plethysmometer at 1, 2, 3, 4 and 5 h. after carrageenan administration.
Arthritis was induced in rats (2) by administration of 0.1 mL Freund’s adjuvant
intradermally in the tail. Methanol extract was orally administrated (400 mg/kg) and
indomethacin (4 mg/kg) since 6 to 10 days. At 6th day, 0.1 mL of carrageenan was
injected into the sub-plantar region of left paw of the rats. The paw volume was
registered with a plethysmometer at different times after the carrageenan
administration.
Results and discussion: The chloroform extract was inactive on carrageenan
induced edema, but methanol and aqueous extracts at doses of 400 mg/kg,
produced a significant effect against this model after 5 h of the administration (45.93
% and 43.03 %, respectively), minor effect than that obtained with indometthacin (62
%). The methanol extract had no effect at doses of 100 and 200 mg/kg, but at doses
of 400 mg/kg showed activity at on arthritis induced with adjuvant-carrageenan only
on the acute phase (5 to 48 h), after 5 h of the oral administration the inhibition was
46.87 %, similar to the effect of indomethacin (46.66 %), the effect increased after
48 h (69.2 %) and after 72 h the extract had no effect.
References
1.
Winter CA, Riseley EA, Nuss GW. (1962). . Procc Soc. Exper.l Biol. Med. 111: 544-547.
2.
Rocha, N. et al. (2002), Acta Farm. Bonaerense, 21, 291-295
214
P 121
Antiinflammatory efect of Senna crotalarioides and Penstemon
roseus on chronic inflammation models
Rosa-V García Rodríguez*, Cuauhtémoc Pérez González, Miguel-A Zavala
Sánchez, Salud Pérez Gutiérrez
Departamento de Sistemas Biológicos, Universidad Autónoma Metropolitana-Xochimilco, A.P.23-181,
México D.F. *e-mail: [email protected]
Objetive: To studyd the antiinflammatory activity of chloroformic extracts of S.
crotalarioides and P. roseus on the ear edema induced by multiple application of 12O-tetradecanoil phorbol-13-acetate(TPA) and the arthritis induced by complet
adyuvant Freund-carrageenan(ACII).
Metodology: Ear edema was induced by 2.5 μg of TPA topically applications on
mice (5 times in 10 days) [1]. The administration of the extracts (2.0 mg/ear) and
indomethacin (0.5 mg/ear) was 30 min after TPA. The inhibition of edema was
determined as difference of the weight between the ear with TPA and the treated
ear with acetone. The arthritis was induced in rats [2] by injections of 0.1mL
Freund’s adjuvant intradermally at the tail. The extracts were administered orally, P.
roseus (100 mg/kg), S. crotalariodes (50 mg/kg) and indometacin (4 mg/kg), at 6 to
10 days. At 6th day 0.1 mL of carrageenan was injected in the subplantar region of
the paw. The paw volume was registed in diferents times after of the carrageenan
with a plethysmometer.
Results and discussion: The results obtained with both chloroform extracts on
mouse ear edema induced by multiple topical applications of TPA showned that
both extracts exhibited antiiflammatory effect. S. crotalarioides showed inhibition
edema (64.9 %) similar to indomethacin (62.7 %), while P. roseus had minor effect
(42.30 %). S. crotalarioides had no activity on the mode of arthitis l induced with
adyuvant-carrageenan. However, P. roseus exhibited an anti-artritic effect only in
the acute phase (24 and 48 h). After 24 h of the oral administration of the extract at
doses of 100 mg/kg, the inhibition was 69.17 % similar to that obtained with animals
treated with indometacine (4 mg/kg), but the effect decreased after 48 h (32.45 %)
and after 72 h no effect was observed.
References
1.
Gábor, M., (2000), Akadémiai Kiadó, Budapest, pp. 31-33
2.
Rocha, N. et al. (2002), Acta Farm. Bonaerense, 21, 291-295.
215
P 122
Screening of four plant species activity against Spodoptera
frugiperda Smith (Lepidoptera: Noctuidae)
Ramos López Miguel Angel1, Pérez Gutiérrez María Salud1, Pixley Kevin2, Pérez
González Cuahutemoc1, Zavala Sánchez Miguel Angel1
Universidad Autónoma Metropolitana-Xochimilco. Calz. del Hueso 1100, Col. Villa Quietud, CP. 04960,
Coyoacán, México, D.F., 2Centro Internacional del Mejoramiento del Maíz y del Trigo (CIMMyT) Km 45,
Carretera México-Veracruz, El Batán, Texcoco, México, CP 56130.
1
Metabolites secondaries from plants are an alternative to control Spodoptera
frugiperda (1). The insectistatic and insecticide effect of aqueous extracts from
Pentesmon roseus, Senna bahuinoides and Eupatorium glabratum and CHCl3
extract of Carica papaya mixed with the artificial diet against S. frugiperda were
evaluated.
Methodology. Bervinson (2) system was use to the rearing of S. frugiperda, the
biological essay was evaluate by Rodríguez (1) method. 100 g of dry and grind
leaves, stems or seeds and 300 mL of water or CHCl3, were heater by 4 h, the water
was lyophilized, and the CHCl3 was eliminate at vacuum. The concentrations were:
16000, 1600, 160, 16 and 0 ppm.
Results and Discussion. C. papaya and E.glabratum had a mortal activity with
72.2, 66.7% (larvae) and 36.4, 29.3% (pupae) and increased the period 4.7, 6.5
days (d) (larvae) and 1.6, 1.6 d (pupae) and decreased 34.3, 30.1 mg the pupae
weigth, were insecticide and insectistatic. E.glabratum, C.papaya (1600 ppm) and
S.bahuinoides (16000ppm) were insectistatic (44.4, 16.7, 27.8%) and (11.8, 8.2,
18.5%) of larvae and pupae mortality respectively and increase (4, 1.0, 2.1 d) and
(0.9, 0.3, 1 d) the larvae and pupae duration, decrease (18.7, 12.2, 11.9 mg) the
pupae weigth. P. roseus had not significant.
Specie
Table 1. Activity of 4 plants (16000 ppm) against S. frugiperda.
Time (d)
Mortality (%)
larvae
pupae
larvae
pupae
C. papaya
27.4±0.51 ab
13.3±0.33 a
E. glabratum
29.2±0.48 a
13.3±0.48 a
S.bahuinoides
24.8±0.78 c
12.7±0.30 ab
P.roseus
23.0±0.64 c
12.3±0.23 ab
CONTROL
22.7±0.39 c
11.7±0.25 b
* Mortality was evaluated by Abbott equation (3).
72.2*
66.7
27.8
5.6
0
36.4
29.3
18.5
6.6
0
Pupae weigth
(mg)
206.8±6.6 c
211.0±7.5 bc
229.2±4.5 ab
236.7±6.6 a
241.1±6.2 a
References
1.
Rodríguez, H. C.; Vendramim, J. D. Manejo Integrado de Plagas (Costa Rica). 1996, 42, 14-22.
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Abbott, W. S. J. Econ. Entomol. 1925, 18, 265-267.
217
P 123
Study of anti-inflammatory propierties of Hesperozygis marifolia
y Senna villosa, used on Mexican traditional Medicine.
Ana-C Susunaga Notario, Salud Pérez Gutiérrez, Miguel Ángel Zavala Sánchez,
Cuauhtémoc Pérez González.
Universidad Autónoma Metropolitana Unidad Xochimilco. Departamento Sistemas biológicos. Calzada
del Hueso 1100. México, Distrito Federal. C.P. 04960.
Objective: To study the anti-inflammatory properties of the Hesperozygis marifolia y
Senna villosa on - O-tetradecanoil phorbol-13-acetate (TPA). Induced edema.
Methodology: The powder leaves were extracted with chloroform under reflux for 4
h, solvent was removed under reduced pressure. Oil essential was obtained by
hydrodistillation. Antiinflamatory activity was investigated on TPA – induced mouse
ear edema by Young method1 using indomethacen as positive control.
Results and discussion: Chloroformic extracts of both species showed antiinflammatory activity on ear edema induced by TPA. Hesperozygis marifolia and
Senna villosa showed an inhibition of 50.9 ± 5.46 y 51.03 ± 2.11, respectively,
whereas the essential oil of H. marifolia produced on inhibition of 41.28 ± 6.44,
similar than that obtained whit indomethacin of (57.20 ± 2.17)
The TPA model seems to be dependent primarily upon leukotrienes which are
synthesized by lipoxygenases enzymes2.. The results obtained in this study, suggest
that chloroform extracts of S. villosa and H. marifolia and the essential oil contain
activity inhibitors of leukotriene and prostaglandins synthesis.
References
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Young JM, De Young LM. (1989). In: Change, J.Y. Lewis, A.J.(Eds), Pharmacological methods
control of inflammation. Alan R.Liss. Inc., New York, pp.215-231.
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Llorets., Moreno J.J. (1995) Biochem Pharmacol 50, 347-563
218
P 124
Efectos de la Clorofilina – Na/Cu sobre el desarrollo de
embriones de ratón post-implantados in vitro
Pérez-Pastén R., Conde Lara I., Chamorro Cevallos G.
Laboratorio de Toxicología Preclínica, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas – IPN. Prol. Carpio Esq.
Plan de Ayala, Col Sto. Tomás, Delegación Miguel Hidalgo, México D.F., México.
El potencial farmacológico de los alimentos de origen vegetal, se ha vinculado a la
presencia de metabolitos secundarios no – nutricionales. En este sentido la
Clorofila (CHL), abundante pigmento vegetal, ha demostrado poseer propiedades
anticlastogénicas y anticarcinogénica. Sin embargo la CHL produce muerte fetal y
reabsorciones en forma concentración dependiente, en ratones gestantes. Con el
fin de conocer si el efecto fetoletal de la CHL, enmascara algún efecto teratogénico,
en este trabajo se procedió a evaluar su in vitro. Se utilizaron embriones
explantados a los 8 días de gestación y cultivados por 48 hrs en suero de rata
adicionado con CHL a diferentes concentraciones (0, 2.5, 5, 7.5, 10, 30, 50 y 500
g/ml). Al término del cultivo se evaluó la viabilidad y desarrollo embrionario.
Asimismo se registraron las malformaciones. Se demuestra que CHL (50 g/ml)
produce efecto embrioletal en el 100 % de embriones e inversamente por debajo de
ésta se aprecia una supervivencia del 100%. En el intervalo y a menores
concentraciones los embriones presentaron desarrollo normal. Cabe resaltar que a
la concentración de 30 g/ml el cono ectoplacentario y los eritrocitos (en la
circulación vitelina) se observan pigmentados de color verde. Los resultados son
concordantes con lo reportado por otros, que la muerte embrionaria se asocia a la
pigmentación que ocurre en el sitio de implantación, aparentemente por una
afinidad por el tejido trofoblástico. Para explicar la aparición de este color y los sitios
donde se observan, se requieren de más estudios.
219
P 125
The hygienic-sanitary risk associated with biogenic amines
formation in Sicilian wines
La Torre G.L., Alfa M., Lo Turco V., Pergolizzi S., Dugo G.mo
Department of Food and Environmental Science, Salita Sperone,31 – 98166 Messina, Italy
Currently, the oenological search is oriented to define the wine quality in relationship
to the chemical composition, the pharmacological ownerships and the safety of the
product. Therefore, in recent years, great importance has been directed towards the
monitoring of wine contamination for the presence of trace of biogenic amines in
wine.
The presence of biogenic amines in foods and more particularly in wines is of
current interest due to their pharmacological properties and the physiological
disorders they may provoke in the human organism (1, 2). Biogenic amines has
been incriminated as having a responsibility for intolerance reaction to wines even if
a study showed that the amount of histamine in wine has no clinical or biological
effect in healthy subjects (3).There are three possible origins for biogenic amines in
wines. They can be presented in the must, be formed by yeasts during alcoholic
fermentation, or result from the action of bacteria involved in malolactic fermentation
(4).
A considerable amount of data on biogenic amines in wines has been published but,
to the best of our knowledge, no such data have been reported for Sicilian wines.
The purpose of this study was to determine the content of biogenic amines in
Sicilian Controlled Denomination of Origin (DOC) and in Sicilian Protected
Geographical Indication (IGP) wines produced in Messina province and belonging to
the typology Passito, white and red wines. The analyzed samples include wines
from biological agriculture and from traditional agriculture. The levels of biogenic
amines in wines form the province of Messina were investigated for the first time.
The present study allows to affirm that the analyzed wines presented moderate
quantities of biogenic amines and that they do not constitute a risk for the health of
the consumer. Besides, all the wines examined, elaborate according to modern
wine-making technique, showed inferior amine contents.
References
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Wantke, F, et al. (1993), Clin. Exp. Allergy, 23, 982.
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220
P 126
Componentes volátiles de Eucalyptus robustus J.E. Smith que
crece en el Estado Mérida. Venezuela
Pernia M, Rojas L y Usubillaga A.
Venezuela. Urb. Campo de Oro. e-mail: [email protected]
El género Eucalyptus, perteneciente a la familia Myrtaceae, está constituido por
alrededor de 750 especies, sus usos son múltiples y van desde la elaboración de
papel a gran escala hasta formar parte de muchos compuestos utilizados en la
industria farmacéutica. En el presente estudio se muestra la composición química
de los componentes volátiles de la especie Eucalyptus robustus J.E. Smith que
crece en Mérida, estado Mérida. El mismo consistió en aislar los componentes
volátiles por arrastre con vapor de agua utilizando una trampa de Clevenger, estos
se identificaron por GC-MS, empleando un equipo Hewlett Packard 5973 GC/MS a
70 eV, equipado con un inyector automático, utilizando una columna capilar HP5MS (30 m, 0.25 mm, 0.25 µm). Se empleó una temperatura inicial de 60 ºC (1 min)
y luego se calentó a razón de 4 °C/min hasta 260 ºC (20 min). Se inyectó una
muestra de 1.0 mL de una solución al 2% del aceite esencial en n-heptane con
reparto de 100:1. Se utilizó una temperatura de inyección de 200 ºC. La
identificación de los componentes de los aceites se realizó mediante comparación
computarizada de los espectros obtenidos con los espectros de una Librería Wiley
(6ta Edición). Se determinaron los índices de Kováts analizando conjuntamente las
muestras con una mezcla de n-alcanos. Se identificaron 40 componentes, los
mayoritarios resultaron ser: alfa-pineno (22.9 %), para-cimeno (19.8%),
isopinocarveol (7.9%).
Referencias:
1.
Albornoz, A (1992). Medicina tradicional herbaria. Instituto Farmacoterapéutico Latino S.A. 423 p.
2.
221
P 127
Chemical fingerprint and anti-Candida potential of Plinia
cauliflora (Mart.) Kausel.
Tatiana M. de Souza1; Juliana A. Severi1; Wagner Vilegas2; Rosemeire C. L. R.
Pietro1.
1 Faculdade de Ciências Farmacêuticas-UNESP; 2 Instituto de Química-UNESP, Rod. Araraquara-Jaú,
km 1, Araraquara, Brasil.
P. cauliflora (Myrtaceae) occurs in South America. Their leaves are without
chemical and biological evaluation. Biological activity of plants has been important
to obtain new agents. The aim of this work was to analyze leaves extract of P.
cauliflora chemical profile and to determine its antifungal activity. The leaves extract
was obtained with 70% ethanol by percolation and dried. After cleaning up a sample
in SEP Pak – RP18 with water:methanol (2:8, v/v), the chromatographic profile was
established using a Varian, ProStar HPLC system equipped with a RP-18 column
(250 mm × 4.60 mm i.d., 5 μm, Phenomenex Luna). The mobile phase used was
water (A) and acetonitrile (B) with linear gradient elution of 4-25% in 20 min, 25-30%
in 30 min and 40-100% of B in 40 min eluted at a flow-rate of 1.0 mL/min. The
effluent was monitored using ProStar 330 photodiode-array of ultraviolet detection
(PDA) system at 270 nm for general aromatics and 360 nm for flavonoids.
Determination of Minimum Inhibitory Concentration (MIC) was done according
NCCLS M27-A2. Final sample concentration was 1.25 mg/mL. Final inoculum of
Candida albicans (ATCC 64548), Candida krusei (ATCC 6258) and Candida
parapsilosis (ATCC 22019) was 2.5-5.0x103 cells/mL. After serial dilutions in the
plates they were incubated for 48 h at 35 °C. Subcultures of the plates were done in
agar-Sabouraud plates incubating for 48 h at 25 °C to determine Minimum
Fungicidal Concentration (MFC). HPLC-PDA analyses showed that ethanolic extract
contain mainly phenolic compounds. The identification of the peaks was performed
by comparing the data obtained with literature suggesting the presence of ellagic
acid and flavonoids derivates. The ethanolic extract showed good activity against all
Candida species but better activity against C. krusei and C. parapsilosis. It was
possible to verify the phenolic composition of leaves ethanolic extract of P. cauliflora
suggesting the responsible metabolites for the activity against Candida spp.
Support: PADC-UNESP and FAPESP.
222
P 128
Effect of Agelasina B on the intracellular calcium mobilization in
breast cancer cells (MCF-7)
Adriana Pimentel1,2, Iriana Zambrano1, Jais Nieves1, Felipe Sojo2, Héctor Rojas3,
Alirica I Suarez4, Reinaldo Compagnone5, Francisco Arvelo2 y Gustavo Benaim1,2.
1Centro de Biociencias y Medicina Molecular, Instituto de Estudios Avanzados (IDEA); 2Laboratorio de
Biofísica, Instituto de Biología Experimental, Universidad Central de Venezuela; 3Laboratorio de
Permeabilidad Iónica, Instituto Venezolano de Investigaciones Científicas; 4Laboratorio de Productos
Naturales, Facultad de Farmacia, Universidad Central de Venezuela; 5Laboratorio de Síntesis Orgánica,
Facultad de Ciencias, Universidad Central de Venezuela;Caracas, 1080, Venezuela.
We have demonstrated that agelasine B, a compound purified from a sea sponge
(Agelas clathrodes), shows differential cytotoxic properties. Thus, in breast cancer
cells (MCF-7), the IC50 is 2.22 g/ml., significantly different with respect to the
observed in fibroblasts (IC50 23.43 g/ml), rising the possibility of its use on breast
cancer therapy. When assayed on a cell suspension of MCF-7 loaded with the Ca+2
indicator FURA-2, agelasine B was able to induce an increase of the intracellular
Ca+2 concentration ([Ca+2]i). This was due to the liberation of Ca+2 from the
endoplasmic reticulum, as could be seen by the use of confocal microscopy, as
previously reported [1]. We also demonstrated that agelasine B is able to inhibits
the activity of the sarco(endo)plasmic reticulum Ca+2-ATPase (SERCA) with the
same efficiency to classical inhibitor of this Ca+2 pump, such as thapsigargin and
cyclopiazonic acid, showing that agelasine B is able to differentially kill these cells
through the inhibition of the SERCA and the subsequent disruption of [Ca+2]i
homeostasis.
Acknowledgments: Grants from C.D.C.H.-U.C.V. PG-03-00-6049/2005 & FONACIT G-2001000637 to
G.B.
References
1.
Colina, C. et al. (2005), Biochem. Biophys Res. Commun., 336, 54-60.
223
P 129
Anti-proliferative effect of betalains from Sicilian cactus pear
(Opuntia ficus indica, L. Mill.) on malignant HepG2, Huh-7, and
HA22T human liver cell lines
Pintaudi A.M1, Cocciadiferro L 2, Lannino M 1, Fazzari M 1, Livrea M.A1, Carruba G 2
1Dept. Farmacochimico Tossicologico e Biologico, Università di Palermo; 2Experimental oncology unit.
Dept of Oncology. ARNAS-Civico,Palermo.
Epidemiological evidence has been provided that various age-related pathologies,
including cardiovascular diseases, cancer, and neurodegenerative disorders have a
minor incidence among people consuming vegetable-rich diets. Antioxidant food
components have been considered essential to obtain long-term positive health
outcomes. Betalains are redox-active pigments occurring in the Cariophyllalae order
of plants, among which the edible cactus pear and red beet. These bioactive
phytochemicals can act as antioxidants in various biological models, including
oxidation of membranes (1) and LDL (2), and modulators of redox-mediated cell
pathways relevant to the inflammatory response (3). It has recently been
documented that betanin can inhibit proliferation of a variety of human tumor cells ,
including breast, colon stomach, CNS, lung, and myeloid leukemia (4,5).
Human hepatocellular carcinoma is the third most common cause of cancer death.
We studied the effect of the betalain pigments betanin and indicaxanthin isolated
from fruits of Sicilan cactus pear on the proliferation of human liver cancer cells lines
(HepG2, Huh-7 and HA22T). Both betalains showed a dose-dependent antiproliferative effect (30 to 50%) in a low micromolar range (0.1 to100 μM), with the
effect in Huh-7 and HA22T cells higher than in HepG2 cells. In all experiments
indicaxanthin exhibited higher antiproliferative effect than betanin. Other studies
aimed at investigating about the molecular mechanisms involved are in progress.
Our data add further value to the nutritional characteristics of cactus pear fruits and
encourage diets including this fruit to maintaining a healthy status.
References
1.
Tesoriere L, et al. (2007) Free Radic.Res 41, 226.
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Tesoriere L, .et al. (2003) Free Radic. Res 37, 689.
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5.
Muntha Reddy K, et al. (2005) J.Agric.Food Chem. 53, 9268.
224
P 130
Anticancer efficacy of depside and depsidone compounds
isolated from Chilean lichens against human prostate cancer
cells
M. Piovano1 ,V. Cardile2, G. Frasca2, J. Garbarino1 and A. Russo3
1Dept. of Chemistry, University T.F. Santa Maria, Casilla 110-V, Valparaiso, Chile; 2Dept. of Physiological
Sciences, University of Catania, V.le A. Doria 6, 95125, Catania, Italy; 3Dept. of Biological Chemistry,
Medical Chemistry and Molecular Biology, University of Catania, V.le A. Doria 6, 95125, Catania, Italy.
Prostate cancer continues to be a major problem in the developed world. Owing to
the high mortality and unsatisfactory treatment options available it remains the most
common malignancy [1]. In such cases, intervention strategies using natural
chemical agents are employed in cancer chemoprevention to reverse, suppress or
prevent cancer progression [2]. Lichens are one of the most important sources of
biologically active compounds. For centuries, a number of the 17.000 known lichen
species have been utilized by humans medicinal purposes [3]. Recent pre-clinic
studies have permitted to hypothesize their possible use as anticancer agents [3, 4].
This study was carried to assess the effect of lichen metabolites atranorin,
divaricatic acid, difractaic acid (depsides) and vicanicin (depsidone) against
androgen-insensitive (DU-145) and androgen-sensitive (LNCaP) human prostate
cancer cells. The tested compounds were isolated and purified from diverse lichen
species collected in different localities of Continental and Antarctic Chile. In each
case, the cells were treated with these agents at 6-50 μM doses for 72 h. The
natural compounds inhibited the growth of human prostate carcinoma cells and the
effect was more prominent in DU-145 compared to LNCap. But the depsidone
vicanicin exhibited more potent efficacy, confirming the hypothesis that the higher
biological activity of the depsidones could be related, at least in part, to a larger
incorporation into lipid microdomains [5]. Our data also show an induction of
apoptosis in prostate cancer cells by vicanicin. In fact, a significant (p<0.001)
increase of caspase-3 enzyme activity occurred in both cancer cell lines treated with
this lichen metabolite at 6-12 μM concentrations, correlated to a high DNA
fragmentation, but without the disruption of the plasma membrane, as evaluated by
percentage of LDH release. Atranorin, divaricatic acid and difractaic acid exhibited
proapoptotic effect but at higher concentrations.
References
1.
N. Fleshner, A.R. Zlotta, 2007, Cancer 110, 1889-99.
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226
P 131
Determination by SPME of volatile compounds in non edible
Basidiomycetes
Marisa Piovano1, Juan A. Garbarino1, Elizabeth Sánchez2, Manuel Young2.
1Universidad Técnica Federico Santa Maria, Departamento de Química. 2Universidad Técnica Federico
Santa Maria, Centro de Biotecnologia “Daniel Alkalay L.”, Avenida España 1680, Valparaíso, Chile.
The characteristic odor/flavor of many fresh edible fungi can be classified into
nonvolatile and volatile compounds. Among the volatile substances a series of C-8
aliphatic oxygenated metabolites are the main components, 1-octen-3-ol being the
most abundant [1,2].
This work represented the study of volatile fractions of eight fresh non edible fungi
(Basidiomycetes): Mycena chlorinella, Rhizopogon roseolus, Pholiota spumosa,
Thelephora terrestris, Hygrocybe coccinea, Geastrum triplex, Ramaria flaccida and
Laccaria laccata by headspace solid phase microextraction – gas chromatography –
mass spectrometry using fiber PDMS/DVB [3].
No information of volatile studies concerning the 8 analyzed species was found.
Fresh specimens were collected in the Reserva Nacional Forestal Lago Peñuelas,
Valparaíso (V Region) Chile in fall 2006 and 2007 and 2-3 g of each species were
used. Whole specimens on the peak day of flush and maturity were harvested.
Twenty-eight volatile constituents were identified using the library for the NIST
chromatograph 2000. The main components were 1-octen-3-ol, 1-octene, 3octanol, 3-octanone, among others.
Basically there is no great difference in the content of volatiles among edible and
non edible fungi.
Acknowledgment. This research was supported by a Grant # 130521) from DGIP, USM.
References
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Sophie Breheret,, Thierry Talou, Sylvie Rapior and Jean-Marie Bessieré. 1997, J. Agric. Food
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227
P 132
Effect of lichen compounds on the growth of pathogens bacteria
and fungi
Marisa Piovano1, Juan A. Garbarino1, Soledad Ortega2, Ingrid Ramírez2, Hugo
Peña-Cortés2.
1Universidad Técnica Federico Santa Maria, Departamento de Química. 2Universidad Técnica Federico
Santa Maria, Centro de Biotecnologia “Daniel Alkalay L.”, Avenida España 1680, Valparaíso, Chile.
The phenolic compounds depsides and depsidones are considered to be specific
substances from lichens [1], and they exhibit a broad range of bioactivities, among
them, are considered the inhibitory effect on some bacteria and fungi pathogens of
plants and animals [2; 3].
The Goals of our study was to determine the potential antibacterial and antifungal
properties of the depsides atranorin and difractaic acid and the depsidones
pannarin, 1’-Cl-pannarin, lobaric acid, stictic acid and fumarprotocetraric acid.
The microorganisms used in the bioassays were the phytopathogenic bacteria:
Erwinia carotovora, and Pseudomonas syringae; and the animals pathogens:
Staphylococcus epidermidis, Micrococcus luteus, and Vibrio angynolyticus as well
as the phytopatogenic fungus Botrytis cinerea.
The lichen metabolites were isolated from species collected in Continental Chile and
Antarctica, and were extracted as already described [4, 5].
The results obtained by the biological tests to determine the bioactivity of these
compounds, demonstrate that some of them are able to inhibit the growth of
animals pathogenic bacteria, whereas others display and activity on the growth of
plant pathogens (bacteria and fungus). The growth of S. epidermidis is clearly
inhibited (almost a 90%) by the applications of pannarin, 1’-Cl-pannarin or lobaric
acid. Pannarin and lobaric acid also affect the growth of plant pathogens. While
pannarin inhibit the growth of plant pathogenic bacteria, causing a reduction of
approximately 50% in the growth of E. carotovora, lobaric acid reduces the growth
of B. cinerea in a 60% compared to the control ones.
References
1.
Emerson P. Da Silva Falcão, Nicásio H. Da Silva, Norma B. Gusmão, Sheiyla Mara Ribeiro e
Eugenia C. Pereira, 2004, Acta bot. bras., 18, 911-918.
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228
P 133
Antiproliferative activity of ethanol extract of Cuban propolis on
human breast cancer
Popolo A.1, Carratù A.1, Morello S.1, Piccinelli A.L.1, Osmany Cuesta-Rubio2,
Rastrelli L.1 and Pinto A.2
Department of Pharmaceutical Sciences Via Ponte Don Melillo 84135 Fisciano Salerno; 2 Instituto de
Farmacia y Alimentos (IFAL), Universidad de La Habana, Avenida 23, 21425 Lisa, La Habana, Cuba CP
13600.
1
Propolis is a resinous substance collected by honeybees from the bud and bark of
certain trees and plants and stored inside their hives. It has been used in folk
medicine from ancient times and recently it has been reported to possess various
biological activities such as antibacterial, antiviral, anti-inflammatory and antitumoral
properties. In this study we investigated the antiproliferative activity of the ethanol
extract of brown Cuban propolis (BCP) on two human breast cancer cell lines, MCF7 (estrogen receptor positive ER+) and MDA-MB 231 (ER-). The MTT assay
showed a significant antiproliferative activity (P<0.005) of BCP on either MCF-7 and
MDA-MB 231, and this effect was concentration- (1-25 µg/ml) and time- (24-72 h)
dependent. 17- estradiol (10nM) administration on MCF-7 causes a significant
(P<0.001) but no total reduction of BCP antiproliferative activity at concentrations of
1, 5 and 10 µg/ml, but not at the highest concentration (25 µg/ml). On MDA-MB 231
no differences were observed in presence of 17- estradiol. The co-administration of
ICI 182,780 (100nM), an antagonist of ER, on MCF-7 showed a significant
(P<0.001) reduction of BCP antiproliferative activity. Furthermore, BCP
administration on MCF-7 showed a significant (P>0.01) inhibition of cell growth in
G1 phase of cell cycle in a concentration- and time-dependent manner. This effect
was correlated with a reduction of p-53 expression after 48 h of BCP treatment.
In conclusion our results indicate that BCP could exert its antiproliferative effect by
dual mechanisms: the first involves the ER, as partial agonist, and the other one is
not receptorial pathway mediated.
229
P 134
Nuevos metabolitos prenilhidroxibenzoicos de Piper ssp.
Edwin Correa 1, Winston Quiñones 1, Olov Sterner 2, Fernando Echeverri 1
1Universidad de Antioquia-SIU, Instituto de Química, PO Box 1226, Medellín-Colombia, 2Division of
Organic Chemistry, Lund University, PO Box 124, SE-22100 Lund, Sweden
Las especies del género Piper se caracterizan por la gran diversidad estructural de
sus metabolitos, tales como isobutilamidas, alcaloides, flavonoides, fenilpropanos,
terpenos y derivados prenilhidroxibenzoicos [1]. Sus especies han sido empleadas
en medicina tradicional para el tratamiento de diversas afecciones [2] y en
agricultura para el control de insectos [3]. En el presente trabajo se describe el
aislamiento de varias moléculas de este tipo a partir de un extracto crudo de Piper
ssp., que en estudios anteriores mostró una importante actividad contra Leishmania
(V) panamensis. Tres de ellos son derivados prenilados de acido benzoico (acido 2farnesil-3-hidroxi-4-metoxibenzoico 1), (acido 2-farnesil-3,4-dihidroxibenzoico, 2),
(acido 3-geranilgeranil-4-hidroxibenzoico, 3 previamente reportado [4]), y un
análogo prenilado sin el grupo carboxilo (2-farnesil-6-hidroxifenol, 4) (Figura 1).
Este ultimo es la primera vez que se aísla de una fuente vegetal, ya que
previamente había sido sintetizado para estudiar la biosíntesis de ubiquinona en E.
coli y Saccharomyces cerevisiae [5].
O
15'
OH
2
4
13'
14'
3'
7'
11' 12'
1
COOH
OH
4
3
1
COOH
OH
HO
2
COOH
1
20'
17'
OH
3'
7'
3
11'
15'
HO
4
Agradecimientos. COLCIENCIAS, Universidad de Antioquia (Colombia) y Programa Alfa EULADIV
(EU).
Referencias
1.
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231
P 135
Nuovi diterpeni neo-clerodanici da Scutellaria hastifolia L.
raccolta in Lituania
Rosa Angela Raccuglia1, Gabriella Bellone1, Kristina Loziene2, Franco Piozzi1,
Sergio Rosselli1, Antonella Maggio1, Maurizio Bruno1
1 Dip. Chimica Organica, Viale delle Scienze, Parco d’Orleans II – I 90128 Palermo - Italia. 2 Institute of
Botany, Zaliuju ezeru 47, LT-2021, Vilnius, Lithuania.
Scutellaria è un genere cosmopolita della sottofamiglia delle Scutellarioidea
appartenente alla famiglia delle Lamiaceae. Esse sono piante erbacee spesso
coltivate a scopo ornamentale a causa dei loro fiori sgargianti e colorati. Sono circa
300 le specie di Scutellaria che crescono nel mondo in differenti zone climatiche. In
molte di esse sono presenti composti con diverse proprietà biologiche quali quella
antinfiammatoria, antibatterica, antiossidante ed antitumorale e specialmente
proprietà ecologiche quali quella antifeedant ed antifungina. S. hastifolia L. è una
pianta perenne che fiorisce tra giugno ed agosto, alta 10-40 cm, dalle foglie con
particolare forma ad uovo e dai fiori di un gradevole colore blu-violetto. E’ una
specie molto rara che cresce in Lituania, tipicamente nelle zone erbose nei pressi di
corsi d’acqua (1). In questa comunicazione riportiamo lo studio dell’estratto
acetonico delle parti aeree di S. hastifolia raccolte nel luglio 2006 in Lituania. Sono
stati isolati e caratterizzati tre nuovi diterpeni neoclerodanici (1-3) recanti sul
carbonio C-6 una funzione esterea cinnamoilica ed è da notare, inoltre, che tutti e
tre i composti hanno il carbonio C-19 come metile, una caratteristica strutturale
alquanto rara (2). Il composto 1 presenta il frammento C-11/C-16 come di lattone
α,β insaturo, mentre nei composti 2 e 3, epimeri al C-13, esso forma un sistema
spiranico coinvolgente il carbonio C-8.
O
O
O
O
H
O
H
OH
O
O
O
1
O
O
O
2, 3
References
232
1.
2.
P 135
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M. Bruno, F. Piozzi, S. Rosselli, Nat. Prod. Rep. (2002), 19, 357-378.
233
P 136
Antinflammatory activity of Lantana fucata extracts and its
derived phenylpropanoid glycosides
Julião L. de S1, Marzocco S2, Picinelli A L2, Autore G2, Leitão S G3, Rastrelli L2
PBV, UFRJ, CCS, Bl. K. 2º andar, Rio de Janeiro, RJ, Brazil; 2 Dipartimento di Scienze Farmaceutiche,
Università di Salerno, Via Ponte Don Melillo, 84084 Fisciano (SA), Italy; 3 Faculdade de Farmácia, UFRJ,
CCS, Bl. A, 2º andar, Ilha do Fundão,RJ, Brazil.
1
Lantana (Verbenaceae) is a neotropical genus with approximately 150 species,
many of them occurring in Brazil. Lantana fucata is a small shrub extensively
distributed in Brazil, used in folk medicine as infusions and syrups for the treatment
of respiratory disorders [1]. No studies have been carried out on the chemistry or
pharmacology of this specie before.
The present work describes the isolation of four new phenylpropanoids glycosides
(PPGs) from Lantana fucata named as fucatosides A-D. Moreover we also
evaluated the antinflammatory activity in vitro both of several L. fucata exctracts
(ethanolic “EE” and hydro-alcholic “HE” tinctures and infuse “I” and tisane ”T”) and
of their main PPGs, in a model of LPS-induced NO release, in J774.A1 murine
macrophage cell line.
In order to evaluate the effect of tested extract and compounds on nitric oxide (NO)
release, one of the main mediators of inflammatory process, graded concentrations
(1-100 mg/ml) of extracts and compounds were added to J774.A1 macrophages 1h
before and simultaneously to LPS (10 g/ml). After 24 hrs nitrite concentration,
indicator of NO release, was measured in the culture medium by Griess reaction [2].
Results showed that EE tincture significantly inhibits, at all concentrations, NO
release (P<0.01), HE tincture exerts its inhibitory effect at the concentrations of 10
and 100 mg/ml (P<0.001) while I and T inhibited NO only at the highest
concentration (P<0.001). Among L. fucata PPGs the more active was fucatoside D
which significantly inhibited NO release at the concentrations of 10 and 100 mg/ml
(P<0.001). Other fucatosides (A-C) exerts a significant inhibition only at the
concentration of 100 mg/ml. Moreover MTT assay revealed that no cytotoxic effect
was related to tested fucatosides treatments. Our results strongly validated the
empirical use of L. fucata in folk medicine showing that its effect could be partly
related to the reduction of NO.
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Flora LTDA. 540 p.
2.
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234
P 137
Evaluation of the pharmacological activity of Citrus aurantifolia
leaves on LPS-induced J774.A1 cultured macrophages
Marzocco S.1; Piccinelli, A. L. 1; Garcia Mesa, M. 2; Rastrelli, L.1; Autore G. 1
1Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Università di Salerno, Italy. 2Departamento de Bioquímica,
Instituto Nacional de Angiología y Cirugía Vascular, Cuba.
Citrus aurantifolia Christm. (Lime) is widely distributed in Cuba and in tropical and
sub-tropical regions. Lime leaves have been used for the treatment of skin diseases
and as anti-inflammatory agent by folk medicine [1].
In the past few years there has been an increased interest in the study of Citrus
plants because their fruits and leaves contained large amounts of flavonoids [2].
To better characterize the capability of natural products in preventing vascular
diseases, in the laboratories of the National Institute of Angiology and Vascular
Surgery, Cuba, a tincture of lime leaves (TLL) has been developed to be used as
nutritional supplement or in phytomedicine. Qualitative and quantitative chemical
characterization showed that TLL contained primarily C-glycosyl flavones and
vitexin (1), isovitexin (2), vitexin-O-β-D-glucopyranoside (3) and isovitexin-O-β-Dglucopyranoside (4) are the main constituents [3].
In this study we evaluated the effects of Lime’s major constituent (25-200 μM) on
iNOS expression and activity, in cultured J774.A1 macrophage cell line, added 1h
before and simoultaneously with Escherichia coli lipopolysaccharide(LPS)
stimulation. Twenty four hours later NO release was evaluated by Griess reaction
[4]. Compounds 1-4 (100-200 μM) significantly (P<0.05) and in a concentration
related manner reduced NO release. Particularly 4 reduced significantly NO release
even if at the lowest concentration used (50 μM ; P<0.05). Moreover MTT viability
assay revealed that all tested compounds didn’t showed any antiproliferative activity
on J774.A1 macrophages.
These findings further validate the empirical use of Lime as anti-inflammatory agent
in folk medicine and indicated that its anti-inflammatory effect could be addressed
not only to its isovitexin content, which capability to reduce NO production is well
known, but although to the presence of 1, 3 and 4.
References
1.
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4.
Green L.C. et al. (1982) Analytical Biochemistry 126, 131.
235
P 138
Magnoflorine and phenylpropanoid derivatives from the leaves of
Croton xalapensis L. (Euphorbiaceae)
Carolina Arevalo2, Anna Lisa Piccinelli1, Silvana Morelli1, Ines Ruiz2, Luca Rastrelli1
e Francesco De Simone1
1Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Università degli Studi di Salerno, Via Ponte don Melillo, 84084
Fisciano (SA), Italy. 2Departamento de Control Químico, Facultad de Farmacia, Universidad Nacional
Autonoma de Honduras (UNAH), Bulevar Suyapa, Tegucigalpa, Honduras.
Croton (Euphorbiaceae) is one of the largest genera of flowering plants, with nearly 1300
species of herbs, shrubs, and trees that are ecologically prominent and often important
elements of secondary vegetation in the tropics and subtropics worldwide (Webster, 1993).
C. xalapensis (Euphorbiaceae), commonly named “china native”, is a small tree that grow
in the forests of southern Honduras. The leaves of C. xalapensis were collected in Lange,
Valle, Honduras, in January 2004. The genus Croton is one of the richest sources of
alkaloids with aporphine, proaporphine and morphinandienone skeleton (Farnsworth et al.,
1969; Southon and Buckingham, 1989; Del Castillo et al., 1996), in addition flavonoids
(Amaral and Barnes, 1998), lignans (Pieters et al. 1993) and diterpenes with clerodane
skeleton (Tane, 2004) are also commonly found in this genus. No phytochemical studies on
C. xalapensis have been reported. In the Present study from Dried and powdered leavesof
C. xalapensis we isolated the aporphine alkaloid magnoflorine, and phenolic compound:
3,4-dimethoxycinnamyl alcohol, 3,4-dimethoxy-5-hydroxy-t-cinnamyl alcohol and gallic acid.
The structure of all compounds were unambiguously established by comparing physical
and spectroscopic properties including mass spectrometry, 1D (1H, 13C) and 2D (HSQC,
HMBC and COSY) NMR spectroscopy with those reported in literature. (Barbosa-Filho et
al. 1997, Bao-Ning et al. 1999, Ahmed, 1991). Quantitative HPLC analyses of magnoflorine
the more abundant compound were performed. The yield of the lyophilized aqueous extract
was 447 mg (29.8% of dried leaves). The concentration of magnoflorine calculated from
the experimental peak areas by interpolation to standard calibration curves was 139.58
mg/g in dry leaves.
References
Amaral, A.C.F., Barnes, R.A., 1998. Natural Product Letters 12, 41.
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236
P 139
Phenolic derivates from methanolic extract of Mexican Propolis
Cinzia Lotti1; Anna Lisa Piccinelli1; Fernandez Mercedes Campo2; Cuesta-Rubio
Osmany2; Hernández Ingrid Márquez2; Francesco De Simone1, Luca Rastrelli1
Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Università degli Studi di Salerno, Via Ponte Don Melillo, 84084
Fisciano (SA), Italy, 2 Instituto de Farmacia y Alimentos (IFAL), Universidad de La Habana, Avenida 23,
21425 Lisa, La Habana, Cuba CP. 13600
1
Propolis is considered to possess broad spectrum of biological activities: antibacterial,
antinflammatory, antiviral, antifungal, antiulcer, hepatoprotective [1,2]. It is one of the few
natural remedies that has maintained its popularity over a long period of time. Propolis
has gained popularity as a health drink and also has been used in beverages and food, is
thought to improve human health and to prevent diseases such as inflammation, heart
disease, diabetes [3]. The pattern of natural products in propolis consists of a wide range
of compounds qualitatively and quantitatively varying strictly on its geographical location
depending on the vegetation in the collection area [4]. For example, propolis from
temperate zones, especially European propolis, contains phenolic compounds,
predominantly flavonoids [5] while propolis from tropical zones contains different classes
of natural products, among them polyprenylated benzophenones [6]. This research work
is part of a collaboration with the IFAL (Istituto de Farmacia y Alimentos, Cuba) that for
years studied samples of different origins propolis botany. Literature reported only a few
studies on the antibacterial free-radical scavenging activities of Sonoram (desert
northwestern Mexico) propolis [7]. The methanolic extract of Mexican propolis was
chromatographed (Serphadex LH-20, Silica Gel, RP-HPLC-IR, RP-HPLC-UV and HPLCMS); chemical characterization led to the isolation of known flavonoids including
pterocarpans, isofavans and flavanols and also new compounds including a flavanol and
aromatic substances. The structure of new compounds, including absolute
stereochemistry was accomplished by spectroscopic analysis, particulary 2D-NMR and
ESI-MS. The structures of know compounds were elucidated by spectral data
comparison with those published in the literatures. In particular, for pterocarpans was
studied also the fragmentation pathway proposed for [M+H]+ as reported for the study by
electrospray ionization tandem mass (ESI-MS/MS) specrta of Cuban propolis [8].
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238
P 140
Estudio de toxicidad de un extracto acuoso de madera de
duramen de Enterolobium cyclocarpum (Jacq) Griseb.
Raya González D1, Chávez Duran J1., Martínez Muñoz R.E1., del Río R.E1, Flores
García A1, Salgado Garciglia R1, López Gómez R1., Morales López M.E1., Damián
Badillo L.M2. y Martínez Pacheco M.M1.
Instituto de Investigaciones Químico Biológicas de la Universidad Michoacana de San Nicolás de
Hidalgo, Edificio B-3, Cd. Universitaria, Francisco J. Mújica s/n, Col. Felicitas del Río, Morelia,
Michoacán, México. C.P. 58 000. e-mail: [email protected]. 2Universidad de la Ciénega del
Estado de Michoacán de Ocampo. Sahuayo, Mich
1
Se observó que el extracto acuoso obtenido de madera de duramen de E. cyclocarpum
protegió a la madera de pino (madera perecedera), severamente afectada por el insecto
barrenador de madera seca Incisitermes marginipennis (Latrellie), el efecto que se observó
fue de disuasión y no de insecticida [1]. Debido a la gran cantidad de residuos sólidos
generados en la fabricación de muebles con esta madera, es factible su aprovechamiento
en la obtención de extractos para proteger madera perecedera o de baja durabilidad, por lo
que el propósito del presente trabajo fue hacer un estudio de toxicidad del extracto acuoso
obtenido de madera de duramen de E. cyclocarpum. Se utilizaron organismos indicadores
ampliamente aceptados en pruebas de toxicidad y se hicieron curvas de dosis respuesta
para determinar las concentraciones letales e inhibitorias medias (CL50/CI50) y compararlas
con los valores permisibles de toxicidad aceptados por diferentes legislaciones. Se
determinaron las CL50/CI50 de un extracto acuoso obtenido del duramen de E. cyclocarpum
en organismos de diferentes niveles tróficos. En el crustáceo Artemia salina la CL50 fue de
1.3 mg/ml, en la termita I. marginipennis fue de 2 mg/ml y en la rata Wistar la CL50 > 2000
mg/kgind. En ocho aislados silvestres microbianos la CI50 fue >1 mg, mientras que en
Klebsiella pneumoniae la CI50 fue de 300 µg. En la línea celular MCF-7 la CI50 fue de 133
µg. Al comparar las CL50/CI50 observadas con los límites permisibles de toxicidad. Se
concluye que el extracto acuoso no causa toxicidad en los organismos indicadores.
Cuadro 1. Determinación de la CL50 en animales del extracto acuoso obtenido de duramen de E. cyclocarpum.
Especie
Tratamiento
CL50
Tiempo
Extracto acuoso
1.3 mg/ml
24 h
A. salina
Sulfato de Berberina
0.01 mg/ml
0.083 h
Extracto acuoso
2 mg/ml
5 semanas
I. marginipennis
Sales de DTB
Extracto acuoso
> 2000 mg/kg
> 168 h
Ratas Wistar
Quercitina
200 mg/kg
168 h
Agradecimientos: este trabajo fue financiado por UMSNH-CIC 2.1MMP-2007 y el programa de los FOMIX
(CONACYT y Gobierno del Estado de Michoacán) (Michoacán 2005-C01-009). DRG (becario CONACYT), JCD,
REMM, MEML (estudiantes). LMDB y REdR (vinculación). AFG, RSG, RLG y MMMP (CA154).
239
P 140
Referencias
1.
Raya González D., Rutiaga Quiñones J.G., Martínez Pacheco M.M., Flores García A. y Morales
López M.E. 2007. SILAE, La Plata, Argentina.
240
P 141
Risultati preliminari sull’attività antiossidante di Salvia ssp.
Giamperi L1, Bucchini A1, Fraternale D1, Ricci D1, Bisio A2, Romussi G2, Russo E2,
Cafaggi S2.
Istituto di Botanica e Orto Botanico “P. Scaramella”, Facoltà di Farmacia, Università degli Studi di Urbino
“Carlo Bo”, Urbino (PU) 61029 Italy; 2Dipartimento di Chimica e Tecnologie Farmaceutiche e Alimentari,
Università di Genova, Via Brigata Salerno 16147 Genova, Italy.
1
E’ stato condotto uno studio preliminare sull’attività antiossidante degli essudati di
parti aeree di 8 specie di Salvie. Le specie selezionate sono: Salvia namaensis
Schino (a) S. fallax Fernald (b) S. chamaedryoides Cav. (c), S. confertiflora Pohl (d),
S. x jamensis J. Compton (e), S. buchananii Hedge (f), S. wagneriana Polak (g), S.
cacaliaefolia Benth. Poiché in letteratura non esistono lavori riguardanti l’attività
antiossidante di tali essudati ci è parso interessante valutarne il contenuto
polifenolico e conseguentemente l’attività antiossidante. Gli essudati sono stati
solubilizzati in una miscela di solventi organici ed il contenuto polifenolico è stato
valutato utilizzando il test del Prussian Blue (1) opportunamente modificato. Questo
test ha evidenziato che la concentrazione più elevata di polifenoli era presente in S.
cacaliaefolia (74 g polifenoli/mg DW) ed in S. namaensis (20 g polifenoli/mg DW)
seguite da S. chamaedryoides (15 g polifenoli/mg DW). Sulla base di questi dati
abbiamo valutato l’attività antiossidante utilizzando 2 metodi di indagine: il dosaggio
del “radicale libero stabile” 2,2-diphenyil-picryl-hydrazyl (DPPH) (2) e il test della
lipossigenasi (3). In tali dosaggi il grado di attività antiossidante è stata espresso
come IC50 e comparato all’IC50 del BHT. Nel test del DPPH gli essudati
maggiormente attivi sono stati quello di S. cacaliaefolia e di S. namaensis (IC50 = 17
μg DW/mL e 21 μg DW/mL rispettivamente). Nel test della lipossigenasi la maggior
attività inibente il grado di perossidazione lipidica era ascritta a S. wagneriana (IC50
= 0,11 g DW/mL), S. fallax (IC50 = 0,13 g DW/mL) e S. buchananii (IC50 = 0,19 g
DW/mL). In ogni caso tutti e tre gli essudati avevano un’attività inibente maggiore
dell’antiossidante di riferimento. I vari essudati sono stati messi a confronto ed
analizzati statisticamente applicando l’analisi della varianza (one-way ANOVA) e il
post test Bonferroni. Un p < 0,05 veniva considerato come statisticamente
significativo.
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241
P 142
Caracterización quimiotaxonómica y evaluacion de la actividad
contra veneno de yarará de Nectandra megapotámica (Spreng.)
Mez.
Ricciardi Gabriela A.1, Torres Ana M.1, Camargo Francisco J.1, Agrelo de Nassiff
Ada E.1, Dellacassa Eduardo2, Ricciardi Armando I.A.1
República Argentina. e-mail: [email protected] ; 2 Cátedra de Farmacognosia y Productos
1
El aceite esencial de N. megapotámica (Spreng.) Mez., “laurel negro” tiene
propiedades antimicrobiana, antiinflamatoria y antitumoral (1); el extracto alcohólico
actividad analgésica y antiinflamatoria (2). Por otra parte, N. angustifolia (Schrad.)
Nees & Mart. ex Nees, “laurel amarillo” se cita como activa contra veneno de
víboras (3). Por ello, resulta interesante estudiar tal actividad en laurel negro contra
veneno de Bothrops neuwiedi diporus (yarará chica). Se colectó material vegetal de
N. megapotámica en Corrientes, se separó su aceite esencial (Ed) y el del agua del
destilado (Ea). Sus componentes se cuantificaron por GC/FID, identificándolos por
GC/EM (fases estacionarias SE 52 y Carbowax) y por índices de Kovats.
La actividad alexítera se evaluó por el tiempo de coagulación normal (TC), la dosis
coagulante mínima (DCM) y la Inhibición de la actividad coagulante del veneno de
los extractos de hojas en agua (N1), alcohol (N2) y hexano (N3); de los aceites (Ed)
y (Ea), midiendo el TC con el agregado de la mezcla previamente incubada de
veneno (extracto o aceites) durante 30 minutos a 37 ºC.
Se identificó el 94% de los componentes del aceite (Ed): 31% son hidrocarburos
terpénicos y 58% sesquiterpénicos. Aparecen en menor proporción los compuestos
oxigenados (4%), que se incrementan en el aceite de aguas 53%. Ea y N3
(concentración dependiente) presentaron actividad anticoagulante.
Esta actividad valida, en principio, la posibilidad del uso de la especie frente a un
accidente ofídico.
Referencias
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242
P 143
Phytochemical composition and antimicrobial activity of
essential oils from different parts of Ferulago campestris
growing wild in the Natural Park of Madonie (Sicily)
Serena Riela 1, Sergio Rosselli1, Maurizio Bruno1, Vivienne Spadaro2, Francesco
Napolitano3, Daniela Rigano3, and Felice Senatore3
1 Dipartimento di Chimica Organica, Università degli Studi di Palermo, Viale delle Scienze, I-90128
Palermo, Italy (phone: +39-091-596919; fax: +39-091-596825; e-mail: [email protected];
2 Dipartimento di Scienze Botaniche, Università degli Studi di Palermo, Via Archirafi 38, I-90123 Palermo,
Italy; 3 Dipartimento di Chimica delle Sostanze Naturali, Università degli Studi di Napoli “Federico II”, Via
Domenico Montesano 49, I-80131 Napoli - Italy.
Ferulago species have been used for long in folk medicine for their sedative, tonic
and digestive properties[1-3]. The phytochemical composition of the essential oil of
Ferulago campestris (aerial parts, flowers, roots and seeds), harvested in the
Madonie National Park (Sicily), was analyzed by GC and GC-MS. A total of 89
compounds were identified: 50 in the oil from aerial parts (94.0% of the oil), 61 in
flowers (93.0%), 44 in roots (83.7%) and 39 in seeds (93.4%). The main compounds
were 2,4,5-trimetylbenzaldehyde from aerial parts and seeds, whereas the isomer
2,4,6-trimetylbenzaldehyde was the major constituent in flowers and roots. The oils
were tested for their antimicrobial properties against eight different bacterial strains;
among the oils analyzed, only the one from seeds showed a relevant activity, and it
was found to be more active against Gram (+) bacteria.
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243
P 144
Composizione dell’olio essenziale di Centaurea stenolepis A.
Kerner raccolta in Bulgaria
D. Rigano1, C. Formisano1, F. Senatore1, S. Bancheva2, M. Bruno3, S. Rosselli3
Dipartimento di Chimica delle Sostanze Naturali, Università degli Studi di Napoli Federico II, via D.
Montesano 49, Napoli, Itali; 2Institute of Botany, Bulgarian Academy of Sciences, 1113 Sofia, Bulgaria;
3Dipartimento di Chimica Organica, Università degli Studi di Palermo, Parco d’Orleans II, I-90128
Palermo, Italia.
1
Centaurea (Asteraceae) è un genere estremamente vasto e complesso dal punto di
vista tassonomico, che comprende dalle 400 alle 700 specie a seconda del tipo di
classificazione usata. I centri primari di differenziazione sono l’Anatolia orientale e il
Caucaso, mentre il Mediterraneo e la penisola balcanica costituiscono i centri
secondari; in Bulgaria, sono state identificate circa 60 specie. [1,2]. Lo studio delle
caratteristiche morfologiche e fitochimiche delle diverse specie di Centaurea e delle
Centaureinae è particolarmente interessante, data la notevole complessità
tassonomica del genere. Per questo motivo ci siamo interessati dello studio
fitochimico di Centaurea stenolepis A. Kerner, una pianta perenne dalle foglie
lanceolate e dai fiori rosso porpora che cresce prevalentemente nell’Europa
Centrale. Le parti aeree di C. stenolepis sono state raccolte nel settembre 2006 in
Bulgaria, sul monte Vitosha nel distretto di Sofia, a 1800 m di altitudine. I composti
volatili della specie in esame, estratti per idrodistillazione, sono stati analizzati per
GC e GC-MS. Complessivamente sono stati identificati 60 composti, corrispondenti
al 91.4% dell’olio totale. I componenti presenti in maggiore concentrazione sono
cariofillene ossido (6.9%), esaidrofarnesil acetone (6.5%), epi-cedrolo (6.0%), acido
esadecanoico (5.5%) e p-vinil-guaiacolo (4.3%), ma nel complesso la frazione più
abbondante è quella dei sesquiterpeni (35.6%), soprattutto quelli ossigenati
(28.7%). L’abbondanza di sesquiterpeni e la bassa concentrazione di monoterpeni
(2.8%9) accomuna l’olio di C. stenolepis alla maggior parte degli oli essenziali di
Centaurea riportati in letteratura, che raramente sono caratterizzati dalla presenza
di monoterpeni [3].
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244
P 145
Determinación de compuestos bioactivos en algas marinas
Nurby Nahiely Rios Tesch1, Gerardo Medina2, Jose Manuel Jimenez2, Carlos
Alberto Yánez3
Laboratorio de Investigación de Medicamentos Orgánicos. 2Instituto de investigaciones-Sección
Biotecnología. 3Laboratorio de Toxicología. Facultad de Farmacia y Bioanálisis. Universidad de los
Andes Mérida
1
En Venezuela son escasas las investigaciones sobre compuestos marinos biológicamente
activos, razón por la cual en esta investigación se evaluaron propiedades bioactivas
antibacterianas, antimicóticas, hemaglutinantes y/o hemolisantes, y toxicidad, de extractos
(etanol, diclorometano, hexano) obtenidos de 11 especies de algas marinas colectadas en
las localidades de San Juan de Los Cayos y Chichiriviche, Estado Falcón, Venezuela. La
actividad antibiótica y antimicótica de los extractos se evaluó mediante la aparición de halos
de inhibición contra bacterias Gram positivas (Staphylococcus aureus), Gram negativas
(Pseudomona aeruginosa, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Escherichia coli) y el
hongo Candida albicans. Actividad antibacteriana, se encontró en: Acanthophora sp.,
Bryothamnion triquetrum, Gracilaria sp., Gelidium sp., Caulerpa mexicana, Caulerpa sp.,
Caulerpa ssp., Halimeda incrassata, Ulva sp., Codium decorticatum, Sargassum sp.
Diecinueve extractos presentaron actividad antibacteriana (7 con diclorometano, 6 con
etanol y 6 con hexano), de los cuales 15 fueron activos frente las especies gram (-) y 4
contra la especie gram(+). La actividad hemaglutinante y/o hemolisante se determinó
utilizando muestras de sangre humana (A, B, O, AB). De 11 extractos etanólicos probados,
8 exhibieron propiedades hemaglutinantes, de los cuales 4 provocaron lísis de los glóbulos
rojos. La aglutinación se manifestó principalmente en los grupos sanguíneos A y O,
mientras que la actividad hemolisante se observó en todos los grupos sanguíneos.
Ninguno de los extractos de algas ensayados presentó actividad antimicótica sobre
Cándida albicans. A partir del extracto etanólico obtenido de 50 g de Sargassum sp. se
extrajeron 7,9 g de manitol, identificado mediante las técnicas de Espectroscopía Infarroja y
Resonancia Magnética Nuclear, además sus extractos fueron los únicos que manifestaron
toxicidad frente Artemia salina.
Agradecimientos: FONACIT (Fondo Nacional de Ciencia y Tecnología), Ministerio de Ciencia y
Tecnología, Caracas, Venezuela, CEP (Consejo de Estudios de Postgrado), Mérida, Venezuela.
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246
P 146
Endemismos Canarios de aplicación tópica en el cuidado de
heridas
Jorge Cruz1, Bienvenida Rodríguez1, Juan Jiménez1, Eduardo Navarro2, Carla
Jiménez3, Rodrigo Chacón1
Universidad de Las Palmas de Gran Canária. Islas Canarias. España; 2Universidad de La Laguna. Islas
Canarias. España; 3Universidad San Pablo-CEU. Madrid. España
1
Introducción: Las Islas Canarias poseen una gran biodiversidad vegetal favorecida
por su origen volcánico y sus condiciones climáticas; en una mínima superficie, si la
comparamos con la extensión del Estado español, contiene a casi el 50% de las
especies endémicas presentes en España.
Desde muy antiguo, se constata
que los aborígenes canarios hacían uso de plantas medicinales para su
autocuidado: “…curaban así mismo las heridas con bálsamo odorífero, compuesto
de hierbas y flores salutíferas”1 En la actualidad persiste en la medicina popular el
recurso de aplicación externa de diversos preparados de plantas para el cuidado de
las heridas.
Objetivo: Elaborar un listado selectivo de plantas medicinales endémicas canarias
que por su tradición de uso popular, y por su composición química o actividad
farmacológica de sus principios activos, pudieran ser de utilidad para la aplicación
externa sobre heridas a fin de mejorar su evolución.
Especies: Aeonium ssp., Arbutus canariensis, Asparagus scoparius, Bosea
yerbamora, Campylanthus salsoloides, Ceropegia ssp., Dracaena ssp., Echium
pininana, Euphorbia balsamífera, Ferula linkii, Forskaolea angustifolia, Geranium
canariense, Hedera helix ssp. canariensis, Hypericum ssp., Ilex canariensis.
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247
P 147
Application of hyphenated techniques in the study of infusion
from Brazilian medicinal plants
Clenilson M. Rodrigues1, Miriam Sannomiya1, Marcelo A. da Silva1, Virginia
Carbone2, Paola Montoro3, Sonia Piacente3, Cosimo Pizza3, Clélia A. Hiruma-Lima4,
Alba R. M. Souza Brito5, Lourdes C. dos Santos1, Wagner Vilegas1
São Paulo State University, UNESP, Institute of Chemistry, Organic Chemistry Department, CP 355,
CEP 14800-900, Araraquara, SP - Brazil; 2Proteomic and Biomolecular Mass Spectrometry Center,
Institute of Food Science, CNR, Via Roma, 52 a/c, 83100, Avellino, Italy; 3Università degli Studi di
Salerno, Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, via Ponte Don Melillo, 84084 Fisciano (SA) - Italy; 4São
Paulo State University, UNESP, Institute of Bioscience, Physiology Department, CP 355, CEP 18618000, Botucatu, SP – Brazil; 5State University of Campinas, UNICAMP, Institute of Biology, Physiology
and Biophysics Department, CP 6109, CEP 13083-970, Campinas, SP - Brazil.
1
This study involves an attempt to standardize a useful method to the rapid
investigation of polar compounds from infusions, as well as to optimize conditions to
accomplish the isolation of the main secondary metabolites in these species. The
analytical study of infusions from the diverse Brazilian medicinal plants, including
Byrsonima (Malpighiaceae) species [1,2], Hancornia speciosa (Apocynaceae) [3]
and Davilla (Dilleniaceae) species [4] was performed by HPLC-PAD, direct ESI-MSn,
HPLC-MSn, whereas preparative separations includes GPC, HPLC and HSCCC.
The simultaneous use of different analytical techniques highlighted the diverse
classes of natural compounds contained in these infusions. As result, our group has
isolated and identified a number of compounds of high polarity, including B-type
proanthocyanidins, mono- to triglucosilated flavonoids and a galloylquinic acid
series (from mono- to pentagalloylquinic derivatives). The approach was useful not
only to verify the detailed chemical composition in this type of phytopreparation, but
also to provide with data that allowed to understand the origins of the biological
activities observed.
Acknowledgements: BIOTA/FAPESP Program and CNPq.
References
1.
Sannomiya, M. et al. (2007), Rapid Commun. Mass Spectrom. 21: 1393-1400.
2.
Sannomiya, M. et al. (2007), Nat. Prod. Commun. 2: 829-834.
3.
Rodrigues, CM. et al. (2007), Rapid Commun. Mass Spectrom. 21: 1907-1914.
4.
Rodrigues, CM. et al. (2008), Phytochem. Anal. 19: 17-24.
248
P 148
Cytotoxic activity of 15-oxo–kaur-16,17 epoxi-19-oic acid in
breast tumor cells
Rodrigues Juan R1, Mariugenia Monsalve2, Alfredo Usubillaga2, Francisco Arvelo1.
Laboratorio de Cultivo de Tejidos y Biología de Tumores, Instituto de Biología Experimental, Universidad
Central de Venezuela, Caracas; 2 Instituto de Investigaciones, Facultad de Farmacia y Bioanálisis,
Universidad de Los Andes, Mérida, Venezuela.
1
Ent-Kaurenoic acid and many natural derivatives of this terpene are known to have
interesting biological properties and can be easily obtained from gradiflorolic acid
which was first isolated from Espeletia grandiflora [1]. In this work we investigate the
possible antitumoral activity of this kaurene derivative in MCF7 cells, a breast
cancer tumor cell line. Cells were maintained in RPMI medium and grown in a
humidified incubator (5%CO2; 95%O2, 37°C). Cells were exposed to the compound
for 72 h at concentrations ranging from 5 to 25 ug/mL, and then evaluated for
citotoxicity, which was carried out by colorimetry, following the reduction of 3-(4,5dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT assay), measuring the
production of Formazán at 570 nm [2]. Statistical analysis was performed by student
t-tests and one-way ANOVA. The difference among means was considered
significant when p<0.05. Results showed that MCF7 cells exposed to this kaurenoic
derivative have a lower viable cells number in a dose-dependent manner,
comparing with the compound in presence of fribroblast cells (non tumor cell line),
reaching a percentage of cytotoxicity of 86,36 ± 0,37% and an IC50 of 9,99 ug/mL.
The results show that this kaurenoic derivative could be a potential antitumoral
agent due to its ability to be toxic to this breast tumor cell line.
References
1.
Ghisalberti, E.L. 1997. Fitoterapia. LXVIII, 303-325.
2.
Denizot, F., Lang, R. 1986. Journal of Immunology Methods. 89, 271-277.
249
P 149
Cytotoxicity and DNA fragmentation of a kaurenoic analog in
prostate tumor cells
Ruiz Yarimar3, Rodrigues Juan R2, Alfredo Usubillaga3, Mariugenia Monsalve3,
Francisco Arvelo2, Nardy Diez3, Iván Galindo-Castro3*
Central de Venezuela, Caracas; 2 Instituto de Investigaciones, Facultad de Farmacia y Bioanálisis,
Universidad de Los Andes, Mérida, Venezuela; 3Laboratorio de Genómica y Proteómica, Fundación
IDEA, Caracas, Venezuela.
1
Of the 20,000 plant species described in Venezuela, 1,500 are used for medicinal
purposes [1]. Ent-Kaurenoic acid and many natural derivatives of this diterpene
obtained from Espeletia grandiflora are known to have biological properties and can
be easily synthesized from gradiflorolic acid [2]. The present work describes the
ability of ent-15-oxo-kaur-16-en-19-oic acid to be cytotoxic and promote DNA
fragmentation in PC3 cells, a prostate tumor line. Cells were exposed to the
compound (72 h , 5 to 25 ug/mL), and then evaluated by colorimetry, following the
production of Formazán at 570 nm [3]. DNA fragmentation was assessed on cells
treated or untreated with this compound at its IC50. DNA was separated by
conventional electrophoresis on a 2.5% agarosa gel and visualized after
SYBRgreen® staining. Statistical analysis was performed by student t-tests and oneway ANOVA. Results showed that this kaurenoic derivative was cytotoxic in PC3
cells with an IC50 of 3,7 ug/mL. This result could be explained by a DNA
fragmentation pattern which is not observed in control cells. The results show that
this compound could be a potential antitumor agent with DNA fragmentation as one
mechanism of action.
References
1.
Taylor, P., et al. 2006. Pharmaceutical Biology. 44, 1-14.
2.
Ghisalberti, E.L. 1997. Fitoterapia. LXVIII, 303-325.
3.
Denizot, F., Lang, R. 1986. Journal of Immunology Methods. 89, 271-277.
250
P 150
Effect of a kaurenoic analog on prostate tumor cell growth and
caspase-3 activity
Ruiz Yarimar3, Rodrigues Juan R2, Alfredo Usubillaga3, Mariugenia Monsalve3,
Francisco Arvelo2, Nardy Diez3, Iván Galindo-Castro3
Central de Venezuela; 2 Instituto de Investigaciones, Facultad de Farmacia y Bioanálisis, Universidad de
Los Andes, Mérida, Venezuela; 3Laboratorio de Genómica y Proteómica, Fundación IDEA, Caracas,
Venezuela.
1
Espeletia schultzii WEDD, a Venezuelan specie, have been found to contain ent-15oxo-kaur-16-en-19-oic acid, a derivative of kaurenoic acid [1], which have been
reported active in human epithelial tumor cells [2]. In this work we investigate the
properties of this compound in PC3 cells (prostate cancer line) inducing activation of
caspase-3. Cells (106) were incubated with the compound (3,7 ug/mL) and the
number of viable cells was counted with a hemocytometer at 24h intervals for 96h.
106 cultured cells were incubated with the compound until 96h and caspase-3
activity was measured by fluorescence in presence of the substrate Ac-DEVD-AMC.
Statistical analysis was performed by student t-tests and one-way ANOVA. Results
show that the kaurenoic derivative exerts an antiproliferative effect on PC3 cells
which is more evident after 48 hours of drug exposure. When caspase-3 was
determined in cells treated with this diterpene, the compound was able to
significantly increase (1,8x) the activity of this protease compared to untreated cells.
These results show that this kaurene could have a potential antitumor activity in
prostate cancer, promoting apoptosis through caspase-3 activation.
References
1.
Usubillaga, A., et al. 2003. Acta Horticulturae. 597, 129-130.
2.
Sasaki, J., et al. 2002. Molecular Cancer Therapy. 1, 1201-1209.
251
P 151
Inhibition of globinolytic proteases by kaurenoic derivatives from
Espeletia schultzii
Rodrigues Juan R1, Mariugenia Monsalve2, Alfredo Usubillaga2, Gamboa Neira1
Laboratorio de Bioquímica, Facultad de Farmacia, Universidad Central de Venezuela, Caracas.
Instituto de Investigaciones, Facultad de Farmacia y Bioanálisis, Universidad de Los Andes, Mérida,
Venezuela.
1
2
Malaria is one of the major diseases in tropical world. It has 300-500 million cases
each year and causes 1,5-3 million deaths [1]. Hemoglobin degradation in
intraerythrocytic malaria parasites is a vast process which occurs in an acidic
digestive vacuole by aspartic and cysteine proteases to obtain free aminoacids
necessary for the parasite´s development [2]. In this research we investigated the
effects of five kaurenoic acid derivatives isolated from Espeletia schultzii Wedd (15keto karurene, 15-keto-16,17-epoxi kaurene, 15-acetoxi kaurene, 16,17-epoxi
kaurene and 15-acetoxi-a6,17-epoxi kaurene) on the proteolytic degradation of
hemoglobin by trophozoyte extracts of Plasmodium berghei. The proteolytic effect
on native mice hemoglobin was measured by SDS-PAGE 12.5% in reductive
conditions. The degree of digestion was evaluated by visual comparison of globin
bands (14,4 kDa) followed by densitometric analysis. Datas were statistically
analysed using t-tests; assuming 95 % of confidence. Results indicate that all
compounds were effective inhibiting the degradation of hemoglobin due to the
presence of intact band at 14,4 kDa in different degrees of inhibition, being 15-keto16,17-epoxi kaurene the most active (>90% of inhibition of globin proteolysis). This
result shows the possible antimalarial activity of kaurene derivatives.
References
1.
Weekly Epidemiological Record. (1997). W.H.O. 72, 269-292.
2.
Rosenthal P., J. 1995. Experimental Parasitology. 80, 272-281.
252
P 152
Terpenoides de las raíces de Stevia serrata Cav.
Ciro Rodríguez-Villanueva, Elier Galarraga-Montes, Enderson Andrade, Alí Bahsas
y Juan Manuel Amaro-Luis
Debido a la notable importancia que tiene el género Stevia (fam. Asteraceae) en la
medicina popular de muchos países, han surgidos numerosos estudios fitoquímicos
dirigidos al asilamiento y caracterización estructural de diversos metabolitos
secundarios, potencialmente activos desde el punto de vista biológico y/o
farmacológico. En conexión con lo anteriormente expuesto se decidió abordar el
estudio fitoquímico de la Stevia serrata Cav. El extracto en acetona de las raíces,
condujo al aislamiento de tres terpenoides, los cuales fueron caracterizados,
mediante estudios espectrales (IR, UV, EM, RMN-1H y RMN-13C y técnicas
bidimensionales de RMN), como el longipineno Rasteviona (1) y los triterpenos: 3acetil-20(S)-dammara-13(17),24-dieno (2) y epi-friedelinol (3). Estos triterpenos se
reportan por primera vez para esta especie y también se describe por primera vez
el estudio, mediante técnicas bidimensionales de RMN, del dammarano (2). Se
discute brevemente el papel que, probablemente juegan estos triterpenos en las
propiedades medicinales de esta especie(1). De igual manera se analiza la
importancia química de la planta como fuente de longipinanos, puesto que son
sustratos de interés para reacciones de reagrupamiento (2,3).
20
10
11
5
3
12
6
4
9
8
18
14
24
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OAng
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(2)
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(1)
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26
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13
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23
OH
1
2
30
29
21
15
O
24
23
(3)
Referencias
1.
Dzubak P., Hajduch M., Vydra D., Hustova A., Kvasnica M., Biedermann D., Markova L., Urban M.
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2.
Román L. U., Del Rio R. E., Hernandez J. D., Joseph-Nathan P., Sabel V. and Watson W. H., 1981.
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Stevia. Tetrahedron, 37, 2769-2778.
253
3.
P 152
Román L. U., Loeza-Coria M., Hernández J. D., Cerdá-García-Rojas C. M. and Joseph-Nathan P.,
1993. Preparation of New Longipinane Derivatives from Stevia serrata. J. Nat. Prod. 56. 11481152.
254
P 153
Composición química y actividad antibacteriana del
aceite esencial de Vismia baccifera var. dealbata
(Guttiferae) colectado en Venezuela
Janne Rojas1, Judith Velasco2, Antonio Morales1, Tulia Díaz3, Máthé Imre4 y Katalin
Veres4.
Grupo Biomoléculas Orgánicas, Instituto de Investigaciones. 2Departamento de Microbiología y
Parasitología. 3Departamento de Bioanálisis Clínico. Facultad de Farmacia y Bioanálisis, Universidad
de Los Andes, Mérida, Venezuela. 4Instituto de Farmacognosia, Universidad de Szeged, Eötvös Str 6,
6720, Szeged, Hungría.
1
El género Vismia pertenece a la familia Guttiferae, representada aproximadamente
por 50 géneros y 1200 especies, en su mayoría árboles y arbustos distribuidos en
América Central y del Sur. En Venezuela, existen quince especies dispersas en
todo el territorio [1]. Ha sido utilizado en la medicina tradicional para el tratamiento
de herpes, hongos, tiña, Leishmaniasis, escabiosis y eczemas. Estudios
fitoquímicos previos han reportado terpenos, lignanos, flavonoides, quinonas,
santonas, benzofenonas y cumarinas [2]. La presente investigación tiene como
objeto el estudio de la composición química del aceite esencial de Vismia baccifera
var. dealbata L.(Triana & Planch.), recolectada en Chiguará, Mérida-Venezuela, no
reportado hasta el momento. Las hojas frescas (2 kg) finamente cortadas, se
sometieron a hidrodestilación por 4 horas usando una trampa de clevenger. El
aceite obtenido (2 ml, 0.1 % m/v) se secó sobre sulfato de sodio anhidro y fue
analizado por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas en un
equipo HP GC-MS system, modelo 5890. Treinta y un compuestos fueron
identificados por comparación de sus espectros de masas con la base de datos
Wiley 6ta ed. y datos reportados en la literatura [3]. Los componentes mayoritarios
fueron: D-germacreno (15.76 %), -cadinol (14.51), epi- -cadinol (11.87 %), cariofileno (10.07 %) y -cadineno (7.45 %). Análisis de la actividad antibacteriana
del aceite usando el método de difusión en agar con discos mostró actividad contra
Staphylococcus aureus ATCC 6538, a una concentración inhibitoria mínima (CIM)
de 30 g/ml.
Referencias
1.
Aristiguieta L. (1973). Familias y géneros de los árboles de Venezuela. Universidad Central de
Venezuela. Edición Especial del Instituto Botánico, Caracas, Venezuela.
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Noungoue, D. et al. (2008). Phytochemistry. 69, 1024-1028.
3.
Adams R. (1995) Identification of essential oil components by GC/MS. Allured Publishing
Corporation, Carol Stream IL, USA.
255
P 154
Componentes volátiles del Plectranthus coleoides Benth.
(Lamiaceae)
Rojas L.1, Arzola J.2, Rangel N. y Usubillaga A.1
1Instituto de Investigaciones, 2Herbario MERF de la Facultad de Farmacia y Bioanálisis. Universidad de
Los Andes. Urb. Campo de Oro 5101, Mérida-Venezuela.
El género Plectranthus (Lamiaceae) contiene cerca de 300 especies,
encontrándose la mayoría en el África tropical, Asia y Australia. Muchas de estas
especies poseen diversas actividades farmacológicas1. El Plectranthus coleoides es
conocida como incienso y su aceite esencial ha sido estudiado previamente2. En el
presente trabajo se aíslan los componentes volátiles de las hojas frescas de P.
coleoides por arrastre con vapor de agua y fueron separados por GC-MS,
empleando un equipo Hewlett Packard 5973 GC/MS a 70 eV, utilizando una
columna capilar HP-5MS (30 m, 0.25 mm, 0.25 µm). Se empleó una temperatura
inicial de 60 ºC (1 min) y luego se calentó a razón de 3 °C/min hasta 260 ºC (20
min). Se inyectó una muestra de 1.0 mL de una solución al 2% del aceite esencial
en n-heptane con reparto de 100:1. Se utilizó una temperatura de inyección de 200
ºC. La identificación de los componentes del aceite se realizó mediante
comparación computerizada de los espectros obtenidos con los espectros de una
Librería Wiley (6ta Edición) y por el cálculo de los índices de Kováts. Se lograron
separar 25 componentes, los mayoritarios resultaron ser: carvacrol (66.24%), beta
cariofileno (12.34%) y alfa-humuleno (4.53). El componente mayoritario (un fenol)
daría a esta planta propiedades antisépticas. Los componentes reportados aquí
difieren de los reportados previamente.
Referencias
1.
Lukhoba, C., et al. (2006). J. of Etnopharmacology 103. 1-24
2.
Buchbauer, G., et al., (1993). J. Essent. Oil Res., %. 311-313.
256
P 155
Estudio de los componentes volátiles de dos especies de
Anethum graveolens L. del estado Mérida Venezuela
Rojas Y, Rojas L y Usubillaga A.
El Anethum graveolens, (eneldo) pertenece a la familia Umbelliferae. La planta es
una hierba erecta, aromática y anual que puede alcanzar el metro de altura. Es
utilizada como condimentos para carnes, salsas, estofados. Como planta medicinal
se utiliza como antiespasmódica, carminativa, diurética y para el insomnio. En el
presente trabajo se estudia los aceites esenciales obtenidos en dos localidades del
estado Mérida: San Rafael de Mucuchies (3.600 m.s.n.m.) y Las Gonzales (1.200
m.s.n.m.). El mismo consistió en aislar los componentes volátiles por arrastre con
vapor de agua utilizando una trampa de Clevenger, estos se identificaron por GCMS, empleando un equipo Hewlett Packard 5973 GC/MS a 70 eV, equipado con un
inyector automático, utilizando una columna capilar HP-5MS (30 m, 0,25 mm, 0,25
de 4 °C/min hasta 260 ºC (20 min). Se inyectó una muestra de 1,0 mL de una
con los espectros de una Librería Wiley (6ta Edición). Se determinaron los índices
de Kováts analizando conjuntamente las muestras con una mezcla de n-alcanos.
Se extrajo el aceite esencial de las hojas frescas, las plantas de Las Gonzales
dieron un rendimiento de 0,19% y las de Mucuchies 0,18%. Los componentes
mayoritarios identificados fueron: alfa-felandreno (39,55%), dill-eter (31,94%) y
limoneno (17,71%) para la primera y alfa-felandreno (56,70%), dill-eter (17,47%) y
limoneno (14,48%) para la segunda. La especie que crece a mayor altitud forma
menos dill-eter. Este compuesto tiene actividad como atrayente de insectos.
Referencias
Albornoz, A (1992). Medicina tradicional herbaria. Instituto Farmacoterapéutico Latino S.A. 423 p.
257
P 156
MatCAKE, a flexible toolbox for integrating 2D NMR spectra in
Matlab
Romano R., Rastrelli L., Acernese F., Barone F.
Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Università degli Studi di Salerno, Fisciano, Italy
MatCAKE (cake.unisa.it) is a toolbox for integrating 2D NMR spectra by the CAKE
(Monte CArlo peaK volume Estimation) [1] algorithm within the Matlab environment
(www.mathworks.com).
Quantitative information from multidimensional NMR experiments can be obtained
by peak volume integration. The standard procedure (selection of a region around
the chosen peak and addition of all values) is often biased by poor peak definition
because of peak overlap. CAKE is a simple algorithm designed for volume
integration of overlapping peaks. Assuming the axial symmetry of two-dimensional
NMR peaks, as it occurs in NOESY and TOCSY when Lorentz-Gauss
transformation of the signals is carried out, CAKE estimates the peak volume by
multiplying a fractional peak volume by an R factor, which is a proportionality ratio
between the total and the fractional peak volume, both evaluated with Monte Carlo
techniques.
Therefore, the peak volume can be estimated by integrating a known fraction of the
peak, and the fractional volume can be chosen so as to minimize the effect of
overlap in complex NMR spectra. The main advantage of CAKE is its simplicity as
difficulties in its use are comparable to those presented by methods that sum all
data points in a defined area. In fact, the user only has to select a peak slice not
overlapping with other peaks therefore avoiding the guess of the total contour shape
of the peak. Furthermore, CAKE is substantially independent on digital resolution
and SNR and allows an unbiased integration of overlapping peaks, giving a better
accuracy of thirty per cent respect to the traditional methods that sum all data points
in a defined area.
Due to the large number of software packages available for processing nuclear
magnetic resonance data, MatCAKE is designed just for implementing the new
CAKE algorithm. In MatCAKE, in fact, only already processed bi-dimensional
spectra are imported and, at the moment, the only volume integration (by CAKE and
by the most simple standard procedure) are allowed.
MatCAKE is a free software at disposal for the scientific community and will be
obtainable on line at the web address cake.unisa.it, which is in construction.
References
1.
Romano, R., et al., (2008), J. of Magn. Res., 192
258
P 157
The effect of Citrus bergamia Risso et Poiteau juice on ischemiareperfusion induced renal injury in rat
Pergolizzi S. 1, Rossi C.V. 2, Montagnese V. 2, Ursino M.R. 2, Miceli N. 2, Escolar J.3
1 Department of Foods and Environmental Sciences. Sal. Papardo, Messina; 2 Pharmaco-Biological
Department, School of Pharmacy, SS. Annunziata, Messina; 3 Department of Human Anatomy and
Histology, University of Zaragoza
Reactive oxygen species (ROS) play a key role in the pathogenesis of
ischemia/riperfusion (I/R) injury in renal parenchyma [1]. Oxidative stress can
promote the formation of a variety of vasoactive mediators that can directly affect
renal function by causing renal vasoconstriction, tubular necrosis or loss of
glomerular ultrafiltration rate, and reducing renal function [2]. Our previous studies
reported the antioxidant properties and phytochemical analysis of C. bergamia juice;
it contains high amounts of polyphenols, and is rich in flavonoids. The most
abundant flavonoid derivatives are neoeriocitrin, narigin and neohesperidin; among
them, naringin content is the highest [3]. In this study the effect of C. bergamia in a
model of renal I/R injury was investigated in rat. For the experiment the animals
were divided in two groups. The first group was treated with C. bergamia juice
(1ml/rat) for 15 days; the second group (control) received water (1ml/rat) for 15
days. At the end of treatment both groups underwent ischemia (45 min.) and
reperfusion. Histological evaluation of the ischemic kidney of both groups was
performed with PAS staining; moreover, a morphometric study with StatView
SE+Graphics program was carried out. In the controls renal tissue showed
morphological changes such as tubular cell swelling, cellular vacuolization with
pykcnotic nuclei, medullary congestion and moderate to severe necrosis. C.
bergamia treatment preserved the normal histology of renal tissue; in fact normal
morphology of glomeruli and slight oedema in tubular cells are evident.
Morphometric studies confirm these results. The protective effect of C. bergamia
treatment on is I/R renal injury could be partially attributed to the antioxidant activity
of the flavonoid compounds. It is well known that naringin, as most of the flavonoids,
has antioxidant, free radical scavenging and metal chelating properties; moreover it
exerts a protective effect against lipid peroxidation in I/R induced renal damage [4].
So, it could be hypotized that the protective effect of C. bergamia juice on renal
parenchyma is related to flavonoids ability to reduce oxidative damage in vivo.
References
1.
McCord, J.M. et al. (1985), J. Med. 312,159–253
2.
Bomzon, A. et al. (1997), Semin. Nephrol. 17, 549-562
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259
4.
P 157
Singh, D. et al. (2004), Pharmacol. Res., 50(2), 187-193
260
P 158
Estudio fitoquímico comparativo de flavonoides entre diferentes
especies de Smilax L. – Smilacaceae –
Rugna Ana, Gurni Alberto, Wagner Marcelo L.
Cátedra de Farmacobotánica, Departamento de Farmacología, Facultad de Farmacia y Bioquímica.
Junín 956, 4°P. (1113) Buenos Aires. República Argentina. e-mail: [email protected]
En la Argentina crecen 5 especies del género Smilax L. –Smilacaceae-, de las
cuales S. campestris Grisebach, S. cognata Kunth y S. fluminensis Steudel
están presentes en el Parque Nacional Iguazú, en la provincia de Misiones1.
El género Smilax L. corresponde a enredaderas dioicas rizomatosas, que crecen en
zonas cálidas y templadas. Las hojas de las 3 especies en estudio presentan
diferencias anátomo-morfológicas1. El objetivo de este trabajo es determinar si
existen diferencias en la producción de flavonoides entre S. campestris, S. cognata
y S. fluminensis que crecen en el Parque Nacional Iguazú. Se utilizó metodología
estándar de Mabry y col.2 para el aislamiento y la identificación de flavonoles y la de
Waterman3 para la determinación de proantocianidinas. Se determinó que, a
igualdad de condiciones, la producción de flavonoles y proantocianidinas resultó
diferente.
En S. campestris se observó la presencia de derivados 3-O-mono, di y
triglicosidados de quercetina y canferol y polímeros de procianidina; en S. cognata
se encontraron derivados 3-O-mono, di y triglicosidados de quercetina y 3-Odiglicosidados de canferol y polímeros y dímeros de procianidina y
propelargonidina; mientras tanto, S. fluminensis presentó derivados 3-O-mono y
diglicosidados de quercetina y derivados 3-O-diglicosidados de canferol y no se
detectó la presencia de proantocianidinas.
Con los resultados obtenidos se evidencia que la producción de flavonoides en las
3 especies estudiadas acompaña las diferencias anátomo-morfológicas. Por lo
tanto, los flavonoides resultarían buenos caracteres para diferenciar las tres
especies, S. campestris, S. cognata y S. fluminensis, que crecen en el mismo
ambiente natural. De esta manera, se podría utilizar a esos compuestos para
caracterizar los extractos o preparaciones fitoterápicas de S. campestris de las
otras dos especies.
Referencias
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Guaglianone, R & S. Gattuso (1991) Bol. Soc. Arg. de Botánica 27 (1-2): 105-12912.
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3.
Waterman, P. & S. Mole (1994) “Analysis of Phenolic Plant Metabolites”. Blackwell Scietific
Publication, Oxford, pags. 1-238.
261
P 159
Estudio comparativo de los componentes volátiles del
Callistemon speciosus cultivados en Mérida Venezuela
Saavedra A, Meza C, Rojas L y Usubillaga A
Instituto de Investigaciones de la Facultad de Farmacia y Bioanalisis. Universidad de Los Andes. Urb.
Campo de oro Mérida, Venezuela. C.P. 5101 [email protected]
El Callistemon speciosus o conocido también con su nombre común: Limpia tubos,
Escobillón rojo, es un arbusto resistente usado como planta ornamental. Este
pertenece a la familia Myrtaceae, la cual esta presente en la flora de Venezuela y
de otros países. Para los análisis de laboratorio se recolectaron 200 g de 3
individuos ubicados en la ciudad de Mérida, uno en el sector la Mata a una altura de
1300 m.s.n.m. y dos individuos del Jardín de Plantas Medicinales de la Facultad de
Farmacia y Bioanálisis a una altura de 1400 m.s.n.m. Estas muestras fueron
sometidas a hidrodestilación empleando la trampa de Clevenger por 3 horas
obteniendo 0,7mL, 1,1mL y 0,8mL de aceites de color amarillo respectivamente. El
análisis de estos, se realizó por cromatografía de gases empleando un equipo de
Marca Pekín Elmer modelo Autosystem equipado con una columna AT-5 de 60m de
largo y 0,25 mm de diámetro, también se uso un sistema GC/MS Hewlett Packard
MSD 5973 con una columna de fenil-metil-polisiloxano de 30 m x 0,25 mm (HP-5)
La identificación de los componentes se realizo con ayuda de una librería Wiley Ms
Data (sexta edición, 275 K Spectra). El análisis de los aceites muestra que los
individuos estudiados mantienen semejanza en los componentes mayoritarios, lo
que permite indicar que pertenecen a una misma raza química de esta especie. Los
componentes mayoritarios encontrados son: Eucaliptol de 47,28% a 53,31%, alfa
pineno de 9,86% a 11,02%, p-cymeno de 7,45% a 8,70% y limoneno de 4,02% a
5,57%; los cuales mantienen pequeñas diferencias en cuanto a concentración pero
que en ninguno de los casos fueron diferencias significativas. Por otra parte se
encontraron componentes distintos pero en muy baja proporción (<1%), esto se
debe posiblemente a las condiciones de riego y cultivo de los individuos estudiados.
Agradeciemientos a la dirección de asuntos estudiantiles de la Universidad de los Andes.
References
1.
Adams, R. P: (1995), Identification of essential oil components by gas chromatography mass
spectroscopy. ilinois (USA). Allered publishing corporation.
2.
Albornoz A. 1992 medicina tradicional herbaria. Instituto farmacoterapéutico latino. División de
fitoterapia y productos naturales.
3.
Venezuela.
262
P 160
Derivados del labdano aislados de las hojas de Zanthoxylum
rhoifolium Lam.
Santiago-Brugnoli, Laura V. y Rosquete-Porcar, Carmelo.
Los Andes. Mérida 5101. Venezuela.
Zanthoxylum rhoifolium Lam. (Rutaceae) está ampliamente distribuida en el
territorio venezolano y otros países del Hemisferio. A la infusión preparada con sus
hojas se le atribuyen actividades desinflamatorias, antitumorales, antileucémicas y
antimicrobiales1; también es usada en la Medicina Tradicional en la Guayana
Francesa como tratamiento preventivo contra la malaria2. Estudios recientes
confieren a los aceites esenciales obtenidos de las hojas y los frutos, actividades
bactericidas frente a microorganismos Gram positivos (Staphylococcus aureus) y
Gram negativos (Klebsiella pneumoniae y Salmonella setubal)3, asimismo se le han
determinado propiedades antitumorales.4
De la extracción con diclorometano y acetona de las hojas de Z. rhoifolium
colectada en los alrededores del Estado Mérida, Venezuela, se han separado e
identificado hasta el momento, además de otros compuestos, tres derivados del
labdano, dos de ellos epímeros, (13S)-labdano-8 ,15-diol (I) y (13R)-labdano-8 ,15diol (II) y un tercer compuesto, el 13(S)-8 -13-epoxilabd-14-eno (III).
CH3
CH3
CH3
CH3
13
13
CH3
OH
8
8
OH
H3C
CH3
(13 R) (I); (13 S) (II)
CH2
CH3
H3C
CH3
(III)
Referencias
1.
De Moura, NF.; et al. (1997). Phytochemistry, 46: 1443.
2.
Jullian, V.; et al. J. Ethnopham., (2006)106 : 348.
3.
De Abreu, W.; et al. (2003). Planta Medica, 63: 773.
4.
Da Silva, S.; et al. (2007). Eur. J. Pharm., 576: 180.
263
P 161
Ensaios de mutação gênica reversa para avaliação da
atividade mutagenica de Miconia cabucu e Miconia
rubiginosa
Varanda EA1, Rocha DC1, Cardoso CRP1, Rodrigues J2, Vilegas W2, Santos LC2
Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Araraquara – UNESP; São Paulo-Brasil;
Química de Araraquara- UNESP; São Paulo -Brasil
1
2
Instituto de
O gênero Miconia pertence à família Melastomataceae, com cerca de 1040
espécies vegetais, as quais se distribuem desde o sul do México até o norte da
Argentina e Uruguai. Essas plantas possuem diferentes sinonímias populares e em
geral, são utilizadas por populações locais para o tratamento de diversas
enfermidades, principalmente gastrintestinais. Considerando que todo medicamento
deve ser eficaz e seguro, é imprescindível avaliar os seus possíveis efeitos
adversos, entre eles, o potencial mutagênico. Para tanto, realizamos uma avaliação
da atividade mutagênica dos extratos metanólico e diclorometanico de M.
rubiginosa e M. cabucu através do Teste de Ames, utilizando-se as linhagens de
Salmonella typhimurium TA98, TA97a, TA100 e TA102 e empregando-se a
metodologia de pré-incubação. Foi verificado que os extratos metanólico e DCM de
M.rubiginosa e metanolico de M.cabucu apresentaram atividade mutagênica na
linhagem TA98. Esses resultados indicaram que os extratos podem causar
mutações pelo deslocamento do quadro de leitura do DNA. A análise fitoquimica
dos extratos das folhas dessas espécies é qualitativamente similar, apresentando
principalmente flavonóides glicosilados derivados da quercetina, além de ácidos
fenólicos, catequinas e taninos. Destacamos a importância desses estudos onde
The detection and evaluation of the mutagenic effect of plant compounds are of
fundamental importance in order to minimize the possible risks of these agents to
the humans health.
Agradecimientos: Projeto BIOTA-FAPESP.
264
P 162
Validación farmacológica y evaluación fitoquímica de extractos de plantas
medicinales de uso popular en Guatemala como anticancerígenos
Amarillis Saravia1, Hans Lorenzo2, y Ruth Molina1
Fondo Nacional de Ciencia y Tecnología, 1Departamento de Farmacología, Fisiología, Laboratorio de Productos
Naturales – LIPRONAT- y Bioterio. Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia. Universidad de San Carlos de Guatemala.
[email protected] y 2Instituto Nacional de la Salud e Investigación Médica – INSERM- Paris, Francia
Esta investigación generó conocimiento sobre plantas medicinales contra el cáncer por
medio de encuestas etnobotánicas realizadas en 7 áreas de la Republica de Guatemala
especialmente en el área rural, que representa la única alternativa terapéutica. Luego se
recolectaron las plantas que presentaron mayor respuesta en dichas encuestas y
fueron preparadas y enviadas al Instituto Nacional de la Salud y la Investigación Médica
– INSERM- , Paris, Francia(1) para ser estudiadas in vitro con procesos científicos de
alta calidad. Se procedió a la evaluación de la actividad anticancerígena de las hojas de
Cardosanto (Argemone mexicana), hojas de Jorobté (Cornutia pyramidata), hojas de
Apacin (Petiveria alliaceae), hojas de Aguacate (Persea americana) y rizoma de
Calahuala (Phlebodium pseudoaureum) por medio de la búsqueda de un efecto
proápoptósico de sus infusiones en células de cáncer de riñón (RCC7). Para la
observación del fenómeno pro-apoptósico se utilizaron técnicas como cultivo celular,
viabilidad por MTT, cuantificación de proteínas, lisado celular, citometría de flujo,
microscopía de luz, electroforesis en gel de poliacrilamida SDS-PAGE e
inmunotransferencia por medio de Western Blot. Además se evaluó in vitro la Dosis
Letal media (DL50) de las infusiones. Se presentó el mayor efecto proápoptósico con
Apacín (P. alliacea) y Aguacate (P. americana) y en menor medida para el cardosanto
(A. mexicana), Jorobté (C. pyramidata L.) y calahuala (P. pseudoaureum), el efecto fue
relacionado con la dosis, requiriéndose dosis altas para lograr el efecto deseado. A
través de ensayos macro y semimicro y cromatografía en capa fina se realizó la
caracterización fitoquímica de las 5 plantas. Se determinó que las particiones de las
especies vegetales que demostraron actividad positiva presentaron metabolitos
secundarios tales como alcaloides, cumarinas, antraquinonas, saponinas, flavonoides y
principios amargos.(2) Con estos resultados se concluye que las infusiones de hojas de
Apacin y de Aguacate, tienen mayor efecto antiapotósico según se demuestra en todos
los ensayos in vitro llevados a cabo en células de riñón RCC7, aportando así un estudio
que demuestra que dichas plantas si poseen actividad anticancerígena, comparados
con otros estudios en donde se reporta una actividad negativa en otras células de
cáncer de mama o próstata. Las plantas no demostraron toxicidad DL50 en ratones (3).
Referencias
1.
Hirsch, F. y Angevin, E. (1999b). CNRS, n° 99/05942; 2. Molina, R.Y. (2005). Tesis Ad Gradum. Facultad
de Ciencias Químicas y Farmacia. Univ. de San Carlos de Guatemala; 3. Saravia A. (2005). Manual de
265
P 162
ensayos toxicológicos y farmacológicos experimentales in vivo e in Vitro. Edit. Universitaria. Univ.
de San Carlos de Guatemala.
266
P 163
Validacion farmacologica y evaluacion fitoquimica de extractos
de tres especies vegetales comercializadas en Guatemala como
sedantes-hipnoticos
Amarillis Saravia, Maria Alejandra Ruiz, Claudia Roca y Cristian López
Fondo Nacional de Ciencia y Tecnología y Departamento de Farmacología, Fisiología, Laboratorio de
Productos Naturales – LIPRONAT- y Bioterio. Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia. Universidad
de San Carlos de Guatemala. [email protected]
La investigación fue orientada a la generación de conocimientoo botánico, fitoquímico y
farmacológico de tres especies usadas comercialmente como sedantes-hipnóticos en
Guatemala y popularmente conocidas con nombres de especies que no se encuentran en
el país. El propósito fundamental fue preparar extractos con diferentes disolventes
evaluando la actividad sobre el sistema nervioso central (SNC) en ratones machos por
diferentes pruebas farmacológicas.(1) Para cada especie se prepararon por extracción
fraccionada, cuatro extractos de diferente polaridad (hexano, cloroformo, acetato de etilo y
etanol) para establecer por las pruebas realizadas la posible composición química
responsable de la actividad. Se evalúo por pruebas macro y semimicro, la presencia de
metabolitos secundarios que podrían ser los responsables de la actividad farmacológica.
De los resultados obtenidos se confirma la hipótesis para Pasiflora (Passiflora edulis) Sims,
presentando una actividad reguladora del SNC, ya que fue la única que dio positivo para el
efecto hipnótico, con el extracto etanólico a dosis de 50 y 200 mg/kg de peso corporal y con
el extracto clorofórmico a dosis de 25 y 50 mg/kg de peso corporal. Al obtener el resultado
positivo se trabajó la toxicidad aguda (DL50) no presentándose ninguna toxicidad de los
extractos a dosis <500 mg/kg. Los extractos de Valeriana (Valeriana prionophylla) Standl. y
Tilo (Ternstroemia tepezapote Schlect. & Cham.), no presentaron actividad farmacológica
estadísticamente significativa comparada con el control, pero V. prionophylla fue
equiparable a V. officinalis por su composición química en el contenido de valepotriatos.(2)
Se evaluó la actividad citotóxica de los extractos por la prueba con nauplios de Artemia
salina, resultando que ninguno posee citotoxicidad por este modelo a concentraciones > 1
mg/mL.Con estos resultados se concluye que los extractos etanólico y clorofórmico de P.
edulis pueden utilizarse para el desarrollo de productos fitofarmacéuticos por sus
propiedades hipnóticas y sus componentes químicos, como un aporte para el desarrollo de
los recursos naturales del país. En el caso de V. prionophylla deberá evaluarse mediante
otros modelos para analizar la actividad sobre el SNC y en el caso de T. tepezapote se
requiere de pruebas más profundas para validar su uso popular.
Referencias
1.
Saravia A. (2005). Manual de Ensayos Toxicológicos y Farmacológicos Experimentales in vivo e in
vitro. Edit. Universitaria. Universidad de San Carlos de Guatemala
267
2.
P 163
Roca C. (2005) Evaluación comparativa de la acción sedante e hipnótica de un elixir fitoterapéutico
y la combinación de las plantas originales (Tesis). Guatemala: Facultad de Ciencias Químicas y
Farmacia Universidad de San Carlos de Guatemala, 78 p.
268
P 164
Sardinia as source of endemic plants and their molecular pattern
Anna Maria Serrilli1, Alessia Ramunno1, Mauro Ballero3, Mauro Serafini2,
Armandodoriano Bianco1
Consorzio Interuniversitario COSMESE - Viale S. Ignazio da Laconi, 13 - 09123 Cagliari. 1Dipartimento di
Chimica e 2Dipartimento di Biologia Vegetale Sapienza Università di Roma, 3Dipartimento di Scienze
Botaniche Università di Cagliari.
More recently particular attention is directed to the phytochemical studies of plants
growing in restricted areas, characterized by narrow limits. A wide variety of
climates, environmental, geological, geographical and biological conditions has led
to the diversification of species.
Here we report the results on the molecular composition of endemic plants of
Sardinia. In the Teucrium marum L. a new neoclerodane was isolated [1]. Loganic
acid and loganin were isolated for the first time in Galium corsicum Sprengel and in
Galium schmidii Arrigoni respectively and they are both present in Galium
glaucophyllum E. Schmid. 6-hydroxy-loganin, a rare iridoid, was isolated in
G.schmidii. Stachys corsica Pers. [2] and Stachys glutinosa L. [3] showed, together
with the presence of known iridoids, the occurrence of a new iridoid containig allose
as glycosidic component of the molecule. Gentiana lutea L., Verbascum
conocarpum Moris and Scrophularia trifoliata L. [4], present in Gennargentu area,
were also examined and the content in bitter compounds was also determined. In
the end, Genista cadasonensis Val., an endemic plant present in a restricted area of
the North-East Sardinia, was investigated and the presence of 6-hydroxy-genistein,
a rare flavonoid, was evidenced.
COOH
HO
O
H3C
Oglc
Loganic acid
COOH
COOCH3
HO
HO
O
H3C
Oglc
Loganin
HO
HO
O-Allose
O
Oglc
10-hydroxy-loganin
O
HOH2C
H
Oglc
5-allosiloxy-aucubin
HO
O
HO
OH
O
6-hydroxy-genistein
OH
The anti oxidizing activity of crude extracts and pure compounds was also
determined, confirming some traditional use of the described plants. In particular
significative anti oxidizing activity was showed to be present in the high polar
extracts of T. marum, and in the medium polar extracts of G. cadasonensis.
References
1.
Bianco A. et al. (2004), Nat. Prod. Res., 18, 557-564.
2.
Serrilli A.M. et al. (2005), Nat. Prod. Res., 19, 561-565.
3.
Serrilli A.M. et al. (2006), Nat. Prod. Res., 20, 648-652.
269
4.
P 164
Ramunno A. et al. (2006), Nat. Prod. Res., 20, 511-516.
270
P 165
Domesticación y cultivo de plantas medicinales nativas en Santa
Ana, Misiones
Rivas. MC., Fernández L., Galarco S y Sharry S.
Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales, UNLP-CIC. Diag. 113 Nro. 469, La Plata (1900), Buenos
Aires, Argentina. e-mail: [email protected]
Las plantas medicinales y aromáticas nativas constituyen uno de los recursos genéticos
más valiosos, como lo demuestra el uso cada vez más frecuente de productos herbolarios,
fitofármacos y condimentarios en todo el mundo.Es de destacar que la región bajo estudio
se caracteriza por la riqueza de su flora autóctona. En la actualidad este recurso está
seriamente amenazado por el avance de la frontera agrícola-ganadera, de la deforestación
y de la urbanización. Las plantas silvestres son recolectadas en forma indiscriminada y por
personas no calificadas, con lo cual se corre serio riesgo de la pérdida irremediable del
germoplasma nativo. Al mismo tiempo desaparece la tradición de uso ancestral de las
plantas por parte de los lugareños, quienes transmitían sus conocimientos de generación
en generación y hacían un uso racional del recurso. El Convenio de Biodiversidad (Eco Río
1992) estableció como uno de sus objetivos principales salvaguardar los derechos de los
países respecto a sus recursos fitogenéticos, Por otra parte y paradojalmente el mercado
actual demanda calidad y cantidad de este tipo de productos, los que para su
comercialización, deben ajustarse a estrictas normativas; tornándose por lo tanto,
indispensable la domesticación y cultivo de especies nativas silvestres y el mejoramiento
en busca de líneas de “elite”. Es claro que con germoplasma seleccionado y un adecuado
manejo del cultivo se logra calidad homogénea y sanidad controlada para la obtención de
un producto de calidad diferencial. Concomitantemente se plantea necesario lograr la
capacitación y formación de recursos humanos en la comunidad local, recreando el
sentido de pertenencia de los bienes que le brinda la tierra y convertirlos, en consonancia,
en fuente de trabajo y progreso para la región. Por tanto el objetivo del proyecto es el uso y
conservación de los recursos naturales, generando sistemas de producción dentro del
marco del desarrollo sustentable, e impulsar y promover alternativas que generen
microemprendimientos en las comunidades locales. Se está en condiciones de
intervenir, mediante un soporte científico-técnico adecuado y con el apoyo de entidades
intermedias, sobre la comunidad local poniendo en marcha programas de capacitación,
producción y comercialización a través de microemprendimientos. Las plantas
medicinales y aromáticas nativas, representan no sólo una fuente de ingresos, sino que
también proporcionan beneficios socio–culturales, estéticos y ecológicos. Avanzar en
estudios sobre la domesticación y propagación a escala comercial es de alguna manera
“sentar soberanía” sobre estos recursos que pueden potencialmente representar
importantes divisas para la región. Actualmente, gracias a este proyecto, se comenzó con
271
P 165
la producción de algunos fitofármacos a nivel local, así como el establecimiento de viveros
locales.
272
P 166
Uso de biotécnicas en la conservación, propagación y
mejoramiento de plantas medicinales de Santa Ana
Sandra Sharry
Centro Experimental de Propagación Vegetativa, Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales, UNLP-CIC,
CC 31, La Plata (1900), Buenos Aires, Argentina. E-mail: [email protected]
Este trabajo tuvo como propósito mostrar las oportunidades para el desarrollo que
surgen al vincular la riqueza en diversidad biológica del Municipio de Santa Ana con
las herramientas que ofrece la biotecnología moderna. Durante la última década,
se han llevado a cabo esfuerzos significativos para proteger y valorizar el
patrimonio biológico de las naciones. En la Provincia de Misiones, el patrimonio
biológico es uno de los más importantes del mundo, tanto por su riqueza de
diversidad biológica y endemismos, como por poseer un extraordinario acervo de
conocimientos tradicionales vinculados a la biodiversidad. Es necesario recalcar el
peligro de extinción en la que se encuentra parte de la biodiversidad vegetal del
planeta, debido al extractivismo y la amenaza por sobreexplotación de las
poblaciones existentes, requiriendo sistemas sostenibles, el reconocimiento de
estas especies en peligro y cultivos manejados adecuadamente que permitan la
conservación.La producción sostenible de plantas medicinales y aromáticas y su
utilización como fuente de fitoterápicos es un campo relativamente nuevo, pero con
el esfuerzo de los investigadores, las nuevas políticas de desarrollo y el interés de
las compañías farmacéuticas y otras industrias de alimentos y cosméticos, se
visualiza como un campo de futuro para el desarrollo de la región.A pesar del
potencial estratégico de esta biodiversidad, los escasos recursos disponibles se
han orientado a estudios de tipo fitoquímico y desarrollos agrotecnológicos en
menor escala, lo que no ha permitido el desarrollo sustancial de estos cultivos. Sin
embargo la evaluación de especies medicinales hace parte del conocimiento de
esta diversidad biológica, sobre todo en áreas como colecta y caracterización de los
recursos, estudios filogenéticos, biología, química, farmacología, biotecnología,
bioprospección, industria, entre otros con los consiguientes beneficios económicos.
El aprovechamiento y conservación, la biotecnología y bioquímica, son áreas
importantes que requieren atención para el conocimiento y desarrollo integral de las
plantas medicinales y aromáticas y deberán ser consideradas en la legislación y las
posibilidades de mercado. De allí la necesidad de la participación de diferentes
sectores para su recuperación, manejo y conservación con el propósito de ofrecer
alternativas agrícolas y de salud buscando nuevos mercados para estos
productos.En este contexto, la biotecnología moderna ofrece la oportunidad de
convertir la biodiversidad en factor de desarrollo económico y social a través de su
256
valoración, uso sostenible y conservación. La formación de capacidades e
infraestructura para la biotecnología es vista por el Gobierno Argentino como clave
para el desarrollo económico del siglo XXI (Ver Plan estratégico de Biotecnologìa
SAGPYA, Plan de Ciencia y Tecnica, Plan Estrategico INTA). Ello se ha traducido
en un significativo apoyo del sector público, a través de varios mecanismos que
incluyen el financiamiento y que abordan diversas áreas tales como: formación de
recursos humanos a todos los niveles, incluyendo el área de gestión de negocios
biotecnológicos; apoyo a la investigación en ciencia y tecnología; promoción del
desarrollo empresarial (con especial énfasis en el fortalecimiento de los vínculos
entre universidades y empresas, desarrollo de incubadoras de empresas
biotecnológicas y creación de entidades de transferencia tecnológica);
estructuración del marco regulatorio e institucional apropiados, incluyendo derechos
de propiedad intelectual y bioseguridad; conformación de mecanismos para facilitar
la participación pública e impulso a la cooperación internacional con los países que
puedan ofrecer mercados, capital, tecnología y otros insumos productivos. Este
trabajo sintetiza tres amplios estudios, el primero de los cuales se refiere a las
estrategias de conservación de recursos medicinales, aromáticos y ornamentales
nativos. El segundo ofrece un análisis consolidado de las herramientas
biotecnológicas para el mejoramiento y valoración de la biodiversidad de la zona de
Santa Ana.Por último, un tercer estudio analiza las posibilidades de propagación de
plantas medicinales mediante el uso de biotecnología.
274
P 167
Componentes volátiles de la Persea americana Mill. que crece en
Venezuela
Sheen R.1, Rojas L.1, Usubillaga A.1
Instituto de Investigaciones. Facultad de Farmacia y Bioanálisis. 2 Jardín de Plantas. Facultad de
Farmacia y Bioanálisis. Urb. Campo de Oro. Universidad de Los Andes. Mérida-Venezuela. Email:
[email protected]
1
El género Persea (Lauraceae) comúnmente llamado Aguacate, es un árbol o
arbusto de flores hermafroditas y fruto globoso o elipsoideo. Cerca de 60 especies
se distribuyen en los países tropicales de América y del mundo. En Venezuela
existen unas 15 especies en la Cordillera Andina, Cordillera de la Costa, Llanos
Occidentales y Estados Orientales. Las hojas y corteza son utilizadas en medicina
domestica, debido a su alto contenido en taninos. En el presente trabajo se
separaron los componentes de las hojas de Persea americana, por hidrodestilación
empleando la trampa de Clevenger por tres horas obteniendo de 1Kg de hojas, 1
mL de aceite. La identificación de estos se realizó mediante un sistema GC/MS
Hewlett Packard MSD 5973, con una columna de fenil-metil-polisiloxano de 30m por
0,25mm (HP-5). La identificación de los componentes se realizó con ayuda de una
librería Wiley MS Data (6ª Edición, 275K Spectra). Se determinaron los índices de
Kováts analizando conjuntamente la muestra con una mezcla de n-alcanos
obteniendo un aceite de color amarillo con un rendimiento de 0,1%. Un total de 35
constituyentes fueron identificados siendo los mayoritarios: -cariofileno (56,62%),
germacrene-D (11,24%) y -humuleno (8,27%).
Referencias
1.
Leandro, A. (1973). Familias y géneros de los árboles de Venezuela. Edición especial del Instituto
Botánico.
2.
Pino, J. et al. (2004), J. Essent. Oil Res, Vol 16, p 139-140.
275
P 168
Aloin loaded matrix tablets for topical treatment of oral cancer
Siragusa M.G., De Caro V., Giandalia G., Giannola L.I.
Università di Palermo, Dipartimento di Chimica e Tecnologie Farmaceutiche, Via Archirafi 32, 90123
Palermo, Italy
Herbal medicines are still prevalent, and serve the medicinal needs of a large
population around the world [1]. Aloe is one of the few medicinal plants that have
maintained their popularity for a long period of time. This plants containing aloin,
aloe emodin, and structurally related anthraquinones have long been used as
traditional medicines and in the formulation of retail products such as laxatives,
dietary supplements, and cosmetics. Aloin is one of the major anthraquinone
components found in aloe plant. It has been shown that Aloin induces dosedependent apoptosis on cancer cell lines [2].
Oral cancer is a common malignancy in most of the world. The poor prognostic
outcome of oral cancer is due to its resistance to current therapies [1]. Successful
treatment with chemotherapeutic agents is largely dependent on their ability to
inhibit cell growth and/or induce differentiation. Conventional systemic
chemotherapy regimens are associated with severe toxicity and morbidity potentially
relevant to the survival rate [3]. Recently, natural anthraquinones from Aloe have
proved to be effective for their apoptotic effects also on oral cancer [1].
On the basis of these considerations, in this study we report the design and
formulation of a new Eudragit RS100 matrix system containing Aloin (10% w/w) to
be topically applied on cancerous lesions of buccal mucosa. This non conventional
buccal formulation releases Aloin with a controlled release rate. Tablets were
developed and prepared by direct compression of preformed drug loaded
matrices.
In vitro drug liberation tests were performed to evaluate the release rate of Aloin
from tablets. The collected data showed that the drug is slowly discharged from
buccal tablets following a typical Higuchian trend [4]. Our results support the idea
that Aloin loaded matrix tablets may be useful for the prevention and/or treatment of
patients with oral cancer.
References
1.
Xiao B. Et al., Oral Oncology (2007) 43, 905– 910
2.
Buenz E.J., Toxicol. in Vitro (2008) 22, 422–429
3. Kovacs A. F., et al., J. CranioMaxillofac Surg. (1999), 27,
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276
P 168
4. Giannola L.I. et al., Int.J. Immunopathol. Pharmacol.
(2005), 18, 21-31
277
P 169
Enteric aloin loaded microparticles for treatment of colorectal
cancer
Giannola L.I., Siragusa M.G., Giandalia G., De Caro V.
Università degli Studi di Palermo, Dipartimento di Chimica e Tecnologie Farmaceutiche, Via Archirafi 32,
90123 Palermo, Italy
Aloins are the major constituents with known therapeutic activity of the dried juice of
the leaves of Aloe barbadensis Miller.
Aloins are a group of hydroxyanthracene derivatives mainly constituted of
anthraquinones such as Aloin A , Aloin B and Aloe-emodin. Human intestinal flora
is able to transform Aloin A and Aloin B in Aloe-emodin which has been intensely
investigated as an antineoplastic agent since it is believed to induce apoptosis,
alters cell cycle, involves reactive oxygen species and affects mitochondria [1]. Its
additional inhibitory effects on angiogenic and metastasis regulatory processes
make Aloe-emodin a sensible candidate as a specific blocker of tumor-associated
events [2]. Aloe-emodin is produced in the large intestine and acts specifically on
the colon.
On the basis of these considerations, in this study we report the design and
formulation of a new enteric microparticulate system able to deliver Aloins
specifically in the colon for treatment of colorectal cancer.
The microparticulate drug delivery system was prepared by the solvent evaporation
method using Cellulose acetate butyrate, chosen as gastroresistant polymer for the
entrapment of Aloin. Reproducible, discrete, non-cohesive, free-flowing
microparticles were obtained.
The drug release was assessed in vitro, and the kinetic of Aloin transferred in
simulated gastrointestinal environment was evaluated. Drug release was followed
by periodically measuring the amount released in the simulated acceptor fluid by UV
spectrophotometric quantitative analysis. Kinetic behaviour was evaluated by
plotting the percent amount of drug released versus time. In simulated gastric juice
no Aloin was observed whereas in colonic environment Aloin is released gradually.
The obtained data suggested that adequate drug concentrations in intestinal juice
could be maintained for a prolonged period after administration of Aloin loaded
microparticles.
References
1.
Buenz E.J., Toxicol in Vitro (2008) 22, 422–429
2.
Srinivas G., Med. Res. Rev. (2007) 27, 591-608
278
P 170
Antimicrobial and cytotoxicity of Lapachol and Lapachol
methylated
Soares, V. C. G1,2, Paula, V. I2, Bonacorsi, C1, Raddi, M. S. G1
Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Rua Expedicionários do Brasil,1621, 14801-360, Brasil;
Faculdade de Tecnologia,UNANCHIETA, Rua Bom Jesus de Pirapora,100, 13270-270, Brasil.
1
2
The search for new antimicrobial agents is an important line of research because of
the resistance acquired by several pathogenic microorganisms [1]. The prevalence
of antimicrobial drug resistance is now so high that all patients infected with
Helicobacter pylori should be considered as having resistant infections [2]. The
purpose of this study was to compare the basal cytotoxicity and antimicrobial in vitro
activity of Lapachol and Lapachol methylated. Lapachol was extracted from the peel
of the wood of yellow ipê, Tabebuia avellanedae, through a basic solution. The
obtained product was recristalized in dichlorometane/hexane. The methylation of
lapachol was performed of reaction of 2 equivalent of methyl iodide and 0,1 M of
potassium hydroxide in solution of dimethyl sulfoxide at temperature room for 24
hours. The lapachol and methyl-lapachol were characterized for 1H, 13C NMR. The
strains for antimibacterial activity were ATCC 25925. To assess the minimal
inhibitory concentration (MIC) microplates were filled with 0,1mL of serial two-fold
dilutions (500 to 0,12 g/mL) of the substance test. A standardized number of
bacteria (106 CFU/mL) were inoculated into each well. After 24h, the MIC was
determined as the last dilution at wich no increase in visual turbidity was observed
[3]. The viability was assayed with the neutral red uptake assay in Mac Coy cells
after 24h of exposition [4]. Studies on MIC for Helicobacter pylori showed that
lapachol metiled has an activity twofold greather than lapachol, and vancomycin
(control). On the other hand, this work makes evident that change hydroxyl groups
for methyl on position enolic carbon increase the cytotoxicity of lapachol. These
work suggested that cytotoxicity and antibacterial may be mediated in part to
changes in the structural of lapachol.
References
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Oliveira, C. G. T. et al. (2001), J.Braz. Chem. Soc.,12, 339-45.
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279
P 171
Pharmacological modification of BTHTX-I induced by Lapachol
Soares, V.C.1; de Santis, L.H1; Fagundes, F.H1,2.; Paula, V.I.1; Marangoni, S.2;
Toyama, M.H.3
1 Unianchieta, Jundiaí, SP, Brasil. 2 Departamento de Bioquímica, Instituto de Biologia (IB), UNICAMP,
Campinas, SP, Brasil; 3 UNESP, Campus do Litoral Paulista, São Vicente, SP, Brasil.
Lapachol (naphthoquinone) is a compound naturally encountered as constituent of
many Bignoniaceae family plants. It has been the subject of much interest for a
number of the years due its various biological activities [1, 2, 3]. The present study
investigated the activity of lapachol in B. jararacussu venom and in the K49 PLA2
isoform (BthTx-I) in edematogenic, hemorrhagic and myotoxic activity. Edema was
induced by intradermal injection, in the foot pad of mice, of B. jararacussu venom
and purified BthTx-I. Myotoxicity was measured by the increase in plasma creatine
kinase activity at 3 hours after intramuscle injection. The histological changes were
observed into the muscle at 3 hours after injection of the test solutions. Hemorrhagic
activity was assayed according to the method of Nikai et al. (1984). Inhibition
studies were performed by incubating venom and BthTx-I with Lapachol at different
ratios (1:1 and 1:2). This study showed that the hemorrhagic activity caused by
intradermal injection of B. jararacussu venom were significantly neutralized by the
Lapachol at a ratio of 1:2 (w/w venom:extract). The Lapachol induced significant
decrease to myotoxic effect, this was shown by decrease the creatine kinase levels
induced by native BthTx-I. The histopathological alterations seen in skeletal muscle,
treated with BthTx-I, involve many degenerative events, including hypercontraction
and myofibril disorganization. However these histopathological alterations seen in
the muscle showed a reduction when the BthTx-I was treated with the Lapachol.
Lapachol was capable of induced significant decrease in the hemorrhagic activity
and inflammatory activity in paw edema induced by crude venom, and the BthTx-I.
These results indicate that the Lapachol change the myotoxic, edematogenic and
hemorrhagic activity of BthTx-I. Recent studies suggest that the Lapachol can
modify the structure of amino acids. Although, more studies are demanded to
elucidate its mechanism of action.
Acknowledgements: UNIAnchieta, FAPESP, CNPq and CAPES.
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1.
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Nikai, T. et al (1984), Arch. Biochem. Biophys., 231, 309-311.
280
P 172
Composición y actividad antibacteriana in vitro del aceite
esencial de la Oyedaea verbesinoides DC. de Venezuela
Solórzano M.1, Villarreal S.1, Velasco J.2, Díaz T3, Rojas LB1, Usubillaga A.1,
Ramírez-González I.1
1Instituto
de Investigaciones, 2Departamento de Microbiología y Parasitología, 3Departamento de Bioanálisis
Clínico, Facultad de Farmacia y Bioanálisis, Universidad de Los Andes, Mérida, Venezuela. CP 5101. E-mail:
[email protected]
En el presente trabajo se expone el estudio de la actividad antibacteriana del aceite
esencial de la especie Oyedaea verbesinoides, perteneciente a la familia
Asteraceae. Ésta, tiene gran importancia, ya que a la misma se le han atribuido
diversas propiedades. Desde el punto de vista fitoquímico, la familia Asteraceae se
caracteriza por biosintetizar una gran variedad de metabolitos secundarios tales
como: flavonoides, fitomelanos, poliacetilenos, lactonas sesquiterpénicas,
terpenoides, como diterpenos de las series del labdano y kaurano, esteroides y en
menor proporción, cumarinas y alcaloides1. Por otro lado, un número considerable
de estos productos resultan interesantes por la variada gama de actividades
biológicas y farmacológicas que poseen. El material vegetal fue recolectado al pie
de la montaña Lomas de los Ángeles, a las afueras de la ciudad Mérida en el
estado Mérida–Venezuela. La Muestra (2 kg de hojas frescas), fue sometida a una
extracción por arrastre con vapor de agua, empleando la trampa de Clevenger2,
durante 3 horas, obteniéndose 0.5 ml de aceite. La actividad antibacteriana se
determinó por el método de difusión en agar con disco3, contra: Staphylococcus
aureus (ATCC 6538), Enterococcus faecalis (ATCC 29212), Escherichia coli (ATCC
25922), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) y Klebsiella pneumoniae (ATCC
23357). Se utilizó como control positivo para cada uno de los microorganismos los
siguientes antibióticos: ampicilina-sulbactam® (10 g/10 g), vancomicina® (30 g),
gentamicina® (10 g), ceftazidima® (30 g) y aztreonam® (30 g). El aceite mostró
actividad contra S. aureus con un valor de Concentración Inhibitoria Mínima (CIM)
de 180 g/mL. Este es el primer reporte sobre actividad antibacteriana del aceite
esencial de la O. verbesinoides.
Referencias
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P 172
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282
P 173
Cytotoxicity of essential oils from flowers and leaves of Croton
caracasana
Alirica I. Suàrez1, Katiuska Chavez2, Elsa Mateu1, Luís Vasquez1, Giovannina
Orsini1, Reinaldo S Compagnone2, Francisco Arvelo3
Facultad de Farmacia, Universidad Central de Venezuela, 2Escuela de Química, Facultad de Ciencias,
Universidad Central de Venezuela, 3Instituto de Biología Experimental (IBE), Facultad de Ciencias,
Universidad Central de Venezuela
1
Within a systematic study on the chemical composition of the essential oils from some
Croton (Euphorbiaceae) species from Venezuela, we have already published the results
of three of them [1-2]. Many Croton species are used in traditional American medicine for
their anti-inflammatory, antinociceptive, anticancer, and, hypoglycaemic properties and
its essential oils are of common use to treat health disorders [3]. Continuing our
investigation on the composition and pharmacologycal evaluation of the essential oil of
the species endemic in our country from this genus, we present here the chemical
composition and the screening against: human colon adenocarcinoma cell line LoVo,
human colon carcinoma cell line X-17, human uterus cell line HeLa and normal fibroblast
of the volatile oils of flowers and leaves of Croton caracasana. The essential oil of this
specie, have not been investigated previously, the isolation of two 3,4-seco-entkaurenes
was recently reported by us [4]. Aerial parts of the plant were collected during the period
of full flowering. The isolation of the essential oil was carried out by hydrodistillation using
a Clevenger type apparatus. The compositions of the essential oils were elucidated by a
combination of GC and GC-MS. The main components identified from the flowers oil
were fenchyl acetate, α-cubebene, caryophyllene oxide, calamene, spathulenol, selinene, and α-caryophyllene. The oil from the leaves gave fenchyl acetate, α-selinene,
humolene oxide, β-bourbene as major constituents. The cytoxicity of these oils was
evaluated by the MTT method. The essential oils from flowers and leaves showed
moderate cytotoxicity against the cancer cell lines and the normal cell line used in the
current investigation. The results are interesting due that the IC50 values obtained with
the normal fibroblasts indicated that the tumor cells are more sensitive to the oils
components, due that the IC50 is practically the half of the values obtained with the
normal fibroblast. Some of the components in high concentration such as terpinen-4-ol,
D-limonene, spathulenol, cadinol, -elemene-have been reported with activity against
breast cancer, colon cancer, gastric cancer cells] and lung, ovarian and laryngeal cancer
cell lines.
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284
P 174
Physiochemical and microbiological analysis of pasteurized
Human Milk from Marília, Brazil
Mendonça C.C.T.N1, Domingues S.M.O.2, Marinelli P.S1, Bassan J.C, Silva J.C.P1,
Tanaka A. Y1
1 FATEC-university of Ciència and Technology of Marília, Marília/SP, Brazil;
Marília/SP, Brazil. E-mail: [email protected]
2
Human Milk Banc,
The human milk is a rich food in nutrients and protection factors, mainly for the
babies in the first six months of life, as well as to the premature new borne. The
human milk bank of Marilia, assists the nurseries of all municipal district and of
mothers that don't have milk for some physiologic or emotional problem. Thus, is
necessary to maintain program of quality control mainly of the microbiological (total
coliforms, fecal and E. coli) and of the physiochemical (acidity in Dornic-ºD) of those
human milk. Due the relevance of the theme, we aimed to evaluate the quality of
the pasteurized human milk (PHM) through the microbiological and physiochemical
analyses. 865 samples of PHM were analyzed during July to October of 2007. The
analyses were done following the Standard Methods for Dairy Products. According
of the Health Ministry Resolution, among 865 samples analyzed, a total of 129
(15%) samples were considered inappropriate for the consumption, including 80
(9,4%) of the total coliforms, 27 (3,1%) of fecal coliforms and 22 (2,5%) of E. coli
.For acidity, 236 (27,3%) samples showed value up to recommended by specific
legislation. The results showed the necessity of more rigidities control of PHM, and
urgent implantation of Good Practices of Manipulation to guarantee a safe food for
the newly born.
Acknowledgement: Human Milk Banc and Secretary Health Marília
285
P 175
Search of aflatoxins present in peanut distributed by a national
dealer of Marilia, Brazil
Silva A.R1, Mendonça C.C.T.N1, Oshiiwa M1, Marinelli P.S1, Leite S.R.A.2, Tanaka
A. Y1
FATEC - Faculty of Food Technology – Marília /SP, Brazil;
Araraquara /SP, Brasil. E-mail: [email protected]
1
2
Instituto de Química – UNESP –
The peanut (Arachis hupogaea L.) is a species in the legume family Fabaceae
native to America. Their seeds are oleaginous and have a great nutritional value. It
is broadly used in the food industry and also consumed "in natura" and in
homemade goodies. The sanitary control of the peanuts is obligatory, once the
seed is an excellent substratum for some toxigenic fungi development. Due the
prevalence of tropical and subtropical climate, Brazil offers ideal conditions for the
development of such fungi, mainly Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus,
producing of aflatoxins with potent carcinogenic, mutagenic and teratogenic
activities. Marília city, SP, is an important peanut agribusiness center and for that
we considered relevant to evaluate the occurrence of aflatoxins in this area. The
material was obtained from a local wholesale dealer. From January 2005 to
January 2008, 1627 samples of three peanut varieties were analyzed, namely:
Runner (873), Tatu (600) and Caiapó (154), by the fluorimetric method
"AFLATEST - VICAM" (AOAC validated). According to ANVISA (Brazilian National
Sanitary Surveillance Agency), the concentration of aflatoxins in the peanut cannot
exceed 20 μg/kg. Among the analyzed samples, 10,9% (57/873) of the Runner
variety, 14,1% (38/ 600) of the Tatu variety and 2,6% (3/154) of Caiapó variety,
showed value of aflatoxins above 20 μg/kg. Concluding, the prevalence of
contamination is expressive and this represents a risk to the consumer's health.
286
P 176
Propiedades curativas/nutricionales de macromicetos silvestres
del bosque pino-encino de Agostitlan, Michoacan. México
Maria Judith Tello Suarez, Ma. Teresa Alvarez Ramírez
Lab.Parasitología y Nutrición. Fac. Biología.UMSNH Edf. B4.CU. CP. 58060 .Morelia. Mich. México.
Los macromicetos en asociación con los micromicetos y otros microorganismos,
son componentes vitales en el ecosistema del bosque, interviniendo directamente
en los ciclos biologicos, transferencia de nutrientes, calidad de suelos etc. Por tal
motivo es necesario la conservación de estos ecosistemas como reservas
ecologica (2,3). Así tambien en la diferentes estaciones de año su poblaciones
aumentan principamente en epoca de lluvia, bridando alimento y principios activos
que se utilizan para regular el sistema inmune en padecimiennto como el cancer,
diabetes,ulceras gastrica y de piel etc. Sin enbargo algunos son tóxicos. Por lo que
es importante el conocimientos de las propiedades de estos hongos presentes en
esta comunidad (1,3). El objetivo de este trabajo fué realizar un registro de los
hongos presentes en este bosque y determinar sus propiedades. La metodología
fué de campo, identificación taxonomica. Los resultados muestran un registro de
30 familias, 250 especies, 90 macromicetes comestibles, 25 hongos venenosos, 12
de uso medicinal (5 inmunorreguladores, 3 anticancerigenos, 4 antiulcerativos) 9
hongos con propiedades alucinogenas y 115 con asociaciones simbióticas
mutualista con otras especies del bosque. Los hongos comestible de mayor
comercialización son; Amanita caesarea, Hypomyces lactifluorum principalmente
este último donde su producción silvestre es de 10 Ton/has, es rico en proteínas y
minerales adémas de sus metabolitos secundarios presentan propiedades
inmunorreguladoras. Consideramos que es importante el conocimiento de estos
recursos naturales para su conservación y buen uso.
Referencias
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Michoacán. Estudio de Estudio de Estado. ISBN: 970 900 0284. P.265
287
P 177
Almond (Amygdalus communis L.) skins: phenolic profile and
protective effect on protein oxidation
Tomaino A.1, Mandalari G.1,2, Arcoraci T.1, Martorana M.1, Monteleone D.1,
Trombetta D.1, Bisignano G.1, Wickham M.S.J.2, Saija A1.
1
2
Dept. Farmaco-Biologico, Facoltà di Farmacia, Università di Messina, Vill. Annunziata, 98168 Messina
Model Gut Platform, Institute of Food Research, Colney Lane, NR4 7UA, Norwich (U.K.)
Different studies indicate that reactive oxygen species (ROS) can inactivate proteins
by modification of amino acid residues and this process could be implicated in the
pathophysiology of different diseases.
Almond (Amygdalus communis L.) seeds are traditionally associated with
Mediterranean diet. Blanched seed coats (or skins) (BS), removed by industrial
blanching, constitute ∼7% of the total almond weight and are generally considered
as by-product.
The aims of this study were: 1) to determine, by HPLC–DAD, the phenolic profile of
BS; 2) to estimate its phenolic content, 3) to investigate its radical scavenger
activity; 4) to evaluate its protective activity on protein oxidation.
The total phenolic content was 219.44±15.47 mg gallic acid equivalents (GAE) per
100 g BS. The high total phenolic content explains its excellent radical scavenger
activity (SC50=124.81±12.15 µg/ml and 7.03±0.49 µg/ml, expressed as µg of
extract/ml or as µg of phenols/ml, respectively). Furthermore, BS was shown to
protect BSA from carbonyl groups formation, during HClO-induced oxidation,
(SC50=25.21±1.85 µg of phenols/ml) and to prevent albumin AAPH-oxidative
modification (determined by the loss of tryptophan- and tyrosine-associated
fluorescence and by the increase of bityrosine-associated fluorescence
[SC50=4.58±0.3 µg/ml, 4.27±0.35 µg and 2.24±1.35 µg/ml, expressed as µg of
phenols/ml, respectively]).
BS was found to contain mainly hydroxybenzoic acids (0.71 mg/100 g), flavan-3-ols
(2.14 mg/100 g), flavonols (4.44 mg/100 g) and flavanones (0.88 mg/100 g). The
antioxidant capacity of the above mentioned phenolic compounds is largely reported
in the literature [1,2]; therefore the high phenolic content of BS could be responsible
for the observed antioxidant activity.
These results indicate that BS could be utilised further to produce high value
compounds for cosmetic applications and functional food industries.
Acknowledgements: This work has been funded by the Almond Board of California.
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289
P 178
Inhibición de la actividad procoagulante del veneno de yarará
chica (Bothrops neuwiedi diporus), por extractos de plantas del
NE argentino
Torres, Ana M. 1; Camargo, Francisco J. 1; Ricciardi, Gabriela A. 1; Dellacassa,
Eduardo 2; Ricciardi, Armando I.A.1
República Argentina. e-mail: [email protected]; 2 Cátedra de Farmacognosia y Productos
1
Existe amplia información sobre el uso de plantas como antiveneno en accidentes
ofídicos (alexíteras), que recibiéramos a través de crónicas de misioneros jesuitas.
Para examinar la capacidad inhibitoria de estas especies sobre la acción
coagulante del veneno de Bothrops neuwiedi diporus (Cope), se recogieron partes
aéreas (PA) y raíces (R), en Corrientes.
Se midió el tiempo de coagulación normal (TC) con la técnica del plasma
recalcificado y la dosis coagulante mínima (DCM: dosis del veneno que lleva a 1
minuto el TC). Luego se analizó la inhibición de la actividad coagulante del veneno
para cada uno de los extractos vegetales preparados por maceración con agua,
alcohol o hexano, midiendo el TC con el agregado de la mezcla previamente
incubada de veneno-extracto (30 minutos a 37 ºC). Se consideraron activos
aquellos extractos que recuperaron el 30% del TC.
De los 58 extractos estudiados, resultaron activos: Aristolochia elegans: PA (1:24)
y R alcohólico (veneno-extracto, 1:36); A. gibertii: PA acuoso (1:7); Asclepias
curassavica: PA hexano (1:33); Dorstenia brasiliensis: R alcohólica (1:10);
Eclipta prostrata: PA hexánico (1:14); Iresine diffusa: PA alcohólico (1:11);
Mikania coridifolia: PA acuoso (1:23) y hexánico (1:23), R alcohólico (1:18) y
hexánico (1:20); M. micrantha: PA hexano (1:7), R acuoso y alcohólico (1:5); M.
periplocifolia: PA acuoso (1:6); alcohólico (1:4) y hexánico (1:7); Nectandra
angustifolia: PA alcohólico (1:39) y hexánico (1:45); N. megapotamica: PA
hexánico (1:80); Sapium haematospermum: Tallos y hojas alcohólico (1:30);
Trixis divaricata: PA hexano (1:14).
Los resultados expuestos avalan la tradición de uso de las especies estudiadas
como terapia alternativa frente a accidentes ofídicos, sugiriendo profundizar su
estudio a fin de correlacionar los compuestos activos con las propiedades
atribuidas.
290
P 179
Actividad antiviral del latex de varias plantas y estructura de los
metabolitos de algunas especies de la familia Euphorbiaceae
Liliana Avila1, Winston Quiñones 1, Fernando Torres 1, M. Teresa Rugeles 2, Jorge
Forero 2, Fabio Cabezas 3, Luis Gonzales 3, Eduardo Muñoz 4, Fernando Echeverri1
1Grupo de Química Orgánica de Productos Naturales, 2Grupo de Inmunovirología; Universidad de
Antioquia-SIU , PO Box 1226 Medellín (Colombia); 3Universidad del Cauca, Departamento de Química,
Popayán (Colombia); 4Universidad de Córdoba, Departamento de Biología Celular, Fisiología e
Inmunología, Córdoba (España)
Los látex representan mecanismos de defensa de las plantas, especialmente contra
herbívoros e insectos y su composición química está relacionada con estas
funciones, ya que poseen enzimas proteolíticas y metabolitos secundarios que
interfieren la bioquímica de sus agresores. Las especies de la familia
Euphorbiaceae constituyen una rica fuente de látex y son importantes como fuente
de alimentos (aceites y harinas), de metabolitos secundarios que tiene diferentes
actividades biológicas y también como plantas ornamentales.
En un estudio biodirigido tendiente a buscar sustancias contra el virus del SIDA se
determinó la actividad de los látex de varias plantas entre las que están el banano,
el mango y la papaya, así como las especies de la familia Euphorbiaceae,
Euphorbia laurifolia, E. lactea y Manihot esculenta, que muestran tanto la acción
antiviral como reactivadora de su latencia. De estas últimas especies se aislaron
cuatro compuestos que se caracterizan como esqueletos de jatrophano/ingenano
multiesterificados con residuos de acetato, isobutirato y nicotinato.
Agradecimientos. COLCIENCIAS, Universidad de Antioquia (Colombia) y Programa Alfa EULADIV (EU).
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291
P 180
Antinociceptive activity of aqueous leaf extract of
almerindae Leal
Amanoa
Torrico Fátima1, Cedeño Perla1, Espinoza Rosfrancis1, Suárez Alirica I2
Cátedra de Farmacología, Facultad de Farmacia, Universidad Central de Venezuela; 2Unidad de:
Productos Naturales, Facultad de Farmacia, Universidad Central de Venezuela. Caracas, Venezuela
1
Under an ongoing research project in which have been evaluated the phytochemical
and pharmacological properties of plants belonging to the Euphorbiacea present in
Venezuela, we choose Amanoa almerindae Leal (Aa). The aqueous extract of
leaves of Amanoa almerindae was evaluated for its antinociceptive effects using the
tail flick test to thermal stimulus (Davies 1946). Pain threshold was assessed by oral
administration. Previously to this study we determine by intraperitoneal and oral
administration the TD50 with values of . 376 mg/kg and 23 mg/kg, respectively.The
results with doses of 188 mg/kg (1/2 TD50) using the tail flick test showed that the
aqueous extract of Aa. exerted antinociception significantly different of the control
group at the different observation times (p<0.001) being the effect similar to the
results obtained with morphine and noteworthy different to the effects obtained with
ASA (p<0.05). The possible participation of the opiode system in the antinociceptive
effect was analyzed with the extract. The animals were pre-treated with naloxone.
The results indicate that naloxone markedly reversed the antinociceptive effect of
the aqueous extract (p<0.001) which suggest that the analgesia effect may involve
opiod receptors. On the basis of the present study, we may state that the aqueous
extract of Amanoa almerinade Leal has antinociceptive effect. Phytochemical study
of this plant revealed the presence of: triterpenes, lignans and biflavonoids.(Leong
et al 2008).
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292
P 181
Chacterization of essential oil of Chinotto (Citrus myrtifolia
Raf.) cultivated in Sicily
Lanuzza F1, Mondello F1, Tripodo MM2, Cappellano G1, Galati EM3, Micali G1
Dip. RIAM Università di Messina, Piazza S. Pugliatti, 98122 Messina, Italy; 2 Dip. Chim. Org. Biol.,
Università di Messina, Salita Sperone 31, 98166 Messina, Italy; 3 Dip. Farmaco Biologico, Università di
Messina, Vill. SS Annunziata, 98168 Messina, Italy
1
Chinotto is a citrus with little dark green leaves, similar of myrtle, from which
scientific name. The fruit is spherical, like to a small orange, with a bitter pulp. In
Italy it is cultivated in Liguria (near Savona) and in Sicily (near Taormina). The fruits
are utilized to obtain candied fruits, liquors, marmalade and mustard. Flowers and
peels are utilized in phytotherapy for insomnia, digestion, and appetite.
Chinotto extract is contained in the drink of the same name, in an unknown
percentage. Instead, according to the Italian law, the other fruit beverages have to
contain 12 % of juice at least. In the ingredient label, some Chinotto drinks have the
word aroma, probably a synthetic aroma, instead of citrus extract. Chinotto covers
5% of the Italian market of drinks, equal to € 60 millions, referred to a total value of
€ 1.2 thousand millions.
In this work essential oil is studied, to characterize fruit and its derivatives. Oil is
obtained from fresh fruits at different level of ripening. Fruits were collected near
Taormina, during the months of November-April, in the same period of industrial
processing, in a firm near Messina. Essential oil was extracted in laboratory,
according to the old method of sponge. The oil composition was studied by gas
chromatography, utilizing a Chrompack CP Sil 8 CB, 25 m x 0,25 mm (0,4 µm)
column.
The GC analysis showed a characteristic composition, different from other citrus
analyzed in the same conditions. The comparison with literature data (1) about
Chinotto shows in all samples analyzed some differences: the most relevant is a
higher linalyl-acetate content.
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293
P 182
Chemical profile and antioxidant activity of cherry tomato
(Lycopersicon esculentum) from two different areas of Sicily.
Trombetta D., Cristani M., Ferreri A., Ginestra G., Morabito G., Arcoraci T. and
Tomaino A.
Dept. Farmaco Biologico, School of Pharmacy, University of Messina, Vill. Annunziata - C. da Citola
98168 Messina, Italy
Tomato is a widespread vegetable extensively present in the Mediterranean diet.
Evidences suggest that regular tomato consumption decreases the incidence of
chronic degenerative diseases such as certain types of cancer and cardiovascular
diseases. The beneficial effects of tomato consumption are generally attributed to
vitamin C, carotenoids, flavonoids and hydroxycinnamic acids. There is a large
number of tomato cultivars but a variety today much appreciated is the cherry
tomato (Lycopesicon esculentum), growing in several Italy regions. Our study
focused on evaluation of chemical profile and antioxidant activity of extracts
obtained from cherry tomatoes, coming from two Sicily areas (Messina: Type I;
Ragusa: Type II). The freeze dried juice from fresh tomato was processed according
to Le Gall et al. (2003) and chemically characterized by HPLC/DAD. The
concentration of hydroxycinnamic acids is similar in both the extracts (Type I
4.20mg/100 g ww and Type II 4.26mg/100 g ww), while Type 1 contains a flavonoid
amount higher than Type II (0.84/100 g ww vs 0.66 mg/100 g ww). The radical
scavenger/antioxidant activity of these two extracts, evaluated through chemical and
biomimetic assays, seems to be related to their different chemical profile. Type I
extract shows an higher activity than Type II in DPPH (SC50 136.2 vs 182.9 µg/ml)
and FRAP tests (1.74 vs 1.28 gFe2+/ml), although the two extracts have a similar
activity (0.92 vs 0.88 g Trolox/ml) in TEAC assay. Furthermore, Type I showed an
antioxidant activity against UVC-induced liposome damage higher than that of Type
II (IC50 502.9 vs 1451.7 µg/ml). Finally, both the extracts exhibit a good
antigenotoxic activity, as studied in the SOS-chromotest on Escherichia coli PQ37
strain. Further studies could clarify how peculiar climatic conditions can influence
cherry tomato chemical profile.
294
P 183
Antiproliferative and antioxidant activities of a Cystoseira
foeniculacea extract on HepG2 cells
Ursino M.R.1, Catalano G.2, Messina C.2, Santulli A.2
1
2
Dipartimento Farmaco-Biologico, Università di Messina, Vill. SS. Annunziata, 98168, Messina, Italia;
Istituto di Biologia Marina, Lungo mare Dante Alighieri, 91016, Trapani, Italia;
Seaweeds are an important source of many compounds with different demonstrated
biological properties [1].
Among them, Cystoseira intertidal brown algae, contain meroditerpenes that are
diterpenes originated by oxidation and cyclization of geranylgeranyltoluquinols [2].
These substances exert antioxidant [3] and antibacterial activities [4], however no
data are present regarding their possible antiproliferative activity. In the present
study, we focused our attention on Cystoseira foeniculacea f. foeniculacea ((L.)
Grev. Emend. Sauvageau), a species that grows all over the year in the Western
Sicily (Italy), to evaluate antiproliferative and antioxidant activity of an extract
obtained by supercritical fluid extraction (SFE). Algae were collected on the rocky
shores near Trapani (Italy), dried and grinded to obtain a fine brown powder, that
was extracted by a SFE apparatus at a temperature ranging from 31 to 34°C and a
pressure ranging from 250 to 260 bar. The extract was re-suspended in dimethylsulfoxide (DMSO).
Polyphenols content and antioxidant activity of the SFE extract were evaluated
according to Kuda et al. [5]. The SFE extract was tested on an human hepatoma
cell line, HepG2, to verify its capacity to protect against oxidative stress induced by
free radical promoters and its eventual effects on cell proliferation.
Results show that SFE extract concentrations ranging from 2 to 16 g/ml, exert a
significant protection against oxidative stress, as demonstrated by the increase of
vitality in cells, pre-treated with C. foeniculacea SFE extract, and then exposed to
free radical promoters (P<0.05). Cells treated with higher concentrations of C.
foeniculacea SFE extract (from 20 to 50 g/ml) showed a significant reduction of
proliferation (P<0.05).
Studies about the action mechanisms of these biological effects are in progress.
References
1.
Aneiros, A. et al. (2004), J. Chromat. B, Analyt. Technol. Biomed. Life Sci., 1, 41.
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5.
Kuda, T. et al. (2005), Food Comp. Anal., 18, 625.
295
P 184
Fermentación de proteínas bovinas para la producción de
proteasas por Serratia marcescens
Francisco J Ustáriz 2, Adriana Laca 1, Luis A García 1, Mario Díaz 1*
1 Departamento de Ingeniería Química y Tecnología del Medio Ambiente. Universidad de Oviedo, Julián
Clavería 8. 33006 Oviedo. Asturias. España; 2 Facultad de Farmacia y Bioanálisis. Universidad de Los
Andes, Campo de Oro. 5101 Mérida. Edo. Mérida. Venezuela.
Actualmente una gran variedad y cantidad de enzimas son empleadas a nivel
industrial, pero las enzimas proteolíticas ocupan una posición preponderante debido
a sus múltiples aplicaciones industriales, biotecnológicas, así como en el campo de
la medicina y de la investigación básica [1-2].Las proteínas mayoritarias presentes
en el lactosuero: -lactoglobulina, -lactoalbúmina, albúmina de suero bovino (BSA)
e inmunoglobulinas fueron estudiadas como únicas fuentes de carbono y nitrógeno
para la producción de proteasas por Serratia marcescens mediante fermentación
discontinua. Durante las fermentaciones se analizó la evolución del crecimiento
celular, consumo de proteína y producción de proteasas. El máximo nivel de
actividad proteolítica fue alcanzado cuando la BSA fue empleada como único
sustrato. Diversas sustancias relacionadas directamente con la síntesis microbiana
de proteasas fueron empleadas individualmente como suplemento del medio de
cultivo formulado a partir de la BSA, con la finalidad de conocer su influencia sobre
la producción de proteasas. Igualmente, fermentaciones empleando una mezcla de
proteínas fueron realizadas simulando la composición proteica mayoritaria de
lactosuero, con la finalidad de determinar un posible efecto sinérgico de las
proteínas sobre la producción de proteasas. Sin embargo, los niveles alcanzados
de actividad enzimática fueron bajos, similares a los obtenidos con -lactoglobulina.
Estos resultados también se compararon con los obtenidos cuando se empleaba
lactosuero dulce fresco. Las comparaciones realizadas permitieron establecer
importantes diferencias, tanto en lo que respecta a los niveles de proteasas
alcanzados en cada caso como al tipo de proteasa producido. En todos los casos
en los que el medio de cultivo se formuló en base a principalmente en proteínas
bovinas, tanto individuales como con la mezcla de las mismas, se determinó un
cambio total en la tendencia del tipo de proteasa mayoritariamente producida por
S. marcescens.
Referencias
1.
Wiseman A. (1993),J. Chem. Tech. Biotechnol. 56 3-13.
2.
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Romero, F y col. (2001), Process Biochem. 36 501-515.
296
5.
P 184
Ustáriz, F y col. (2004), Biochem. Eng . J., Vol 19 147-153.
297
P 185
Cytotoxicity in MCF-7 cells and mutagenic activity in
bacterial mutation of Serjania glutinosa and Serjania
fucsifolia
Vanessa Regina Maciel Uzan1; Márcia Kazumi Nagamine2; Cássia Regina Primila
Cardoso1; Mariana Carina Frigieri1; Cláudia Joseph Nehme3; Maria Lúcia Zaidan
Dagli2; Wagner Vilegas3; Eliana Aparecida Varanda1
Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Araraquara-UNESP - Rodovia Araraquara-Jaú Km 1, 14801902, Araraquara, SP, Brazil; 2Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia-USP - Avenida Prof. Dr.
Orlando Marques de Paiva, 87, 05508-900 São Paulo, SP, Brazil; 3Instituto de Química de AraraquaraUNESP - Rua Professor Francisco Degni, s/n, 14801-970, Araraquara, SP, Brazil. e-mail:
[email protected]
1
In Brazil, in some situations, the medicinal plants are the only therapeutic resource
of some communities and ethnic groups, however, in spite of their indiscriminate
use, until today studies of their chemical constitutions and biologically activity are
scarce. In spite of the many beneficial actions of plants, it is important emphasize
that some of their constituents can be poisonous to the organism. In addition, the
interest in research on natural has increased resulting in the discovery of more
efficient drugs for cancer treatments. In light of these plant species in medicinal
treatment in this study we assessed the mutagenic and cytotoxic potential of MeOH
70% extracts of two species of the genus Serjania, family Sapindaceae. The
cytotoxicity assays were appraised in human cells line MCF-7 (breast
adenocarcinoma) and mutagenicity in Salmonella typhimurium using the strains
TA100, TA98, TA102 and TA97a. Serjania glutinosa Radlk, popularly known as
“timbó-branco”, is used as ictiotoxic in the North and Center West. Serjania fucsifolia
Radlk doesn't present any data in the literature. The cell proliferation was
determined by the sulforhodamine B and cristal violet assays and the results
demonstrated that the extracts exhibited citotoxic activity (40% cellular viability) in
the treatments for 48 and 72 h at 1 mg/mL. Additionally, it was possible to observe
that the extract of S. glutinosa presented positive mutagenic activity for the strains
TA97a, TA98 and TA100, in the absence and in the presence of metabolic
activation. On the other hand, the extract of S. fucsifolia presented mutagenic
activity in all of the tested strains (TA98, TA97a, TA100 and TA102) in the absence
of metabolic activation, and just in the strains TA98 and TA100, in the presence of
metabolic activity. These results are very interesting and they reveal the mutagenic
potential and antiproliferative activity of those extracts in tumor cells lines.
Acknowledgementes: financial support FAPESP, CNPq.
298
P 186
La corteza de “Espino Cerval” (Rhamnus cathartica L.)
como posible adulterante de “Frángula” (Rhamnus
frangula L.)
Borri, Karina A., Gurni Alberto A. y Varela Beatriz G.
Cátedra de Farmacobotánica, Facultad de Farmacia y Bioquímica (UBA), Junín 956 4° Piso, 1113,
Buenos Aires, Argentina. E-mail: [email protected]
Se comparó la anatomía de la corteza de “espino cerval” (Rhamnus cathartica L. –
Rhamnaceae-) con la corteza de “frángula” (Rhamnus frangula L.)1, esta última de
reconocidas propiedades laxo-purgantes debido al contenido en antraquinonas2.
Del “espino cerval” se utilizan, con las mismas propiedades, los frutos drupáceos.
Es una planta muy invasora que crece junto con otras especies de Rhamnus. Se
demostró también la presencia de compuestos antracénicos en la corteza del tallo
de “espino cerval”3. En la República Argentina, crece asilvestrado en Buenos Aires
y Entre Ríos4 y se ha mencionado como posible sustituto o adulterante de la
corteza de “frángula”5,6,7.
Para el estudio botánico se analizaron muestras desecadas y trozadas, materiales
frescos y ejemplares de herbario. Se obtuvieron disociados leves y cortes
longitudinales de las cortezas. Además, se realizó un perfil fitoquímico de las
mismas y una reacción para detectar antraquinonas. R. cathartica y R. frangula
presentaron caracteres anatómicos bastante similares. Si bien, se encontraron
diferencias en la forma de las células suberosas y en el tamaño y distribución de las
drusas, estos elementos son insuficientes para realizar una buena caracterización
de las especies. En cuanto al perfil fitoquímico, presentaron una composición
distinta y dieron positivo el ensayo para antraquinonas8.
Si se tiene en cuenta la similitud anatómica y exomorfológica de las drogas
trozadas, sería posible hallar “espino cerval” como adulterante o sustituto de
“frángula”. Se sugiere, por lo tanto, que el análisis botánico morfológico y
micrográfico se complemente con el fitoquímico para realizar una correcta
identificación, un control de calidad o detectar posibles adulteraciones.
Referencias
1.
Tortosa, R.D. (1999). Catálogo de las Plantas Vasculares de la Argentina II. Ed. Missouri Bot.
Gard. Press, St. Louis, Missouri 74: 974-981.
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Youngken, H. W. (1958). Tratado de Farmacognosia. Atlante, México: 707-718
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299
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Wagner, H. et al. (1984). Plant Drug Analysis. Springer- Verlag Berlin Heidelberg: 93-107.
300
P 187
Spirulina maxima protects against hydroxyurea-induced
cytotoxic on mouse primary-embryos cultures
J. Vázquez-Sánchez1,2, E. Ramón-Gallegos1, G. Chamorro-Cevallos1
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, Instituto Politécnico Nacional, Prolongación de Carpio y Plan
de Ayala S/N, Colonia Plutarco Elías Calles, 11340, México D.F., México. 2Área Académica de Farmacia,
Instituto de Ciencias de la Salud, Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo, Ex-Hacienda
Concepción, Tilcuautla,C.P. 42160, Hidalgo, México
1
Since congenital malformations are one of the major causes of child mortality all
over the world, it is necessary to find substances that may be used to prevent them.
Hydroxyurea is a potent mammalian teratogen. Within 2-4 hours after maternal
injection, it causes fast cellular death. It was suggested that hydroxyurea reacted
within embryos to give hydrogen peroxide and free radicals, such as the extremely
reactive hydroxyl, and they could be involved in early cellular death. Spirulina sp., a
blue-green filamentous alga or cyanobacterium has been used as food and
nutritional supplements for a long time, has many pharmacological effects, most of
that have been attributed to its antioxidant properties. In this work the effect of
Spirulina maxima on hydroxyurea (HU)-induced cytotoxicity on different cellular
cultures from eleven-day embryos of mice was tested. It was observed that Spirulina
did not provoked cytototoxic effects at any concentration tested and even increased
cell viability. HU affects in a different rate the cells showing a high toxicity on
cultures from encephalon and complete embryos than in cells from fore limbs. On
the other hand Spirulina protected against HU cytotoxicity in a concentrationdependent way until 48h after the drug exposition. This effect could be attributed to
the antioxidant properties of the extract.
References
1.
Bhat, V. B., Madyastha, K. M. (2001). Biochemical and Biophysical Research Comunications, 2858
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2.
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Romay, S., Armesto, J., Ramírez, D., González, R., Ledon, N., García, I. (1998b). Inflammation
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7.
Brown, N. A., Fabro, S. (1981). Teratology, 24: 65-78.
301
P 188
Antidiarrhoeal activity of the methanolic extract leaves of Salvia
connivens
Velázquez G. Claudia, Pérez G. Salud, Pérez G. Cuauhtémoc, Zavala S. Miguel
Departamento de Sistemas biológicos, Universidad Autónoma Metropolitana-Xochimilco, Calzada del
Hueso 1100 Col. Villa Quietud, Coyoacan México D. F., México.
Salvia connivens is used in Mexican traditional medicine for the treatment of
diarrhoea, but there is no data references available in the literature regarding the
antidiarrhoeal activity.
The dried and powdered leaves were extracted with methanol at room temperature
for a week, the filtrate was evaporated to dryness under reduced pressure to afford
the crude extract. Methanol extract (300 mg/Kg) was tested on several models;
castor oil and magnesium sulphate induced diarrhoea in mice1,2, and intestinal
transit in rats3. Loperamide (2.5 mg/Kg) was used as a reference antidiarrhoeal
compound.
Methanol extract showed 41.3 % of inhibition of wet stools whereas loperamide was
86.16 % of inhibition on castor oil induced diarrhoea, and 92.43 % of inhibition of
wet stools on magnesium sulphate induced diarrhoea, the effect was similar to that
showed by loperamide (92.4 % of inhibition). The activity of the extract on intestinal
transit was evaluated at 30, 60 and 90 minutes after the oral administration of
charcoal meal, agar and castor oil, the results showed that the methanol extract
inhibited the intestinal transit in 18.08, 19 and 25.6 % percent, respectively to
loperamide was 24.5, 22.79 and 33.3 % percent, respectively. The results showed
that the methanol extract posses an antidiarrhoeal activity, these lend a support to
continue the phytochemical study to obtain the active compounds, finally this work is
a contribution of the pharmacological study of the Mexican traditional plants.
References
1.
Rouf, R., Uddin, S., Shilpi, J., Alamgir, M. 2007. Journal of Ethnopharmacology, 109, 539-542.
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3.
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302
P 189
A new flavonol triglycoside obtained from Indigofera truxillensis
inhibits NO and TNF- production
Lopes, F.C.M.1, Calvo, T.R.2, Vilegas, W.3, Carlos, I.Z.4
1 Department of Clinical Analysis, Faculdade de Ciências Farmacêuticas, UNESP, R. Expedicionários do
Brasil, 1601, 14801-902, Araraquara, SP, Brazil; 2 Department of Organic Chemistry, Instituto de
Química, UNESP, R. Francisco Degni, s/n, 14800-900, Araraquara, SP, Brazil.
Nowadays, the immune effects of medicinal plants are being studied. Macrophages
play an important role in the immune system because they are cells capable to
secrete many biological active products such as nitric oxide (NO) and tumor
necrosis factor- (TNF- ). The biological activities of these molecules are numerous
and they play a relevant role in the pathogenesis of inflammation. Plant flavonoids
have already shown anti-inflammatory activity in different kinds of studies.
Kaempferol
3-O-[β-D-apiofuranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside]-7-O-α-Lrhamnopyranoside is a new flavonoid obtained from I. truxillensis [1]. The inhibition
of NO and TNF- production in LPS-activated macrophages by this new flavonol
was the aim of this research. Three different concentrations of the flavonol were
tested: 25, 50 and 100µg/mL. NO was determined through Griess reaction and TNFby ELISA assay. The flavonol strongly inhibited NO and TNF- production in a
dose-dependent manner ranging from 33,33±10,29% to 59,09±5,07% and from
35,86±10,21% to 46,67±5,59%, respectively. It is now well understood that
damaging mechanisms at the basis of very common human pathologies, such as
atherosclerosis, neurodegenerative diseases, and cancer are driven by the
inflammatory process. This research is very important since inhibitory agents that
can decrease NO and TNF- production are potentially useful in the treatment of
several situations associated with the overproduction of these mediators, including
septic shock and inflammation [2].
Acknowledgements: Biota-Fapesp Program and CNPq.
References
1.
Calvo et al. (2006), Silae.
2.
Hobbs et al. (1999), Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol., v.39, p.191-220.
303
P 190
In vitro antitumoral and mutagenic activities of natural
substances
Juliana Pizarro Martins Gomes1, Iracilda Zeppone Carlos2, Eliana Aparecida
Varanda3, Wagner Vilegas1
Department of Organic Chemistry, Instituto de Química de Araraquara, São Paulo State University
(UNESP. 2 Department of Clinical Analysis, Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Araraquara,
(UNESP) São Paulo,, Brazil. 3 Department of Biology, Faculdade de Ciências Farmacêuticas de
Araraquara,(UNESP),Araraquara, São Paulo, Brazil.
1
This study evaluated the in vitro cytotoxicity of natural products such as terpenes,
iridoids, and phenolic derivatives in the cell lines of adenocarcinoma murine of the
breast (LM3) and lung (LP07), by MTT assay. The study attempted to identify
possible correlations between the molecular structure of these natural products and
anticancer activity. Results of the cytotoxicity activity in LM3 and LP07 cell lines are
displayed in Table 1. The quinone-methide triterpene tingenone and pristimerin
showed the highest cytotoxicity in these cell lines. The structure-activity relationship
suggests that rings A and B containing an ,ß-unsaturated carbonyl group are
essential for the observed cytotoxic activity. Pristimerin and were evaluated using in
vitro Ames test, and they did not show mutagenic potential (RM<2).
Tab. 1 : Citotoxicity activity expressed as the
average and standard derivation of the IC50.
Substances
E
C
A
D
B
Pristimerin (1)
E
C
A
IC50 (µmol/mL)
LM3
LP07
0.063±0.010 0.134±0.009
cromene
p-coumaric acid
0.506±0.010
3.075±0.275
clorogenic acid
0.942±0.119
0.864±0.351
scandenin
0.127±0.010
0.152±0.013
plumericine
0.032±0.010
0.025±0.009
Pristimerin
0.005±0.000
0.005±0.000
Tingenone
0.003±0.001
0.002±0.001
bauerenyl acetate
0.170±0.047
0.852±0.192
paclitaxel
0.074±0.000
0.191±0.061
D
B
Tingenone (2)
304
P 190
Acknowledgements: CNPq, FAPESP.
305
P 191
Estudio comparativo de los componentes volátiles de dos
especies de Psidium guajava L., que crecen en la región de los
Andes de Venezuela
Villalobos C, Villarreal S, Rojas L, Usubillaga A.
Instituto de Investigaciones de la Facultad de Farmacia y Bioanálisis. Universidad De Los Andes. Urb.
Campo de Oro C.P. 5101. Mérida; Venezuela C.P. 5101. Email: [email protected].
Psidium guajava, es considerada una planta nativa de México, luego extendida
alrededor de sur América, Europa, África y Asia. Esta crece en todas las regiones
tropicales y subtropicales del mundo, teniendo preferencia por las zonas con climas
secos. Sus principales usos son como antidiarreico, en gastroenteritis, disentería y
antibacteriano en gérmenes patógenas del intestino. Es un árbol pequeño de 10m
de altura aproximadamente, con hojas opuestas, frutos comestibles amarillos el
cual contiene numerosas semillas blancas, duras y pequeñas. Para el presente
estudio se utilizaron dos individuos de Psidium guajava, una recolectada en la
ciudad de Valera (570m.s.n.m) y otra en Mérida (1650m.s.n.m). Se empleó para la
separación 720 g y 1800 g de partes aérea de P. guajava respectivamente, estas
fueron sometidas a hidrodestilación empleando la trampa de Clevenger por 3 horas
obteniendo 0,5ml y 0,8ml de aceites de color amarillo respectivamente. El análisis
de estos, se realizo por cromatografía de gases empleando un equipo de Marca
Pekín Elmer modelo Austosystem equipado con una columna AT-5 de 60m de largo
y 0,25 mm de diámetro, también se uso un sistema GC/MS Hewlett Packard MSD
5973 con una columna de fenil-metil-polisiloxano de 30 m x 0,25 mm (HP-5) La
identificación de los componentes se realizo con ayuda de una librería Wiley Ms
Data (sexta edición, 275 K Spectra). Se obtuvo como componentes mayoritarios:
para la recolectada en Valera: beta -Carofileno (23,63%), 5-epi-neointermedeol
(15,77%), beta-selineno (10,09%), alfa-selineno (10,34%), y para la recolectada en
Mérida: limoneno (33,40%), beta-Carofileno (9,24%), beta-selineno (9,18%), alfa selineno (8,48%). Según este resultado se puede deducir que se tratan de 2
variedades diferentes o que la variación es debida a la altitud de las zonas.
Referencias
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4.
Gill Ricardo y Carmona Juan,(2003) Herbolario Tradicional Venezolano; Mérida, Venezuela.
306
P 192
Estudio antibacteriano del extracto metanólico del Phyllanthus
salviaefolius de los andes venezolanos
Villarreal S1, Velasco J2, Díaz T2, Ramírez-Gonzaléz I1.
1Instituto de Investigaciones, 2Departamento de Microbiología y Parasitología, Facultad de Farmacia y
Bioanálisis, Universidad de Los Andes, ZP-5101-A, Mérida, Venezuela. E-mail: [email protected]
El Phyllanthus salviaefolius (Euphorbiaceae), es una planta que pertenece a la flora
de los páramos de Venezuela, encontrándose en matorrales de los Estados
Táchira, Mérida y Trujillo1. El material vegetal fue recolectado en las cercanías de la
población Mucurubá, Mérida – Venezuela. Un Voucher specimen fue depositado en
el Herbario MERF de la Universidad de Los Andes, bajo el Nº SV01. Con base a los
resultados obtenidos en un estudio preliminar, sobre la actividad antibacteriana del
extracto metanólico de las hojas de P. salviaefolius, el cual mostró actividad contra
bacterias Gram positivas (S. aureus ATCC 25923, E. faecalis ATCC 29212) a 1000
mg/mL; se procedió a realizar un estudio antibacteriano contra estos
microorganismos del extracto mencionado, para ello se preparó un percolado del
mismo, utilizando mezclas de solventes de diferente polaridad creciente (acetato de
etilo:hexano 25:75, acetato de etilo:hexano 50:50, acetato de etilo:hexano 75:25,
metanol:acetato de etilo 25:75, metanol:acetato de etilo 50:50, metanol:acetato de
etilo 75:25 y metanol) obteniéndose 7 muestras. La evaluación de la actividad
antibacteriana realizada por el método de difusión en agar con discos3, reveló que
las muestras E1 (CIM 400 mg/mL), E2 (CIM 150 mg/mL), E5 (CIM 100 mg/mL)
presentaron actividad contra E. faecalis y todas las fracciones ensayadas
mostraron actividad contra S. aureus con un rango de concentración de 200-2050
mg/mL, observándose mayor actividad en E5 con un halo de inhibición de 24 mm y
CIM 20 mg/mL. Los resultados obtenidos en esta investigación se correlacionan
con estudios anteriores realizados en otras especies pertenecientes al género
Phyllanthus. La actividad antibacteriana exhibida por el extracto metanólico contra
estos microorganismos, apoya futuras investigaciones orientadas a aislar y
caracterizar el o los compuestos responsable(s) de dicha actividad.
Referencias
1.
Vareschi, V. (1970), Flora de los Páramos de Venezuela. Ediciones del Rectorado. Universidad de
Los Andes. Mérida – Venezuela.
2.
Villarreal S. et al. (2006), XV Congreso Italo-Latinoamericano Di Etnomedicina “Ivano Morelli”,
ATTI-Resumenes, Università degli Studi di Perugia, Italia.
3.
Rondón, M. et al. (2005), Rev. Latinoamer. Quím., 33, 40-44.
307
P 193
Componentes volátiles de las partes aereas de Tagetes lucida
Cav. (Asteraceae)
Visbal T1, Morillo M4, Rojas L2, Cordero Y2, Carmona J3 y Usubillaga A2
Programa Doctoral en Química de Medicamentos. 2.Instituto de Investigaciones, 3 Jardin de Plantas
Medicinales, Facultad de Farmacia. Universidad de Los Andes (ULA), Mérida Venezuela. 4Programa
Doctoral en Ciencias Médicas Fundamentales. Facultad de Medicina. ULA. Mérida. Venezuela.
1.
El Tagetes lucida Cav., es una hierba con flores amarillas perteneciente a la familia
asteraceae. Es una especie aromática que presenta actividad bactericida y
fungicida1, fue previamente estudiada en Costa Rica, de donde se aisló Metil
chavicol (95-97%)2. En el presente trabajo se muestra el estudio de sus
componentes volátiles, cultivada en la localidad de Cordero (1149 msnm) estado
Táchira. En este estudio se utilizaron 500g de hojas frescas y 100g de flores, las
cuales fueron homogeneizadas y sometidas a extracción por arrastre con vapor de
agua usando una trampa de Clevenger. La identificación de los componentes fue
realizada por GC-MS, empleando un equipo Hewlett Packard 5973 GC/MS a 70 eV,
equipado con un inyector automático, con una columna capilar HP-5MS (30 m, 0,25
mm, 0,25 µm). Con temperatura inicial de 60 ºC (1 min) y luego se calentó a razón
de 4 °C/min hasta 260 ºC (20 min). Se inyectó una muestra de 1,0 µL de solución al
2% del aceite esencial en n-heptano con reparto de 100:1. Temperatura del inyector
200ºC. Los espectros obtenidos fueron comparados con la Librería Wiley (6ta
Edición). Se hallaron los índices de Kováts, analizando conjuntamente la muestra
con una mezcla de n-alcanos. El rendimiento resultó ser de 1% en hojas y 0,2% en
flores. En ambas partes se detectó como componente mayoritario, el Metil chavicol
(99,5 % en hojas y 95,5% en flores).
Referencias
1.
Cespedes et. al. (2006), Rev. Journal of Agricultural and food chemistry, 54, 3521-3527
2.
Ciccio J. F. (2004), Revista de Biología Tropical, 52, 853-857
308
P 194
Characterization of stingless bee honey from Peru
Vit P1, Rasmussen C2, Gutiérrez MG1, Rodríguez-Malaver AJ3
1Apiterapia y Bioactividad, Departamento Ciencia de los Alimentos, Facultad de Farmacia y Bioanálisis,
Universidad de Los Andes, Mérida, 5101, Venezuela; 2Department of Entomology, University of Illinois,
Urbana, IL 61801, USA; 3Laboratorio de Bioquímica Adaptativa, Departamento de Bioquímica, Facultad
de Medicina, Universidad de Los Andes, Mérida 5101, Venezuela.
Stingless bee (Meliponini) honey has been used in traditional medicine for centuries
or more1. Honey from ten stingless bee species from Perú was characterized
according to their colour, moisture2, flavonoids3, polyphenols4, nitrites5 content, and
total antioxidant activity6.
Table 1. Entomological origin, colour C (mm Pfund), moisture M (g water/100 g), flavonoids F
(mg EQ/100 g), polyphenols P (mg EGA/100 g), nitrites N (μM nitrites/ 100 g) content and total
antioxidant activity TAA (μM E Trolox/ 100 g) of stingless bee honey samples.
Nr.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
Stingless bee species
Melipona crinita
Melipona eburnea
Melipona grandis
Melipona illota
Nannotrigona melanocera
Partamona epiphytophila
Ptilotrigona lurida
Scaptotrigona polystica
Scaura latitarsis
Tetragonisca angustula
n
2
1
5
1
1
1
1
1
1
1
C
88
103
38
26
150
78
120
128
130
150
M
28.8
23.8
27.5
28.0
33.4
45.8
35.2
33.0
20.8
28.9
F
7.3
8.9
3.1
2.6
31.0
5.9
23.4
17.6
17.7
18.8
P
155.1
179.6
105.5
99.7
464.9
151.3
240.3
337.0
282.6
260.9
N
0.37
0.65
0.35
0.30
1.46
1.26
2.88
1.15
1.13
1.07
TAA
131.2
93.2
-25.2
-41.8
532.1
-15.5
93.1
242.9
152.4
240.2
Classes of TAA suggested for Czech A. mellifera honey7 would position stingless
bee honey from Peru between extreme ranges, from negative to very high (>300).
Acknowledgements: Prof. JMF Camargo from Universidade de São Paulo, Brasil, kindly identified the
stingless bees.
References
1.
Rasmussen, C., Castillo, P.S. (2003). Rev. Per. Ent. 43,159-164.
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7.
Vit, P. et al. (2008) Acta Bioquim. Clin. Latinoam. 41(2) (in press).
309
P 195
Antioxidant capacity and sensory attributes of Trigona
carbonaria honey from Australia
Vit P1, Rodríguez-Malaver AJ2, Heard TA3, Villas-Boas JK4, González I1
1Apiterapia y Bioactividad, Departamento Ciencia de los Alimentos, Facultad de Farmacia y Bioanálisis,
Universidad de Los Andes, Mérida, 5101, Venezuela; 2 Laboratorio de Bioquímica Adaptativa,
Departamento de Bioquímica, Facultad de Medicina, Universidad de Los Andes, Mérida 5101, Venezuela
3 CSIRO Entomology, Long Pocket Lab, Indooroopilly, Qld 4068, Australia; 4 Programa Regional de PósGraduação em Desenvolvimento e Meio Ambiente (PRODEMA) Universidade Federal da Paraíba - João
Pessoa, PB, CEP - 58059-900 Brasil.
Trigona carbonaria Smith 1854 is a stingless bee (Meliponini) of the east coast of
Australia1 and is the most commonly domesticated species in Australia.2 Compared
to A. mellifera, physicochemical properties of T. carbonaria showed higher moisture,
water activity, electrical conductivity, and free acidity, and a different sugar
spectrum.3 Medicinal uses of stingless bee honey have been reported for
Guatemala, México and Venezuela4 and recently was tested a model for putative
anticataract properties.5 A medicinal approach for both nutritional and
pharmaceutical applications, antioxidant components6,7 (ABTS + and nitrite, the
stable Nitric oxide metabolite), and sensory atributes of aroma, odour8 and flavour
were studied in eight samples of T. carbonaria honey collected in suburban areas of
Brisbane, Queensland, Australia. The antioxidant activity expressed as percentage
of ABTS + decolourization, was 233.96 ± 50.95 μM Trolox equivalents, and nitrites
content was 0.63 ± 0.23 μM. The reference aroma and odour wheel8 needed
modifications to add distinctive attributes in a sensory primitive family, smog and
marine subfamilies. Mellow flavour was characteristic for this dark honey. Both the
antioxidant and the sensory properties increase the knowledge of T. carbonaria
honey, to initiate pharmaceutical applications and to secure its quality.
References
1.
Michener, C.D. (2000) The bees of the world. John Hopkins University Press. Baltimore, MD, USA.
2.
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Al-Waily, N.S. (2003) J. Med.Food 6,359-64.
8.
Piana, M.L. et al. (2004) Apidologie 35,s26-s37.
310
P 196
Analisi chimica e sensoriale dell’olio essenziale di Ocotea
wrightii (Meisn) Mez.
Vita Finzi Paola1, Ngueyem Tatiana A.D.2, Gilardoni Gianluca3, Benzo Maurizio3 e
Abdo Susana4
1 Università degli studi di Pavia, Dipartimento di Chimica Organica, via Taramelli 10, 27100 Pavia,
ITALIA. 2 Università degli studi di Pavia, Dipartimento di Chimica Farmaceutica,via Taramelli 12, 27100
Pavia, ITALIA. 3 OSMOTECH s.r.l., Dipartimento di Chimica Farmaceutica, via Taramelli 12, 27100 Pavia,
ITALIA. 4 Escuela Superior Politécnica de Chimborazo, Facultad de Ciencias Quimicas, Riobamba,
Ecuador. [email protected]
Le piante del genere Ocotea, appartenenti alla famiglia delle Laureaceae,
costituiscono un insieme di oltre 800 specie note(1), caratterizzate dalla frequente
presenza di sostanze volatili profumate. Diversi oli essenziali sono prodotti e
commercializzati a partire da piante del genere Ocotea: Peruvean Rosewood da
Ocotea cemua, Brazilian Sassafras da Ocotea odorifera, East African
Camphrowood da Ocotea usambarensis. In questa sede è descritta per la prima
volta la composizione chimica dell’olio essenziale ottenuto dalla pianta Ocotea
wrightii (Meisn.) Mez., detta Canelòn, raccolta e idrodistillata in Ecuador. L’analisi
chimica è stata condotta tramite gascromatografia-spettrometria di massa (GC-MS),
confrontando gli spettri di frammentazione EIMS e gli indici di ritenzione degli analiti,
calcolati secondo Van den Dool, con quelli di una pubblicazione di riferimento (2).
Sono state identificate 48 sostanze, prevalentemente di natura terpenica; tra i
composti più abbondanti, presenti in quantità superiore a 1% del totale, vi sono: αpinene (9.9%), β-pinene (5.4%), limonene (5.2%), 1,8-cineolo (14,9%), (E)cinnamaldeide (2.6%), (E)-metilcinnamato (10.5%), Cariofillene ossido (10.3%),
spatulenolo (2.8%), umulene ossido (7.9%). E’ stata inoltre condotta sull’olio
essenziale un’analisi sensoriale qualitativa tramite gascromatografia-olfattometria
(GC-O).
References
1.
Wood C.E. Jr, 1958, The genera of the woody ranales in the southern united states, J. Arnold
Arbor. , 39: 296-346.
2.
Adams R., 2001, Identification of essential oil components by gas chromatography/quadrupole
mass spectroscopy.
311
P 197
Analisi chimica e sensoriale dell’olio essenziale di Clinopodium
nubigenum (Kunth) Kuntze
Paola Vita Finzi1, Cristina Massolino2, Maurizio Benzo 3, Gianluca Gilardoni3, Omar
Malagòn4, Vladimir Morocho4 e Claudio Baiocchi2
1 Università degli studi di Pavia, Dipartimento di Chimica Organica, via Taramelli 10, 27100 Pavia,
ITALIA; 2 Università degli studi di Torino, Dipartimento di Chimica Analitica, Via Giuria 5, 10125 Torino,
ITALIA; 3OSMOTECH s.r.l., Dipartimento di Chimica Farmaceutica, via Taramelli 12, 27100 Pavia,
ITALIA; 4 Universidad Técnica Particular de Loja, Loja, ECUADOR. [email protected]
Clinopodium nubigenum (Kunth) Kuntze è una pianta aromatica appartenente alla
famiglia delle Lamiaceae, conosciuta anche come Thymus nubigenus, Micromeria
nubigena e Satureja nubigena e diffusa in America latina tra i 3000 e 4000 metri di
altitudine. Presso le popolazioni indigene è conosciuta con il nome di “tipo de cerro”
ed è utilizzata dalla medicina tradizionale nel trattamento del mal di stomaco, del
raffreddore e dei dolori mestruali.
L’olio essenziale, oggetto della presente comunicazione, è stato ottenuto per
idrodistillazione a partire da un campione raccolto in Ecuador presso Aguarongo,
nella parrocchia di San Lucas, alla quota di 3242 metri. L’analisi chimica è stata
effettuata tramite gascromatografia-spettrometria di massa (GC-MS) e
l’identificazione dei costituenti è stata ottenuta confrontando i relativi indici di
ritenzione e gli spettri di frammentazione EIMS con i dati riportati nella letteratura di
riferimento (1). Tra i costituenti principali si ritrovano: acetato di 3-ottenile, epossido
di cis-piperitone, α-copaene, biciclogermacrene, δ-cadinene. L’olio essenziale è
stato inoltre sottoposto ad analisi sensoriale qualitativa tramite gascromatografiaolfattometria (GC-O).
References
1.
Adams R., Identification of essential oil components by gas chromatography/quadrupole mass
spectroscopy, 2001.
312
P 198
In vitro hepatoprotective and antioxidant activities
isoflavonoids from Erythrina senegalensis DC (Fabaceae)
of
Donfack J. H.1, Njayou F. N.1, Ngameni B.2, Tchana A.1, Chuissea P. D.1, Vita Finzi
Paola3, Ngadjui B. T.2 and Moundipa P. F.1
Laboratory of Pharmacology and Toxicology, Department of Biochemistry, 2Laboratory of Organic
Chemistry, Department of Organic Chemistry, Faculty of Science, University of Yaounde I, P.O. Box . 812
Yaounde, Cameroon, 3Dipartimento di Chimica Organica, Universita’degli Studi di Pavia, Via Taramelli
10, 27100 Pavia, Italy, [email protected]
1
Erythrina senegalensis is a thorny shrub or small tree with bright red flowers found
in Sudanese Savannah regions [1]. The stem bark of this tree is traditionally used by
the Bamun population (Western Cameroon tribe) against liver disorders as a
decoction [2]. Previous studies had reported the identification of three diprenylated
isoflavonoids: 2,3-dihydro-2’-hydroxyosajin (1), osajin (2) and 6,8-diprenylgenistein
(3) [3]. These compounds were tested for hepatoprotective activities against in vitro
CCl4-induced hepatitis in rat liver slices. The following four model systems were
used to measure the antioxidant activity of these three isoflavones: 2,4dinitrophenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activities, ß-CaroteneLinoleic Acid Model System (ß-CLAMS), Ferric-Reducing Antioxidant Power (FRAP)
assay and microsomal lipid peroxidation. The obtained hepatoprotective
percentages of activity for compounds (1) (2) (3) will be reported and discussed. By
comparison to compound (2) and (3), compound (1) showed significant antioxidant
effect in the different antioxidant assays. The results obtained provide promising
baseline information for the potential use of this crude extract as well as some of the
isolated compounds for their hepatoprotective and antioxidant activities. These
results validate, by in vitro tests, the therapeutic use of the plant in traditional
medicine.
References
1.
Malgras D. (1992) Arbres et arbustes guérisseurs des savanes Maliennes. Publié avec le concours
du comité catholique contre la faim et pour le développement. ACCT-KARTHALA, 285
2.
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3.
Wandji, J, (1994) Two isoflavones from Erythrina senegalensis. Phytochemistry, 35, 245-248.
313
Actividades antifúngica y antibacteriana
peploides, P. stratiotes y P. microphylla
P 199
de
L.
Vivot Eduardo, Sánchez Cecilia, Sequin Christian y Cacik Francisco
Cátedra Química General – Fac. de Cs. Agropecuarias – UNER Ruta 11, Km 10,5 (3100) –Entre RíosArgentina- e-mail: [email protected]
El uso de plantas en medicina popular ocupa un importante lugar en el tratamiento
de dolencias como las afecciones microbianas. La revalorización de los vegetales
como fuente de fármacos ha propiciado los estudios para validar las referencias
etnobotánicos. Entre Ríos (Argentina) posee una vasta flora con antecedentes en
usos antimicrobianos. Las hojas de Ludwigia peploides y Pistia stratiotes son
usadas para curar heridas, como emolientes, antisifiliticas, y diureticas. Los leños
de Porlieria microphylla poseen actividad antisifilítica y antirreumática. Ludwigia Sp.
ha mostrado actividad antidiarreica y se han aislado triterpenos con actividad
anticancerígena. La evaluación de la actividad antibacteriana y antifúngica se
realizó utilizando la prueba de sensibilidad de difusión en medio sólido,
impregnando discos de papel con extractos de los vegetales y observando la
inhibición a cepas tipificadas de Candida krusei, Pseudomonas aeruginosa,
Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Bacillus spizizenii, y una cepa clínica de
Staphylococcus aureus metileno resistente (Metil R). Se ensayaron extractos
etanólicos, metanólicos y acuosos. Los extractos etanólicos y metanólicos de P.
stratiotes presentaron actividad contra P. aeruginosa. Los mismos extractos de L.
peploides mostraron actividad contra P. aeruginosa, S. aureus, B. spizizenii, y S.
aureus (Metil R). El extracto etanólico de P. microphylla exhibió actividad contra B.
spizizenii, P. aeruginosa y S. aureus (Metil R). El extracto metanólico presentó
inhibición en P. aeruginosa. Los extractos acuosos de las tres especies no
revelaron actividad. En los ensayos antifúngicos los extractos metanólicos y
etanólicos de L. peploides presentaron actividad contra C. krusei. Se profundizarán
los estudios para detectar los compuestos bioactivos.
Agradecimientos: Secretaría de Investigaciones UNER y PID-UNER 2110
314
P 200
Estudio de la composición química del aceite esencial de hojas
de Euphorbia cotinifolia L. (Euphorbiaceae) colectado en MéridaVenezuela.
Marietta Vizcaya, Janne Rojas, Shirely Baldovino, Luis Rojas, Antonio Morales
Grupo Biomoléculas orgánicas, Instituto de Investigaciones, Facultad de Farmacia y Bioanálisis, Mérida,
Venezuela
Dentro de la familia Euphorbiaceae, que comprende cerca de 5000 especies se
encuentra el género Euphorbia, el cual se caracteriza por contener un latex
blanquecino frecuentemente cáustico y tóxico [1]. Las especies del género
Euphorbia han sido objeto de numerosas investigaciones por sus compuestos
biológicamente activos, entre las que se pueden mencionar irritantes de la piel,
promotores de tumores y propiedades inflamatorias que son atribuidas a la
presencia de diterpenos particularmente macro y policíclicos. Algunas de estas
especies son usadas para el tratamiento de enfermedades de la piel, gonorrea,
migraña y como antiparasitarias [2]. Este estudio tiene como finalidad determinar la
composición química del aceite esencial de hojas de Euphorbia cotinifolia
recolectada en el sector Manzano Alto-Ejido, Municipio Campo Elias, MéridaVenezuela, no reportada hasta el momento. Las hojas frescas (5 Kg) finamente
cortadas y trituradas se sometieron a hidrodestilación por 5 horas, utilizando una
trampa de Clevenger. El aceite obtenido, hojas (0,2 ml; 0,004 % m/v) se secó
sobre sulfato de sodio anhidro y fue analizado por cromatografía de gases acoplada
a espectrometría de masas en un equipo GC-MS system, modelo 5890. Se
identificaron veintisiete (27) compuestos de los cuales -cariofileno (39,32 %), Dgermacreno (21.51 %), α-copaeno (9,27%) y α-humuleno (5,20 %) se observaron
como mayoritarios. Estos compuestos fueron identificados por comparación de sus
espectros de masas con la base de datos Wiley 6th ed. y datos reportados en la
literatura [3].
Referencias
1.
Webster, G. (1994). Systematic of the Euphorbiaceae: Introduction. Annal Miss Bot Gard. 81, 33144.
2.
Uddin, V.; Reza, A. 1998. Three tricyclic diterpenoids from Euphorbia decipiens. Planta Med. 64,
732-735.
3. Adams R. (1995). Identification of the essential oil
components by GC/MS. Allured Publishing Corporation,
Carol Stream IL, USA.
315
P 201
Volatile components of Periploca angustifolia
Sajeva M1, Zito P1, Maggio A2, Rosselli S2, Bruno M2, Senatore F3
1 Dip. Scienze Botaniche, Università di Palermo, via Archirafi 38, 90123 Palermo, Italy; 2 Dip. Chimica
Organica, Università di Palermo, viale delle Scienze – parco d’Orlens II – 90128 Palermo, Italy, 3 Dip.
Chimica delle Sostanze Naturali, Università Federico II via Montesano 49, 80131 Naples, Italy
Periploca angustifolia (Apocynaceae) is a perennial deciduous plant, leaves appear
few weeks after the first outcome of rain, and last till the end of Spring. Stems are
branched and quickly become lignified and woody. Leaves are simple, sessile and
flowers arise from leaf axils. Flowers have a light green calyx formed by 5 very small
semi-circular overlapping sepals and are pollinated by flies. P. angustifolia is a
typical sapromyophilous species which grows in Lampedusa Island (Italy, 35°29’28”
and 35°21’39” N - 12°30’54” and 12°37’55” E). Sapromyophilous flowers show a
high functional specialization toward flies, both from a morphological and a chemical
point of view. The chemical analysis carried out on the esssential oil from the aerial
parts of P. angustifolia showed the remarkable presence of fatty acids (C18:0, C18:2,
C18:3), alkanes (C27, C29) and terpens ( -Cadinene, α-Copaene, (E)-Caryophyllene,
Germacrene D), Octadecanol acetate, (Z)-Octadec-9-en-1-ol, Carvacrol. In the
stems and the leaves these compounds may have defensive functions against
herbivores and insects. On the other hand the presence of such compounds in the
flowers play a strong role in actracting pollinators, thus making possible pollination
by flies. The compounds found in P. angustifolia are also present in other
sapromyophilous taxa within the family Apocynaceae. Field observations confirm
that some functionally similar groups of flies that breed or feed on dung and
decaying organic matter, such as flesh flies, houseflies and blowflies, regularly visit
the flowers and act as pollinators.
316
P 202
Antimicrobial and cytotoxic activity of some Brazilian
medicinal plants
Maria Lúcia M. Bouzada1, Rodrigo Luiz Fabri 1, Gizele Duarte Garcia2, Elita Scio1.
1Department of Biochemistry, 2Department of Parasitology, Microbiology and Imunology, Institute of
Biological Sciences - Federal University of Juiz de Fora, MG, 36036-330, Brazil.
Infectious diseases are the world’s leading cause of premature deaths, killing almost
50,000 people every day. In recent years, drug resistence to human pathogenic
bacteria has been commonly reported from all over the world. In this scenario there
is a need of search for new antimicrobial substances from other sources including
plants. In this study, methanol extracts of the leaves of Solanum nigrum, Vernonia
polyanthes, Piper aduncum, Stachytarpheta cayennensis, Alternanthera brasiliana,
Plantago lanceolata, Pothomorphe umbelatta and Polygonum hidropiperoides, plants
commonly used in Brazil for treating conditions likely to be associated with
microorganisms, were evaluated for their toxicity to the brine shrimp [1] and
antimicrobial activity [2]. The agar diffusion method was used against Staphylococus
aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella thyphi and Klebsiella
pneumoniae. Phytochemical analysis of the plant extracts for their major groups of
phytoconstituents is also reported [3]. All extracts showed antimicrobial activity
against at least S. aureus and Salmonella sp; extracts of Polygonum hidropiperoides,
Stachytarpheta cayennensis and Alternanthera brasiliana were active against all
microorganisms tested and the highest inibitory zones were observed for the latest. The
extracts of Solanum nigrum, Piper aduncum and Alternanthera brasiliana showed
significant toxicity against brine shrimp with 100% of lethality at 1000 µg/ml, after 24 h
exposure. Phytochemical analysis of the extracts demonstrated the presence of
common phytoconstituents like phenols, coumarins, flavonoids, saponins and
alkaloids. The results were encouraging, as all the selected plants appeared to contain
antimicrobial substances. Further attempts are being made to isolate the active
constituents of the extracts. This reinforces the concept that the investigation of
ethnobotanically used plants will reveal a substantial number of positive responses to in
vitro screens.
Acknowledgements: FAPEMIG and UFJF for the financial support.
References
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3.
Matos, FJA. (1997), Introdução à Fitoquímica Experimental. EUFC. Fortaleza-Brasil.
317
P 203
Hypoglycemic effects of Cecropia pachystachya in normal and
alloxan-induced diabetic rats
Danielle Maria de Oliveira Araújo1, Lyvia Guarize Nogueira1, Juliana Lanini1, Raúl
Marcel Gonzalez Garcia2, Elita Scio1
Department of Biochemistry, 2Department of Biology, Institute of Biological Sciences - Federal University
of Juiz de Fora, MG, 36036-330, Brazil.
1
Diabetes mellitus (DM) is a metabolic disorder characterized by hyperglycemia.
Alternative strategies to the current modern pharmacotherapies of DM are urgently
needed because the inability of existing actual therapies to control all the
pathological aspects of the disorder. The objective of this work was to study the
hypoglycemic effect of Cecropia pachystachya on normal and diabetic rats. Leaves
of C. pachystachya were powdered and macerated with methanol to obtain the
methanolic extract. For evaluation of hypoglycemic activity, were used male Wistar
rats of 60 days in age. Diabetes was induced by a single intravenous injection of
120mg/kg b.w. of alloxan. Animals with plasma glucose levels > 200 mg/dL were
considered diabetics [1]. The rats were divided into 4 groups: Group 1: 7 diabetic
rats treated with vegetal extract; Group 2: 6 diabetic rats untreated with extract;
Group 3: 9 non-diabetic rats treated with extract; Group 4: 8 non-diabetic rats
untreated with vegetal extract. After an overnight fast, the plant extract was
administered orally at a single dose of 80 mg/kg b.w. Group 2 and group 4 received
vehicle. Blood samples were taken before the administration of extract or vehicle
(time 0) and 30, 60, 90, 120 min there after. Blood glucose was measured by using
glucose oxidase method. The methanolic extract showed a significant hypoglycemic
effect in normal and diabetic rats. The hypoglycemic activity appeared 30 min after
oral administration of the extract and lasted till 90 min. The most significant
hypoglycaemic effect occurred after 90 min of the treatment with reduction of 49%
and 20% in blood glucose levels for diabetic and normal rats, respectively. The
results clearly showed that the extract of C. pachystachya exerts significant
hypoglycemic and anti-hyperglycemic effects in normal and alloxan-induced diabetic
rats. Further experiments are required to elucidate the exact mechanism of action.
Acknowledgements: FAPEMIG and UFJF for the financial support and Reproduction Biology Center
(CBR-UFJF) for the animals.
References
1.
Alarcón-Aguilar, FJ. et al. (2005), J Ethnopharmacol, 97, 447.
318
Laxative and intestinal motility effects of extracts of Senna
macranthera leaves on rats
Lyvia Guarize Nogueira and Elita Scio
Departamento de Bioquímica – ICB – Universidade Federal de Juiz de Fora (UFJF), Campus
Universitário, Martelos, CEP 36036 900, Juiz de Fora, MG, Brazil
Species of Senna are widely distributed in tropical and subtropical regions throughout the
world and are known to be a rich source of phenolic derivatives, most of them with
important biological and pharmacological properties. Some species are used as a laxative,
purgative, antimicrobial, antipyretic, antiviral and anti-inflammatory agent [1]. So, the aim of
this study was to evaluate the laxative activity and the effects on intestinal motility of the
methanol and hexane extracts of the leaves of Senna macranthera. Wistar male rats,
weighing 200-230 g, were used. The animals were housed in a room kept under controlled
conditions with free access to water and complete commercial chow (NuvitalTM). Rats were
fasted for 8h before the laxative test and 24h prior the experiment for intestinal motility
evaluation. For both tests animals were divided into 4 groups (n = 7): Group 1- received
saline (1 ml - vehicle control); group 2- received bisacodyl (0.25 mg/kg – positive control);
group 3- received hexane extract (400 mg/kg); group 4- received methanol extract (400
mg/kg). All administrations were by gavage. To evaluate the laxative activity [2], the faeces
production (total number) in all groups was monitored for 8 h after administration of the
extracts. Thereafter, food and water were given to all rats and faecal outputs were again
counted after a period of 16 h. For the intestinal motility effect [3], at 40 min after drug
administration, 1 ml of a 5% charcoal suspension in 10% aqueous solution of tragacanth
powder was administered to each animal. The animals were killed 20 min later and the
abdomen opened. The distance traveled by the charcoal from the pylorus to the caecum
was measured and expressed as the percent of the total length of the distance. The
methanol extract exhibited laxative activity as reflected by the increase in the number
faeces 8 h after its administration (4) when comparable to the vehicle control (1.6). No effect
on intestinal motility was observed for methanol extract. On the other hand, the hexane
extract not only showed laxative activity (number of faeces = 4.4) but also caused a
significant increase in the intestinal motility (89%), greater than the positive control,
bisacodyl (61%). This is the first relate on the laxative activity and on the effects of the
intestinal motility of the leaves of S. macranthera.
Acknowledgements: FAPEMIG and UFJF for the financial support and Reproduction Biology Center
(CBR-UFJF) for the animals.
References
1. Júnior, CV. et al. (2006), Quim Nova, 6, 1286.
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Croci,
T.
et
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(1997),
Brit
J
Pharmacol,
121,
375.
320
3
Authors Index
Indice degli autori
Listado de autores
4
Abdo S.
Acernese F.
Adrian-Romero M.
Agrelo de Nassiff A.E.
Aguiar J.S.
Aguilar J.J.
Aiello N.
Albarracin Valdivia B.
Albertin V.
Alexandre-Moreira M.S.
Alfa M.
Allegra M.
Almeida A.C.A.
Alonzo G.
Alvarez Ramírez M.T.
Alvarez Reyes A.
Alves de Almeida A.C.
Amaro-Luis J.M.
Amato F.
Amesty A.
Andrade E.
Andrade J.M.
Anesini C.
Angileri F.
Anjos R.M.
Aparicio R.
Aquino P.G.V.
Aquino R.
Araque M.
P 196
P 156
P 001
P 002
P 024
P 142
P 005
P 113
P 083
P 022
P 083
P 005
P 125
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O 15
O 01
O 05
O 10
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P 152
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P 003
P 093
P 063
P 006
O 27
O 37
P 004
P 005
P 098
O 03
3
Araque M.C.
Araujo A.R.
Araújo-Júnior J.X.
Arcoraci T.
Arcos-Guerrero B.Y.
Arevalo C.
Arias E.
Armenta-Salinas C.
Armijos C.
Arroyo-Razo G.A.
Arvelo F.
Arzola J.
Ascolillo V.
Autore G.
Avila J.L.
Avila L.
Badilla B.
Bahsas A.
Baiocchi C.
Baldovino S.
Ballero M.
Bancheva S.
Baquero E.
Barbastefano V.
Barbosa C.V.
O 29
P 088
P 005
P 006
P 177
P 182
P 054
P 138
P 007
P 071
O 20
P 095
O 07
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P 164
P 144
P 049
P 010
P 035
P 043
P 005
4
Barone F.
Barrera H.J.M.
Barreto S.
Bartolomé C.C.
Basile A.
Bassan J.C.
Bassarello C.
Bassols G.
Bastida J.
Battista S.M.
Bello-Gonzales M.A.
Bellone G.
Benaim G.
Benavides A.
Benzo M.
Beranek M.
Berkov I.
Betancourt N.
Bianco A.
Bisignano G.
Bisio A.
Bisonni G.
Blunden G.
Bonacorsi C.
Bontempo R.
Bontempo R.
Borri K.A.
Botta B.
Bouzada M.L.M.
Braca A.
Bruno M.
P 156
P 054
O 29
P 034
P 011
P 012
P 050
P 174
O 34
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O 21
O 35
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O 05
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P 032
P 186
PL 10
P 202
P 017
O 28
O 36
5
Bruzual De A.M.C.
Bucchini A.
Bucio M.A.
Bueno M.
Buitrago D.
Burgos E.
Cabezas F.
Cabrera J.L.
Cáceres Huamani F.
Cáceres Huambo A.
Cacik F.
Cadet Y.
Cafaggi S.
Calderón M.A.
Calvo T.R.
Camargo E.E.S.
Camargo F.J.
Camargo Penteado V.
Camarillo-Romero E.S.
Campaner dos Santos L.
Campo F.M.
Campodonico E.
Campodonico P.G.
Campolo L.
Campos Navarro R.
Canzoneri M.
P 011
P 135
P 143
P 144
P 201
P 017
P 141
P 048
P 050
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P 020
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P 074
P 025
P 139
P 026
P 026
P 027
P 090
O 24
P 028
6
Capelli E.
Cappellano G.
Capputto A.
Carbone V.
Cardile V.
Cardoso C.A.L.
Cardoso C.R.P.
Carina Frigieri M.
Carlos I.Z.
Carmona J.
Carmona J.
Carmona J.
Carmona J.A.
Carnevali M.
Carola M.
Carpano S.M.
Carpio E.
Carratù A.
Carruba G.
Carrubba A.
Cartuche J.
Castaldo Cobianchi R.
Castro V.H.
Catalano C.
Catalano G.
Cau A.
Cazar A.
Cazar M.E.
Cedeño P.
Cegarra J.
Ceja Mendoza M.L.
P 109
P 181
P 036
O 34
P 147
P 117
P 130
P 087
P 161
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P 189
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P 104
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O 16
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P 133
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P 032
O 20
P 012
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P 098
P 033
P 033
P 180
O 02
P 059
7
Cervellati R.
Chacon R.
Chamorro-Cevallos G.
Chanona-Pérez J.J.
Chataing B.
Chaves F.
Chávez Duran J.
Chavez G.L.R.
Chavez K.
Chuissea P.D.
Ciampi E.
Ciangherotti C.
Circosta C.
Cobar Pinto O.M.
Cocciadiferro L.
Codina C.
Codina C.
Coelho Kaplan M.A.
Coelho R.G.
Cola M.
Colman-Saizarbitoria T.
Comai S.
Comini L.
Compagnone R.S.
Conde L.I.
Conforti F.
P 067
P 146
P 053
P 061
P 062
P 073
P 095
P 124
P 187
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O 04
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P 111
P 112
O 07
P 128
P 173
P 124
P 055
8
Contartese G.
Conte B.
Contigiani M.S.
Contreras M.
Cordero de Rojas Y.
Correa E.
Cortés P.C.J.
Cortès-Rodrìguez M.A.
Costa C.
Costa C.D.F.
Costa R.C.
Costa S.
Coutinho I.D.
Cristani M.
Crivos M.A.
Crosta L.
Cruz J.
Cuellar Cuellar A.
Cuesta Rubio O.
Curini M.
Curione A.
D’Angelo V.
Da Silva M.A.
Da Silva V.C.
Dall’Acqua S.
Damián Badillo L.M.
P 056
P 012
P 113
P 029
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O 27
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P 025
P 043
P 147
P 042
P 082
P 083
P 140
9
Davicino R.
De Caro V.
De Fina M.
De Jesus S.
de Oliviera Araujo D.M.
De Montijo S.
De Pasquale R.
de Rosso V.V.
de Santis L.H.
De Simone F.
de Sousa Menezes F.
de Souza T.M.
De Tommasi N.
Decandio L.F.
De-Faria F.M.
Del Río R.E.
Delgado Peralta J.
Dellacassa E.
Di Bernardi T.
Di Bernardo M.L.
Dias J.C.
Dìaz L.E.
Díaz M.
Díaz T
P 093
P 168
P 169
P 107
P 044
P 203
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O 16
O 29
P 091
O 11
P 184
P 172
P 046
P 096
10
Diez N.
Domingues S.M.O.
Donfack J.H.
Dorantes L.
Dos Santos L.C.
Duarte Garcia G.
Dugo G.
Dugo G.mo
Dunder R.J.
Echeverri F.
Epifano F.
Escolar J.
Escouto L.F.S.
Espinosa S.I.
Espinoza R.
Espinoza R.M.
Esteves P.F.
Fabri R.L.
Fagundes F.H.
Faraone N.
Farias-Silva E.
Favalli L.
Fazzari M.
Ferlete G.S.
Fermin G.
Fernández Herrera M.A.
Fernandez I.
Fernandez L.
P 192
P 047
P 153
P 149
P 150
P 174
P 198
P 073
P 147
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PL 03
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O 22
P 117
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P 050
P 051
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P 116
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P 129
P 023
O 12
P 068
P 072
P 111
P 112
P 165
11
Fernandez-Zurita L.G.
Ferraro G.
Ferreira G.A.O.
Ferreira J.R.O.
Ferreri A.
Fidalgo O.
Filip R.
Flores A.
Flores Alvarez L.J.
Flores García A.
Flori P.
Florio S.
Forero J.
Forero J.E.
Formisano C.
Franzblau S.G.
Frasca G.
Fraternale D.
Fregoso-Aguilar T.
Fuertes C.
Fung Y.
Furtado F.F.
Galarco S.
Galarraga-Montes E.
Galati E.M.
Galindo-Castro I.
Gambino L.
Gamboa N.
Garbarino J.A.
García Calderón M.A.
Garcìa Chàvez A.
P 074
P 053
P 003
P 093
P 050
P 005
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O 25
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P 151
P 130
P 131
P 132
P 059
O 05
O 08
12
Garcia G.F.
Garcia Gonzalez N.
García L.A.
García M.Y.
Garcia Mesa M.
García Rodríguez R.V.
García S.M.C.
Garcìa Sànchez E.
Garcia Torres M.
Garciglia R.S.
Garduño L.
Garduño-Siciliano L.
Garufi F.
Garza-Juárez A.
Gebbia N.
Genovese S.
Gentile C.
German-Faz C.
Germanò M.P.
Giamperi L.
Giandalia G.
Giannola L.I.
Gilardoni G.
Gilberto Morillo G.
Ginestra G.
Giuffrida D.
Gómez Aiza A.
Gómez Aiza L.
Gómez J.
Gomez Olivàn L.M.
Gonzàles F.
Gonzales L.
Gonzales M.C.
Gonzales Mosquera D. Ma
Gonzalez Garcia K.
Gonzalez Garcia R.M.
González I.
P 013
O 25
P 184
O 29
P 137
P 120
P 121
P 076
P 060
O 25
O 01
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O 13
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P 168
P 169
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P 197
P 039
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O 18
O 18
P 106
P 074
O 03
P 179
P 066
O 06
O 25
P 203
P 065
13
Gonzalez Lavaut J. A.
Gordo Alvarez O.
Grandi M.
Grippi F.
Gualtieri M.
Guarize Noguiera L.
Guerra M.C.
Guerrero Luna G.
Guerrero T.
Guimarães Leitão G.
Guimarães Leitão S.
Guimaraes P.H.L.C.
Gurni A.A.
Gutiérrez M.G.
Guzmán-Martínez J.C.
Hahn O.
Heard T.A.
Herculano E.A.
Hernàndez F.
Hernàndez Garcìa A.
Hernández Hernández J.D
Hernández Linares M.G.
Hernández M.
Hernandez Marquez I.
Hernandez Navarro M.D.
P 195
O 25
O 25
PL 06
P 040
O 29
P 066
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P 204
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O 08
P 060
P 071
P 116
P 068
P 072
P 073
P 139
P 053
14
Hernàndez Ochoa M.I.
Hernandez Ortega M.M.
Hernandez Ortega Y
Herrera Bucio R.
Herrera C.
Herrera F.M.C.
Higuchi C.T.
Hiruma-Lima C.A.
Honda N.K.
Hoyos Z.
Huelvas P.
Ibarra S.
Idrovo A.
Imre M.
Innocenti G.
Iovino C.
Isdrael A.
Jaramillo X.
Jimenez C.
Jimenez J.
Jimenez J.M.
Joseph-Nathan P.
Joseph-Nehme C.
Juárez B.E.
Juliao L.S.
Kazumi Nagamine M.
Konigheim B.S.
La Torre G.L.
Laca A.
Ladio A.
Lagunes-Ruiz V.E.
P 074
P 062
P 074
O 06
P 054
P 075
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P 077
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P 099
P 136
P 185
P 113
P 125
P 184
PL 05
P 095
15
Lanini J.
Lannino M.
Lanuzza F.
Lanza E.
Lara J.
Lauriano E.R.
Lauricella G.
Leão A.M.S.
Leitão S.G.
Leite C.Q.F.
Leite S.R.A.
Leporini L.
Lerch F.
Leuzzi A.
Lima Albuquerque C.
Livrea M.A.
Lo Cascio P.
Lo Turco V.
Loaiza R.
Lopes F.C.M.
López A.
López C.
López Gómez R.
López-Albarrán P.
Lopez-Gramcko J.
Lorenzo H.
Lotti C.
Lotufo L.V.
Loziene K.
Lucero H.
Luiz-Ferreira A.
P 203
P 129
P 056
P 181
P 109
P 065
P 085
P 090
P 090
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P 118
P 162
O 32
P 139
P 005
P 135
O 20
P 010
16
Luparia M.
Luzzi R.
Machado Kuster R.
Macìas-Rodrìguez L.I.
Maciel Uzan V.R.
Maggio A.
Maiocchi Alves Costa A.L.
Malafronte N.
Malagón O.
Mandalari G.
Manuele M.G.
Marangoni S.
Marcotullio M.C.
Marinelli P.S.
Mariño Herrera L.
Marti-Mestres G.
Martìnez Galero E.
Martínez Muñoz R.E.
Martinez Pacheco M.M.
Martínez S.
Martínez Sotres M.C.
Martorana M.
Marzocco S.
Massolino C.
P 035
P 043
P 091
PL 07
O 22
O 23
O 08
P 185
O 28
O 36
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O 20
P 197
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P 137
P 197
17
Mateu E.
Matioli L.
Mecchio A.
Meccia G.
Medeiros I.A.
Medina A.L.
Medina G.
Meira de-Faria F.
Melchini A.
Meléndez P.
Melo V.
Mencherini T.
Méndez Corao G.
Mendiondo M.E.
Mendonça C.C.T.N.
Mendoza Pérez J.
Meneguim G.A.O.
Menezes C.P.
Menghini L.
Menichini F.
Mercadante A.Z.
Merlini V.
Merulla M.
Messina C.
Meza C.
Meza Reyes S.
Miano T.C.
Micali G.
Miceli N.
Michelin D.C.
Milla L.
Mithen R.
Mojica Villegas M.A.
P 173
O 14
P 051
P 041
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P 006
O 11
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P 061
P 062
18
Molares S.
Molina A.
Molina R.
Molina Torres J.
Mondello F.
Mondello M.R.
Monforte M.T.
Monsalve M.
PL 05
P 102
P 162
O 05
P 181
P 090
P 056
P 148
P 149
P 150
P 151
Montagnese V.
P 157
Monteagudo R.
O 25
P 103
Monteleone D.
P 177
Montes de Oca-Jauregui S. P 074
Montiel Smith S.
P 068
P 072
Montoro P.
P 147
Mora F.
P 081
P 105
Mora F.D.
P 046
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Mora Pérez Y.
P 048
Mora S.
P 106
Morabito G.
P 182
Moraes M.O.
P 005
Morales A.
P 009
P 153
P 200
Morales Lopez M.E.
P 060
P 140
Morales Robledo R.R.
P 068
Morán Lòpez G.
P 054
Morelli S.
P 107
P 138
Morello S.
P 133
Moreno C.
P 078
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Moreno J.
P 004
Morillo M.
P 108
P 193
19
Morocho V.
Moundipa P.F.
Moura F.B.P.
Muñoz E.
Murari C.S.
Murati E.
Murillo R.
Nagai L.
Napolitano A.
Napolitano F.
Navarro E.
Nesso B.A.
Ngadjui B.T.
Ngameni B.
Ngueyem T. A.D
Nielloud F.
Nieves J.
Njayou F.N.
Noriega M.
Nunez C.V.
Núñez Montoya S.C.
Núñez Sellés A.J.
Oball-Mond Mwankie G.N.
Occhiuto F.
Ojeda S.
Oliveira A.G.
Oliveira C.F.
Oliveri F.
Olvera García O.
Omura M.H.
Oriquin M.
O 20
P 197
P 198
P 005
P 179
O 14
P 051
P 109
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O 14
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O 09
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P 054
O 14
P 051
P 114
20
Orsini G.
Ortega S.
Ortiz A.
Ortiz Moreno A.
Osaka D.M.
Oshiiwa M.
Osorio M.
Pacifico S.
Padula G.
Pahua Ramos M.E.
Palumbo D.R.
Pamatz Bolaños T.
Panico A.M.
Pannelli G.
Pardo R.B.
Paris A.
Pastorello M.
Patel A.V.
Paula V.I.
Pavan F.R.
Pellizon C.H.
Pelucchini C.
Peña Cortés H.
Peralta Cruz J.
Pérez A.
Pérez E.
Pérez G.C.
O 02
P 044
P 118
P 173
P 132
P 073
P 053
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P 117
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P 119
O 12
P 188
21
Pérez G.S.
Pérez González C.
Pérez Gutiérrez M.S.
Pérez-Messeger J.
Pérez Pastén R.
Pergolizzi S.
Perna V.
Pernia M.
Pessoa C.
Petrosino L.
Piacente S.
Piccinelli A.L.
Picerno P.
Pietro R.C.L.R.
Pimentel A.
Pino A.
Pintaudi A.M.
Pinto A.
Piovano M.
Piozzi F.
Pixley K.
Pizarro Martins Gomes J.
Pizza C.
P 188
P 120
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O 34
22
Popolo A.
Poveda L.
Poveda L.J.
Prieto Gonzalez S.
Primila Cardoso C.R.
Prince K.A.
Profumo P.
Purcell A.
Quiñones W.
Quintanilha Falcao D.
Rabelo Socca E.A.
Raccuglia R.A.
Raddatz M.
Raddi M.S.G.
Radomski M.
Raimondo F.M.
Ramírez I.
Ramirez-Gonzalez I.
Ramon-Gallegos E.
Ramos López M.A.
Ramos S.
Ramos S.R.
Ramunno A.
Ranea F.G.
Rangel N.
Rasmussen C.
Rastrelli L.
Raya D.
Raya González D.
P 147
P 133
P 106
P 008
O 25
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P 138
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P 156
P 060
P 116
P 140
23
Reverchon E.
Ribeiro de Oliveira D.
Ribeiro E.A.N.
Ribeiro Júnior K.A.L.
Ribon W.
Ricci D.
.
Ricciardi A.I.A.
Ricciardi G.A.
Ricco R.A.
Riela S.
Rigano D.
Rijo Costa E.
Rinaldo D.
Ríos N.
Rios Tesch N.N.
Ripa V.
Rivarola V.
Rivas M.C.
Rivero J.
Roca C.
Rocha D.C.
Rocha E.P.
Rodrigues C.M.
Rodrigues J.
Rodrigues J.R.
Rodriguez B.
PL 09
P 092
P 006
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P 084
24
Rodríguez Malaver A.J.
Rodriguez Villanueva C.
Rojas H.
Rojas J.
Rojas L.B.
P 146
P 194
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O 07
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25
Rojas Y.
Román Marín L.U.
Romano R.
Romero I.
Romussi G.
Ron Echeverría O.A.
Rosquete-Porcar C.
Rosselli S.
Rossi C.V.
Ruffoni B.
Rugeles M.T.
Rugna A.Z.
Ruiz I.
Ruiz M.A.
Ruiz Y.
Rumie Vittar B.
Russo A.
Russo E.
Russo R.
Saavedra A.
Sacramento L.V.S.
Saha S.
Saija A.
Sajeva M.
P 200
P 155
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26
Salazar-Aranda R.
Salazar-Bookaman M.
Salazar-Cavazos M.L.
Salgado Garciglia R.
Salgado H.R.N.
Salvo A.
Salvo F.
Sanchez Bermudez L.
Sánchez C.
Sánchez E.
Sánchez Frías I.R.
Sanchez J.
Sánchez Vázquez S.
Sanchez Y.
Sandoval Ramírez J.
Sannomiya M.
Sanogo R.
Sant’Ana A.E.G.
Santi C.
Santiago-Brugnoli L.V.
Santos A.C.B.
Santos L.C.
Santulli A.
Saravia A.
Sato D.N.
Schimpf J.
Scio E.
O 13
O 02
O 13
O 05
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P 060
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P 087
P 089
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P 202
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27
Segnini S.
Senatore F.
Sepúlveda-Boza S.
Sequin C.
Serafini M.
Serrilli A.M.
Severi J.A.
Severino L.
Sharry S.
Sheen R.
Silva A.R.
Silva B.
Silva J.C.P.
Silva M.S.
Silva T.G.
Silvar Tinajero I.
Silveira C.S.
Silvestri G.
Simoni A.G.
Sinacori A.
Siragusa M.G
Soares V.C.G.
Sojo F.
Solórzano M.
Sorbo S.
Sordi R.
Sosa F.
Sosa Moreno A.
Souza Brito A.R.M.
P 204
P 046
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O 29
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P 010
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28
Spadaro V.
Spegazzini E.D.
Speroni E.
Sterm A.
Sterner O.
Stuppner H.
Suarez A.I.
Susunaga Notario A.C.
Suzuki E.
Tabares P.
Taborda N.
Takayama C.
Tammaro F.
Tanaka A.Y.
Tapia A.R.
Tapia Quintero I.
Tapia Rodrìguez A.
Tatsuo Kubota L.
Taviano M.F.
Tchana A.
Tello Suarez M.J.
Tesoriere L.
Thi Thanh H. N.
Thomaz A.G.
Tolomeo M.
Tomaino A.
Torras L.
Torres A.M.
P 042
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29
Torres F.
Toyama M.H.
Traka M.
Tripodo M.M.
Trombetta D.
Trovato A.
Turner S.
Urbina A.
Ursino M.R.
Uscátegui N.
Ustáriz F.J.
Usubillaga A.
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Valentin A.
Vallejos G.
Varanda E.A.
Varela B.G.
Varela M.
Vasquez L.
Vassallo A.
Vazquez Sanchez J.
Vega A.E.
Velasco J.
Velàzquez G.C.
Velázquez Jiménez R.
Veres K.
Vian L.
Vicet Muro L.
Vidari G.
Vignale N.D.
Viladomat F.
P 114
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O 11
O 23
O 06
O 20
PL 07
P 069
O 21
31
Vilegas W.
Villalobos C.
Villalta C.
Villarreal S.
Villas-Boas J.K.
Vinagre A.M.
Visbal T.
Vit P.
Vita Finzi P.
Vivot E.
Vizcaya M.
Wagner M.L.
Waksman N.
Weng N.T.
Wickham M.S.J.
O 35
P 020
P 010
P 025
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O 13
P 008
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Wright D.
Yahuaca J.B.
Yánez C.A.
Yanza A.
Young M.
Zabala C.P.A.
Zaidan Dagli M.L.
Zambrano I.
Zanoni G.
Zavala Sánchez M.A.
Zeledón R.
Zeppone Carlos I.
Zichittella L.
Zito P.
Zuñiga C.J.
Zurita-Valencia W.
P 001
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